1、毛鉤藤葉對(duì)中樞抑制作用的初步研究                  作者：林曉亮，羅超華，莫志賢【摘要】   目的研究毛鉤藤葉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用。方法采用小動(dòng)物自主活動(dòng)測(cè)定儀測(cè)定小鼠的自主活動(dòng)。采用戊巴比妥鈉閾下催眠實(shí)驗(yàn)及戊巴比妥鈉閾劑量誘導(dǎo)小鼠睡眠時(shí)間實(shí)驗(yàn)，觀察毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜催眠作用。結(jié)果鉤藤組(12 g/kg)與毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3個(gè)劑量組均能使小鼠自發(fā)活動(dòng)減少，使戊

2、巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡個(gè)數(shù)增多，并延長(zhǎng)戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時(shí)間，且以毛鉤藤葉高劑量組效果最為明顯。結(jié)論毛鉤藤葉具有顯著的中樞抑制作用。 【關(guān)鍵詞】   鉤藤; 毛鉤藤葉; 自主活動(dòng); 催眠作用Abstract：ObjectiveTo investigate the pharmacological action of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. on CNS. MethodsThe sedative effect and hyponic action of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. c

3、ould be examined through the mouse locomotor activity experiment, under pentobarbitol sodium threshold dosage-induced sleep experiment and pentobarbitol sodium threshold dosage-induced sleep time experiment.ResultsAfter treated with Uncaria rhyuchophylla.(12g/kg)and the low dose (6g/kg), middle dose

4、(9g/kg) and high dose (12g/kg)of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. , mouse locomotor activity was reduced, the sleep number of mice which were induced by the sodium pentobabital threshold sleep dosage was incresed, and the sodium pentobarbital-induced sleep time of mice was extended,and the effec

5、t in high-dose of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. was the most significant. ConclusionThe leaves of Uncaria hirsuta Havil. has significant inhibitory effect on CNS.Key words：Uncaria rhyuchophylla.; Leaves of ncaria hirsuta Havil; Locomotor activity; Hyponic action鉤藤具有清熱平肝、息風(fēng)定驚之功效，是中醫(yī) 治療 肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)，驚癇

6、抽搐的常用中藥。2005年版 中國(guó) 藥典規(guī)定中藥鉤藤為茜草科植物鉤藤Uncaria rhyuchophylla ( Miq. ) Jacks.，華鉤藤U. siueusis (Oliv. ) Havil.，大葉鉤藤U . macrophylla Wall.，毛鉤藤U. hirsute Havil.，無(wú)柄果鉤藤U. sessillfructus Roxb.的干燥帶鉤莖枝。鉤藤中含有多種吲哚類(lèi)生物堿,主要有鉤藤堿,異鉤藤堿24。最近的研究發(fā)現(xiàn)鉤藤葉中也含有鉤藤堿和異鉤藤堿56。目前對(duì)鉤藤的研究多集中于該植物帶鉤的莖枝，而對(duì)于該植物的其他部位研究報(bào)道較少。為開(kāi)發(fā)和利用鉤藤葉資源，本文對(duì)毛鉤藤葉的中樞

7、神經(jīng)系統(tǒng)作用進(jìn)行初步的藥 研究。 1 材料與儀器 1.1 藥材 毛鉤藤嫩枝采自本校中藥圃，經(jīng)本校中藥鑒定教研室張宏偉副教授鑒定為茜草科植物毛鉤藤Uncaria hirsute Havil.。將毛鉤藤葉與帶鉤莖枝分別剪下，在60以下烘干，將兩種藥材分別用75%乙醇回流提取兩次，回收乙醇后，減壓濃縮制成11(1g/ml)醇提取液。放入4冰箱中保存?zhèn)溆茫褂们坝谜麴s水配置成所需濃度。戊巴比妥鈉由中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司生產(chǎn)，批號(hào)F20050405。95%乙醇、無(wú)水乙醇等試劑由廣東汕頭西隴化工廠生產(chǎn)。1.2 動(dòng)物 SPF級(jí)昆明種小鼠, 雌雄各半, 體重2025 g, 由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供

8、，動(dòng)物合格證號(hào): SCXK粵2006-0015。1.3 儀器 YLS-1A多功能小動(dòng)物自主活動(dòng)記錄儀，山東省 科學(xué) 院設(shè)備站提供。 2 方法 2.1 小鼠自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗(yàn) 昆明種小鼠50只，雌雄各半，禁食12 h，飲水不限。將小鼠隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤(即毛鉤藤帶鉤莖枝，下同)組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。每組10只動(dòng)物。將各組小鼠放入YLS-1A多功能小動(dòng)物自主活動(dòng)記錄儀中, 適應(yīng)5 min后，測(cè)定小鼠給藥前的自主活動(dòng)次數(shù), 記錄時(shí)間為5 min。記錄時(shí)室內(nèi)保持安靜。然后按劑量給各組小鼠灌胃給藥(

9、ig)。分別于給藥后30，60 min各測(cè)定1次自發(fā)活動(dòng)數(shù)，記錄5min內(nèi)各組小鼠的活動(dòng)數(shù)。2.2 戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導(dǎo)小鼠入睡實(shí)驗(yàn) 取昆明種小鼠50只，雌雄各半。將小鼠隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥， 藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg，以小鼠翻正反射消失1 min以上為入睡標(biāo)準(zhǔn)，記錄15 min內(nèi)各組小鼠的入睡個(gè)數(shù)。        

10、2.3 戊巴比妥鈉閾劑量誘導(dǎo)小鼠睡眠時(shí)間實(shí)驗(yàn) 取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組。將小鼠隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥，藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg，然后記錄各組小鼠的睡眠時(shí)間(以給藥后小鼠翻正反射消失為入睡時(shí)間，翻正反射消失至恢復(fù)為睡眠時(shí)間)。2.4 學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)進(jìn)行完全隨機(jī)設(shè)計(jì)資料的單因素方差分析或兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組間多重比較方差齊時(shí)用LSD方法，不齊時(shí)用

11、Games- Howell方法。P0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。計(jì)數(shù)資料采用2檢驗(yàn)。 3 結(jié)果 3.2 藥物對(duì)戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡的影響 結(jié)果表明，空白組腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg后小鼠無(wú)一睡眠。鉤藤組和毛鉤藤葉低、中、高3個(gè)劑量組均有小鼠入睡，各組小鼠入睡個(gè)數(shù)經(jīng)2檢驗(yàn)表明，2=16.586，=4，P=0.002(雙側(cè))，差異有顯著性意義，可認(rèn)為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間的差異有顯著性意義，其中毛鉤藤葉高劑量組小鼠的入睡個(gè)數(shù)最多。見(jiàn)表23。表2 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導(dǎo)睡眠的結(jié)果表3 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導(dǎo)睡眠的統(tǒng)計(jì)結(jié)果 4 討論 本研究主要考察毛鉤藤葉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用。采用了小

12、鼠自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)、戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導(dǎo)小鼠入睡實(shí)驗(yàn)及戊巴比妥鈉閾劑量誘導(dǎo)小鼠睡眠時(shí)間實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜催眠作用，并與毛鉤藤帶鉤莖枝進(jìn)行對(duì)比。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，毛鉤藤葉低、中、高3個(gè)劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動(dòng)明顯減少，鉤藤組和毛鉤藤葉中、高劑量組與空白組相比，差異非常顯著。毛鉤藤葉對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的抑制隨劑量加大而加強(qiáng)，毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較有差異，表明毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜作用比鉤藤莖枝明顯。毛鉤藤葉高劑量組還能明顯增加戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導(dǎo)入睡的小鼠個(gè)數(shù)，并能明顯延長(zhǎng)戊巴比妥鈉閾劑量的小鼠睡眠時(shí)間，與鉤藤組相比較有差異。提示高劑量的毛鉤藤葉對(duì)中樞的抑制作用較為顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明毛鉤藤葉具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用，其作用強(qiáng)度與劑量有一定關(guān)系。但毛鉤藤葉抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)理仍有待深入研究。【 參考 文獻(xiàn) 】  國(guó)家藥典委員會(huì). 中國(guó) 藥典，部S.北京: 化學(xué) 工業(yè) 出版社, 2005: 180.張 峻,楊成金,吳大剛. 鉤藤的化學(xué)成分研究() J.中草藥, 1998, 29(10): 649.張 峻,楊成金,吳大剛. 鉤藤的化學(xué)成分研究() J.中草藥, 1999, 30(1): 12.許丹丹,莫志賢. 鉤藤與絨毛鉤藤的化學(xué)成分及藥理作用J.中藥新藥與藥理, 2005,