1、臨床免疫學檢查操作規程傳染病免疫學檢查乙型肝炎血清標志物（HBV M）檢測【 方 法 】ELISA 法。【 試 劑 】國內有商品化試劑盒供應。但必須按規定使用經中國藥 品生物制品檢定所檢定并貼有“中國藥品生物制品檢定所檢 定合格”字樣的防偽標簽的試劑。【 操 作 】按試劑盒內說明書書進行。【 附 注 】1 試劑盒應置冰箱中保存，取出后平衡至室溫方可使 用，未用完的微孔條須密封保存；2 每次應設空白 1 孔（不加標本及標酶試劑，其余各 步相同），陰性對照 3 孔，陽性對照 2 孔；3 洗滌液須用蒸鎦水或去離子水配制，洗滌時各孔均應加滿洗液，以防孔口內邊緣有游離酶殘存不能洗凈；4 用洗板機洗板，每

2、次洗板反復 5 遍，最后一次要求微孔內不殘留洗滌液，如達不到要求，需扣干；5 洗板機洗板時應設定 3060 秒的浸泡時間；6 滴加試劑前應將滴瓶翻轉數次，使液體均勻并棄去 一滴。滴加時瓶身應保持垂直，以使滴量 準確，注意勿將 試劑滴在孔壁上；7 . 37 C溫育須采用水浴箱， 不可使用37 C干式恒溫箱，且微孔條必須接觸 37 C水浴水面，不可懸空；8 不同批號試劑不可混合使用。【 結果判斷 】酶標儀雙波長 450/630nm 比色測定；1 . HBSAg、抗一HBS、HBeAg臨界值（C.O）二陰性對照孔A值的均值NX 2.1 （陰性對照A值V 0.05時按0.05計）;標本 A值 S/C.

3、O > 1 為 HBsAg 抗一HBs HBeAg陽性（S/N> 2.1 );標本 A值 S/C.O v 1 為 HBsAg 抗一HBs HBeAg陰性(S/N v 2.1 )。2 .抗一HBe 抗一 HBb;臨界值(C.O)二陰性對照孔A值的均值NX 0.5 ;標本A值S/C.O < 1者為抗一HBe抗一 HB陽性(S/N< 0.50 );標本A值S/C.O > 1者為抗一HBe抗一 HEC陰性(S/N >0.50 )。抗甲型肝炎病毒免疫球蛋白 M( Anti-HAV-IgM )測定【 方 法 】ELISA 法。【 試 劑 】市售合格試劑、要求同 HBV兩

4、對半；【 操 作 】按試劑說明書要求進行，要求可參考HBV兩對半；結果判斷 】要求同HBV兩對半中HBsAg抗丙型肝炎病毒免疫球蛋白G(Anti-HCV-IgG )測定【 方 法 】ELISA 法。【 試劑 】市售合格試劑、要求同 HBV兩對半。【 操作 】按試劑盒說明書進行、要求可參考HBV兩對半。【 結果判斷 】1 .陰性對照：正常情況下， A值W 0.08 ;2 .陽性對照：正常情況下， A值0.50 ;3 .臨界值(C.O)=陰性對照均值X 2.8。陰性對照孔A值0.08應舍棄、如所有陰性對照孔 A值 均0.08，試驗應重做。陰性對照孔 A值0.05時以0.05計 算。標本A值S/C.

5、0 1者為陽性。 標本 A 值 S/C.O<1 為陰性。抗 HIV（ 1+2）測定在選用測定方法時、需根據自身條件和需要加以綜合考慮、盡管所述方法靈敏度特異性都很高、但在實際工作中， 假陽性仍然可見，為達到最佳的檢測目的，一般需采用下列 程序。ELISA 、金標等過篩試驗陰性排除后；陽性者應以同類另一方法或另類某種方法重新過篩試驗，以排除假陽性，若仍為陽性，可用免疫印跡法證實，再次排除假陽性，經重復 檢測均為陽性者，方可慎重發出陽性結果報告。【 方 法 】1 篩選： ELISA 法、金標法、明膠凝集試驗、免疫熒光 法和乳膠凝集試驗等。試劑：必須使用經中國藥品生物制品檢定所檢定并貼有 “中國藥品生物制品檢定所檢定合格”防偽標簽的商品試劑 盒。2 確認：免疫印跡法和放射免疫沉淀試驗。試劑：使用經國家衛生部正式批準的快速免疫轉印試劑盒和相應的放射免疫沉淀試劑盒。【 操 作 】按試劑說明書要求進行。【 結果判斷 】按試劑說明書要求判定。【 附 注 】1 判斷是否感染 HIV 應十分慎重，對可能是陽性的樣 品還應結合其它測定項目的結果和臨床情況作出判斷。2 金標法必須