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文檔簡介
1、精選優質文檔-傾情為你奉上實驗二 臨時裝片的制作方法和徒手切片法以及植物細胞、組織觀察一、 實驗目的1、 掌握臨時裝片的制片方法、掌握徒手切片的方法2、 了解植物細胞結構。二、 實驗材料顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、刀片、吸水紙、解剖針、培養皿、毛筆、滴管、紗布、0.9%的NaCl溶液;洋蔥、馬鈴薯、芹菜、番茄三、 實驗內容和實驗方法(一) 臨時裝片的制作1、 擦凈載玻片和蓋玻片(1) 擦載玻片 用左手的拇指和食指捏信載玻片的邊緣,右手用紗布將載玻片上下兩面包住,然后反復擦拭,擦好后放在干凈處備用。(2) 擦蓋玻片 先用左手拇指和食指輕輕捏住蓋玻片的一角,再將右手拇指和食指用紗布把蓋玻片包住,
2、然后從上下兩面隔著紗布慢慢地進行擦試。2、 取樣用滴管滴一點水或其他溶液(根據需要)于載玻片的中央,把觀察物放于載玻片上的液滴中,展開或搖勻。3、 蓋蓋玻片右手持鑷子,輕輕夾住蓋玻片的一角,使蓋玻片的邊緣與液滴的邊緣接觸,然后慢慢傾斜下落,最后平放于載玻片上,避免氣泡的產生。如蓋玻片下的液體過多,可用吸水紙將多余的液體吸掉。(二) 徒手切片法徒手切片法不需要任何的機械設備,只需要一把鋒利的刀片就可以完成切片的制作,方法簡單,也容易保持物的生活狀態,有很大的實用價值。1、 選材選擇軟適度的材料,先截成適當的段塊。一般直徑大小以35mm、長度以2030mm為宜。若材料太軟,如幼葉等,不能直接拿在手
3、中進行切片,可用適當大小的馬鈴薯塊莖或蘿卜塊根等作支持物,將材料夾入其中,一起切片。2、 切片用左手拇指、食品指和中指夾住材料,使其稍突出在手指之上,拇指略低于食指,以免刀口損傷手指。材料和刀刃上蘸水,使其濕潤。右手拇指和食指橫向平握刀片,刀片要與材料斷面平行,刀刃放在材料左前方稍低于材料斷面的位置,以均勻的力量和平穩的動作從左前方向向右后方拉切。切片時要用臂力而不用腕力,手腕不要動,靠肘、肩關節的屈伸來切片,拉切要快,中途不要停頓,更不能用拉鋸方式進行切片。每切23片就要把刀片上的薄片用濕毛筆移入盛有清水的培養皿中暫存備用。如發現材料切面出現傾斜,應修平切面后再繼續切片。3、 鏡檢觀察連續切
4、下很多切片后,挑選最薄的切片放于加了1滴清水的載玻片,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片,進行鏡檢、觀察。(三) 植物細胞的結構觀察1、 洋蔥表皮細胞的觀察取一潔凈載玻片,于載玻片中央加上一滴水。取洋蔥一個,剝下一片新鮮的帶紫色的南鱗葉,和刀片從外表面(或內表面)切一個面積為4mm2左右的方形小格,然后用鑷子將表皮撕下,迅速入入載玻片上的小水滴中(表面向上)。并使其平展,蓋上蓋玻片,即制成臨時裝片。將裝片放在顯微鏡下,用低倍鏡觀察細胞結構。(1) 細胞的形狀洋蔥表皮由一層細胞構成,所有的細胞都有相似的扁磚狀。細胞之間排列緊密,沒有間隙。(2) 細胞壁為植物細胞所特有的結構,較透明,因此只能看到其側壁。初
5、看時,好像兩個相鄰細胞只有一層壁,但是,通過增加反差和仔細調焦就能發現這實際上是三層,即兩側相鄰兩細胞的細胞壁及中間的胞間層。(3) 細胞質為無色透明的膠狀物,充滿整個細胞。由于中央有大的液泡,被擠成一薄層,分布于細胞周圍,僅細胞兩端較明顯。(4) 細胞核為球形小體。由于中央有大液泡,也被擠向近細胞壁處。(5) 細胞膜非常薄,而且與細胞壁緊貼在一起,因此不易觀察到。(6) 液泡一個或幾個,位于細胞中央,里面充滿細胞液,所以比細胞質透明。2、 果肉離散細胞觀察用解剖針挑取少許已經紅熟的的番茄果肉(以臨近果皮的為好),把它們放在載玻片上的水滴中,用解剖針將果肉細胞撥勻,分散得越開越好,蓋上蓋玻片,
6、在顯微鏡下觀察。可以看到圓形或卵圓形的離散細胞,同樣也可以觀察到細胞壁、細胞核和很大的液泡。此外,還可以看到帶色的圓形小顆粒,即有色體。3、 厚角組織用徒手切片法做芹菜葉柄的橫切片,選取薄而透明的切片制成臨時裝片,置于低倍鏡下觀察。在芹菜葉柄棱角處的表皮內方有厚角存在,這些細胞的細胞壁在角隅處有增厚。實驗三 植物根、莖、葉、花結構的觀察一、 實驗目的1、掌握雙子葉植物和單子葉植物根的初生結構以及根的次生結構觀察并掌握葉片的內部結構;2、掌握莖的初生結構和次生結構;3、觀察并掌握葉的內部結構;二、 實驗材料雙子葉植物幼根(棉花)橫切片,小麥或玉米根橫切片、棉花老根橫切片;雙子葉植物幼莖橫切片、玉
7、米莖橫切片、椴樹莖橫切片;棉花(或蠶豆、迎春葉)葉片橫切片,玉米(或小麥、水稻等單子葉植物)葉片橫切片三、 實驗內容(一) 根的結構1、 雙子葉根的初生結構取雙子葉植物幼根橫切片顯微鏡觀察。雙子葉植物根的初生結構從外向內由表皮、皮層和維管柱一部分組成。(1) 表皮 是根的最外一層細胞,排列緊密整齊,無細胞間隙。有的表皮細胞可觀察到向外突起形成的根毛(或根毛殘體)。(2) 皮層 在表皮之內維管柱之外的部分,占幼根的大部分,由多層薄壁細胞組成,可進一步分為外皮層、皮層薄壁細胞和內皮層三部分。A、 外皮層:靠近表皮之下的幾層細胞(一般為13層),細胞較小,細胞壁常木栓化,代替表皮起暫時的保護作用。B
8、、 皮層薄壁細胞:細胞體積較大,排列疏松,有較大的細胞間隙,細胞具有儲藏作用。C、 內皮層:是皮層最內層的細胞,圍繞著內部的維管柱,細胞小,排列緊密,細胞橫壁和徑向壁上具有木栓化的加厚帶狀物凱氏帶,在根的橫切面上可見兩相鄰的內皮層細胞間明顯的加深的點狀結構凱氏點。(3) 維管柱 內皮層以內的中央部分,細胞較小,排列緊密,可分為中柱鞘、初生韌皮部、初生木質部、薄壁細胞。A、 中柱鞘:內皮層里面的12層薄壁細胞,排列緊密整齊。這些細胞具有潛在的分生能力,側根、木栓形成層(首次)、維管形成層的一部分由這部分發生。B、 初生木質部和初生韌皮部:蠶豆的初生維管組織由4個木質部束和4個韌皮部束組成,它們彼
9、此單獨成束,相間排列。初生木質部在維管柱中心呈十字形輻射排列。靠近4個輻射角的是原生木質部,近中央的是后生木質部。初生木質部的導管細胞壁厚,腔大。原生導管口徑比后生導管口徑小。初生韌皮部位于兩木質部束之間,同樣原生韌皮部在外,后生韌皮部在內。C、 薄壁細胞:位于初生木質部和初生韌皮部之間,這部分細胞可以恢復分生能力,形成維管形成層的一部分。蠶豆根中央的薄壁細胞形成髓。2、 單子葉植物根的初生結構取小麥或玉米根橫切片觀察。單子葉植物的根只有初生結構,其也是由表皮、皮層和維管柱三部分組成。(1) 表皮 是根的最外一層細胞,排列緊密整齊,可觀察到根毛殘體。(2) 皮層 在表皮內。靠近表皮下的幾層細胞
10、(12層),細胞較小,稱為外皮層。在較老的材料中可見23層細胞壁常木栓化,代替表皮起保護作用,被染成紅色。內皮層細胞的5個面都加厚,并木栓化,僅外切向壁是薄的顯微鏡下呈馬蹄形。僅在正對木質部的地方保留12個細胞壁不加厚的細胞,稱通道細胞。(3) 維管柱 由中柱鞘、初生韌皮部、初生木質部、木質部和韌皮部之間的薄壁細胞及髓幾部分組成。中柱鞘是維管柱最外邊排列緊密的小細胞,它的內側是相間排列成一輪的初生木質部和初生韌皮部,兩者之間是薄壁細胞。維管柱中央是由大型薄壁細胞組成的髓。3、 根的次生結構取棉花老根橫切片觀察。表皮與皮層已經脫落。在顯微鏡下觀察,棉花老根由外向內分為周皮、韌皮部、維管形成層、木
11、質部等幾部分。(1) 周皮 位于老根的最外方,從外向內可區分為木栓層、木栓形成層和栓內層。木栓層是老根外排列整齊的幾層死細胞,在橫切面上呈扁方形,徑向壁排列整齊,常被染成紅色。在木栓層內方,有一層被固綠染成黃色的扁方形的薄壁細胞,細胞質較濃,有的細胞能見到細胞核,即為木栓形成層。在木栓形成層的內側,有12層較大的薄壁細胞,被固綠染成藍綠色即為栓內層。(2) 韌皮部 由初生韌皮部和次生韌皮部(主要為次生韌皮部)組成。初生韌皮部在栓內層以內,大部分因擠壓而毀壞,常不能分辨。次生韌皮部位于初生韌皮部內側,被固綠染成藍綠色,由篩管、伴胞、韌皮薄壁細胞和韌皮纖維組成。其中細胞較大的為篩管,緊靠篩管的較小
12、細胞為伴胞。韌皮薄壁細胞較大,在橫切面上與篩管形態相似,常不易區分。韌皮纖維細胞細胞壁厚,被染成淡紅色。此外在韌皮部還有徑向排列的韌皮射線。(3) 維管形成層 位于次生韌皮部和次生木質部之間,由一層扁形的被染成淺綠色的薄壁細胞組成。顯微鏡下可發現被染成淡綠色的扁形細胞不只一層,這是因為形成層細胞分裂非常迅速,剛產生的細胞尚未分化成熟,與形成層細胞很難區別,故被稱為“形成層帶”。(4) 木質部 由次生木質部和初生木質部組成。次生木質部位于形成層之內,在次生根橫切面上占較大的比例。被番紅染成紅色,它由導管、管胞、木薄壁細胞和木纖維組成。其中口徑較大、呈圓形或近圓形,增厚的木質化次生壁被染成紅色的死
13、細胞為導管;管胞和木纖維在橫切面上口徑較小,可與導管區分,也染成紅色,而木纖維壁較管胞更厚。木薄壁細胞被染成綠色。木射線是呈徑向排列的薄壁細胞,綠色。木玫韌皮射線是連通的,合稱射線。初生木部在次生木部之內,位于根的中央,呈星芒狀。(二) 莖的結構1、 雙子葉植物莖的初生結構取雙子葉植物幼莖橫切片觀察。雙子葉植物幼莖的橫切面可分為表皮、皮層和維管柱三部分。(1) 表皮 僅一層細胞,排列緊密,排列規則,外壁上有角質層,表皮上有氣孔和表皮毛。(2) 皮層 表皮與維管柱之間的部分,所占比例較根小得多。靠近表皮的幾層細胞比較小,為厚角組織,可增強幼莖的支持能力,其內是數層薄壁細胞,其細胞體積較大,排列疏
14、松,有細胞間隙。(3) 維管柱 皮層以內的軸狀部分,較發達,占幼莖橫切面中央較大的面積,由維管束、髓和髓射線組成。A、 維管束:呈束狀,染色較深,在橫切面上許多維管束排成一環。維管束之間為薄壁組織所隔離。每個維管束都由位于外部的初生韌皮部、位于內部的初生木質部和介于韌皮部和木質部之間的束中形成層組成。B、 髓和髓射線:髓位于莖的中央,多為具有細胞間隙的薄壁細胞組成,髓射線為相鄰的維管束之間的薄壁細胞組成。2、 單子葉植物莖的初生結構絕大多數單子葉植物莖中沒有形成層,莖不能增粗,只初生結構,構造比較簡單,維管成散生狀態,分布于基本組織中。取玉米莖橫切片觀察,其由表皮、基本組織和維管束組成。維管束
15、分散在基本組織中,外方多而小,分布比較密集;靠近中央則大而少,分布比較疏松。玉米莖的維管束是外韌維管束,每個維管束的外層是數層厚壁細胞構成的維管束鞘,內面只有木質部和韌皮部,無形成層。韌皮部位于外方,通常只有篩管和伴胞。木質部通常含有34個顯著的被染成紅色的導管,在橫切面上排列成“V”形,近外部是由兩個孔紋導管和一些管胞組成的后生木質部,近內部是由12個較小的導管和少量的薄壁細胞級成原生木質部。小導管的內側有一個大的空腔,是由最早形成的導管被拉扯環形成的,叫氣腔或胞間道。小麥和水稻莖的結構與玉米莖的基本相同,也可用于觀察。最明顯的不同是:小麥和水稻莖的維管束一般只有兩圈分布在基本組織中,同時,
16、莖中空,中央為髓腔。3、 雙了葉植物木本莖的次生結構取23年生的椴樹莖橫切片觀察。(1) 周皮 位于莖的最外層,由數層扁平細胞構成,由木栓層、木栓形成層和栓內層三部分組成。(2) 皮層 在周皮之商,僅數層薄壁細胞,其中靠外圍的細胞排列緊密,靠內的細胞排列比較疏松。(3) 韌皮部 位于最外方的初生韌皮部已擠毀。次生韌皮部的細胞排列成外窄里寬的梯形。韌皮纖維被染成紅色,韌皮薄壁細胞、篩管和伴胞被染成深淺不同的綠色。在次生韌皮部之間有薄壁細胞構成的髓射線貫穿,多列髓射線細胞排列呈倒三角形。(4) 維管形成層 位于韌皮部和木質部之間,只有一層細胞,但因為其分裂出來的細胞還沒有成熟,所以看上去有多層,形
17、成層的細胞呈扁平狀,排列整齊成環,被染成綠色。(5) 木質部 在維管形成層以內,其中初生木質部位于莖的中心,與髓相連,所占面積很小。次生木質部占據橫切面的絕大部分,由于構成它的細胞的大小和壁的厚薄不同,可以明顯看出年輪的界線。次生木質部的細胞有導管、管胞、木纖維和木薄壁細胞。在次生木質部中還有許多由單列或幾列薄壁細胞構成的木射線。木射線和韌皮射線合管維管射線。(6) 髓 位于莖的中心,由薄壁細胞組成。在髓的外部緊靠初生木質部處,有數層排列緊密、體積較小的薄壁細胞,稱為環髓帶。(三) 葉的結構1、 雙子葉植物葉片的結構取棉花(或其它雙子葉植物)葉橫切片觀察,首先在低倍鏡下區分表皮、葉肉和葉脈等基
18、本構造,然后再轉換高倍鏡進行觀察。(1) 表皮 由一層細胞構成,橫切面上呈長方形,排列緊密,細胞外壁角質化,有角質層。在表皮細胞中,還可以觀察到成對的、染色較深的小細胞保衛細胞,保衛細胞之間的縫隙即氣孔。(2) 葉肉 上下表皮之間的綠色部分,屬同化組織。靠上表皮的是柵欄組織,細胞圓柱形,細胞的長軸和葉表面垂直排列,并與表皮細胞緊密相鄰。柵欄組織細胞排列緊密而整齊,細胞內含葉綠體多。靠近下表皮的是海綿組織,細胞形狀不甚規則,常呈圓形、橢圓形等。細胞排列沒有定序,細胞間隙比較發達,海綿細胞內含葉綠體較少。氣孔下文較大的細胞間隙稱孔下室。(3) 葉脈 是葉肉中的維管組織,常伴生一定的機械組織,分布在維管束的上、下方。葉片的主脈具有較大的維管束,其近軸面(靠近上表皮的一面),是維管束的木質部,在遠軸面,是維管束的韌皮部,兩者之間也見到幾層扁平細胞,為束中形成層。韌皮部的下方是較發達的薄壁組織和機械組織。(中小型葉脈中一般沒有形成層,只有木質部和韌皮部,其外包圍著薄壁組織構成的維管束鞘。)2、 單子葉植物葉片的結構取玉米(或其他單子葉植物)的葉片橫切片觀察。其結構也可分為表皮、葉肉和葉脈三部分。(1) 表皮 表皮細胞排列緊密,外壁具有角質膜。注意觀察泡狀細胞(運動細胞)。泡狀細胞位于兩個葉脈之間,為大型的薄
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