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文檔簡介
1、培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化 計劃制定:培養(yǎng)一個酵母菌種群計劃制定:培養(yǎng)一個酵母菌種群通過顯微鏡觀察,用通過顯微鏡觀察,用“血球計數(shù)板血球計數(shù)板”計數(shù)計數(shù)7 7天內(nèi)天內(nèi)10ml10ml培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量計算平均值計算平均值畫出畫出“酵母菌種群數(shù)量的增長曲線酵母菌種群數(shù)量的增長曲線” 實驗方法:實驗方法: (1 1)將)將10mL5%10mL5%葡萄糖培養(yǎng)液加入試管中。葡萄糖培養(yǎng)液加入試管中。 (2 2)將酵母菌菌種接入試管中的培養(yǎng)液內(nèi)混合均勻。)將酵母菌菌種接入試管中的培養(yǎng)液內(nèi)混合均勻。 (3 3)將試管在)將試管在2828條件下連續(xù)培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)7 7天。天。
2、(4 4)每天取樣每天取樣計數(shù)酵母菌數(shù)量,采用計數(shù)酵母菌數(shù)量,采用抽樣檢測抽樣檢測方法。方法。 (5 5)分析所取得數(shù)值并用曲線圖表示出來,分析圖形得)分析所取得數(shù)值并用曲線圖表示出來,分析圖形得出酵母菌種群數(shù)量變化規(guī)律。出酵母菌種群數(shù)量變化規(guī)律。 1 1、血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片、血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚厚的玻片特制的玻片特制而成。而成。2 2、板的中部有一部分比兩邊低、板的中部有一部分比兩邊低0.1mm0.1mm,兩邊有溝。,兩邊有溝。血球計數(shù)板構(gòu)造血球計數(shù)板構(gòu)造NoImage稀釋倍數(shù)每小格平均菌數(shù)稀釋倍數(shù)小格內(nèi)菌數(shù)毫升個菌數(shù) 61046104100100) / (計數(shù)室是一
3、大格(計數(shù)室是一大格(S=1mm2S=1mm2)由由2525個中格組成,每一中格個中格組成,每一中格又分為又分為1616個小格,共個小格,共400400個小個小格(也有一種計數(shù)板是格(也有一種計數(shù)板是1616中中格格2525小格,總數(shù)也是小格,總數(shù)也是400400格)。格)。每小格容積為每小格容積為0.000250.00025立方毫立方毫米,即米,即1/41/410-610-6亳升亳升 每個樣品重復(fù)計數(shù)每個樣品重復(fù)計數(shù)2-3次,取其平均值,按次,取其平均值,按下式計算樣品中的菌數(shù)。下式計算樣品中的菌數(shù)。 刻度為刻度為2516(大格)的計數(shù)板:(大格)的計數(shù)板: 刻度為刻度為1625(大格)的計
4、數(shù)板:(大格)的計數(shù)板: 稀釋倍數(shù)每小格平均菌數(shù)稀釋倍數(shù)小格內(nèi)菌數(shù)毫升個菌數(shù)610461048080)/(血球計數(shù)板的使用方法 (一)取清潔干燥的血球計數(shù)板,(一)取清潔干燥的血球計數(shù)板,加蓋玻片加蓋玻片蓋住蓋住網(wǎng)格和兩邊的槽。網(wǎng)格和兩邊的槽。 (二)將待測菌液(二)將待測菌液充分搖勻充分搖勻后,用無菌吸管吸少后,用無菌吸管吸少許,由許,由蓋玻片邊緣或槽內(nèi)加入蓋玻片邊緣或槽內(nèi)加入計數(shù)板來回推壓蓋計數(shù)板來回推壓蓋玻片,使其緊貼在計數(shù)板上,計數(shù)室內(nèi)玻片,使其緊貼在計數(shù)板上,計數(shù)室內(nèi)不能有氣不能有氣泡泡。靜置靜置5-105-10分鐘。分鐘。 (三)在低倍鏡下找到小方格網(wǎng)后更換高倍鏡觀(三)在低倍鏡下
5、找到小方格網(wǎng)后更換高倍鏡觀察計數(shù),上下調(diào)動細(xì)螺旋,以便看到小室內(nèi)不同察計數(shù),上下調(diào)動細(xì)螺旋,以便看到小室內(nèi)不同深度的菌體。位于分格線上的菌體,只數(shù)兩條邊深度的菌體。位于分格線上的菌體,只數(shù)兩條邊上的,其余兩邊不計數(shù)。如數(shù)上線就不數(shù)下線,上的,其余兩邊不計數(shù)。如數(shù)上線就不數(shù)下線,數(shù)左邊線就不數(shù)右邊線。數(shù)左邊線就不數(shù)右邊線。 (四)計數(shù)時若使用刻度為(四)計數(shù)時若使用刻度為25251616(大格)的計(大格)的計數(shù)板,則數(shù)四角的數(shù)板,則數(shù)四角的4 4個中格(即個中格(即100100小格)內(nèi)的菌小格)內(nèi)的菌數(shù)。如用刻度為數(shù)。如用刻度為16162525(大格)的計數(shù)板,除數(shù)(大格)的計數(shù)板,除數(shù)四角的
6、四角的4 4個大格外,還需數(shù)中央個大格外,還需數(shù)中央1 1個大格的菌數(shù)個大格的菌數(shù)(即(即8080小格)。小格)。每小格中菌數(shù)以每小格中菌數(shù)以5-105-10個為宜個為宜,如,如菌液過濃可適當(dāng)稀釋菌液過濃可適當(dāng)稀釋 稀釋倍數(shù)每小格平均菌數(shù)稀釋倍數(shù)小格內(nèi)菌數(shù)毫升個菌數(shù) 61046104100100) / ((五)計算(五)計算計算次計算次數(shù)數(shù)各方格中細(xì)胞數(shù)各方格中細(xì)胞數(shù)1ml1ml懸液中總細(xì)胞懸液中總細(xì)胞數(shù)數(shù)3 3次平均次平均數(shù)數(shù)1 12 23 34 45 51 12 23 3 每個樣品重復(fù)計數(shù)每個樣品重復(fù)計數(shù)2-3次,取其平均值,按次,取其平均值,按下式計算樣品中的菌數(shù)。下式計算樣品中的菌數(shù)。 刻度為刻度為2516(大格)的計數(shù)板:(大格)的計數(shù)板: 刻度為刻度為1625(大格)的計數(shù)板:(大格)的計數(shù)板: 稀釋倍數(shù)每小格平均菌數(shù)稀釋倍數(shù)小格內(nèi)菌數(shù)毫升個菌數(shù)610461048080)/(實驗注意事項 血球計數(shù)板的使用血球計數(shù)板的使用 1、先蓋蓋玻片,再滴加菌液、先蓋蓋玻片,再滴加菌液 2、菌液從平臺兩側(cè)凹槽處滴加,不要產(chǎn)生氣泡、菌液從平臺兩側(cè)凹槽處滴加,不
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