1、KKME-專業醫學搜索引擎傷寒、副傷寒甲二聯菌苗 拼音shnghán、fùshnghánjièrliánjnmiáo 傷寒、副傷寒甲二聯菌苗制造及檢定規程1本品系用傷寒、副傷寒甲菌培育后取菌苔制成懸液，加甲醛殺菌，以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋成每ml含傷寒1.5億菌，副傷寒甲1.5億菌制成。用于預防傷寒、副傷寒甲。菌種1.1菌種來源制造傷寒、副傷寒甲二聯菌苗用的菌種及檢定菌種用的診斷血清，應由中國藥品生物制品檢定所分發或經同意。1.2菌種檢定檢定菌種可用pH7.27.4的肉湯瓊脂、馬丁瓊脂或其他適宜的培養基。1.2.1培養特性制造菌苗的菌

2、株應具有的典型的形態、培養和生化特性。1.2.2血清凝集試驗用37培養1820小時的培養物以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋成含菌6億/ml，與相應的傷寒、副傷寒甲菌診斷血清作定量凝集試驗，搖勻后37過夜，以肉眼見到凝集（+）之血清最高稀釋度為凝集反應之效價。凝集價不應低于血清原效價之半。并用傷寒Vi及O血清做凝集試驗，應與Vi血清有凝集，與O血清不凝集，或僅有較低凝集。1.2.3毒力試驗用37培育1216小時的瓊脂培養物以生理鹽水稀釋，傷寒稀釋成6億/ml、3億/ml、1.5億/ml及0.75億/ml，副傷寒甲稀釋成15億/ml、7.5億/ml及3.75億/ml等濃度的菌液（根據菌種毒力情況可作更改也

3、可增加稀釋度）。第一稀釋度菌懸液腹腔注射體重1416g小白鼠至少5只，每只0.5ml，觀察3天，使小白鼠于感染后3天內全部死亡的最小劑量為1個致死量（LD），傷寒菌種1LD應不超過1.5億菌，副傷寒甲菌種不超過7.5億菌。1.2.4毒性試驗用37培育1820小時瓊脂培養物混懸于磷酸鹽緩沖生理鹽水內，56加溫1小時（或其他方法殺菌），不加防腐劑。殺菌試驗合格后稀釋成每ml含菌60、30及15億共3個濃度，每一濃度的菌懸液以0.5ml腹腔注射體重1518g小白鼠5只，觀察3天，注射7.5億菌之小白鼠應全部生存，注射15億菌的5只小白鼠可有3只死亡。1.2.5免疫力試驗按傷寒、副傷寒甲、乙三聯菌苗制

4、造及檢定規程1.2.5項進行。1.2.6抗原性試驗選體重2kg左右之健康家兔至少3只，用免疫力試驗所用之菌液靜脈注射3次，每次0.5ml，第1次注射7億菌，第2次14億菌，第3次21億菌，每次間隔7天。末次注射后1014天采血做定量凝集試驗測定效價。傷寒菌免疫的血清對免疫菌效價應不低于112800，副傷寒甲效價不低于16400，2/3家兔血清之凝集價達上述要求即為合格。1.3菌種保存菌種應凍干保存，凍干菌種保存于28。菌種凍干后應抽取樣品按1.2.2項進行檢查，合格后可使用3年。以后每次生產前必須檢查全部特性一次，合格者可繼續使用2年。菌苗制造制造傷寒、副傷寒甲二聯菌苗所用的每一菌種選用2個菌

5、株。2.1菌種凍干菌種啟開后檢查菌形、純度及進行玻片凝集試驗（傷寒菌加用Vi血清），合格后即可使用。每啟開1支凍干菌種用于生產不超過6代。2.2制造用培養基用pH7.27.4的馬丁瓊脂或其他適宜的培養基。2.3原液制造2.3.1接種采用涂種，接種后置37培育1824小時。2.3.2采集采集前應逐瓶檢查，有雜菌者廢棄。刮取菌苔混懸于磷酸鹽緩沖生理鹽水中。2.3.3純菌試驗原液采集后應逐瓶取樣接種瓊脂斜面1管，于37培育2天，24261天，有雜菌生長應廢棄。2.3.4殺菌原液用甲醛溶液殺菌，各種原液加入甲醛溶液濃度如下：傷寒菌原液不超過1.1%±0.1%（ml/ml）。副傷寒甲菌原液不超

6、過1.4%±0.1%(ml/ml)。加殺菌劑后的原液應放在37，不得超過7天，以后保存于28。2.3.5無菌試驗純菌試驗合格的原液，應取樣接種不含瓊脂的硫乙醇酸鹽培養基及普通瓊脂斜面各1管，放37培育5天，有本菌生長，可加倍量復試一次；有雜菌生長應廢棄。2.3.6原液合并無菌試驗合格之原液，安不同菌株或不同制造日期分別過濾合并，合并后應加不超過0.5%(g/ml)的苯酚或其他適宜之防腐劑，保存于28。2.4原液檢定2.4.1鏡檢菌形應正常，無雜菌。2.4.2凝集試驗原液與相應血清進行凝集試驗，其凝集效價不應低于血清原效價之半。2.4.3無菌試驗按生物制品無菌試驗規程進行。2.4.4濃

7、度測定應按中國細菌濁度標準與質量檢定部門會同測定濃度。2.4.5免疫力試驗原液于無菌試驗合格后與質量檢定部門會同進行。抽驗批數應不少于生產批數的1/5。方法同1.2.5項，唯所用小白鼠每組至少15只。對傷寒或副傷寒甲毒菌之攻擊，均應保護60%小白鼠活存為合格。2.5原液保存原液應保存于28。原液自采集之日起至用于菌苗稀釋時不得少于4個月，保存效期自采集之日起為2年半。2.6菌苗稀釋2.6.1原液配合稀釋前應先將不同菌種所制之原液按比例配合。每一種菌所加的菌數與應加菌數在總菌數不變的原則下，允許兩種菌之間在20%的范圍內互有增減；同一種菌不同菌株之原液按等量混合，但每個菌株所加的菌數與應加菌數在

8、總菌數不變的原則下，允許兩個菌株之間在40%范圍內互有增減。2.6.2菌苗稀釋稀釋菌苗用含0.25%0.5%（g/ml）苯酚或其他適宜的防腐劑之磷酸鹽緩沖生理鹽水。2.6.3菌苗濃度菌苗每ml含傷寒菌1.5億，副傷寒甲菌1.5億。2.7菌苗分批同組配合的原液用同批稀釋液在同一日稀釋的各瓶菌苗為1批。大罐稀釋時應按大罐分批，并按分裝機分為亞批。2.8檢定稀釋后每批應逐瓶抽樣進行無菌試驗及測定防腐劑含量（大罐稀釋時除外）。2.9分裝分裝后應每亞批抽樣送質量檢定部門進行成品檢定。成品檢定3.1物理化學檢查菌苗應為乳白色懸液，pH值為6.87.4。不應有搖不散的菌塊或異物。苯酚含量應為0.25%0.5

9、%（g/ml）。3.2菌形及純度染色鏡檢，應為革蘭氏陰性桿菌。至少觀察10個視野，平均每個視野內不得有10個以上非典型菌（線狀、粗大或染色可疑桿菌），并不應有雜菌。3.3無菌試驗按生物制品無菌試驗規程進行。3.4安全試驗3.4.1毒性試驗用體重1820g之健康小白鼠5只，每只腹腔注射菌苗0.5ml，或用體重350450g之健康豚鼠2只，腹腔注射菌苗1.5ml，觀察7日，應無死亡。3.4.2防腐劑試驗用體重1820g之健康小白鼠2只，每只皮下注射菌苗0.5ml，用苯酚作防腐劑的菌苗注射的小白鼠可發生戰栗癥狀，但不應超過半小時，觀察7日不得有局部膿腫或死亡。保存與效期應保存于28。自稀釋之日起效期

10、為1年半。如原液保存超過1年稀釋，應相應縮短效期（自原液采集之日起總效期不得超過2年半）。傷寒、副傷寒甲二聯菌苗使用說明書本品系用傷寒、副傷寒甲菌分別培育，取菌苔制成懸液經甲醛殺菌，以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋制成。用于預防傷寒、副傷寒甲。本品為乳白色的混懸液，含苯酚防腐劑，不應含有異物或搖不散的凝塊。接種對象重點使用于部隊、港口、鐵路沿線工地的工作人員，下水道、糞便、垃圾處理人員，飲食行業、醫務防疫人員及水上居民，或有本病流行地區的人群。用法1.于上臂外側三角肌附著處皮膚經消毒后皮下注射。2.初次注射本菌苗者，需注射3次，每次間隔710天。注射劑量如下：16周歲：第1針0.2ml，第2針0.3ml，第3針0.3ml。6周歲以上14周歲：第1針0.3ml，第2針0.5ml，第3針0.5ml。14周歲以上：第1針0.5ml，第2針1.0ml，第3針1.0ml。禁忌1.發熱，嚴重心臟病，高血壓，肝