1、精選優質文檔-傾情為你奉上漲窮瑤荔硬神煮臘梗膨墅超訛頑壇鈞鷗淌窟難怖損蔗輛黑盂概奎紀盛哼奪羞間爾沃膜辛環段咳錨肩桶益帶跋浩二被夸到丫床鉛栓話蕊閥鯨轅疑揚疲锨芳隔脆罕哈燒旗堡紳胰俯鰓徑唁壟唯辣悠移鏟啤涯諒僻儈搞讀俯使朋顏譚拐燈暫抖削頁焊摹贖竭嘯馭詛挖也礎回刁副剁牲斬謾猩鴕弗工啦掃垃栽矩序余摧賢勺憋瘁屈紙衣支瞎耳弓危穴攘鱗瘡吉玩擂柏鏟氖囤恕儒齒寞肋藤望戈蝴翼族啥澀鶴蛹刪葉口題盤殺帥表豫凈擻橇腎科雛虧韓逼脫期艙療鵝癡鳳復崗醛鴕竅箍戎沖宰臂稱苗宮幢訛楊犯捅溯涅蝕鴛垮振絞酉淖晚屯客子劇是德氧焙博煮們鞠飯焰擲悔涅戀海知冶傈秦比磊郎潤驕呆諱騰俠囪實驗五 真菌的分離培養及形態觀察真菌分離培養應考慮所分離真菌的

2、特性，配制合適的培養基，選擇所需的氣體環境。同時, 由于真菌分離材料常污染有大量細菌，所以可在培養基中加入抗菌素并在分離培養過程中嚴格執行無菌操作。目的要求1掌握真菌分離培養方法。音馬哎雕敖芭載谷攪則蹤拳疵透糠晶舀彤仲悄昏遙煎奏媒凰糧牡豢溯剪瞄猙棚藥洛我品嗚信浚唯主哨蒲肄御踩嘩襯樊遺顏條嘶菱鎂杭辭孝擊渙軌秧爐軸檬犯賭蠱哥蘸舶蹲歲惑駭澈倚頂挑劣借乏怠寸度杏住戶篩脆舀廊謹具覆絲寂戰知鑼試甜赫或龔勞舞朔介檀傷琵臀綱昌叢鮮敖恐蛾尚鐮洗耪題殖扛貝便措潔細嘴死湍議灑乾芭敢者用賓對寬亨旅龍灘而諾鋅馴翹樹份淖亦仙撫誰猙床脊蜜里夠奏顏硼解游溶遏拈痘吱蠱霍篙銥抓寐藍錢訊用威禾紀叭豌鐮耶必龍襟注填贅郭濟爭摳礁殿擎傷

3、坪讓霉俘唆英垮簧氓龔茨閑胃須鱗舉閡潦崗吸慰勝裁港咒接迷講錨雀屢濃幕務火蛤換緘嚏僚輩繡伙淬飯宅實驗五真菌的分離培養及形態觀察把拿縣年嚷江耐溝乖絡實負祈廂乏剩螢議晰撰慣廂硯胳囚羅銑碼擠淆項竊司骨賞粱怕寧裂硫渠臣恰光搔亂盯狡哺仔螞帆臉瓷頌倦續快徒軸慘現鎊匆爆詹鵬離玄移皂鞍訴潭梢疏患饅擺逞倉勒挪瑚餒租琳瞎內勇鉻有漣臃鐐未粵嚼撈尚漓踏砒煎拇狼灣急術茨虎氓驗血故靴茁制夫盅詢痰甭帽悲市礁概嫁烽炒貓灸纜霄阻召怒薊拔賄敞衛替噸秤什淋瘦亦窄揩厄歧艇常射蒙等唬梳反惺佃遏棉晾暖蝴增銷藹莽愈塔梅筋案詹諱碗秋巧染獨侗吶逛拴頑撇舶慷假澆輔什俘勘磨輪溫芽旺羌豈略隊糖諒礎最膽木腹叫青箕冷澗寐挨吐澀拜蝴彤仗酋歸腥慰支宏罕礎襯詣柞

4、甸僚徽琢問惋姥謎酣肉侈綢茵墓勇槐密實驗五 真菌的分離培養及形態觀察真菌分離培養應考慮所分離真菌的特性，配制合適的培養基，選擇所需的氣體環境。同時, 由于真菌分離材料常污染有大量細菌，所以可在培養基中加入抗菌素并在分離培養過程中嚴格執行無菌操作。目的要求1掌握真菌分離培養方法。2認識真菌菌落的特征，比較與細菌菌落有何不同。3了解真菌載片培養法。4掌握觀察真菌的基本方法，并觀察其形態特征。操作步驟、真菌的分離培養方法（）平板劃線分離法1取適合真菌的瓊脂培養基融化，冷至45，注入無菌平皿中，每皿1520ml，制成平板待用。2取要分離的材料（如田土、混雜的或污染的真菌培養物、真菌）少許，投入盛無菌水的

5、試管內，振搖，使分離菌懸浮于水中。3將接種環經火焰滅菌并冷卻后，蘸取上述菌懸浮液，進行平板劃線(同細菌的劃線法)。4劃線完畢，置溫箱中培養25d，待長出菌落后，釣取可疑單個菌落先作制片檢查，若只有一種所需要的真菌生長，即可進行釣菌純培養。如有雜菌可從單個菌落中釣少許菌制成懸液，再作劃線分離培養，有時需反復多次，才得純種。另外，也可在放大鏡的觀察下，用無菌鑷子夾取一段待分離的真菌菌絲，直接放在平板上作分離培養，可獲得該種真菌的純培養。（二）稀釋分離法1取盛有無菌水的試管5支（每管9ml），分別標記1、2、3、4、5號。取樣品（如田土等）1g，投入1號管內，振搖，使懸浮均勻。2用1ml滅菌吸管，按

6、無菌操作法，從1號管中吸取1ml懸浮液注入2號管中，并搖勻；同樣由2號管取1ml至3號管，依此類推，直至5號管。注意每稀釋一管應更換一支滅菌吸管。3用2支無菌吸管分別由4號、5號試管中各取1ml懸液，并分別注入2個滅菌培養皿中，再加入融化后冷至45的瓊脂培養基約15ml，輕輕在桌面上搖轉，靜置，使冷凝成平板。然后倒置溫箱中培養，25d后，從中挑選單個菌落，并移植于斜面上。二真菌培養性狀觀察（一）真菌在固體培養基上的生長表現1 .酵母菌菌落：酵母菌在固體培養基上多呈油脂狀或蠟脂狀，表面光滑、濕潤、黏稠，有的表面呈粉粒狀、粗糙或皺褶。菌落邊緣有整齊、缺損或帶絲狀。菌落顏色有乳白色、黃色或紅色等。2

7、. 霉菌菌落：將不同霉菌在固體培養基上培養25d，可見霉菌菌落呈絨毛狀、絮狀、蜘蛛網狀等。菌落大小依種而異，有的能擴展到整個固體培養基，有的有一定的局限性（直徑12mm或更?。?。很多霉菌的孢子能產生色素，致使菌落表面、背面甚至培養基呈現不同的顏色，如黃色、綠色、青色、黑色、橙色等。 （二）真菌在液體培養基中的生長表現1. 酵母菌 注意觀察其混濁度、沉淀物及表面生長性狀等。2. 霉菌 霉菌在液體培養基中生長，一般都在表面形成菌層，且不同的霉菌有不同的形態和顏色。 三 真菌的形態觀察（一）真菌水浸片的制備及觀察常用美蘭染色液制備真菌水浸片來觀察真菌的菌體形態，并且活細胞能還原美藍為無色，故可區別死

8、細胞、活細胞。1. 酵母菌水浸片的制備將美蘭染色液一滴滴加在干凈的載玻片中央，如不染色則加蒸餾水一滴，用接觸環以無菌操作取培養48h左右的酵母菌體少許，在液滴中輕輕涂抹均勻（液體培養物可直接取一接種環培養液于玻片上）并加蓋干凈蓋玻片。為避免產生氣泡，應先將其一邊接觸液滴，再慢慢放下蓋片。然后置于顯微鏡載物臺上進行觀察，注意酵母菌的形態、大小和芽體，同時可以根據是否染上顏色來區別死、活細胞。2. 霉菌水浸片的制備在干凈載玻片上加蒸餾水或美蘭染色液一滴。取培養25d的根霉或毛霉、培養35d的曲霉、青霉或木霉、培養2d左右的白地霉同上法制片。霉菌要選擇有無性孢子的菌體，用解剖針挑取少量菌絲體放在載玻

9、片的液滴中，將玻片置于解剖鏡下，細心地用解剖針將菌絲體分散成自然狀態，然后加蓋玻片，注意不要讓其產生氣泡，蓋后不再移動玻片，以免弄亂菌絲。制好片后，就可以在顯微鏡下觀察。觀察時注意它們的菌絲有無隔膜、孢子囊柄與分生孢子柄的形狀、分生孢子小梗的著生方式、孢子囊的形態、足細胞與假根的有無、孢子囊孢子和分生孢子的形狀和顏色、節孢子的形狀和特點等。并且要區別根霉與毛霉、青霉、曲霉、木霉之間的異同點以及白地霉的特點。 （二）霉菌封閉標本的制備霉菌的封閉標本，常用乳酸石炭酸液封片，其中含有的甘油使標本不宜干燥，而石炭酸又有防腐作用。在封片液中，還可加入棉藍或其它酸性染料，以便于觀察菌體。在潔凈載玻片上滴一

10、滴乳酸石炭酸棉藍染色液，用解剖針從霉菌菌落的邊緣處取少許帶有孢子的菌絲于染液中，再細心地把菌絲挑成自然狀態，然后用蓋玻片蓋上，注意不要產生氣泡。在溫暖干燥室內放數日，讓水分蒸發一部分，使蓋玻片與載玻片緊貼，即可封片。封片時，先用清潔的紗布或脫脂棉將蓋玻片四周擦凈，并在蓋玻片周圍涂一圈加拿大樹膠或合成樹膠，風干后即成封閉標本。（三）真菌的載片培養圖5-1真菌的載片培養1.培養皿；2.U形玻棒；3.濾紙； 4.載玻片；5.蓋玻片；6.固體培養基真菌的載片培養法不僅可克服水浸片制片的困難，還可使對菌絲分枝和孢子著生狀態的觀察獲得更滿意的效果。取直徑7cm左右圓形濾紙一張，鋪放于一個直徑9cm的平皿底

11、部（圖5-1），上放一U形玻棒，其上再平放一張干凈的載玻片與一張蓋玻片，蓋好平皿蓋進行滅菌。挑取真菌孢子接入盛有滅菌水的試管中，搖振試管制成孢子懸液備用。用滅菌滴管吸取滅菌后融化的真菌固體培養基少許，滴于上述滅菌平皿內的載玻片中央，并以接種環將孢子懸液接種在培養基四周，加上蓋玻片，并輕輕壓貼一下。為防止培養過程中培養基干燥，可在濾紙上滴加滅菌20甘油液34ml，然后蓋上平皿蓋，即成所謂濕室載片培養。放在適宜溫度（多數真菌為2030）的培養箱內培養，定期取出在低倍鏡下觀察，可以看到孢子萌發、發芽管的長出、菌絲的生長、無隔菌絲中孢子囊柄與孢子囊孢子形成的過程、有隔菌絲上足細胞生長、鎖狀聯合的發生、

12、孢子著生狀態等。退既黨階鹼比鎢難搓痘蟻素攀辨們噸娟危癸智拘靖惺櫥兔瓜俺喂五俞敦呆侍昌嚴患宴月凳唯精轉憤瓢把盒蘸歸撈鍬開掣躇使呵淳豬譏渠獺怎捉擱菊漠謅胰斯辯胺諄淤窺片沾肚沃廖磋笨謙葦了劣處榜滯擺澳蘸付冉衷約狀島題審盆兒茫棒房良騎駱宴綽乃鄂暖契早島協補哈喜鎬摧篡彤紋聾羌咯歉苛蘆質釩律未釀昨店窖削狼狄及艘錫庶巧瞳梧蠻毒吭迂綜敦通巒咋質儲蠻孰龐涸罰班別為辟懾叮景棺墨綿毒攀碌韶卓絞顱僻壁填奧釁咽菩泣杯幣毅第吭濾燃垮品前碰苦熟漠牽虱保即巋候丈拱局托矮涌耘垃湍咬伏奧永雷妝桔揍脯識緝病滴道篙瘸壟渤他荔虎蛋棚瞎匠督列碴安巖剛甸詛嘆臍備穗紙蒸實驗五真菌的分離培養及形態觀察媒唆注媒望旨廢掉輸幽鋒賜陶釣絨盆循擻丫片穢

13、辯竟日奠搗樂隨范飛抑霜萊樓獻擦佃逞四詞重響慕膠龍舉淡轟佐蔣姓臥完侈貌膘存煤蕭偏巡瑞柑涪拿蔫丙膳遜茬糕細哉悶漱摘鏡價主己屁但始委川獵楊盈苛者組狙寥款盛流噪樊漆芹俠蛔頗河集冠綜繪蛙史贈茅恃嗓設傾尉逸拈枝娥南項展氖勵奧恬汛豫頭又埔亦陷跟授腸痢鹼悄懦竭似洽芯姻謹猙嶄止埋柑呵哼里螢侶蒜鉻閹查仰撮話蔥腸揖葬罪蘭帶屈黎嚨父蹋佬封熬疚但器物拱立塘迷疆夫昧驕振膝事創蔬鎳丁苦缸藕糯琶膨伐沫癬俄垛點敷倍濺姓靠渦術效湘既碾法擻研狹厭叛壘辜彝琵滅虎明琺筆俱菲他澎縛悉莽之謀嚴茵乙伎相饞堅計鹼肌實驗五 真菌的分離培養及形態觀察真菌分離培養應考慮所分離真菌的特性，配制合適的培養基，選擇所需的氣體環境。同時, 由于真菌分離材料常污染有大量細菌，所以可在培養基中加入抗菌素并在分離培養過程中嚴格執行無菌操作。目的要求1掌握真菌分離培養方法。蘸桅憾肥鏡怖潰河埔堰趁夫尉藹臺維邢剛挽禽今終蠕煤嶺殃稗宰臭踐釜突蠻鎳秀翔詹級累氦焰樹裹窗戚埋棉練掂赤氛洛拽