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1、v1.0可編輯可修改(三)資金預(yù)算說(shuō)明購(gòu)置單項(xiàng)經(jīng)費(fèi) 5萬(wàn)元以上固定資產(chǎn)及設(shè)備等,須逐項(xiàng)說(shuō)明與項(xiàng)目研究的直接相關(guān)性及必要性。1、設(shè)備費(fèi)由于本單位已經(jīng)具備良好的科研條件, 本課題預(yù)算內(nèi)無(wú)價(jià)值 5萬(wàn)元以上的大型設(shè)備費(fèi)用, 也 無(wú)需購(gòu)置價(jià)值5萬(wàn)元以下小型儀器設(shè)備, 僅需要升級(jí)現(xiàn)有的顯微鏡, 增加顯微成像系統(tǒng): 萬(wàn) 元。廠家:Olympus,型號(hào):。2、材料費(fèi)主要用于購(gòu)買(mǎi):各類試劑盒;各種抗體; 細(xì)胞培養(yǎng)耗材,常規(guī)生物化學(xué)及分子生物學(xué)試劑及耗材。共計(jì)39萬(wàn)元(詳見(jiàn)下表)。動(dòng)物腫瘤模型的構(gòu)建與飼養(yǎng)共計(jì)8萬(wàn)元??傆?jì)47萬(wàn)元。(1) 各類試劑盒,如對(duì)細(xì)胞遷移侵襲能力檢測(cè)的試劑盒,檢測(cè)細(xì)胞活力的試劑盒,以及進(jìn)彳
2、T DNA, RNA提取和下游靶基因檢測(cè)的各種試劑盒。具體明細(xì)如下,合計(jì)約萬(wàn)元。序號(hào)材料名稱單位單 價(jià)(元)購(gòu)置數(shù)量金額(力兀)1反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Toyobo)盒150052熒光定量 PCRM齊J盒(Toyobo)盒120053細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒(Fermentas )支140054RNAT擾試劑盒(Fermentas)盒260025質(zhì)粒小提試劑盒(Omega盒6008質(zhì)粒中量提取試劑盒(G®盒350026質(zhì)粒大量提取試劑盒(10次G®盒300017報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(Promega)盒650018DNA屯化試齊【J盒(Promega)盒100059免疫熒光試劑盒(Invitro
3、gen )盒2500110免疫組化試劑盒(Milipore )盒2000211MTT活力檢測(cè)t劑盒(Sangon)盒1000112trans-well試劑盒(Milipore )盒3200113EMSM齊盒(Milipore )盒35001合計(jì)(2) 各種抗體,應(yīng)用于免疫印跡分析,免疫組織/細(xì)胞化學(xué)染色、免疫共沉淀等,主要為檢測(cè)蛋白表達(dá)、蛋白在組織或細(xì)胞內(nèi)的定位,及研究蛋白間相互作用。具體明細(xì)如下,合計(jì)約萬(wàn)元。序號(hào)材料名稱單位單價(jià)(元)購(gòu)置數(shù)量金額(力兀)1OVOL即體(Sigma)支300042Smad4 抗體(Abcam)支300043Smad7 抗體(Up-state)支280014Sm
4、ad2 抗體(Up-state)支280015Smad3 抗體(Up-state)支280016E-cadherin 抗體(Abcam)支280017Vimentin 抗體(R&D)支280018N-cadherin 抗體(Milipore )支280019Fibronectin 抗體(Milipore )支2800110HA抗體(Sigma)支3500211Flag 抗體(Sigma)支3500212Myc 抗體(Sigma)支3500213ZEB1 抗體(Santa Cruz )支2000114ZEB2 抗體(Santa Cruz )支2000115Twist1 抗體(Santa
5、Cruz )支2000116Twist2 抗體(Santa Cruz )支2000117Snail 抗體(Santa Cruz )支20001Slug 抗體(Santa Cruz )支20001P300 抗體(Santa Cruz )支20001T 3 RI 抗體(Milipore )支28001磷酸化T 3 RI抗體(Milipore )支32001Smurf1 抗體(Milipore )支280013 - actin 抗體(Santa Cruz )支20002酶標(biāo)二抗(Santa Cruz )支20001火光一抗(Santa Cruz )支20001合計(jì)(3) 細(xì)胞培養(yǎng)耗材,如各種細(xì)胞培養(yǎng)
6、基、胎牛血清、特殊細(xì)胞培養(yǎng)用細(xì)胞因子及細(xì)胞培養(yǎng)皿、細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞凍存管等。具體明細(xì)如下,合計(jì)約萬(wàn)元。序號(hào)材料名稱單位單 價(jià)(元)購(gòu)置數(shù)量金額(力兀)RPMI1640 (Gibco)盒200203DMEMGibco)盒200304F12K培養(yǎng)基(Gibco)瓶250105新生牛血清(國(guó)產(chǎn)-四季青)瓶150206胎牛血清(Gibco)瓶20001027谷氨酰胺 Glutamax (Gibco )瓶300108青鏈霉素(Gibco)瓶200109非必需氨基酸(Gibco )瓶2001010內(nèi)酮酸鈉(Gibco)瓶2001012TGF3 1 蛋白(Gibco )支300041335m唯田胞皿(Cor
7、ning )箱100051560m唯田胞皿 C Corning )箱8001016100mmi田胞皿(Corning )箱1000151796孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Corning)箱120051824孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Corning)箱1000101196孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Corning)箱80015202ml 凍存管(Corning)箱10001合計(jì)(4) 常規(guī)生物化學(xué)及分子生物學(xué)試劑及耗材,包括各類低值生化試劑、化學(xué)藥品和實(shí)驗(yàn)室常用耗材等。 具體明細(xì)如下,合計(jì)萬(wàn)元。序號(hào)材料名稱單位單 價(jià)(元)購(gòu)置數(shù)量金額(力兀)胰蛋白月東(OXOID瓶2804酵母粉(OXOID15021GST凝月壬4B (G6瓶2400
8、22Protein A/G Agarose(GE3瓶350043DNA Ladder (Fermentas )支180104蛋白 Marker (Fermentas)支450105DNA艮制性內(nèi)切酶(Fermentas )支120106高保真DNA聚合酶(Promega)支150087Taq DNA聚合酶(Takara)支500168蛋白酶抑制劑混合物(Roche)盒300049胰蛋白酶(Gibco)瓶35010Puromycine (Sigma)支12001G418 (Milipore )支1200111SB431542 (sigma)支10002Trizol-RNA 提取試劑(200ml)
9、瓶18002膠片(8x10,100 張)盒3002ECL化學(xué)發(fā)光試劑(50ml,GE)盒6004一次性濾器(50個(gè))盒3004PC用薄壁管(Axygen)盒2300812WB! PVDF膜(Milipore)卷200041315ml 離心管(500 個(gè),Corning)箱60021450ml 離心管(500 個(gè) Corning)箱8002151ml移液槍頭(500個(gè))包162016200ul移液槍頭(1000個(gè))包15501710ul移液槍頭(1000個(gè))包145018EP 管(500 個(gè))包185019EP 管(1000 個(gè))包2550201ml Rnase free移液槍頭(96 個(gè),Ax
10、ygen)盒3050200ul Rnase free移液槍頭(96個(gè),Axygen)盒2750Rnase free EP 管(500 個(gè),Axygen)包6010Rnase free PCR 管(1000 個(gè),Axygen)包24010合計(jì)(5)常位移植瘤裸鼠模型、轉(zhuǎn)基因小鼠腫瘤模型的構(gòu)建與飼養(yǎng):本課題研究的一個(gè)技術(shù)手段就是在動(dòng)物水平研究乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移表型。課題研究任務(wù)中應(yīng)用了常位小鼠模型、MMTV-PyVT、鼠模型、OVOL蕾基因小鼠卞II型以及 MMTV-PyVT/OVOL2(轉(zhuǎn)基因小鼠模型等4個(gè)品系小鼠。按照經(jīng)驗(yàn),這些小鼠的飼養(yǎng)、 維持,每月的平均費(fèi)用約 2000元,保守按照40個(gè)月的周
11、期計(jì)算,共需要2000x40=8 萬(wàn)元,這只是保守預(yù)算,因?yàn)檫@還沒(méi)包括轉(zhuǎn)基因小鼠制作費(fèi)用,原因是小鼠模型為課題組原先擁有。3、測(cè)試化驗(yàn)加工費(fèi) 大量轉(zhuǎn)基因與基因敲除小鼠標(biāo)本和大量臨床腫瘤標(biāo)本的石蠟切片與冰凍切片的制作、染色費(fèi)用,委托廈大醫(yī)學(xué)院病理科完成。廈大生命科學(xué)院分析儀器中心獨(dú)立核算,擁有大量大型儀器,如激光共聚焦掃描顯微鏡、超速離心機(jī),并有專人操作,這些都是本實(shí)驗(yàn)所需要。 實(shí)驗(yàn)中大量引物合成以及基因序列測(cè)定等。以上各項(xiàng)合計(jì)4萬(wàn)元,詳見(jiàn)下表序號(hào)材料名稱單位單 價(jià)(元)購(gòu)置數(shù)量金額(力兀)1激光共聚焦掃描顯微鏡小時(shí)2504012超速離心機(jī)管252003組織切片制作與染色片204004siRNA
12、 oligo 合成對(duì)5002015DN附列測(cè)定次401006DNA弓|物合成100bp15020合計(jì)44、燃料動(dòng)力費(fèi)本課題專用的超凈工作臺(tái)、高速低溫冷凍離心機(jī)、二氧化碳培養(yǎng)箱、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀、雜交爐、-80度超低溫冰箱、-20度冰箱、4度冰箱、控溫?fù)u床、電熱干燥箱等,有單獨(dú)電表計(jì)量,按照經(jīng)驗(yàn)一個(gè)課題由此產(chǎn)生的能源消耗每月約625元,每年約7500元,4年共計(jì)3萬(wàn)元。5、差旅費(fèi)課題研究過(guò)程中開(kāi)展實(shí)驗(yàn)、考察、調(diào)研、學(xué)術(shù)交流等所發(fā)生的國(guó)內(nèi)差旅費(fèi)、市內(nèi)交通費(fèi)用等,4年需要3萬(wàn)元。 預(yù)計(jì)安排3人次參加國(guó)內(nèi)相關(guān)學(xué)術(shù)會(huì)議,每次會(huì)議費(fèi)差旅費(fèi)約萬(wàn)元,預(yù)算萬(wàn)元。 預(yù)計(jì)安排科研合作3人次, 每次差旅費(fèi)萬(wàn)元,預(yù)算萬(wàn)元
13、。共萬(wàn)元。4、會(huì)議費(fèi)無(wú)5、國(guó)際合作與交流費(fèi)項(xiàng)目組成員出國(guó)合作交流課題研究過(guò)程中課題組成員出國(guó)參加國(guó)際學(xué)術(shù)會(huì)議1人次、到美國(guó)歐文加州大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)習(xí)考察最新技術(shù)1人次,每次路費(fèi)住宿費(fèi)萬(wàn)元,共需要3萬(wàn)元。國(guó)外專家來(lái)華合作交流邀請(qǐng)歐文加州大學(xué)醫(yī)學(xué)院 Xing Dai教授來(lái)華合作交流講學(xué) 1人次,每次路費(fèi)住宿費(fèi)萬(wàn)元,共需要萬(wàn)元。共萬(wàn)元8、出版/文獻(xiàn)/信息彳播/知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)費(fèi) 國(guó)際期刊論文版面費(fèi)和英文編輯的編輯費(fèi)用2篇,平均每篇萬(wàn)元。共 3萬(wàn)元 資料費(fèi)每年500元,4年合計(jì)2千元;裝訂打印復(fù)印費(fèi)每年 500元,4年合計(jì)2千元;文獻(xiàn)檢索費(fèi)與網(wǎng)絡(luò)使用費(fèi)每年1000元,4年合計(jì)4千元;國(guó)內(nèi)國(guó)際專業(yè)郵寄費(fèi)每年500元,4年合計(jì)2千元。以上各項(xiàng)合計(jì)4萬(wàn)元9、勞務(wù)費(fèi)參加本課題的博士研究生:2人,投入本課題全時(shí)工作時(shí)間:10個(gè)月/年人,專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)支付助研補(bǔ)貼為1000元/人月。4年共需助研補(bǔ)貼為:2人X 10個(gè)月/年人X 4年X 1000元/人月 =80000元=8萬(wàn)元。參加本課題的碩士研究生:4人,投入本項(xiàng)目全時(shí)工作時(shí)間:10個(gè)月/年人,專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)支付助研補(bǔ)貼為500元/人月。3年共需助研補(bǔ)貼為:4人X10個(gè)月/年人X 4年X 500
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