1、第 卷第 期 年 月色 譜高效液相色譜法和毛細管電泳法測定甘草制品中甘草酸的含量彭 軍 王 復 朱明華華東理工大學分析測試中心 上海提 要 分別用高效液相色譜法 毛細管區帶電泳法 膠束電動毛細管色譜法 測定了甘草制品中甘草酸的含量對 的分析條件作了一些選擇實驗 結果表明 法與 法分析數據接近 比較準確 而且前者比 法分離效率高 溶劑用量少 是一種很有發展潛力的分析方法關鍵詞 高效液相色譜法 毛細管區帶電泳法 膠束電動毛細管色譜法 甘草酸 甘草制品分類號 前言甘草是我國傳統的中草藥甘草酸是甘草中的主要有效成分對于甘草制品中甘草酸的含量分析 目前報道較多的一種分析方法是高效液相色譜法毛細管電泳技術

2、 是近年發展最迅流動相為 甲醇 水 醋酸 用前減壓脫氣 流速為 柱壓為 檢測波長為 靈敏度為根據外標峰面積法計算甘 進樣量為 草酸含量的分析條件速的分離分析方法之一 本文除用 方法外 還參閱文獻 分別采用毛細管電泳技術中的毛細管區帶電泳法 膠束電動毛細管色譜法測試了甘草制品中甘草酸的含量石英毛細管柱為 有效長度 硼 磷酸氫二鉀砂緩沖溶液 值為 電遷移進樣 進樣時間操作電壓為 檢測波長為 靈敏度為甘草制品配制成一定濃度的溶液 進樣實驗部分儀器和試劑前用 微孔膜過濾每次電泳前用二次重蒸水 緩沖溶液分別沖洗毛細管 的分析條件儀器 高效液相色譜儀紫外 可見分光檢測器 色譜數據石英毛細管柱為 有效長度

3、緩沖體系為含 的 磷酸氫二鉀 硼砂的 緩沖處理機 毛細管電泳儀未處理的彈性石英毛細管 河北永年光導纖維廠 試劑 甲醇為色譜分析純 醋酸 磷酸氫二鉀 硼砂 十二烷基硫酸鈉 均為分析純 所用溶液均用二次重蒸水配制甘草酸標準對照品 由中國藥品生物制品檢定所提供 以 法測定其純度為歸一化 甘草制品 號樣品 甘草制品 號液電遷移進樣 進樣時間為 操作電壓為檢測波長為 靈敏度為 每次電泳前用 氫氧化鈉溶液 二次重蒸水 緩沖液分別沖洗毛細管 結果與討論分析條件的選擇樣品由本實驗室從不同原料甘草藥材中提取分離制得 提取分離方法見另文報道 實驗方法的分析條件本實驗參照文獻 采用流動相為甲醇 水 醋酸 時 甘草酸

4、色譜色譜柱為 峰出峰時間較長 且峰形有點拖尾通過實驗 改用本課題屬上海市教委科技基金資助項目 通訊聯系人本文收稿日期 修回日期期 彭 軍等 高效液相色譜法和毛細管電泳法測定甘草制品中甘草酸的含量 流動相為 甲醇 水 醋酸 此時分離效果較好這樣 在保證甘草酸能較好分離的前提下 不僅縮短了出峰時間 前者為后者為 而且由于稍稍增加了醋酸的比例 使峰形變得尖銳一些按 節的條件 在測定的質量濃度范圍內 峰面積與標樣質量濃度 呈良好的線性關系線性回歸方程為 相關系數為 甘草制品 號樣品的 譜圖見圖圖 甘草制品 號樣品的譜圖 甘草酸 分析條件的選擇緩沖溶液的選擇 當選擇高濃度的緩沖溶液即 磷酸氫二鉀 硼砂

5、的緩沖溶液 操作電壓為 時 遷移時間會增加 甘草酸的出峰時間為 這是因為緩沖溶液濃度的增加會導致溶質在毛細管內遷移速率下降 遷移時間增長選用低濃度的緩沖液即 磷酸氫二鉀 硼砂 緩沖液 甘草酸遷移時間縮短為 電壓的選擇 當操作電壓升高到 時甘草酸遷移速度加快 分離度下降 當操作電壓降低到 時 遷移時間變長本實驗選擇操作電壓為用峰高外標法測定甘草含量 在測定的質量濃度范圍內 峰高 與質量濃度 呈良好的線性關系回歸方程為 相關系數為 甘草制品 號樣品的 譜圖見圖 中濃度的選擇在 緩沖溶液中加 以形成膠束 的濃度對甘草酸遷移時間有很大影響 濃度過低 則不能形成膠束 甘草酸遷移時間短 分離度差 濃度過高

6、 則膠束含量增大 遷移時間會增長實驗選用 濃度為 時 發現甘草酸在 內不會遷移出來 而且 濃度過高時 形成膠束濃度很大 使毛細管較易堵塞本實驗選用 濃度為 則甘草酸遷移時間比較合適 遷移時間為 而且毛細管也不易堵塞圖 甘草制品 號樣品的譜圖 甘草酸 用峰高外標法測定甘草含量 在測定的質量濃度范圍內 峰高 與質量濃度 呈良好的線性關系回歸方程為 相關系數為 甘草制品 號樣品的 譜圖見圖圖 甘草制品 號樣品的譜圖 甘草酸 種分析方法結果的比較和 種方法的分析結果見表 表 和 種方法的分析結果 質量分數 色 譜 卷分析 法用于測定甘草制品中甘草酸的含量 分析結果準確 與 法所得數據比較接近 而且由于 法分離效率高 速度快 樣品用量少 可以節約大量溶劑 減少實驗成本 因而是一種很有發展潛力的分析方法致謝 本實驗在使用毛細管電泳方面得到了中科院上海有機所吳萍的熱心幫助 在此特表謝意甘草制品從表 可看出 法分析結果與 法接近 數據比較準確而 法的分析結果偏低 數據誤差較大 其原因有待于進一步探討參考文獻范云鴿 史作清 何炳林 天然產物研究與開發 梁貴鍵 張福成 魏 寧等 中國