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1、.: 生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定老師行為學(xué)生行為課堂變化及處理主要環(huán)節(jié)的效果【出示目的】1. 嘗試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)。2. 推斷組織樣液中有機(jī)物的種類及相對(duì)含量。3. 通過探究實(shí)驗(yàn)和探究后小組的交流活動(dòng),培養(yǎng)學(xué)生的初步探究才能和表達(dá)交流才能。【新課】我們?cè)诨瘜W(xué)中學(xué)習(xí)過物質(zhì)的鑒定,其原理是被鑒定的物質(zhì)與所用的化學(xué)試劑要么發(fā)生顏色反響,要么產(chǎn)生沉淀,我們生物學(xué)上也采用此原理,在生物學(xué)中物質(zhì)鑒定的理念是:某些化學(xué)試劑可以使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反響。今天,我們學(xué)習(xí)鑒定生物組織中糖類、脂肪、蛋白質(zhì)的根本方法。一復(fù)原糖的鑒定1. 原理:可溶性復(fù)原糖+
2、斐林試劑磚紅色沉淀。2. 操作過程:3. 實(shí)驗(yàn)本卷須知:二脂肪的鑒定1. 原理:脂肪小顆粒 + 蘇丹染液橘黃色小顆粒。2. 操作過程:3. 實(shí)驗(yàn)本卷須知:.脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好實(shí)驗(yàn)前浸泡3h4h。該試驗(yàn)成功的關(guān)鍵是獲得只含有單層細(xì)胞理想薄片。滴蘇丹染液染液染色2-3min,時(shí)間不宜過長(zhǎng),以防細(xì)胞的其他部分被染色。三蛋白質(zhì)的鑒定1.原理:蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑紫色反響。2. 操作過程:3. 實(shí)驗(yàn)本卷須知:演示四類有機(jī)物的顯色反響引導(dǎo)學(xué)生對(duì)要檢測(cè)的樣品作出假設(shè)提醒學(xué)生分工合作。小結(jié):本節(jié)課我們練習(xí)了生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定,大家要重點(diǎn)掌握實(shí)驗(yàn)的原理,材料的
3、選擇及實(shí)驗(yàn)的過程。在以后的學(xué)習(xí)中可以應(yīng)用本實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)展簡(jiǎn)單的物質(zhì)鑒定。【布置作業(yè)】1. 完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。2. 總結(jié)斐林試劑與雙縮脲試劑的異同點(diǎn)。3. 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)鑒定唾液中是否含有蛋白質(zhì),寫出簡(jiǎn)要的實(shí)驗(yàn)步驟。明確本節(jié)課的學(xué)習(xí)目的學(xué)生自主學(xué)習(xí)教材相關(guān)內(nèi)容。考慮:1. 實(shí)驗(yàn)的原理是什么?2. 實(shí)驗(yàn)的材料選擇有哪些要求?3. 實(shí)驗(yàn)的操作過程有哪些本卷須知?選材 制備組織樣液 注入組織樣液2ml 加斐林試劑:2ml由斐林試劑甲液和乙液充分混合而成,不能分別參加水浴加熱:煮沸2min觀察溶液顏色變化:復(fù)原糖的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織,以蘋果、梨為最好。斐林試劑要兩液混合均勻且現(xiàn)
4、配現(xiàn)用。取材滴蘇丹染液去浮色制成臨時(shí)裝片觀察蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子或用豆?jié){、或用雞蛋蛋白稀釋液。雙縮脲試劑的使用,一定要先參加A液即0.1 g/ml的 NaOH 溶液,再參加雙縮脲試劑B液即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液。還可設(shè)計(jì)一只加底物的試管,不加雙縮脲試劑,進(jìn)展空白對(duì)照,說明顏色反響的引起是蛋白質(zhì)的存在與雙縮脲試劑發(fā)生反響,而不是空氣的氧化引起。學(xué)生回憶演示實(shí)驗(yàn),結(jié)合實(shí)物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的步驟。學(xué)生自選材料分組實(shí)驗(yàn)并設(shè)計(jì)表格記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。學(xué)生小組交流實(shí)驗(yàn)結(jié)果并交流討論實(shí)驗(yàn)中遇到的問題。參考資料復(fù)原糖的鑒定 生物組織中普遍存在的復(fù)原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥
5、芽糖。它們的分子內(nèi)都含有復(fù)原性基團(tuán)游離醛基或游離酮基,因此叫做復(fù)原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒有游離的半縮醛羥基,因此叫做非復(fù)原性糖,不具有復(fù)原性。本實(shí)驗(yàn)中,用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中復(fù)原糖存在與否,而不能鑒定非復(fù)原性糖。 斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1 gmL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05gmL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍(lán)色的CuOH2沉淀。CuOH2與參加的葡萄糖在加熱的條件下,可以生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身那么氧化成葡萄糖酸。其反響式如下:CH2OHCHOH4CHO2CuOH2CH2OHCHOH4COOHCu2O2H2O用斐林試劑鑒定復(fù)原糖時(shí),溶液的顏色變化過程為:
6、藍(lán)色棕色磚紅色沉淀。 用于鑒定復(fù)原糖的實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備植物組織是常用的實(shí)驗(yàn)材料,但必須加以選擇。在雙子葉植物中,光合作用的主要產(chǎn)物葡萄糖形成后,合成為淀粉,暫時(shí)儲(chǔ)藏在葉子內(nèi),因此最好不用雙子葉植物的葉子作實(shí)驗(yàn)材料。有些單子葉植物,如韭菜、鳶尾,并不將光合作用的初始產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)榈矸郏虼巳~內(nèi)含有大量的可溶性單糖,但是,由于葉片中葉綠素的顏色較深,對(duì)于鑒定時(shí)的顏色反響起著掩蓋作用,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯,因此,也不宜用單子葉植物的葉子作實(shí)驗(yàn)材料。 本實(shí)驗(yàn)最理想的實(shí)驗(yàn)材料是復(fù)原糖含量較高的植物組織或器官,而且組織的顏色較淺或近于白色的,如蘋果和梨的果實(shí)。經(jīng)試驗(yàn)比較,顏色反響的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉
7、、白蘿卜。蛋白質(zhì)的鑒定 鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1 gmL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.01 gmL的硫酸銅溶液。在堿性溶液NaOH中,雙縮脲H2NOCNHCONH2能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個(gè)反響叫做雙縮脲反響。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲構(gòu)造相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反響。實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織或器官,植物材料常用的是大豆種子,動(dòng)物材料常用的是雞蛋卵白。如用大豆種子,必須提早浸泡12 d,這樣容易研磨成漿。有條件的學(xué)校,可以直接采用現(xiàn)成的大豆磨成的豆?jié){,豆?jié){可以購置,也可用小型的研磨機(jī)制取。利用豆?jié){作實(shí)驗(yàn)材料,可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。假如用稀釋的卵白作實(shí)驗(yàn)材料,效果會(huì)更好。用于鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)材料 準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料最好選擇富含脂肪的種子,如花生種子取其子葉。供實(shí)驗(yàn)用的花生種子,必須提早浸泡34 h。浸泡時(shí)間短了,不容易切成片;浸泡時(shí)間過長(zhǎng),那么組織太軟,切下的薄片不易成形。做鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn),老師可根據(jù)本地區(qū)的情況選用蘇丹或蘇丹染液。蘇丹染液遇脂
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