1、第二部分：滅菌劑量的確定目錄：(1) 引言(3)1. 范圍(4)2. 引用標準(4)3. 縮寫、術語和定義(4)3.1 縮寫(4)3.2 術語(5)4確定和保持劑量設定，劑量認證以及滅菌劑量審核中的產品族(6)4.1 總則(6)4.2 產品族的定義(6)代表產品族實施驗證劑量試驗和滅菌劑量審核所指定的產品(7) 產品族的保持(8)4.5 滅菌劑量的確定和滅菌劑量審核失敗對產品族的影響(8)5 確定和驗證滅菌劑量的產品的選擇及試驗(8)5.1 產品特性(8)5.2 樣品份額(9)5.3 取樣方式(10)5.4 微生物試驗(10)5.5 輻照(10)6 劑量確定方法(10)7 方法1：利用生物負載

2、信息進行劑量設定(11)7.1 原理(11) 使用方法1對平均生物負載1.0的多個生產批次的產品的程序(12)7.3 使用方法1對平均生物負載1.0的單一生產批次的產品的程序(16)7.4 使用方法1對平均生物負載在0.10.9之間的單一或多個生產批次的產品的程序 (17)8 方法2：用增量劑量實驗中得到的部分陽性信息確定外推因子的劑量設定(18)8.1 原理(18)8.2 方法2A的程序(18)8.3 方法2B的程序(21)9. VDmax方法以25kGy或15kGy作為滅菌劑量的證明(23)9.1 原理(23)對多個生產批次使用VDmax25方法的程序(24)9.3 對單一生產批次使用VD

3、max25方法的程序(27)9.4 對多個生產批次使用VDmax15方法的程序(29)9.5 對單一生產批次使用VDmax15方法的程序(31)10 滅菌劑量的審核(32)10.1 目的和頻率(32)10.2 使用方法1或方法2進行滅菌劑量設定的審核程序(32)10.3 使用VDmax方法證明滅菌劑量的審核程序(35)11 實例(38)11.1 方法1舉例(38)11.2 方法2舉例(40)11.3 方法3舉例(46) 使用方法1進行滅菌劑量設定的審核的實例，審核的結果有必要增加滅菌劑量 (47)11.5 使用方法2A進行滅菌劑量設定的審核的實例，審核的結果有必要增加滅菌劑量(48)11.6

4、使用方法VDmax25證明滅菌劑量的審核的實例(49)醫療衛生產品滅菌-輻射第二部分：確定滅菌劑量1. 范圍ISO11137本部分列出了為滿足特定滅菌要求的最小劑量的確定方法以及證明使用25kGy或15kGy作為滅菌劑量達到10-6滅菌保證水平的方法，同時指明了為確保滅菌劑量持續有效地劑量審核的方法。2. 引用標準以下涉及的文件是本文件應用中必不可少的。對于有日期參考的，僅引用的版本有效，對無日期參考的，參考文件的最新版本（包括任何修訂本）有效。ISO11137-1:2006ISO11737-1ISO11737-2ISO134853. 縮寫、術語和定義本文件中，在ISO11137-1給出及以下

5、的術語和定義適用。縮寫核算出最小的從中位ffp到FFP劑量。CD*按方法2驗證劑量試驗輻照100個單元產品進行無菌試驗所獲得的陽性數。d*從指定的產品批次中取樣的單元產品進行增量劑量試驗得到的劑量。D*要求達到10-2SAL的初始估計劑量。D* 要求達到10-2SAL的最終估計劑量，用于滅菌劑量的計算中。DD*由方法2驗證劑量試驗得到的劑量。DS產品輻照DD*劑量后估計的微生物的10值。D值或10值在自然狀態下殺滅90的試驗微生物所需的劑量或時間。注：本文件中，10值僅指輻照劑量。ffp 從指定的產品批次中選取得單元產品進行增量劑量試驗，其中20個試樣至少一個為陰性的最小劑量。FFP20個樣本

6、的無菌試驗中只有一個為陽性的估計劑量，由中位ffp劑量減去A計算得到。FNP用于計算DS中對試驗樣本達到10-2SAL的估計劑量。VDmax15對一特定的生物負載的最大驗證劑量，與指定15kGy作為滅菌劑量達到10-6的滅菌保證水平一致。VDmax25對一特定的生物負載的最大驗證劑量，與指定25kGy作為滅菌劑量達到10-6的滅菌保證水平一致。術語批在特征和質量上期望相同，并在某一確定制造周期中生產出來的一定數量的產品。生物負載產品或無菌隔離系統上活微生物的數量。假陽性試驗結果的渾濁被解釋為試驗樣本長菌，然而長菌是由外來微生物的污染所致或渾濁是由于樣本和試驗用培養基相互影響的結果。陽性份數以無

7、菌試驗樣本的陽性數作分子，以樣本數作分母的商。 增量劑量一系列用于數個單元產品或其組分的劑量，在劑量設定方法中它用于建立和證實滅菌劑量。3.2.6 陰性無菌試驗無菌試驗樣本經培養后不能查到微生物生長。3.2.7 包裝體系無菌隔離系統的組成和防護的包裝。3.2.8 陽性無菌試驗無菌試驗樣本經培養后能查到微生物生長。3.2.9 取樣份額（SIP）某一醫療衛生產品用來做測試所選擇的部分。3.2.10 無菌隔離系統用于阻擋微生物的進入和使用時允許無菌形式的產品進入的最小包裝。3.2.11 無菌保證水平（SAL）滅菌后單元產品上存在活微生物的概率。注：術語滅菌保證水平采用數量級表示，一般為10-6或10

8、-3。當為保證無菌提供一數量級時，S為10-6比S為10-3級別低但提供了更高的無菌保證。3.2.12 滅菌劑量審核為證明某一確定的滅菌劑量的適宜性而采取的活動。3.2.13 驗證劑量 用于確定滅菌劑量，對預計s10-2估計的輻照劑量。4 確定和保持劑量設定，劑量認證以及滅菌劑量審核中的產品族4.1 總則選擇滅菌劑量和實施滅菌劑量審核都是加工確定（見ISO11137-1:2006 第8條款）和維持加工有效性（見ISO11137-1:2006 第12條款）部分的活動。在這些活動中產品可以組成族，產品族的定義可主要依據產品上（生物負載）微生物數量和類型。微生物類型用來指示其對輻照的抗性。，在建立這

9、些產品族時不考慮例如密度和產品在其包裝體系中的布局，因為它們不是影響生物負載的因素。使用產品族來確定滅菌劑量和滅菌劑量審核，重要的是知道其中的風險例如降低在制造過程察覺由于不明顯變化影響滅菌有效性的能力。此外，使用單一產品來代表整個產品族可能察覺不到發生在產品族中其它組份的變化。應評估關于降低察覺產品族中其它組份變化的風險，且應設計維持產品族的方法并在加工前實施應用。注：有關風險管理的指引見ISO149714.2 產品族的定義建立一個產品族的標準應形成文件，應根據這些標準評估產品，并考慮產品族各組分之間可能的類似之處?？紤]的事項應包括對生物負載有影響的所有與產品相關的變化，包括但不限于：a)

10、原料的特性和來源，包括其影響，原料可能來自不止一個地方。b) 部件c) 產品的設計及大小d) 生產過程e) 生產設備f) 生產環境g) 生產場所評估和考查因素的結果應形成文件（見ISO11137-1:2006 條款）。如果證明與產品有關的變化是相似的并在控制下，產品應被包括在一個產品族內。 要將產品歸入一個產品族內，應證明其生物負載由相似數量和類型的微生物組成。將不同地方生產的產品歸入一個產品族應有合理的說明和記錄（見ISO11137-1:2006 條款）。應考慮對生物負載有影響的：a) 場所地理和（或）氣候的不同b)生產過程和環境控制方面的任何差別c)原料和加工輔助物（如水）的來源代表產品族

11、實施驗證劑量試驗和滅菌劑量審核所指定的產品代表產品族的產品.1 產品中或產品上微生物的數量和類型應被用來作為選擇產品代表產品族的依據。.2產品族的代表應為：a)其主要產品（見），或b)相同產品（見），或c)模擬產品（見）.3 采取正式的、形成文件的評估來決定4.3.1.2中所列的三種可能代表產品的適宜性，在這個評估中，應考慮以下內容：a)組成生物負載的微生物類型b)微生物的生長的環境c)產品的尺寸d)部件的數量e)產品的聯合體f) 生產中的自動化程度g) 生產環境主要產品如果評估（見.3）顯示產品族中一個成員表現的抗性比這個產品族中其它的成員更大時，則這個產品可以認定為主要產品。在有些情況下，

12、一個產品族中可能有幾個產品，其中每個產品都可以被認定為這個產品族。 同等產品 如評估（見.3）表明一組產品各成員要求的滅菌劑量相同，則這組產品可以認定為同等的。代表產品族的同等產品應a）隨機選擇或 b）根據包括產品族中不同成員的計劃的列表。在選擇同等產品代表產品族時應考慮制造產量及產品的有效性。模擬產品如一模擬產品比產品族中各成員表現出的對輻照過程的抗性同等或更大，則這個模擬產品可以代表該產品族。模擬產品使用與真實產品相同的方式和材料包裝。注：模擬產品不作為臨床使用；它是專門為確定和維持滅菌劑量而制作的。模擬產品可以是：a) 在材料和大小上與真實產品類似，并經過相似的制造過程；例如，經過整個加

13、工過程的一塊用于植入的材料。b) 產品族中產品部件的組合物，在使用中不是典型的組分；例如，一件多重過濾器的管座，夾子及活塞都是產品族中其它產品的部件。模擬產品應和真實產品以相同的方式和相同的材料包裝。4.4 產品族的保持 周期性評審應以一特定的頻率來實施評審來保證所有的產品族和用來代表每個產品族的產品保持有效。選派有資格的人員負責對可能影響到產品族各成員之間關系的產品或過程的評審。這樣的評審至少每年一次。評審的輸出應按ISO11137-1:2006 第條款記錄。產品或生產過程的更改產品的更改：如原材料（材料和來源）、部件或產品設計（包括大?。┖停ɑ颍┥a過程的更改，如設備、環境或地點，應通過正

14、式的形成文件的更改控制體系進行評估。這種更改可能改變產品族確定的依據或對代表產品族的產品的選擇依據。對重大的改變可建立一個新的產品族或選擇不同的代表產品。 記錄產品族的記錄應保留（見ISO11137-1:2006 第條款）滅菌劑量的確定或產品族滅菌劑量審核失敗的結果 如果發生滅菌劑量確定或產品族滅菌劑量審核失敗的情況，產品族中所有的成員應被認為是受到影響的，應對產品族中所有的產品采取后續措施。5確定和驗證滅菌劑量的產品的選擇及試驗5.1 產品的特性用于滅菌的產品可以由以下組成：a)包裝體系中一個獨立的醫療保健產品b) 在包裝體系中的一套部件，使用時用來組成醫療保健產品，以及組合產品要求使用的配

15、件。c) 包裝體系中一定數量的同一醫療保健產品d)由多種程序相關的醫療保健產品組成的一套產品用于實施劑量設定和劑量證明的單元產品應按表1選擇。如果產品對其某一部分有滅菌的要求，滅菌劑量的確定應僅針對該部分。例如：如果產品有標識僅流動通道要求滅菌，滅菌劑量的確定可以依據對流動通道進行無菌試驗得到的生物負載決定。表1-用于確定和驗證滅菌劑量的單元產品的特性產品類型用于確定生物負載或增加劑量試驗的產品原理包裝體系中一個獨立的醫療保健產品獨立的醫療保健產品每個醫療保健產品是單獨的在臨床實踐中使用的在包裝體系中的一套部件產品組成的所有部件這些部件組成一件產品而在臨床實踐中使用包裝體系中一定數量的同一醫療

16、保健產品包裝體系取出的單一醫療保健產品每個醫療保健產品是單獨的在臨床實踐中使用的一套程序相關的醫療保健產品組成一套的每種類型的醫療保健產品每個醫療保健產品是單獨的在臨床實踐中使用的注1: 對注2：對d）所描述的產品使用的產品族見第4條款指引劑量設定中，根據醫療保健產品要求的最高滅菌劑量進行滅菌劑量的選擇。5.2 取樣份額（SIP） 對于平均生物負載1.0的產品，只要可行，整個產品應按表1用來進行實驗。如果不可行，應用一選擇的產品份額（取樣份額）來代替。該SIP應是單元產品在試驗中可能操作的最大部分，并且其尺寸在試驗中可以操作。 對平均生物負載0.9, 整個產品（SIP=1）應按表1用來進行實驗

17、。 如果生物負載是平均的分布在單元產品中，這種SIP可以取自單元產品的任何一個部分。如果生物負載不是平均分布的，這種SIP應由隨機選擇的能適當的代表產品制造的各種材料的產品部分組成。如果知道生物負載，SIP應從產品中認為是對輻照過程有最大抗力的部分選擇。P值可按被檢單元產品的長度，質量，體積和表面積計算（例子見表2）表2 計算p的實例SIP計算的基礎產品長度管道（直徑一致）質量藥粉輔料移植物（不可吸收的）體積流體表面積移植物（不可吸收的）管道（可變直徑）準備和包裝一個SIP必須選擇令生物負載變動最小的條件下。SIP的準備應在受控的環境條件下,只要可行，其包裝材料和條件應和成品相同。應證實所選擇

18、SIP的充分性。SIP的生物負載必須是，對20個未輻照樣本的分別進行無菌試驗結果至少17個為陽性（即85%陽性）。如果達不到這個指標，應使用更大的SIP。如果使用整個產品進行試驗，20個樣品的無菌試驗結果至少17個陽性的指標不適用。5.3 取樣方法 用于滅菌劑量確定和審核的產品必須是能代表日常加工的程序和條件生產的產品。一般情況下，用來確定生物負載或進行無菌試驗的每個單元產品應取自獨立的包裝體系。 在選擇產品樣品和確定生物負載之間所花費的時間會影響到最終加工步驟的完成到產品滅菌之間的時間周期。單元產品可以取自加工過程中的次品，它們與產品的留樣在相同的加工和條件下生產。5.4 微生物試驗 生物負

19、載的確定和無菌試驗應按ISO11737-1和ISO11737-2要求操作。當使用單一的培養基進行無菌試驗時，一般推薦使用大豆酪蛋白肉湯，在30±2培養14天。如果有理由證明這種培養基和溫度不支持微生物的生長，應使用其它適合的培養基和培養條件。見Herring et al,197412,Favero,197110;NHB,19687所舉例子。只要可行，產品應以其原始的形式和包裝進行輻照。然而，為減少無菌試驗假陽性發生的可能性，樣品可能在輻照前拆開并重新包裝。如果輻照前的處理改變了生物負載的數量和其對輻照的響應（例如：操作可改變微生物周圍的化學環境，最典型的是氧壓力），則是不可接受的。重

20、新包裝單元產品的材料，輻照時應能耐受所實施的輻照劑量和其后的處理，以減少污染的可能性。應對經過包裝過程的產品進行生物負載確定。注：通常，最好是在產品從其包裝體系內取出后進行生物負載確定，以便避免其包裝體系對確定生物負載的影響。5.5 輻照 應使用符合ISO11137-1要求IQ、OQ和PQ的輻照器對用于確定和驗證滅菌劑量的產品進行輻照。為了實施驗證劑量和增量劑量試驗，必須進行足夠的劑量場測試來確定產品所接受的最高和最低劑量。 劑量測量和輻照源的使用應符合ISO11137-1要求。注：見ISO11137-3部分對于輻照滅菌劑量測定方面的指引。6 劑量確定方法6.1 如果按ISO11137-1：2

21、006第8.a）（產品特定的滅菌劑量）條款要求進行滅菌劑量確定，應按以下方法之一設定：a) 方法1對單一和多個生產批次b）方法2A（見8.2）c）方法2B（見8.3）或d) 為達到特定的滅菌要求同以上），）或）提供相等保證的方法。如果按ISO11137-1：2006第 b）條款要求進行滅菌劑量確定，應按以下方法之一證明：a) 對于平均生物負載在0.11000（包括）范圍的產品1)VDmax25方法（見9.2或9.3）2) 方法（見第條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量25kGy。3）方法2 （見第8條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量25kGy?；?）為獲得最大s為10-6同以上1），2）

22、或3）提供了相等保證的方法。b) 對于平均生物負載在0.11.5（包括）范圍的產品：1） VDmax15方法（見9.4或9.5）2）方法（見第條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量15kGy。3）方法2 （見第8條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量15kGy?；?）為獲得最大s為10-6同以上1），2）或3）提供了相等保證的方法。1） VDmax25方法（見9.2或9.3）2）VDmax15方法（見9.4或9.5）3）方法2 （見第8條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量15kGy。或4）為獲得最大s為10-6同以上1），2）或3）提供了相等保證的方法。7 方法1： 利用生物負載信息進行劑量

23、設定7.1 原理該滅菌劑量的設定方法是由實驗驗證表明，產品的微生物群對輻照的響應比有標準抗力的微生物群更大些。對SDR已經做出了合理的選擇。SDR以D10值和所有群體發生的概率值（見表3）的形式來表示微生物抗力。并用計算機對達到10-2，10-3，10-4，10-5，以及10-6SAL值所需的各個劑量按生物負載水平增加得到的SDR進行計算。表5和表6 列出了對給定平均生物負載計算出的劑量值。表3-方法1中使用的微生物抗力分布（Whitby and Gelda，197920）D10(kGy)概率（%）在實踐中用平均生物負載作為確定值。達到s為10-2所需的劑量可以從表5或表6中讀出。該劑量稱作驗

24、證劑量，它代表能使具有標準抗力分布的微生物群減少到s為10-2水平的劑量。然后用100個單元產品暴露于所選定的驗證劑量，每一個單元產品單獨進行無菌檢驗。若100個樣本的試驗出現的陽性數不超過2個，再回到表5或表6中查生物負載水平下獲得各種要求的SAL的滅菌劑量。允許2個陽性的原理是根據假設符合泊松分布的一定數量的陽性發生概率在1個左右。根據泊松分布，發生0，1和2個陽性的概率是0.92，見表4。表4-10-2SAL下檢測100個樣本期望出現陽性的概率陽性數012345678概率（%） 總則應用方法1，須按以下六個步驟執行。注： 步驟1：選擇SAL和取得單元產品樣本.1 記錄產品預計使用的s。.

25、2 在三個獨立的生產批次中每批選擇至少10個單元產品，根據5.1，5.2和5.3要求。 步驟2： 確定平均生物負載.1 決定在確定生物負載中是否應用校正因數。注：.2確定每個選擇的單元產品的生物負載并計算：a) 三個批次樣本每批的平均生物負載（批次平均）b)所有選擇的單元產品的平均生物負載（總體平均負載）注：.3 將三批產品的平均生物負載進行比較，確定是否有一個批次的平均值比總體平均生物負載大兩倍或兩倍以上。 步驟3：獲得驗證劑量從表5獲得s為10-2的劑量可以用以下數據之一a) 若一批或更多批次的平均生物負載總體平均生物負載*2，則用最高批次值；或b) 若每個批次的平均生物負載<2*總

26、體平均生物負載，則使用總體平均生物負載。指定該劑量為驗證劑量。如果使用單元產品的一部分（SIP）來進行無菌試驗，則該SIP的平均生物負載應用來確定驗證劑量。如果平均生物負載在表5中沒有給出，則用比計算出的生物負載大些的，最接近的平均生物負載。7.2.5步驟4：實施驗證劑量試驗.1 從單一的產品批次中選擇100個單元產品。 步驟4的100個單元產品可以從步驟2確定生物負載的其中一個批次中選擇，或從能代表正常生產條件下制造的第四批產品中選擇。在選擇所用的批次時應考慮該產品支持微生物生長的能力。.2 用驗證劑量對單元產品進行輻照?？刂苿┝浚绻麊卧a品接受的最大劑量超過驗證劑量的10%，并使用方法一

27、來確定滅菌劑量，則驗證劑量試驗必須重做。如果單元產品的最高和最低劑量的算術平均值小于驗證劑量的90%，則驗證劑量試驗可重做。如果這個平均劑量小于驗證劑量的90%，并且無菌試驗的結果是可接受的（見7.2.6.1），驗證劑量試驗可以不重做。.3 依據ISO11737-2（見5.4.1）分別對輻照后的單元產品進行無菌試驗，記錄陽性樣本數。 步驟5：結論說明.1 如果100個樣本的無菌試驗不超過兩個陽性樣本，則驗證可以接受。.2 如果無菌試驗的結果超過兩個陽性，則驗證不可接受。如果這種結果能歸因于生物負載測定不正確，生物負載測定中不適合的修正因子，無菌檢驗不正確或驗證劑量的實施不正確，則可以根據糾正措

28、施執行重做驗證劑量試驗。如果這種結果不能解釋為采取糾正措施的理由，則這種劑量設定的方法無效，應使用另外一種替代的確定滅菌劑量的方法。（見第6條款） 步驟6：確定滅菌劑量.1 如果使用整個產品進行試驗并且通過驗證，從表5中得到最接近生物負載的單元產品的滅菌劑量，該生物負載比計算的生物負載相等或更大，并讀出達到指定SAL所需的劑量。.2 如果使用SIP的 p1.0進行試驗并且通過驗證，則整個產品的平均生物負載可以用SIP的平均生物負載除以p值來計算。從表5中得到最接近生物負載的單元產品的滅菌劑量，該生物負載比計算的整個產品的平均生物負載相等或更大，并讀出達到指定SAL所需的劑量。表5-已知標準抗力

29、分布的平均生物負載1.0達到給定的SAL所需的輻照劑量（kGy）平均生物負載滅菌保證水平（s）平均生物負載滅菌保證水平（s）10-210-310-410-510-610-210-310-410-510-6120130140150160170180190200220240260280300325350375400104251145012475135001452515550165751760018650197002075022800248502690028950301000321050341100361150381200401250421300441350461400481450501500551

30、55060160065165070170075175080180085185090190095195010020001102100續上表5220040000230042000240044000250046000260048000270050000280054000290058000300062000320066000340070000360075000380080000400085000420090000440095000460010000048001100005000120000530013000056001400005900150000620016000065001700006800180

31、00071001900007400200000770022000080002400008500260000900028000095003000001000032000010500340000110003800001150040000012000420000130004400001400046000015000480000160005000001700054000018000580000190006200002000066000021000700000220007500002300080000024000850000250009000002600095000027000100000028000注

32、1：表中出現的高生物負載水平并不暗示其就是正常。注2：所列的數據用于方法1劑量設定的步驟3，4和6。 290003000032000340003600023.238000 原理本方法是根據方法1改編，僅用于對單一加工批次確定滅菌劑量。這是一種根據試驗證明其生物負載的輻照抗力低于或等同于擁有標準抗力分布（SDR）的微生物群抗力的確定滅菌劑量的方法。 總則在應用方法1的本改編版時，必須遵從以下6個步驟： 步驟1：選擇SAL和取得單元產品樣本.1記錄產品預計使用的s。.2根據5.1，5.2和5.3要求，在單一的生產批次中選擇至少10個單元產品。 7.3.4 步驟2： 確定平均生物負載7.1 決定在確

33、定生物負載中是否應用修正因素。注：ISO11737-1所描述的確定生物負載的方法中引用了校正因數，從生物負載有效的計數中得到。使用方法1進行劑量設定可以使用這個有效的計數而不引用校正因數。當不使用校正因數時生物負載可能被低估。但提供不正確的生物負載校正因數可能增加驗證劑量試驗失敗的風險。7.2確定每個選擇的單元產品的生物負載并計算所有選擇的單元產品的平均生物負載（總體平均負載）注：生物負載一般由單獨的單元產品確定，但是當生物負載較低（例如<10）,可能需要合并10個單元產品來確定批次的平均生物負載。這個規則不適用于SIP，SIP不可被合并，當然可以選擇更大的SIP。7. 步驟3：獲得驗證

34、劑量從表5使用平均生物負載獲得s為10-2的劑量，指定該劑量為驗證劑量。如果使用單元產品的一部分（SIP）來進行無菌試驗，則該SIP的平均生物負載應用來確定驗證劑量。如果平均生物負載在表5中沒有給出，則用比計算出的生物負載大些的，最接近的平均生物負載。 步驟4：實施驗證劑量試驗.1 從單一的產品批次中選擇100個單元產品。.2 用驗證劑量對單元產品進行輻照。控制劑量，如果單元產品接受的最大劑量超過驗證劑量的10%，并使用方法一來確定滅菌劑量，則驗證劑量試驗必須重做。如果單元產品的最高和最低劑量的算術平均值小于驗證劑量的90%，則驗證劑量試驗可重做。如果這個平均劑量小于驗證劑量的90%，并且無菌

35、試驗的結果是可接受的（見7.3.7.1），驗證劑量試驗可以不重做。.3 依據ISO11737-2（見5.4.1）分別對輻照后的單元產品進行無菌試驗，記錄陽性樣本數。 步驟5：結論說明.1 如果100個樣本的無菌試驗不超過兩個陽性樣本，則驗證可以接受。7.2 如果無菌試驗的結果超過兩個陽性，則驗證不可接受。如果這種結果能歸因于生物負載測定不正確，生物負載測定中不適合的修正因子，無菌檢驗不正確或驗證劑量的實施不正確，則可以根據糾正措施執行重做驗證劑量試驗。如果這種結果不能解釋為采取糾正措施的理由，則這種劑量設定的方法無效，應使用另外一種替代的確定滅菌劑量的方法。（見第6條款）確定滅菌劑量.1 如果

36、使用整個產品進行試驗并且通過驗證，從表5中得到最接近生物負載的單元產品的滅菌劑量，該生物負載比計算的生物負載相等或更大，并讀出達到指定SAL所需的劑量。.2 如果使用SIP的 p1.0進行試驗并且通過驗證，則整個產品的平均生物負載可以用SIP的平均生物負載除以p值來計算。從表5中得到最接近生物負載的單元產品的滅菌劑量，該生物負載比計算的整個產品的平均生物負載相等或更大，并讀出達到指定SAL所需的劑量。使用方法1對單一或多個生產批次的平均生物負載在0.10.9之間的產品的程序 對于平均生物負載在0.10.9范圍的產品，以上給出的多個（見7.2）或單一（見7.3）批次使用方法1確定劑量的程序應遵從

37、，除非：A）.根據表1要求整個產品必須用來試驗（也可見）B）.修正因素應在確定生物負載中使用；C）.輸入表6以獲得滅菌保證水平為10-2的劑量（驗證劑量）和給定的s所需的滅菌劑量。注2：所列的值為方法1劑量設定步驟3，4和6中使用。表6-已知標準抗力分布的平均生物負載在0.10.9范圍達到給定的SAL所需的輻照劑量（kGy）平均生物負載滅菌保證水平 s平均生物負載滅菌保證水平 s10-210-310-410-510-610-210-310-410-510-60/注：對于平均生物負載>0.9而<1.0范圍的，在表5中查生物負載為1.0。8 方法2：用增量劑量實驗中得到的部分陽性信息確

38、定外推因子的劑量設定8.1 原理方法2中，可以得到關于產品上微生物對輻照抗力的信息。本方法使用暴露于一系列增量劑量的產品樣本無菌試驗的結果，估計在100個單元產品中期望得到一個有菌的劑量（即10-2SAL）。暴露于這一劑量后殘存的微生物應有比原始生物負載更均勻的D10值。從增量劑量實驗估測出的一個D10值，用這個估測值外推到低于10-2SAL以確定滅菌劑量。計算滅菌劑量的有效性通常取決于超過期望達到SAL為10-2的劑量進行外推的有效性。在對采用計算機模擬物品上微生物滅活的試驗的深入研究中，建立起了對已測定微生物群的抗力分布外推的有效性。以上略述的原理的詳盡的細節，包括計算機模擬的結果，見Da

39、vis，Strawderman和Whitby,19849。下文描述了兩種程序，方法2A和方法2B。方法2A是通常采用的一種方法，然而方法2B是針對生物負載一向很低的產品。使用方法2B必須符合的條件在.1條款中有說明。方法2不使用確定生物負載來確定滅菌劑量，無論如何，作為產品常規監控的一部分有要求確定生物負載。方法2A和方法2B中計算A，DSAL以及滅菌劑量的方法不是相同的。因此，有必要注意使用合適的公式。劑量計算必須最好報告一位小數。滅菌劑量可以四舍五入（使用標準舍入程序）到一位小數。注1: 在以下的程序和實例中，小寫字體表示為取自單一批次產品得到的結果。大寫字體表示取自所有三個批次產品得到的

40、結果。注2：方法2B要求使用整個產品（SIP=1.0），然而使用方法2A，可以使用整個產品或者產品的一部分（SIP1.0）。8.2 方法2A程序 總則使用方法2A，應遵從以下5個步驟。注：實例見 步驟1：選擇SAL和取得單元產品樣本.1記錄產品預計使用的s。.2根據5.1，5.2和5.3要求，在三個獨立的生產批次中各選擇至少280個單元產品。 用來驗證SIP1.0的充分性可能需要更多的產品。 步驟2：實施增量劑量試驗.1 總則 從2kGy開始，以標準增量為2kGy對三個批次中每批20個單元產品進行輻照，至少輻照9個劑量系列。確定每個增量劑量，每個標準增量劑量的最高劑量用來隨后判斷首次陽性劑量（

41、ffp）和d*。這些劑量可變化到標增量劑量的1.0kGy或10%，取較大值。如果對于一給定的增量劑量實施的最高和最低劑量的算術平均值小于最低限度，則對這個增量劑量可以輻照20個更多的單元產品。.1.2 根據ISO11737-2（見5.4.1條款）分別對每個輻照后的單元產品進行無菌試驗，記錄無菌試驗的陽性數。.1.3 從該試驗中獲得以下值：A）A和首次陽性劑量（FFP）（見.2）B）D*C) CD*批次（見.4）8.2.3.2 A 和 FFP.2.1 從三個批次每批增量劑量系列確定20個試樣中至少一個是陰性的最低劑量，指定這些劑量為ffp并找出三個批次的中位ffp。如果有2或3批次表現出相同的f

42、fp值，選擇批次中提供更高或最高陽性數的劑量作為中位ffp。.2.2 從表7中獲得中位ffp在無菌試驗的不同陽性數時所對應的A值。表7 中位ffp在不同無菌試樣的陽性數時所對應的A值（方法2A）中位ffp時的無菌試樣陽性數A kGy 中位ffp時的無菌試樣陽性數A kGy 14613512411310291807這里n為無菌試驗的陰性樣本數注：見公式（1）來計算A（公式1）log10(loge20)-log10loge(20/n) log10(loge20)-log10loge(20/19)A=（2kGy）.2.3 從式（2）中計算FFPFFP = 中位ffp A (2) .3 D*.3.1

43、對三個生產批次中的每一批，按以下之一確定d*a) 找出所有試樣中陰性的兩個連續劑量的最低劑量，在隨后的增量劑量系列的任何試驗中陽性不得多于一個，或b）找出20個試樣中發生一個陽性的最低劑量，緊接之前的不超過1，等于1，其后所有試樣均為陰性的增量劑量。.3.2 如果三個生產批次每個都不符合本標準8.2.3.）或b），則增量劑量試驗無效。在這種情況下，在調查試驗的方法和執行糾正措施之后可以重新進行增量劑量試驗。.3.3 按以下指定D*，a）如果最高批次d*比中位d*高出值小于5kGy，則中位批次d*就成為D*，或b）如果最高批次d*比中位d*高出值大于等于5kGy，則最高批次d*就成為D*。.4

44、CD*批次確定d*等于D*的批次并將其標示為CD*批次，如果一個以上批次d*等于D*，則可以隨機選擇其中之一作為CD*。從CD*批次中保留單元產品在方法2A步驟3中使用。從三個批次中取出保留的產品的存儲條件應阻止微生物生長。可能的話，可以選擇第四個批次作為CD*。 步驟3：實施驗證劑量試驗從CD*批次中選擇100個單元產品以D*劑量進行輻照。確定劑量并指定單元產品接受的最高劑量為DD*。DD*可以變化到D*的+1.0kGy或+10%，取其中較大值。如果單元產品接受的最高和最低劑量的算術平均值小于D*的90%，則可以對取自CD*批次的另外100個單元產品進行重新輻照。如果單元產品接受的最高和最低劑量的算術平均值小于D*的90%，但無菌試驗的結果是可以接受，則驗證劑量試驗可以不必重做。.2根據ISO11737-2（見5