1、XXXXXX醫院 檢驗科標題：檢驗程序的選擇和確認程序文件編號： XXXXX版本號： 1 修改號： 0生效日期： 2012-01-10發行部門： XXX 小組編制人： XX審核人： XX批準人： XX頁碼：第 1 頁， 共 6 頁1 目的為了證實 （驗證） 檢驗科所用檢驗方法可以滿足預期的用途， 確保醫學檢驗工作能對患 者和醫護人員發揮臨床有意義、有價值的作用，制定本程序。2 范圍適用于本檢驗科對檢驗程序的選擇和確認，包括驗證、評估、評審等一系列活動。3 職責 檢驗科管理層負責組織檢驗程序的評審； 技術主管負責檢驗程序確認的管理工作； 各專業組組長負責本組所用檢驗程序確認的組織實施；（4） 文

2、件資料管理員負責管理評審確認過程和結果的記錄。4 程序、內容和要求4.1 檢驗方法的選擇選擇檢驗程序的優先原則： 公認的或權威部門發布的程序； 經同行評議認可的書刊、雜志中發表的程序； 國際、國家、區域的指南中發表的程序。按以上原則， 中華人民共和國衛生部醫政司第 3 版全國臨床檢驗操作規程 規定的檢 驗程序和方法學是優選的。設備制造商提供的程序， 其檢驗原理應該是符合以上優選程序中的原理的， 只不過基于 其設備進行了開發。該設備如果得到我國藥監部門的批準，可直接選用。如果沒有上述優選程序， 檢驗科則使用自己制定程序內部程序。 內部程序必須經過 確認證明其符合預期的用途， 而且形成正式文件。

3、當以作業指導書的形式對公認的方法或標 準規定的方法進行補充或細化時， 這些作業指導書也被看作是一種內部程序 （通常稱為 “標 準操作程序”或“ SOP 文件”）。4.2 檢驗程序的確認（ validation ）檢驗科所用的檢驗程序都經過確認 ,證實適合其預期用途。確認的定義是“通過核查并 提供客觀證據， 以證實某一特定預期用途的特殊要求得到滿足” 。確認包括 “證實”、“評估”、 “評審”三個步驟： a）證實（ confirm ）：證實檢驗程序的性能的真實性和可靠性。confirm 也可翻譯成“驗證” ，檢驗科比較習慣用的詞是“驗證” ，所以在 4.3 節以后稱為“驗證” ，與“證實”是同義

4、詞。證實的內容：正（準）確度、精密度、可報告范圍、分析靈敏度（檢出限） 、特異性、 生物參考區間、攜帶污染率等 。XXXXXX醫院 檢驗科標題：檢驗程序的選擇和確認程序文件編號： XXXXX版本號： 1 修改號： 0生效日期： 2012-01-10發行部門： XXX 小組編制人： XX審核人： XX批準人： XX頁碼：第 1 頁， 共 6 頁證實盡量充分，覆蓋認可的醫學檢驗專業領域和所需水平,滿足應用需求。若檢驗科使用制造商配套的測量系統，則需證實前三項性能， 對非配套（自行組建）的測量系統則還需 證實其它性能。證實是基于本檢驗科所使用的測量系統進行的。 證實的方法包括但不限于以下情況： 用參

5、考程序進行方法學比較； 使用參考物質證實檢驗程序的正確性； 參加正式的能力驗證活動，由組織者給出評價； 對影響結果的因素作系統評審。 根據對方法的理論原理和實踐經驗的實驗學理解，對所得結果不確定度進行的評定。a）評估（ evaluation ）（亦稱評價） ：評估檢驗程序的可接受性和適用性 ,即使用該程序可給出 滿意結果 。評估的指標：依據 CLIA 88 的允許誤差或制造商提供的技術性能指標。評估 的方法：簡單評估或統計學評估。b）評審（ review ）：評審檢驗科使用該檢驗程序的質量和能力。 證實和評估基本上是一次性的， 即同一個檢驗程序經過一次證實和評估即可， 以后只要 測量的質量和水

6、平（管理水平和技術水平）不變， 就不必重新證實和評估。 評審是周期性的 （通常周期為一年） ，即檢驗科在第一次采用該檢驗程序之前就應進行評審，以后每隔一定 時間進行再次評審。4.3 檢驗方法性能的驗證（即證實）和評估 建立檢驗程序驗證和評估計劃。詳見檢驗程序驗證和評估計劃表 、檢測系統 /方法 的分析性能驗證評估報告 。4.3.1 精密度驗證和評估4.3.1.1 精密度的定義在規定條件下獲得的獨立測量結果之間的接近程度。 精密度是一個定性詞匯， 其反義是 不精密度或分散性，可用標準偏差定量表示。4.3.1.2 精密度試驗方法 做精密度試驗的樣品要穩定；它的基體組成盡可能與實際患者樣品相同； 樣

7、品中分析物的含量應在該項目的醫學決定水平處， 有可能的話， 做 2 個水平的精密度試 驗。如果是對廠商的檢測系統的性能評價， 則選取的樣品中分析物的含量盡量與公司評估系 統性能時分析物的含量接近；精密度試驗樣品與質控樣品不可為同一個， 也不能用質控數據來評價試驗的精密度； 因為 質控反映整個試驗過程是否受到控制，主要反映人員的操作一致性、儀器設備的穩定性等 而精密度試驗僅反映方法 （檢測系統）的精密程度。 只有系統處于受控狀態， 精密度試驗才XXXXXX醫院 檢驗科標題：檢驗程序的選擇和確認程序文件編號： XXXXX版本號： 1 修改號： 0生效日期： 2012-01-10發行部門： XXX

8、小組編制人： XX審核人： XX批準人： XX頁碼：第 1 頁， 共 6 頁是有效的；采用凍干保存的樣品要注意選擇內含分析物穩定、 瓶間差小， 嚴格控制每次復溶凍干品時 使用的復溶液的質量，開瓶要小心謹慎、 加液準確，控制使凍干塊浸潤并復溶的時間， 注意 混勻的手法等； 通常對每個水平做批內和天間重復試驗，一批連續做多次，天間是每天做一次，累積多 天的結果；在樣品數量較少，或樣品不易保存的情況下，可以采用雙份樣品檢測的方法。 同一個檢測系統不同檢驗項目的精密度可能不一樣的， 所以必須對所有檢測項目做精密度 試驗。4.3.1.3 精密度試驗數據處理計算均值、標準偏差、變異系數。4.3.1.4 精

9、密度評估可根據相關國家標準判定， 如無明確規定則可根據美國 臨床實驗室改進修正案 CLIA '88 的規定判定。例如選擇 1/4 CLIA88 允許誤差為批內不精密度判斷限，選擇 1/3 CLIA '88 允許誤差為天間不精密度判斷限等，如果受檢驗科條件、檢測系統的限制，無法達到CLIA'88 要求，則根據廠家提供的指標判定。見精密度驗證試驗結果評價表 。如果簡單 評估難以判斷，則應該用統計學方法評估，可參照 NCCLS 有關文件規定進行。4.3.2 正確度驗證和評估4.3.2.1 正確度的定義測量結果與被測量真值之間的一致程度。 正確度也是定性概念， 其反義是系統誤差

10、或偏 倚，可以定量表示。4.3.2.2 正確度試驗方法 正確度試驗實質上是方法學比較，即用待評價的方法與參考方法對同一患者的同一新鮮 樣品進行檢驗， 比較二者的結果。 通常需進行一系列水平的比較試驗， 才能得出有意義的結 論。如果只作個別水平的比較， 則至少在醫學決定水平附近進行。 也可以與參考物質或與已 定值的患者真實樣品進行比較； 在整個試驗過程中，保持良好的質量控制，只有受控過程的數據才是有效的； 樣品數量足夠，否則數據的可靠性不高。原始樣品的質量要好，避免溶血等對試驗結果 的干擾； 兩種方法的試驗基本上同時進行。4.3.2.3 正確度試驗數據處理對單對數據， 用待比較方法的測量值減去參

11、考方法的測量值， 即為二者的系統誤差或偏 倚。如果是一系列測量數據則需用線性回歸方法得到回歸值， 用回歸值減去參考值則為系統 誤差或偏倚。XXXXXX醫院 檢驗科標題：檢驗程序的選擇和確認程序文件編號： XXXXX版本號： 1 修改號： 0生效日期： 2012-01-10發行部門： XXX 小組編制人： XX審核人： XX批準人： XX頁碼：第 1 頁， 共 6 頁參加衛生部檢驗科或地方（省、自治區）檢驗科的室間質評的結果可以作為本檢驗科 正確度數值。但對系列的室間質評結果應作統計分析。4.3.2.4 正確度評估在剔除了明顯的離群值后， 經過 t 檢驗或相關性檢驗確認試驗數據有效， 然后進行判

12、定。 系統誤差或偏倚不應大于允許值。 該允許值可能由相關標準給出， 如果無相關標準則可以根 據美國臨床實驗室改進修正案 CLIA88 的規定判定，例如將 1/2 CLIA88 的允許誤差作 為正確度判斷限。見正確度驗證試驗結果評價表 。如果簡單評估難以判斷，則應該用統 計學方法評估，可參照 NCCLS 有關文件規定進行。4.3.3 患者結果的可報告范圍4.3.3.1 患者結果可報告范圍的概念檢驗結果與被測分析物濃度之間呈線性關系的范圍。 患者結果的可報告范圍是針對原始 樣品濃度而言的，稀釋的結果不能作為可報告范圍。4.3.3.2 試驗方法對一系列濃度的樣品（其基體盡可能與真實患者樣品相同，濃度

13、范圍盡可能覆蓋通常 所需的檢驗結果） 進行多次重復檢驗， 取平均值為實測值。 樣品的濃度可通過稀釋比準確計 算出（預期值） 。4.3.3.3 試驗數據處理 將檢驗結果（實測值）和對應的樣品濃度值（預期值）點畫在坐標圖上，理想的情況下 可通過回歸得到一條斜率約為± 1，截距約為 0 的直線。 如果回歸直線的斜率明顯偏離± 1 ， 或截距明顯偏離 0，或相關系數明顯偏離± 1 ，則需重新做試驗，辦法是縮短測量的濃度范 圍，或者舍去頭或尾的部分數據重新統計， 當能到達上述要求時的統計上下限即為患者結果 的可報告范圍。見臨床可報告范圍試驗評價表 。4.3.3.4 患者結果

14、的可報告范圍評估患者結果的可報告范圍至少應覆蓋醫學決定水平。 如果簡單評估難以判斷， 則應該用統 計學方法評估，可參照 NCCLS 有關文件規定進行。4.3.4 分析靈敏度（檢測下限）分析靈敏度的定義靈敏度這個詞在國際通用計量名詞術語 （VIM ）中的含義是 “測量儀器響應的變化除以 對應的激勵變化” ，即曲線的斜率。醫學檢驗中常用的分析靈敏度是指可檢測的分析物的最 低濃度（或）含量，又稱檢出限或檢測限。檢測限又有檢測低限、生物檢測限、功能靈敏度 之分。4.3.4.2 試驗方法在 “空白”樣品中分別加入不同濃度或含量的分析物，構成一系列的檢測限樣品。對XXXXXX醫院 檢驗科標題：檢驗程序的選

15、擇和確認程序文件編號： XXXXX版本號： 1 修改號： 0生效日期： 2012-01-10發行部門： XXX 小組編制人： XX審核人： XX批準人： XX頁碼：第 1 頁， 共 6 頁空白樣品和這一系列的檢測限樣品進行多次重復測量得到一系列檢驗值。4.3.4.3 試驗數據處理計算空白樣品測量的均值和標準偏差， 計算每一個檢測限樣品的測量平均值和標準偏差， 將檢驗均值減去空白均值得到一系列檢驗結果。通常以 95%的置信概率判斷檢測限，因此； 空白均值加兩倍空白標準偏差為檢測低限； 一系列濃度檢驗結果中，如果有一個檢驗結果的均值減去兩倍標準偏差（該檢測限樣品 的）恰好等于檢測低限，則該檢驗結果

16、的均值為生物檢測限； 一系列濃度檢驗結果中，如果有一個濃度檢驗結果的（天間）相對標準偏差（變異系數） 接近 20% ，則該檢驗結果的均值為功能靈敏度。見分析靈敏度試驗結果評價表 。4.3.4.4 分析靈敏度評估實測分析靈敏度的值可與制造商給出的相關值進行比較， 實測分析靈敏度的值應優于或 等于制造商給出的相關值。 如果簡單評估難以判斷， 則應該用統計學方法評估， 可參照有關 統計學資料進行。分析干擾分析干擾定義 由一種影響量而引起的測量的系統誤差，該影響量自身在測量系統中不產生信號，但 它會引起示值的增加或減少。4.3.5.2 試驗方法及結果判定 配對差異檢驗 將陽性干擾物加入樣品中，制成干擾

17、測定樣品，與不加干擾物的樣品（干擾對照樣品） 用待評價的方法進行比較測量。兩個檢驗結果有顯著差異則干擾存在。 與參考方法比較從患者樣品組中尋找有某種疾病的，或使用過某種藥物的，或有其它不正常組分的患 者樣品，將這些樣品用待評價的方法檢驗的“不正確結果”與用參考方法（不存在干擾的影 響）的檢驗結果比較，發現有顯著差異則可判定干擾物為何。以上兩種方法各有局限性，最好相互補充。生物參考區間的評審檢驗科對所使用的生物參考區間須注明出處和適用范圍。 如果懷疑原有的生物參考區間 已不適用， 則要對原有的生物參考區間進行驗證， 當驗證結果表明原有的生物參考區間確實 不適用時， 須對檢驗科服務對象的參考值重新

18、調查、 統計，建立新的生物參考區間。 詳見生 物參考區間評審程序 。4.4 檢驗程序的評審XXXXXX醫院 檢驗科標題：檢驗程序的選擇和確認程序文件編號： XXXXX版本號： 1 修改號： 0生效日期： 2012-01-10發行部門： XXX 小組編制人： XX審核人： XX批準人： XX頁碼：第 1 頁， 共 6 頁檢驗程序的評審是一項周期性的活動， 主要是對檢驗科應用該程序的質量和能力 （包括 初始能力和持續能力） 和結果滿意程度進行評審， 而不是確認檢驗方法的性能。 評審包括對 人員、儀器設備、環境條件、量值溯源、質量控制等方面的評價，在開始采用某個檢驗程序 以及以后每年都要評審一次，

19、檢驗程序修改之后也需重新評審。 詳見檢驗程序的評審程序 和檢驗程序評審表等。5 相關文件（ 文件編號）檢驗程序的評審程序（ 文件編號）生物參考區間評審程序（ 文件編號）檢驗程序評審表6 相關記錄文件編號）精密度驗證試驗結果評價表文件編號）精密度驗證試驗數據記錄表文件編號）正確度驗證試驗結果評價表文件編號）正確度驗證試驗數據記錄表文件編號）臨床可報告范圍試驗評價表文件編號）臨床可報告范圍試驗數據記錄表文件編號）分析靈敏度試驗結果評價表文件編號）檢測系統 /方法的分析性能驗證評估報告文件編號）檢驗程序驗證和評估計劃表XXXXXXXX 醫院文件編號： XXXXXXXX 第1版第 0次修訂精密度驗證試

20、驗結果評價表年： 流水號：試驗日期項目試驗樣品檢測系統名稱 及編號質控品批 號試劑名稱及 有效期檢測方法批內試驗結果試驗次數均值標準差變異系數1/3CLIA'88 允許誤 差評價天間試驗結果試驗天數均值標準差變異系數1/2CLIA'88 允許誤 差評價評價人及日期XXXXXXXX 醫院文件編號： XXXXXXXX 第1版第 0次修訂精密度驗證試驗數據記錄表年： 流水號：試驗樣品及批號檢測系統 名稱檢測系統 編號試劑名稱 及有效期操作者檢測項目檢測方法批內檢測日期重復 1重復 8重復 15重復 2重復 9重復 16重復 3重復 10重復 17重復 4重復 11重復 18重復 5重

21、復 12重復 19重復 6重復 13重復 20重復 7重復 14批間檢測日期重復 1重復 2重復 3重復 4XXXXXXXX 醫院文件編號： XXXXXXXX 第1版第 0次修訂正確度驗證試驗結果評價表年： 流水號：試驗日期項目檢測系統試驗樣品試劑名稱試劑有效期校準品批號校準品靶值驗證值絕對偏倚相對偏倚（ %）允許誤差t 檢驗結果評價評價人及日期XXXXXXXX 醫院文件編號： XXXXXXXX 第1版第 0次修訂正確度驗證試驗數據記錄表年： 流水號：試驗樣品檢測系統名 稱檢測系 統編號檢測日期試劑名稱及 有效期操作者檢測方法項目校準品批號驗證值 1驗證值 2驗證值 3均值試驗樣品檢測系統名 稱檢測系 統編號檢測日期試劑名稱及 有效期操作者檢測方法項目校準品批號驗證值 1驗證值 2驗證值 3均值XXXXXXXX 醫院文件編號： XXXXXXXX 第1版第 0次