1、1.1.概念：又叫做概念：又叫做基因拼接技術(shù)基因拼接技術(shù) 或或 DNA重組技術(shù)重組技術(shù) 通俗的說(shuō)，就是按照人們的意愿，把通俗的說(shuō)，就是按照人們的意愿，把一種生物一種生物的某種基因的某種基因提取出來(lái)，加以修飾改造，然后放到提取出來(lái)，加以修飾改造，然后放到另一種生物另一種生物的細(xì)胞的細(xì)胞里，里，定向定向地改造生物的地改造生物的遺傳性狀遺傳性狀。一一 基因工程基因工程2.2.原原 理：理：3.3.操作水平：操作水平：5.5.結(jié)結(jié) 果：果：基因重組基因重組DNADNA分子水平分子水平定向定向地改造生物的地改造生物的遺傳性狀遺傳性狀，獲得人類所需要的品種獲得人類所需要的品種4.4.操作環(huán)境：操作環(huán)境：生

2、物體外生物體外（一（一 ） 基因工程的概念基因工程的概念3）實(shí)例）實(shí)例:EcoR 該限制酶只能識(shí)別該限制酶只能識(shí)別GAATTC的序列，并在的序列，并在G和和A之間將這段序列切開(kāi)。之間將這段序列切開(kāi)。黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端PPPPC CT TA AG GP4 41 13 35 52 2oP4 41 13 35 52 20PPA AC CG GT T磷酸脫氧核糖反向平行反向平行含氮堿基DNA的平面結(jié)構(gòu)的平面結(jié)構(gòu)3，5磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵被同一種限制酶切斷的幾個(gè)被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNADNA是否具有相同是否具有相同的黏性末端？的黏性末端？黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端具有具有具有相

3、同的黏性末端的具有相同的黏性末端的DNADNA分子會(huì)相互黏合起來(lái)。分子會(huì)相互黏合起來(lái)。C T T A AG A A T T C G具有相同的黏性末端的具有相同的黏性末端的DNADNA分子會(huì)相互黏合起來(lái)。分子會(huì)相互黏合起來(lái)。C T T A AG A A T T C GCTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 練習(xí)使用練習(xí)使用EcoRI 剪切剪切目的基因目的基因CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 目的基因目的基因黏性末端黏性末端黏合只能使互補(bǔ)

4、的堿基連接起來(lái)黏合只能使互補(bǔ)的堿基連接起來(lái)問(wèn)問(wèn): : 黏性末端黏合的是什么部位？黏性末端黏合的是什么部位？問(wèn)：?jiǎn)枺夯虻尼樉€基因的針線-DNA-DNA連接酶連接酶連接的是什么部位連接的是什么部位? ? 脫氧核糖與磷酸交替鏈接而構(gòu)成脫氧核糖與磷酸交替鏈接而構(gòu)成DNADNA骨架上的缺口骨架上的缺口（3,53,5磷酸二酯鍵）磷酸二酯鍵）使用使用DNADNA連接酶制作重組連接酶制作重組DNADNA分子分子甲片段甲片段CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段乙片段GGCATCTTAAAATTCCGTAG 重組重組DNADNA分子分子GGCATCTTAAAATTCCGTAG 實(shí)質(zhì)：擬核或細(xì)胞核以外的能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子二二 基因工程的基因工程的“四步曲四步曲”1.提取提取目的基因目的基因12.目