1、學習好資料歡迎下載專題2微生物的培養與應用課題2土壤中分解尿素的細菌的分離與計數教學設計金堂縣竹篙中學譚善財2013-3-16本節課內容的總體目標二、教學重點與難點課題重點：對土樣的選取和選擇培養基的配制課題難點：對分解尿素的細菌的計三、課時：1h四、本課題內容標準1、研究培養基對微生物的選擇作用，“研究”屬于知識性領域的目標動詞，應用水平2、進行微生物的分離，“進行”屬于技能性領域目標動詞，獨立操作水平3、測定某種微生物的數量，“測定”屬于技能性領域目標動詞，獨立操作水平。五、本課題研究思路六、教學思路:七、教學流程八、教學過程復習提問教師活動1 .微生物最常用的兩種接種方法是什么?2 .什

2、么稀釋涂布平板法？其目的是什么?導入課題引導學生閱讀“課題背景”知識，提出的問題。學生活動學生回憶學生自主學習回答問題設計意圖為細菌計數原理、操作做好鋪墊創設情景，引入新課，使學生明確分解尿素的細菌的重要性，突出課題的必要性研究思路1、教師讓學生閱讀課本P21,講解：DN咪合酶作用，發現過程。引導學生得到啟示根據它對生存環境的要求，到相應的環境中去尋找（即自然界篩選）。1、DN咪合酶發現過程，同學們得到什么啟示？2.學生討論為什么1、篩選菌株2、實驗室中微生物的篩選原理實驗室篩選：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度、H等），同時抑制或阻止其他微生物生長。Taq細菌能從熱泉p中篩選

3、出來嗎？3、教師展示各種篩選菌株方法的多媒體圖片:引導學生對知識進行遷移學習，培養學生的邏輯遷移思維。3、學生閱讀課本P22側邊欄關于本課題使用的培養基成分相關內容，討論并回答提供碳源和氮源的分別是什么物質。黃石公園熱泉底火山海4.學生分析討論，以尿素為唯一氮源的培養基能否篩選出分解尿素的細菌3、學生觀看教師展示的多媒體圖片。大腸桿菌顯色培養基菌株實驗室篩選SARS4、學生討論培養基如何對微生物進行篩選。通過觀看圖片，使學生由感性認識過渡到理性認識。培養學生的學科素養。4、培養基選擇分解尿素的微生物的原理：培養基的氮源為尿素，只有能合成月尿酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏胭酶的微生

4、物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所以用此培養基就能夠選擇出分解尿素的微生物。5、選擇培養基：在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基。目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。1、學生討論能否 用來計數土壤中的 活菌數。2、學生討論并區 別：稀釋涂布平板 法是用來計數的， 而平板劃線法是用 來純化的。1、直接計數法：最常用的顯微鏡直接計數，指出優缺點。2、間接計數法：最常用方法稀釋涂布平板法。知識的遷移，培養學生的知識整合能力。C:某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數2、統計菌落數目V：涂布平板時所用的稀釋液的體積（ml）學生設

5、計實驗方案：方案一：由其他同 學用與A同學相同 土樣進行實驗；萬案二：將A同學培養學生的懷疑3、設置對照配制的培養基在不 加土樣的情況下進 行培養，作為空白 對照，以證明培養 基是否受到污染。精神，并根據自身設計實驗方案進行驗證。培養學生的實驗設計能力。小結：通過這個事 例可以看出，實驗 結果要有說服力， 對照的設置是必不 可少的。1、教師講解樣品的稀釋和稀釋液的取樣培養流程示 意圖。學生討論思考下列 問題：1、如何從平板上 的菌落數推測出每 克樣品中的菌落 數？通過實驗設計， 培養學生設計實 驗方案能力，培 養學生的學科素 養。體驗無菌操 作的實驗過程。答：統計某一稀釋M稀釋倍數每克樣品中的

6、菌株數=(C+V)XM3.教師提出計數過程中應注意那些問題1、實例：在做分解尿素的細菌的篩選與統計菌落數目的實驗時，A同學篩選出約150個菌落，但其他同學只選擇出約50個菌落，分析其原因。教師要求學生設計實驗方案。2、對照實驗是指除了被測試的條件外，其他條件都相同的實驗。滿足該條件的稱為對照組，未滿足該條件的稱為實驗組。設置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度。實驗設計度下平板上的菌落 數，最好能統計3 個平板，計算出平 板菌落數的平均 值，然后按課本旁 欄的公式進行計 算。2、土壤取樣:2、為什么分離不 同的微生物要采用 不同的稀釋度？從肥沃、濕潤的土

7、壤中取樣。先鏟去表層土3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準備好的信封中。3、制備培養基和樣品的稀釋:制備以尿素為唯一氮源的選擇培養基，并按一定倍數稀釋。答：因為土壤中各類微生物的數量（單位:株/kg）是不同的，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進行分離，同時還應當有針對性地提供選擇培養的條件。4、微生物的培養與觀察:每隔24h統計一次菌落數目。選取菌落數目穩定時的記錄作為結果。1、無菌操作a、取土用小鐵鏟、盛土樣信封在使用前都需要滅菌。培養學生的創新 思維。學生討論實驗過程操作提示b、應在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣的注意事項。倒入錐形瓶中，塞好棉塞。c、在稀釋土壤溶液的過

8、程中，每步都要在火焰旁操作。2、做好標記注明培養基種類、培養日期、平板培養樣品的稀釋度等。3、規劃時間學生交流成果，分析自己的成功之處和需要改進的地方。培養學生學會對別人評價和自我評價的能力1、培養物中是否有雜菌污染以及選擇培養基是否篩選菌落結果分析2、樣品的稀釋操作是否成功與評價3、重復組的結果是否一致在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑。培養某種細菌后，如果PH升高，指示劑將變紅，說明該細菌能夠分解尿素課題延伸學生了解酚紅指示劑的作用，通過對比月尿酶的檢測七、板書設計1、自然篩選和實驗率箍選上埴中分解尿素的細鑿的分高與計數研究思路1 .篩選附林2、選拜培養基2 .統計菌落數H設置對照

9、1 . E接計數法2 .間接諱效法1.上壤取樣實驗設計T 2樣品的梯和L九僚生物的培葬與觀察操作提示結果分析與坪價L課題延伸九、課堂鞏固1 .使用選擇培養基的目的是（）A.培養細菌B.培養真菌C.使需要的微生物大量繁殖D.表現某微生物的特定性狀與其他微生物加以區別2 .能合成月尿酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是（）A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素3 .下列說法不正確的是（）A.科學家從7080度熱泉中分離到耐高溫的TaqDNAm合酶B.統計某一稀釋度的5個平板的菌落數依次為MlM2M3M4M5以M3作為該樣品菌落數的估計值C.設置對照實驗的主要目的是排除實驗

10、組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度D.同其他生物環境相比，土壤中的微生物數量最大，種類最多。4 .酵母菌能在青霉素的環境中生存而細菌一般不能，為培養和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養基中加入（）A.較多的氮源物質B.較多的碳源物質C.青霉素類藥物D.高濃度食鹽5 .用來判斷選擇培養基是否起到了選擇作用需要設置的對照是A.未接種的選擇培養基B.未接種的牛肉膏蛋白月東培養基C.接種了的選擇培養基D.接種了的牛肉膏蛋白月東培養基6 .請選出下列正確的取樣培養操作步驟土壤取樣稱取10g土壤取出加入盛有90ml無菌水的錐形瓶中吸取0.1ml進行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A.f一B.一一一C.一一D.一一7 .（2011揭陽模擬）下列關于微生物分離和培養的有關敘述，錯誤的是（）A.微生物培養前，需對培養基進行消毒8 .測定土壤樣品中的細菌數目，常用菌落