1、選修實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)備考選修實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)備考一、考綱解讀實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)要求要求選修三選修三 基因工程基因工程（1 1）能獨(dú)立完成所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括）能獨(dú)立完成所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。（2 2）具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力，）具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力，并對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和并對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理。處理。（3 3）具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探）具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力，包括

2、運(yùn)用觀察、實(shí)驗(yàn)與調(diào)查、究的能力，包括運(yùn)用觀察、實(shí)驗(yàn)與調(diào)查、假說(shuō)演繹、建立模型與系統(tǒng)分析等科學(xué)假說(shuō)演繹、建立模型與系統(tǒng)分析等科學(xué)研究的方法。研究的方法。（4 4）能對(duì)一些簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)）能對(duì)一些簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂。的評(píng)價(jià)和修訂。DNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定選修一選修一 微生物的利用微生物的利用（1 1）微生物的分離和培養(yǎng)）微生物的分離和培養(yǎng)（2 2）某種微生物數(shù)量的測(cè)定）某種微生物數(shù)量的測(cè)定（3 3）培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用）培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用（4 4）利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物）利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用以及微生物在其

3、他方面的應(yīng)用酶的應(yīng)用酶的應(yīng)用（1 1）酶活力測(cè)定的一般原理和方法）酶活力測(cè)定的一般原理和方法（2 2）酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用）酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用（1 1）植物的組織培養(yǎng)）植物的組織培養(yǎng)（2 2）蛋白質(zhì)的提取和分離）蛋白質(zhì)的提取和分離（3 3）PCRPCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用技術(shù)的基本操作和應(yīng)用注意選修實(shí)驗(yàn)與必修內(nèi)容的聯(lián)系注意選修實(shí)驗(yàn)與必修內(nèi)容的聯(lián)系選修內(nèi)容選修內(nèi)容必修內(nèi)容必修內(nèi)容選修三選修三 基因工程基因工程DNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定選修一選修一 微生物的利用微生物的利用（1 1）微生物的分離

4、和培養(yǎng)）微生物的分離和培養(yǎng)（2 2）某種微生物數(shù)量的測(cè)定）某種微生物數(shù)量的測(cè)定（3 3）培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用）培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用（4 4）利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的）利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用種群密度的增長(zhǎng)曲線種群密度的增長(zhǎng)曲線血球計(jì)數(shù)板的應(yīng)用血球計(jì)數(shù)板的應(yīng)用酵母菌、醋酸菌等微生物的代謝特點(diǎn)酵母菌、醋酸菌等微生物的代謝特點(diǎn)酵母菌的呼吸類型酵母菌的呼吸類型酶的應(yīng)用酶的應(yīng)用（1 1）酶活力測(cè)定的一般原理和方法）酶活力測(cè)定的一般原理和方法（2 2）酶在食品制造和洗滌等方面的）酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用應(yīng)用酶的本質(zhì)，影響酶活性的

5、因素酶的本質(zhì)，影響酶活性的因素細(xì)胞壁的成分細(xì)胞壁的成分生物技術(shù)在食品加工及其他方面的生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用應(yīng)用（1 1）植物的組織培養(yǎng)）植物的組織培養(yǎng)（2 2）蛋白質(zhì)的提取和分離）蛋白質(zhì)的提取和分離（3 3）PCRPCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用技術(shù)的基本操作和應(yīng)用細(xì)胞分化，細(xì)胞全能性細(xì)胞分化，細(xì)胞全能性蛋白質(zhì)的特點(diǎn)，血紅蛋白的結(jié)構(gòu)等蛋白質(zhì)的特點(diǎn)，血紅蛋白的結(jié)構(gòu)等DNADNA復(fù)制的條件復(fù)制的條件（一一）培養(yǎng)基培養(yǎng)基 人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)稱生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)稱 培養(yǎng)基培養(yǎng)基一般的培養(yǎng)基均需要碳源、氮一

6、般的培養(yǎng)基均需要碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水等源、無(wú)機(jī)鹽和水等培養(yǎng)基的基本成分培養(yǎng)基的基本成分 液體培養(yǎng)基（一般用錐形瓶盛裝）液體培養(yǎng)基（一般用錐形瓶盛裝） 固體培養(yǎng)基（一般用試管或培養(yǎng)皿盛裝），在液體固體培養(yǎng)基（一般用試管或培養(yǎng)皿盛裝），在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上再添加瓊脂。培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上再添加瓊脂。 培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類2、理解培養(yǎng)基的種類及應(yīng)用（適當(dāng)補(bǔ)充）按物理狀態(tài)不同劃分按物理狀態(tài)不同劃分固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基按化學(xué)組成不同劃分：合成培養(yǎng)基按化學(xué)組成不同劃分：合成培養(yǎng)基/天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基按用途不同劃分按用途不同劃分鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基選擇

7、培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌只有尿素作為惟一氮源的培養(yǎng)基只有尿素作為惟一氮源的培養(yǎng)基 分離出分解尿素分離出分解尿素 的細(xì)菌的細(xì)菌不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基 分離固氮菌分離固氮菌只有纖維只有纖維素素作為惟一碳源的培養(yǎng)基作為惟一碳源的培養(yǎng)基 分離分解纖維素的細(xì)菌分離分解纖維素的細(xì)菌加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基 分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞選擇培養(yǎng)基做一些適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充（二二）無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù) 無(wú)菌

8、操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，無(wú)菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法技術(shù)。所有防止雜菌污染的方法技術(shù)。 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，無(wú)菌技術(shù)就是防止雜菌污染的操作技術(shù)。無(wú)菌技術(shù)就是防止雜菌污染的操作技術(shù)。滅菌方法滅菌方法適用對(duì)象適用對(duì)象所需條件所需條件滅菌時(shí)間滅菌時(shí)間灼燒滅菌灼燒滅菌接種金屬用具、試接種金屬用具、試管口、瓶口管口、瓶口在酒精燈火焰的在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒充分燃燒層灼燒直至燒紅直至燒紅干熱滅菌干熱滅菌能耐高溫并需要保能耐高溫并需要保持干燥的玻璃器皿、持干燥的玻璃器皿、金屬用具等金屬用具等干熱滅菌箱內(nèi)，

9、干熱滅菌箱內(nèi)，160170OC中中12h高壓蒸汽高壓蒸汽滅菌滅菌培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)器具培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)器具等等100kPa，121OC 1530min消毒消毒 無(wú)菌技術(shù)的種類無(wú)菌技術(shù)的種類滅菌滅菌 使用較為溫和的方法（酒精、紫外線）來(lái)殺使用較為溫和的方法（酒精、紫外線）來(lái)殺死部分對(duì)人體有害的微生物。死部分對(duì)人體有害的微生物。 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔消毒；清潔消毒； 將培養(yǎng)皿、接種用具進(jìn)行滅菌；將培養(yǎng)皿、接種用具進(jìn)行滅菌； 接種的過(guò)程要在酒精燈附近進(jìn)行。接種的過(guò)程要在酒精燈附近進(jìn)行。使用較為強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外的所使用較為強(qiáng)烈的理化因素殺死物

10、體內(nèi)外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。有微生物（包括芽孢和孢子）?；具^(guò)程：稱量基本過(guò)程：稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板分離分解尿素的細(xì)菌分離分解尿素的細(xì)菌：培養(yǎng)基中加入尿素為：培養(yǎng)基中加入尿素為唯一氮源唯一氮源分離分解分離分解纖維素纖維素的的微生物：培養(yǎng)基中加入纖微生物：培養(yǎng)基中加入纖維素為唯一碳源維素為唯一碳源倒平板操作的討論倒平板操作的討論 1. 1.培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到5050O OC C時(shí)倒平板。用什么辦法來(lái)時(shí)倒平板。用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？ 用手觸摸錐形瓶，溫度下降到剛用手觸摸錐形瓶，溫度下降到剛剛不燙手時(shí)即可開始倒平板。剛不燙手時(shí)即可

11、開始倒平板。 2. 2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？ 通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。 3. 3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠. . 將平板倒置，既可以將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快地?fù)]發(fā)過(guò)快地?fù)]發(fā) 。 4. 4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部

12、位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？ 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。（二二）純化大腸桿菌純化大腸桿菌 微生物接種方法常見的有平板劃線法和稀釋涂布平板法。微生物接種方法常見的有平板劃線法和稀釋涂布平板法。1.1.平板劃線法平板劃線法 通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面（操作如教將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)

13、基的表面（操作如教材材1818頁(yè)圖示）。頁(yè)圖示）。 在數(shù)次劃線后可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉在數(shù)次劃線后可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體稱眼可見的子細(xì)胞群體稱菌落菌落。優(yōu)點(diǎn)：可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離優(yōu)點(diǎn)：可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離缺點(diǎn)：不能計(jì)數(shù)缺點(diǎn)：不能計(jì)數(shù)一般用于分離微生物的純種一般用于分離微生物的純種 1、為什么在操作的第一步以及劃線之前都要灼、為什么在操作的第一步以及劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)？燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)？ 操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了

14、避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和

15、感染操作者。感染操作者。平板劃線法的討論平板劃線法的討論 2.2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？行劃線？ 以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 3.3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？是從上一次劃線的末端開始劃線？ 劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)

16、細(xì)菌繁殖線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。而來(lái)的菌落。 2. 2.稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)。的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)。 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將分在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。 稀釋涂布平板法操作過(guò)程分兩個(gè)步驟，即系列稀釋操稀釋涂布平板法操作過(guò)程分兩個(gè)步驟，即系列稀釋操作和涂布平板操

17、作。作和涂布平板操作。優(yōu)點(diǎn)：可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征。優(yōu)點(diǎn)：可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征。缺點(diǎn)：吸收量較少，較麻煩，平板不干燥缺點(diǎn)：吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延。效果不好，容易蔓延。一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計(jì)數(shù)一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計(jì)數(shù) 系列稀釋操作系列稀釋操作101102103104105106 (1) (1)將分別盛有將分別盛有9mL9mL水的試管滅菌并編號(hào)。水的試管滅菌并編號(hào)。 (2) (2)用移液管吸取用移液管吸取1mL1mL培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中，培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中，輕壓橡皮頭，吹吸三次使之充分混勻。輕壓橡皮頭，吹吸三次使之充分混勻。 (3)

18、 (3)從從10101 1倍稀釋的試管中吸取倍稀釋的試管中吸取1mL1mL稀釋液，注入第三支試稀釋液，注入第三支試管中，重復(fù)步驟管中，重復(fù)步驟2 2，直至到第六支試管。，直至到第六支試管。涂布平板操作涂布平板操作(1)(1)將涂布器浸在盛有將涂布器浸在盛有7070的酒精的燒杯中。的酒精的燒杯中。(2)(2)取少量菌液（不超取少量菌液（不超0.1mL0.1mL），滴加到培養(yǎng)基表面。），滴加到培養(yǎng)基表面。(3)(3)將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷卻將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷卻8 810s10s。(4)(4)用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)

19、基表面。涂布平板操作討論涂布平板操作討論 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第2 2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？操作？ 應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌無(wú)菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。酒精燈火焰周圍；等等。 將接種后和未接種（作為對(duì)照組）的培養(yǎng)基均放到將接種后和未接種（作為對(duì)照組）的培養(yǎng)基均放到

20、37370 0C C的的恒溫箱中，培養(yǎng)恒溫箱中，培養(yǎng)121224h24h后進(jìn)行觀察并記錄結(jié)果。后進(jìn)行觀察并記錄結(jié)果。 1.1.未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)？如果有菌未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)？如果有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明了什么？落生長(zhǎng)，說(shuō)明了什么？ 未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 12 d2 d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。 2.2.在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上，能否觀察到獨(dú)立的在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上，能否觀察到獨(dú)立的菌落？它們的大小、形狀、顏色相似？菌落？它們的大小、形狀、顏色相

21、似？ 如果接種成功的話，在培養(yǎng)基的表面可觀察到大小、如果接種成功的話，在培養(yǎng)基的表面可觀察到大小、形狀、顏色相似的菌落。形狀、顏色相似的菌落。 3.3.培養(yǎng)培養(yǎng)12h12h和和24h24h后，觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同嗎？如后，觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同嗎？如果不同，請(qǐng)分析產(chǎn)生差異的原因？果不同，請(qǐng)分析產(chǎn)生差異的原因？ 培養(yǎng)培養(yǎng)12 h12 h與與24 h24 h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)、菌落的不斷生長(zhǎng)，使菌落不斷增大。同。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)、菌落的不斷生長(zhǎng)，使菌落不斷增大。 4.4.如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落，請(qǐng)分析如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形

22、態(tài)的菌落，請(qǐng)分析其可能的原因。其可能的原因。 無(wú)菌操作未達(dá)到要求：可能是培無(wú)菌操作未達(dá)到要求：可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底；可能是接種時(shí)發(fā)生了污染；也可能是在養(yǎng)基滅菌不徹底；可能是接種時(shí)發(fā)生了污染；也可能是在培養(yǎng)的過(guò)程中受到了污染。培養(yǎng)的過(guò)程中受到了污染。 1.1.試管低溫臨時(shí)保存試管低溫臨時(shí)保存 將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成菌落將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成菌落后，置于后，置于4 4OC C的冰箱中保存（每隔的冰箱中保存（每隔3 36 6個(gè)月要重新接種培個(gè)月要重新接種培養(yǎng)后再保存）。養(yǎng)后再保存）。 2.2.甘油管長(zhǎng)期保存甘油管長(zhǎng)期保存 在在3mL3mL的甘油瓶中加入的甘油

23、瓶中加入1mL1mL的甘油，高壓滅菌。將的甘油，高壓滅菌。將1mL1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，充分混合后，置于培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，充分混合后，置于2020OC C的的冷凍箱中保存。冷凍箱中保存。（一一） 篩篩 選選 菌菌 株株原理原理 人為提供有利于目的菌株的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、人為提供有利于目的菌株的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pHpH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。 在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱做抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱做選擇

24、培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基?；?1.1.在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是是什么物質(zhì)？氮源的分別是是什么物質(zhì)？ 碳源是葡萄糖，氮源是尿素。碳源是葡萄糖，氮源是尿素。 2.2.分析該配方的培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有篩選作用？分析該配方的培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有篩選作用？如果有，又是如何進(jìn)行篩選的？如果有，又是如何進(jìn)行篩選的？能分解尿素的細(xì)菌的篩選能分解尿素的細(xì)菌的篩選 閱讀教材閱讀教材2222頁(yè)第一大段相關(guān)內(nèi)容，并思考回答下列頁(yè)第一大段相關(guān)內(nèi)容，并思考回答下列問題：?jiǎn)栴}： 有篩選作用，它的氮源只含有尿素，只有能合成分有篩選作用，它的氮源只含有尿素，只

25、有能合成分解尿素的脲酶的細(xì)菌才能生長(zhǎng)。解尿素的脲酶的細(xì)菌才能生長(zhǎng)。（二二） 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目原理原理 運(yùn)用稀釋涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)。運(yùn)用稀釋涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)。 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的理論依據(jù)是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的理論依據(jù)是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。因此，恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的一個(gè)活菌。因此，恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，通常將幾個(gè)稀釋度下的菌液都關(guān)鍵。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，通常將幾個(gè)稀釋度下的菌液都涂布在平板上，培

26、養(yǎng)后再選擇菌落數(shù)在涂布在平板上，培養(yǎng)后再選擇菌落數(shù)在30 30 300300的平板進(jìn)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。行計(jì)數(shù)。能分解尿素的細(xì)菌的鑒定能分解尿素的細(xì)菌的鑒定鑒定的原理：鑒定的原理： 細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基的的pHpH升高。升高。鑒定方法：鑒定方法： 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，利用此培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基的顏劑，利用此培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基的顏色變化。色變化。 剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，而不與水解后的剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，而不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)

27、生這種反應(yīng)。纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。（二二）纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選 用加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基去培養(yǎng)微生物時(shí)，如果培用加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基去培養(yǎng)微生物時(shí)，如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈時(shí)，可說(shuō)明該菌落是纖維養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈時(shí)，可說(shuō)明該菌落是纖維素分解菌，因?yàn)樗褜⒈粍偹胤纸饩?，因?yàn)樗褜⒈粍?果紅果紅 染成紅色的纖維素分解了。染成紅色的纖維素分解了。（1 1）微生物培養(yǎng)與選修三的聯(lián)系）微生物培養(yǎng)與選修三的聯(lián)系特點(diǎn)：結(jié)合種群密度變化曲線考查微特點(diǎn)：結(jié)合種群密度變化曲線考查微生物培養(yǎng)生物培養(yǎng)注意：關(guān)注影響微生物繁殖的條件，注意：關(guān)注影響微生物繁殖的條件，

28、復(fù)習(xí)復(fù)習(xí)“S”S”型、型、“J”J”型曲線型曲線特點(diǎn)：結(jié)合微生物特點(diǎn)：結(jié)合微生物計(jì)數(shù)考查必修三的計(jì)數(shù)考查必修三的血球計(jì)數(shù)板的使用血球計(jì)數(shù)板的使用注意：血球計(jì)數(shù)板，注意：血球計(jì)數(shù)板，掌握基本用法掌握基本用法（0808廣東，廣東，8 8）?。┤∩倭拷湍妇悍湃肷倭拷湍妇悍湃胙蛴?jì)數(shù)板直接計(jì)血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，測(cè)得的數(shù)目是數(shù)，測(cè)得的數(shù)目是A A、活細(xì)胞數(shù)、活細(xì)胞數(shù)B B、死細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)C C、菌落數(shù)、菌落數(shù)D D、細(xì)胞總數(shù)、細(xì)胞總數(shù)知識(shí)要點(diǎn)知識(shí)要點(diǎn) 1.1.酵母菌的兼性厭氧生活方式酵母菌的兼性厭氧生活方式2.2.發(fā)酵需要的適宜條件發(fā)酵需要的適宜條件3.3.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來(lái)源傳統(tǒng)發(fā)

29、酵技術(shù)所使用的酵母菌的來(lái)源酵母菌的代謝類型酵母菌的代謝類型 酵母菌是種兼性厭氧型微生物，在酵母菌是種兼性厭氧型微生物，在有氧時(shí)進(jìn)行有氧呼吸，快速繁殖。有氧時(shí)進(jìn)行有氧呼吸，快速繁殖。C C6 6H H1212O O6 6 + 6O+ 6O2 26CO6CO2 2 + 6H+ 6H2 2O O酶酶 無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。C C6 6H H1212O O6 62C2C2 2H H5 5OH + 2COOH + 2CO2 2 酵母菌在酵母菌在2020O OC C、缺氧、呈酸性的、缺氧、呈酸性的條件下能大量繁殖（絕大多數(shù)其他微條件下能大量繁殖（絕大多數(shù)其他微生物

30、在該環(huán)境條件下則會(huì)受到抑制）生物在該環(huán)境條件下則會(huì)受到抑制）酵母菌發(fā)酵的條件酵母菌發(fā)酵的條件酶酶 傳統(tǒng)的發(fā)酵方法、傳統(tǒng)的發(fā)酵方法、酵母菌的來(lái)源酵母菌的來(lái)源閱讀教材第閱讀教材第3頁(yè)頁(yè) 考點(diǎn)考點(diǎn)2 2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用酒變醋的原理酒變醋的原理 在醋酸菌的作用下，酒首先被氧化成在醋酸菌的作用下，酒首先被氧化成乙醛，進(jìn)而被氧化成乙酸。乙醛，進(jìn)而被氧化成乙酸。CHCH3 3COOH COOH H H2 2O OC C2 2H H5 5OHOH + + O O2 2 醋酸菌是種好氧細(xì)菌，對(duì)氧氣的含量特別的敏感。醋酸菌是種好氧細(xì)菌，對(duì)氧氣的含量特別的敏感。醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為醋酸菌的最

31、適生長(zhǎng)溫度為30303535O OC C。醋酸菌的代謝類型及生活條件醋酸菌的代謝類型及生活條件酶酶 應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。 你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？ 需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮。例如，榨需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮。例如，榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、

32、不要完全揭開瓶蓋等。不要完全揭開瓶蓋等。 制葡萄酒和葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度分別控制在制葡萄酒和葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度分別控制在1825 1825 和和3035 ？ 20 20左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為長(zhǎng)溫度為30303535，因此要將溫度控制在，因此要將溫度控制在303035 35 。 制葡萄醋時(shí)，為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣？制葡萄醋時(shí)，為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣？ 醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需

33、要氧的參與，因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。的參與，因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。用重鉻酸鉀檢測(cè)酒精的產(chǎn)生用重鉻酸鉀檢測(cè)酒精的產(chǎn)生 原理原理：在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)：在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng) 呈現(xiàn)灰綠色。呈現(xiàn)灰綠色。 操作：操作：試管試管發(fā)酵液（發(fā)酵液（2mL2mL）3 3滴滴H H2 2SOSO4 4（3mol/L3mol/L）3 3滴重鉻酸鉀（飽和溶液）滴重鉻酸鉀（飽和溶液）振蕩振蕩振蕩振蕩觀察觀察閱讀教材第閱讀教材第6 6頁(yè)，回答下列問題：頁(yè)，回答下列問題： 1. 1.豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事？豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事？ 豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是豆腐上生長(zhǎng)的白毛是

34、毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲，此外在豆腐中還有匍匐菌絲。直立菌絲，此外在豆腐中還有匍匐菌絲。 2. 2.材料中的王致和為什么要用鹽將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)？材料中的王致和為什么要用鹽將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)？ 鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。 腐乳的制作過(guò)程中有多種微生物參與了發(fā)酵（如腐乳的制作過(guò)程中有多種微生物參與了發(fā)酵（如青霉、曲霉、毛霉、酵母等），其中起主要作用的是青霉、曲霉、毛霉、酵母等），其中起主要作用的是毛霉。毛霉。 利用毛霉分泌的蛋白酶等酶類將豆腐中的蛋白質(zhì)利用毛霉分泌的蛋白酶等酶類將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成多肽和氨基酸，將脂肪分解成甘油和脂肪酸。分解成多肽

35、和氨基酸，將脂肪分解成甘油和脂肪酸。1.鹽的用量：鹽的用量：（三）（三） 不同條件對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響不同條件對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響 鹽可抑制其他雜菌的生長(zhǎng)，但鹽過(guò)多，太咸，鹽可抑制其他雜菌的生長(zhǎng)，但鹽過(guò)多，太咸，也會(huì)影響腐乳的品質(zhì)。也會(huì)影響腐乳的品質(zhì)。2.酒的用量：酒的用量： 酒的含量應(yīng)控制在酒的含量應(yīng)控制在1212左右，酒的含量過(guò)左右，酒的含量過(guò)高會(huì)使腐乳成熟的時(shí)間延長(zhǎng)，含量過(guò)少不足以抑制微高會(huì)使腐乳成熟的時(shí)間延長(zhǎng)，含量過(guò)少不足以抑制微生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。3.發(fā)酵的溫度：發(fā)酵的溫度： 溫度應(yīng)控制在溫度應(yīng)控制在2020O OC C左右，溫度過(guò)高，其左右，

36、溫度過(guò)高，其他微生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗，過(guò)低，腐乳成熟他微生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗，過(guò)低，腐乳成熟時(shí)間延長(zhǎng)。時(shí)間延長(zhǎng)。4.發(fā)酵的時(shí)間：發(fā)酵的時(shí)間： 時(shí)間過(guò)長(zhǎng)過(guò)短都會(huì)影響腐乳的品質(zhì)。時(shí)間過(guò)長(zhǎng)過(guò)短都會(huì)影響腐乳的品質(zhì)。制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量 乳酸菌（種類很多，常見有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌）乳酸菌（種類很多，常見有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌）是種厭氧細(xì)菌，在無(wú)氧的條件下，將葡萄糖分解成乳酸。是種厭氧細(xì)菌，在無(wú)氧的條件下，將葡萄糖分解成乳酸。 亞硝酸鹽分布廣泛，在食品加工業(yè)中常用作食亞硝酸鹽分布廣泛，在食品加工業(yè)中常用作食品添加劑。品添加劑。 膳食中少量的亞硝酸鹽一般不會(huì)危害

37、人體健康，膳食中少量的亞硝酸鹽一般不會(huì)危害人體健康，但攝入總量達(dá)到但攝入總量達(dá)到0.30.30.5g0.5g時(shí)會(huì)引起中毒；當(dāng)攝入總量時(shí)會(huì)引起中毒；當(dāng)攝入總量達(dá)到達(dá)到3g3g時(shí)會(huì)引起死亡。時(shí)會(huì)引起死亡。 通常情況下，人體內(nèi)的亞硝酸鹽將隨尿液排除出通常情況下，人體內(nèi)的亞硝酸鹽將隨尿液排除出體外。在特定的條件下（適宜的體外。在特定的條件下（適宜的pHpH、溫度和一定的微、溫度和一定的微生物作用）將轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢?，從而具有致癌、致畸變生物作用）將轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢?，從而具有致癌、致畸變和致突變作用。和致突變作用?見教材第見教材第1010頁(yè)頁(yè)“泡菜壇的選擇泡菜壇的選擇” 問題問題：不合格的泡菜壇為什么會(huì)引起蔬

38、菜的腐爛？：不合格的泡菜壇為什么會(huì)引起蔬菜的腐爛？泡菜壇漏氣，使需氧型微生物大量繁殖，引起蔬菜腐爛。泡菜壇漏氣，使需氧型微生物大量繁殖，引起蔬菜腐爛。 見教材第見教材第1111頁(yè)頁(yè)“腌制的條件腌制的條件” 問題問題：為什么溫度過(guò)高、食鹽用量不足、腌：為什么溫度過(guò)高、食鹽用量不足、腌 制時(shí)間過(guò)短，容易造成細(xì)菌大量繁殖？制時(shí)間過(guò)短，容易造成細(xì)菌大量繁殖？ 溫度過(guò)高、食鹽用量不足，有利于其他細(xì)菌繁殖；溫度過(guò)高、食鹽用量不足，有利于其他細(xì)菌繁殖；腌制一定的時(shí)間以后，乳酸菌產(chǎn)生了大量的乳酸，從腌制一定的時(shí)間以后，乳酸菌產(chǎn)生了大量的乳酸，從而抑制了其他微生物的生長(zhǎng)，若腌制時(shí)間不夠，乳酸而抑制了其他微生物的

39、生長(zhǎng)，若腌制時(shí)間不夠，乳酸含量不高，則不能抑制其他微生物的繁殖。含量不高，則不能抑制其他微生物的繁殖。（2 2）微生物發(fā)酵與必修一的聯(lián)系）微生物發(fā)酵與必修一的聯(lián)系特點(diǎn)：結(jié)合微生物特點(diǎn)：結(jié)合微生物發(fā)酵考查必修一的發(fā)酵考查必修一的細(xì)胞呼吸細(xì)胞呼吸注意：微生物的類注意：微生物的類型（如原核、真核型（如原核、真核細(xì)胞），呼吸類型細(xì)胞），呼吸類型等等(2010廣東理綜，廣東理綜，2）（雙選）小李嘗試制作果酒，）（雙選）小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進(jìn)行試驗(yàn)（見他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進(jìn)行試驗(yàn)（見圖圖10），恰當(dāng)?shù)淖龇ㄊ牵ǎ?，恰?dāng)?shù)淖龇ㄊ牵?）A加入適量的酵母菌加入適量的酵母菌

40、 B一直打開閥一直打開閥b通氣通氣C一直關(guān)緊閥一直關(guān)緊閥a，偶爾打開閥，偶爾打開閥b幾秒鐘幾秒鐘D把發(fā)酵裝置放到把發(fā)酵裝置放到4冰箱中進(jìn)行試驗(yàn)冰箱中進(jìn)行試驗(yàn)（一）植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程一）植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 考點(diǎn)考點(diǎn)3 3 植物組織培養(yǎng)與酶的研究植物組織培養(yǎng)與酶的研究（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素 不同的植物組織、同一植物的不同材料不同的植物組織、同一植物的不同材料 營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境條件、植物激素營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境條件、植物激素使用順序使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后

41、使用細(xì)胞分裂先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素素有利于細(xì)胞分裂，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用同時(shí)使用分化頻率提高分化頻率提高 制備制備MS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 1 1、配制母液、配制母液 2 2、配制培養(yǎng)基、配制培養(yǎng)基 3 3、滅菌（、滅菌（外植體消毒外植體消毒接種接種培養(yǎng)培養(yǎng)移栽移栽栽培栽培實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作 （一）影響花藥培養(yǎng)的因素（一）影響花藥培養(yǎng)的因素1 1、材料的選擇、材料的選擇 不同植物不同植物 同一植物的不同生理狀況同一植物的不同生理狀況（花期早期初花期）（花期早期初花期）

42、合適的花粉發(fā)育期合適的花粉發(fā)育期（單核居中期與靠邊期之間）（單核居中期與靠邊期之間） 此外，植株生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等此外，植株生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等2 2、培養(yǎng)基的組成、培養(yǎng)基的組成月季的花藥培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑有哪兩種途徑？原因是什么？有哪兩種途徑？原因是什么？花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑（4 4）植物組織培養(yǎng)與必修一、三的聯(lián)系）植物組織培養(yǎng)與必修一、三的聯(lián)系特點(diǎn)：結(jié)合植物組織培養(yǎng)特點(diǎn)：結(jié)合植物組織培養(yǎng)過(guò)程考查必修一的細(xì)胞全過(guò)程考查必修一的細(xì)胞全能性，必修三的植物激素能性，必修

43、三的植物激素等內(nèi)容等內(nèi)容注意：復(fù)習(xí)細(xì)胞全能性的注意：復(fù)習(xí)細(xì)胞全能性的概念、細(xì)胞分化的概念，概念、細(xì)胞分化的概念，細(xì)胞分化的本質(zhì)，分化與細(xì)胞分化的本質(zhì)，分化與細(xì)胞全能性的比較，植物細(xì)胞全能性的比較，植物激素的作用等激素的作用等一、菊花組織的培養(yǎng)一、菊花組織的培養(yǎng)1 1、原理：植物細(xì)胞的全能性、原理：植物細(xì)胞的全能性2 2、步驟：、步驟：（1 1）制備）制備MSMS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基（滅菌）（滅菌） 無(wú)機(jī)鹽、維生素、無(wú)機(jī)鹽、維生素、蔗糖蔗糖、激素、激素 （2 2）外植體消毒）外植體消毒（未開花新生側(cè)枝）（未開花新生側(cè)枝） （3 3）接種、培養(yǎng)、移栽）接種、培養(yǎng)、移栽 脫分化脫分化-愈傷組織愈傷組

44、織-再分化再分化-從芽從芽-誘導(dǎo)生根誘導(dǎo)生根 PH5.8PH5.8、溫度、溫度18-2218-22、每日光照、每日光照12h12h專題專題3 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)植物的組織培養(yǎng)技術(shù)二、月季花藥培養(yǎng)二、月季花藥培養(yǎng)1 1、花藥選?。撼趸ㄆ?、未開放花蕾、單核期、花藥選?。撼趸ㄆ凇⑽撮_放花蕾、單核期2 2、培養(yǎng)過(guò)程：、培養(yǎng)過(guò)程： 花粉花粉（脫分化）（脫分化）愈傷組織愈傷組織 （脫分化）（脫分化） （再分化）（再分化） 胚狀體胚狀體（分化）（分化） 叢芽叢芽誘導(dǎo)生根誘導(dǎo)生根3 3、花粉發(fā)育檢查：、花粉發(fā)育檢查：（1 1）醋酸洋紅法（細(xì)胞核紅色）醋酸洋紅法（細(xì)胞核紅色）（2 2）焙花青）焙花青- -鉻礬法

45、（細(xì)胞核藍(lán)黑色）鉻礬法（細(xì)胞核藍(lán)黑色）接種和培養(yǎng)接種和培養(yǎng)植物體植物體選取水稻花藥選取水稻花藥對(duì)花蕾消毒對(duì)花蕾消毒實(shí)例：就水稻花藥培養(yǎng)的步驟，請(qǐng)回答下列問題：實(shí)例：就水稻花藥培養(yǎng)的步驟，請(qǐng)回答下列問題： 1.1.選取的水稻花藥應(yīng)為選取的水稻花藥應(yīng)為期期，此時(shí)細(xì)胞核由中央移向細(xì)，此時(shí)細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)，花藥培養(yǎng)成功率最高胞一側(cè)，花藥培養(yǎng)成功率最高 2.2.通過(guò)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑：一種通過(guò)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑：一種是花粉通過(guò)是花粉通過(guò)階段階段發(fā)育為植株，另一種是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先發(fā)育為植株，另一種是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成形成再將其誘導(dǎo)分化成植株再將其誘導(dǎo)分化成植

46、株 3.3.試管苗形成過(guò)程中，必須從培養(yǎng)基中獲得無(wú)機(jī)鹽或礦試管苗形成過(guò)程中，必須從培養(yǎng)基中獲得無(wú)機(jī)鹽或礦質(zhì)元素和小分子有機(jī)物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂質(zhì)元素和小分子有機(jī)物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有和生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有和和兩類激素兩類激素單核胚狀體愈傷組織細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素單核胚狀體愈傷組織細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素專題專題6：生物材料中成分的提?。荷锊牧现谐煞值奶崛? 1、水蒸氣蒸餾法：水蒸氣、水蒸氣蒸餾法：水蒸氣+ +芳香油芳香油混合物混合物油層和水層油層和水層3 3、壓榨法：浸泡、漂洗、壓榨、過(guò)濾、靜置、壓榨法：浸泡、漂洗、壓榨、過(guò)濾、靜置2 2、萃取法：芳香油、萃取法：

47、芳香油+ +有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑溶液溶液芳香油（去溶劑）芳香油（去溶劑）玫瑰精油：玫瑰花玫瑰精油：玫瑰花+ +清水清水乳濁液乳濁液 NaClNaCl：促進(jìn)乳化液分層；無(wú)水：促進(jìn)乳化液分層；無(wú)水NaNa2 2SOSO4 4：除水：除水橘皮精油：石灰水浸泡、橘皮精油：石灰水浸泡、NaHCONaHCO3 3、NaNa2 2SOSO4 4 促進(jìn)油水分離促進(jìn)油水分離 胡蘿卜素：橙黃色、易溶石油醚胡蘿卜素：橙黃色、易溶石油醚 水浴加熱水浴加熱萃取液萃取液蒸發(fā)溶劑蒸發(fā)溶劑胡蘿卜素胡蘿卜素提取方法：提取方法： 例：幾個(gè)有關(guān)萃取的問題：例：幾個(gè)有關(guān)萃取的問題： （1 1）萃取劑可分為）萃取劑可分為 和和 兩種。兩種

48、。 (2)(2)萃取的效率主要取決于萃取的效率主要取決于 。后。后受受 等等條件的影響。條件的影響。 (3)(3)萃取過(guò)程中，第一步需萃取過(guò)程中，第一步需 ，以提高萃取效率。因?yàn)橐蕴岣咻腿⌒省Ｒ驗(yàn)?，所以應(yīng)避免，所以應(yīng)避免明火加熱，而采用水浴加熱的方法。通過(guò)加熱處理，明火加熱，而采用水浴加熱的方法。通過(guò)加熱處理，-胡蘿胡蘿卜素溶解在萃取液中；再經(jīng)卜素溶解在萃取液中；再經(jīng) 得到萃取液；經(jīng)過(guò)得到萃取液；經(jīng)過(guò) 后，后，可可 得到純凈的得到純凈的-胡蘿卜素。胡蘿卜素。萃取劑的性質(zhì)和使用量萃取劑的性質(zhì)和使用量原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度

49、和時(shí)間將胡蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥將胡蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥有機(jī)溶劑都是易燃物有機(jī)溶劑都是易燃物過(guò)濾過(guò)濾蒸餾蒸餾濃縮濃縮水溶性水溶性水不溶性水不溶性細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)及作用：細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)及作用：1、作用是什么？、作用是什么？2、特點(diǎn)？、特點(diǎn)？3、結(jié)構(gòu)組成？、結(jié)構(gòu)組成？保護(hù)植物細(xì)胞；支撐植物細(xì)胞。保護(hù)植物細(xì)胞；支撐植物細(xì)胞。彈性??；全透性。彈性?。蝗感?。纖維素、果膠。纖維素、果膠。果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用 植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一，它是由分之一，它是由半乳糖醛酸半乳糖醛酸聚合而成的一聚合而成的一種種高分子化合物高分子化合物，不溶于水。，不溶

50、于水。果膠果膠 在果汁加工中，果膠不僅會(huì)影響出汁率，還會(huì)使在果汁加工中，果膠不僅會(huì)影響出汁率，還會(huì)使果汁渾濁。果膠酶能夠分解果汁渾濁。果膠酶能夠分解果膠果膠，瓦解植物細(xì)胞的，瓦解植物細(xì)胞的細(xì)細(xì)胞壁胞壁及及胞間層胞間層，使榨取果汁更容易，而果膠分解成可，使榨取果汁更容易，而果膠分解成可溶性的溶性的半乳糖醛酸半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶果膠酶 指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶反應(yīng)速度用指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶反應(yīng)速度用單單位時(shí)間位時(shí)間內(nèi)內(nèi)單位體積單位體積中中反應(yīng)物的減少量反應(yīng)物的減少量或或生成物的增加生成物的增加量量來(lái)表示。來(lái)表示。(1)(1)酶的活

51、性酶的活性2 2、酶的活性與影響酶活性的因素酶的活性與影響酶活性的因素.果膠酶的用量果膠酶的用量(2)(2)影響酶活性的因素影響酶活性的因素 a. a.溫度溫度b.pHb.pH c. c.酶的抑制劑酶的抑制劑1 1、定義：、定義：（二）加酶洗衣粉（二）加酶洗衣粉含有酶制劑的洗衣粉。含有酶制劑的洗衣粉。2 2、成分：、成分： 除含有普通洗衣粉的成分外，還含有多種酶制劑：除含有普通洗衣粉的成分外，還含有多種酶制劑：蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶，纖維素酶，復(fù)合酶。蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶，纖維素酶，復(fù)合酶。蛋白酶蛋白酶應(yīng)用：有助于取出例如汗?jié)n，血漬，青草，粘液，糞應(yīng)用：有助于取出例如汗?jié)n，血漬，青草，粘液，

52、糞便以及各種食品類的蛋白質(zhì)污垢。便以及各種食品類的蛋白質(zhì)污垢。脂肪酶脂肪酶應(yīng)用：可以催化水解各類動(dòng)植物油脂和人體皮脂腺應(yīng)用：可以催化水解各類動(dòng)植物油脂和人體皮脂腺分泌物及化妝品污垢。分泌物及化妝品污垢。淀粉酶淀粉酶應(yīng)用：可以去除例如來(lái)自面條、巧克力、肉汁和嬰應(yīng)用：可以去除例如來(lái)自面條、巧克力、肉汁和嬰兒食品中含有淀粉的污垢。兒食品中含有淀粉的污垢。纖維素酶纖維素酶應(yīng)用：去除棉紡織品表面的浮毛，使洗滌后的棉紡應(yīng)用：去除棉紡織品表面的浮毛，使洗滌后的棉紡織品柔軟蓬松，織紋清晰，色澤更加鮮艷，穿著更織品柔軟蓬松，織紋清晰，色澤更加鮮艷，穿著更加舒適。加舒適。復(fù)合酶復(fù)合酶 實(shí)際污垢組成復(fù)雜，往往蛋白污

53、垢被脂肪污垢或?qū)嶋H污垢組成復(fù)雜，往往蛋白污垢被脂肪污垢或淀粉污垢覆蓋，單一酶的作用一般達(dá)不到徹底清除污淀粉污垢覆蓋，單一酶的作用一般達(dá)不到徹底清除污垢的作用。而復(fù)合酶可以發(fā)揮其獨(dú)特的垢的作用。而復(fù)合酶可以發(fā)揮其獨(dú)特的“協(xié)同效應(yīng)協(xié)同效應(yīng)”。 試驗(yàn)測(cè)定，單獨(dú)使用蛋白酶或淀粉酶，得到的洗滌試驗(yàn)測(cè)定，單獨(dú)使用蛋白酶或淀粉酶，得到的洗滌效果遠(yuǎn)不如把每種酶用量減半后放在一起使用的效果。效果遠(yuǎn)不如把每種酶用量減半后放在一起使用的效果。即給定酶的用量，復(fù)合酶的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)單一酶的效即給定酶的用量，復(fù)合酶的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)單一酶的效果。原因是淀粉酶分解了污漬表面的淀粉污垢，使蛋果。原因是淀粉酶分解了污漬表面的淀粉污

54、垢，使蛋白酶能以更有效的方式向蛋白質(zhì)污垢進(jìn)攻。白酶能以更有效的方式向蛋白質(zhì)污垢進(jìn)攻。 類型類型優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)不足不足直接使直接使用酶用酶催化效率高；低能催化效率高；低能耗；低污染等耗；低污染等。易失活；難回收，成本高；易失活；難回收，成本高；酶混合在產(chǎn)物中可能影響產(chǎn)酶混合在產(chǎn)物中可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。品質(zhì)量。固定化固定化酶酶既能與反應(yīng)物接觸，既能與反應(yīng)物接觸，又能與反應(yīng)物分離；又能與反應(yīng)物分離；可重復(fù)利用可重復(fù)利用一種酶只能催化一種或一類一種酶只能催化一種或一類反應(yīng)，而生產(chǎn)中很多產(chǎn)物需反應(yīng)，而生產(chǎn)中很多產(chǎn)物需一系列酶促反應(yīng)才能得到。一系列酶促反應(yīng)才能得到。固定化固定化細(xì)胞細(xì)胞成本低；操作更容成本低；操作更容易易大分子物質(zhì)難以自由通過(guò)細(xì)大分子物質(zhì)難以自由通過(guò)細(xì)胞膜使應(yīng)用受到某些限制。胞膜使應(yīng)用受到某些限制。酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化 3、固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)有哪些？各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？、固定化酶和固定化