1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上酵母菌的培養(yǎng)技術(shù)一.酵母菌的培養(yǎng)基的配方1.麥芽汁培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基成分:新鮮麥芽汁一般為10-15波林。配制方法:(1)用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15陰涼處發(fā)芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時(shí)，讓其停止發(fā)芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存?zhèn)溆谩?2)取一份麥芽粉加四份水，在65水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無藍(lán)色出現(xiàn)，即表示糖化完全)(3) 糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個(gè)雞蛋清，加水20 m1，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中，

2、攪拌煮沸，再過濾)。(4)用波美比重計(jì)檢測糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調(diào)pH至6.4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S，可用未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。(5)如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時(shí)，加入2瓊脂，加熱融化，補(bǔ)充失水。(6)分裝、加塞、包扎。(7)高壓蒸汽滅菌100 Pa滅菌20 min。2.馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基成分:馬鈴薯20g 葡萄糖2 g 瓊脂1.5-2g 水100ml 自然pH 配制方法:(1)配制20馬鈴薯浸汁取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000m1。80浸泡lh用紗布過濾，然后補(bǔ)足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成

3、20馬鈴薯浸汁，貯存?zhèn)溆?。?)配制時(shí)，按每100 m1馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。(3)分裝、加塞、包扎。(4)高壓蒸汽滅菌100 Pa滅菌20 min。3.豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基的配制 培養(yǎng)基成分:黃豆芽 10g 葡萄糖 5g 瓊脂 1.52g 水 100ml 自然pH 配制方法 :（1）稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100ml水，小火煮沸30min，用紗布過濾，補(bǔ)足失水，即制成10豆芽汁。 （2）配制時(shí)，按每100ml10豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補(bǔ)足失水。 （3）分裝、加塞、包扎。 （4）高壓蒸汽滅菌100

4、Pa滅菌20min。 4.蔡氏（Czapck）培養(yǎng)基的配制 培養(yǎng)基成分:蔗糖 3g NaNO3 0.3g K2HPO4 0.1g KCl 0.05g MgSO47H2O 0.05g FeSO4 0.001g 瓊脂 1.52g 蒸餾水 100ml 自然pH 配制方法 :（1）稱量及溶化 量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO3、K2HPO4、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培養(yǎng)基加入1ml0.1的FeSO4溶液。 （2）定容 候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。 （3）加瓊脂 加入所需量瓊脂，加熱融化，補(bǔ)足失水。 （4）分裝、加塞、包

5、扎。 （5）高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。5.YPD培養(yǎng)基的配制YPD 或YPED，：Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L)，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基，加入瓊脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌的培養(yǎng)配方：1% Yeast Extract（酵母膏） 2% Peptone（蛋白胨） 2% Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固體培養(yǎng)基，加入2%瓊脂粉配制方法：（1） 溶解10gYeast Extract（酵母膏）, 20gPeptone（蛋白胨）于900ml水中，如制平板加入20g瓊脂粉(2) 高壓121度2

6、0min (3) 加入100ml 10×Dextrose (glucose)（葡萄糖）,葡糖糖溶液滅菌后加入注：葡萄糖，yeast extract ,peptone溶液混合后在高溫下可能會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致培養(yǎng)基成分變化，所以要分別滅菌后再混合。YPEG：除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作為碳源外，其他成分同YPD二.酵母菌的培養(yǎng)條件營養(yǎng)：酵母菌同其它活的有機(jī)體一樣需要相似的營養(yǎng)物質(zhì)，像細(xì)菌一樣它有一套胞內(nèi)和胞外酶系統(tǒng)，用以將大分子物質(zhì)分解成細(xì)胞新陳代謝易利用的小分子物質(zhì)，屬于異養(yǎng)生物。酸度：酵母菌能在PH值為3.07.5的范圍內(nèi)生長，最適PH值為4.55.0。水分：像細(xì)菌一樣，酵母菌必須有水才能存活，但酵母需要的水分比細(xì)菌少，某些酵母能在水分極少的環(huán)境中生長，如蜂蜜和果醬，這表明它們對(duì)滲透壓有相當(dāng)高的耐受性。溫度：在低于水的冰點(diǎn)或者高于47的溫度下， 酵母細(xì)胞一般不能生長，最適生長溫度一般在2030。氧氣：酵母菌在有氧和無氧的環(huán)境中都能生長，即酵母菌是兼性厭氧菌，在有氧的情況下，它把糖分解成二氧化碳和水且酵母菌生長較快。在缺氧