1、    伴有8號染色體四體異常的微分化急性髓系白血病(M0)一例        8號染色體四體(四體8)是一種少見的且主要和髓系惡性疾病相關的非隨機核型異常。我們報道首例伴有四體8異常的微分化型急性髓系白血病(AML-M0)。病例和方法1病例摘要患者，男，29歲。因四肢酸痛、乏力1個月于1997年10月來院就診。既往體健。家族史無特殊。體檢示貧血貌，胸骨輕度壓痛，肝、脾不腫大。血象：Hb51g/L，BPC90×109/L，WBC78.3×109/L，其中原

2、始細胞0.35。骨髓象：有核細胞增生極度活躍，原始細胞占0.90，該類細胞呈圓形，大小不一，以大為主，胞漿呈淺藍色，核圓形，核染色質呈細顆粒樣網狀結構，核仁不清晰。原始細胞髓過氧化物酶(MPO)染色全部呈陰性。患者最初被診斷為急性淋巴細胞白血病(ALL）L2型，僅接受輸血和抗生素治療，但高熱持續不退，4周后即死亡。2白血病細胞的免疫表型檢測應用流式細胞儀(EpicsXL型，Coulter公司)檢測患者白血病細胞的膜抗原如CD2、CD7、CD10、CD13、CD14、CD19、CD22、CD33、CD34、CD42b、CD61以及胞漿抗原如MPO、CyCD3、CyCD22和TdT等。全部單抗均購

3、自法國Immunotech公司。每份標本檢測500010000個細胞。陽性判斷標準：膜抗原陽性細胞>20，胞漿抗原如MPO、CyCD3和CyCD22>10,TdT>5。3染色體檢查初診時抽取患者骨髓，按2×106細胞/ml將其接種于含小牛血清(體積分數為20)的RPMI1640培養基中，37孵育24小時，然后按常規方法收獲細胞和制備染色體標本，采用R顯帶技術進行核型分析。4間期熒光原位雜交(FISH)檢測采用異硫氰酸熒光素(FITC)直接標記的8號染色體著絲粒探針(由法國南特大學醫院中心血液細胞遺傳學實驗室Loiseau博士提供)對本例和1名有正常二倍體核型的對照者

4、進行間期FISH檢測。其方法簡述如下：染色體制片在70、體積分數為70甲酰胺/2×SSC液中變性2分鐘，20系列酒精中脫水，氣干。1l探針和9l體積分數為65甲酰胺/2×SSC/100g/L硫酸葡聚糖混合后70變性5分鐘。將變性后的探針混合液滴在37預溫的染色體制片上，置37濕盒中雜交16小時，在432×SSC液中洗滌10分鐘，在600.1×SSC液中洗滌3次，每次5分鐘，在1×PBD液中洗滌3次，每次2分鐘，用碘化丙錠(200ng/ml)室溫下染色20分鐘。標本在Leitz熒光顯微鏡下觀察。每個標本觀察1000個間期核。結果1白血病細胞的免疫

5、表型白血病細胞膜抗原CD3329.6，CD3450，其余抗原(包括淋系抗原在內)均為陰性；白血病細胞胞漿抗原MPO為19.8，而CyCD3、CyCD22和TdT均為陰性。2骨髓細胞核型共分析53個中期相，其中8個顯示46，XY正常核型，45個顯示48，XY，8，8異常核型(1)。未見三體8細胞。3間期FISH檢測正常對照者顯示1，2，3和4個雜交信號的間期核分別占1.2、97.2、0.6和0.8，而本例顯示1，2，3，4和5個雜交信號的間期核分別占0.1、2.9、14.2、82.4和0.3，提示存在著兩個異常克隆，即1個較大的四體8克隆和1個較小的三體8克隆(2)。討論迄今文獻中僅報道過19例

6、伴有四體8的血液病1-7，除1例為ALL外，其余均屬于髓系疾病，其中AML13例，包括M11例，M23例，M41例和M58例。上述資料提示四體8和髓系疾病特別是單核細胞白血病有聯系。本例的原始細胞和ALL?L2患者原始細胞極為相似，但免疫學分析揭示CD33、CD34和胞漿MPO陽性，而所有檢測的淋系抗原均為陰性，故符合于AML-M0的診斷8。據我們所知，這是第一例伴有四體8的AML-M0。本例加上已報道的1例M1和3例M2提示四體8是和一組異質性髓系疾病相關，而不是象以往那樣認為對單核細胞白血病有絕對特異性2。本例生存期只有4周，和多數其他作者的觀察相一致，提示四體8患者往往預后不良。本例常規

7、核型分析除少數正常二倍體細胞外，只發現四體8細胞，而間期FISH檢測除占優勢的四體8細胞外還發現較小的三體8克隆，表明四體8和三體8是相關的克隆性異常。目前認為，該種四體8/三體8嵌合型的發生機制可能為兩個獨立的染色體不分離事件先后發生，即從正常核型經過三體8階段最后形成四體82。然而和高的三體8發生率相反，四體8十分少見，這說明三體8演變為四體8是不常見的細胞遺傳學事件。志謝：向為我們提供8號染色體著絲粒探針的法國南特大學醫院中心血液細胞遺傳學實驗室AvetLoiseau博士表示誠摯的謝意 作者單位：215006蘇州醫學院附屬第一醫院、江蘇省血液研究所參考文獻：1Wullich B, Koc

8、h B, Schwarz M, et al. A further case of acute nonlymphocytic leukemia with tetrasomy 8. Cancer Genet Cytogenet, 1993, 69:126-128.2Marosi C, Muhm M, Argyriou-Tirita A,et al. Tetrasomy 8 in acute monoblastic leukemia (AML-M5a) with myelosarcomatosis of the skin. Cancer Genet Cytogenet, 1993, 71: 50-5

9、4.3Cull GM, Howe DJ, Stack-Dunne M， et al. Tetrasomy of chromosome 8 in a patient with acute myeloid leukemia. Leuk Lymph, 1995, 19:355-358.4Muhlematter D, Castagne C, Bruzzese O, et al. Tetrasomy 8 in a patient with acute nonlymphocytic leukemia: a metaphase and interphase study with fluorescence i

10、n situ hybridization. Cancer Genet Cytogenet, 1996, 89:44-48.5Shao J, Zhang L, Semenza JC, et al. Tetrasomy 8 detected by interphase cytogenetics in a child with acute lymphocytic leukemia. Cancer Genet Cytogenet, 1996, 92:135-140.6Lessard M, le Prise PY. Cytogenetic studies in 56 cases with Ph1-pos

11、itive hematologic disorders. Cancer Genet Cytogenet, 1982, 5:37-49.7Antonucci R, Walker R, Herion J. Myelofibrosis and aplastic anemia: first report of the two disorders occurring sequentially in the same person. Am J Med, 1989, 86:352-355.8Bennett JM, Catovsky D, Daniel MT,et al.Proposal for the recog