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1、選修3知識(shí)點(diǎn)過(guò)關(guān)檢測(cè)測(cè)試題專題二、細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程1. 理論基礎(chǔ)(原理):全能性表達(dá)的難易程度:受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞; 植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1) 過(guò)程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞 一-愈傷組織-7試管苗一-植物體(2) 用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體嫌生驗(yàn)體B原生育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(3) 地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3. 植物細(xì)胞培養(yǎng)(蘇教版)(1) 概念:在實(shí)驗(yàn)室工廠化生產(chǎn)的條件下,將組織培養(yǎng)過(guò)程中形成的 或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中,進(jìn)行懸浮培養(yǎng),得到分散游離的懸浮細(xì)胞,通過(guò) 繼代培
2、養(yǎng)使細(xì)胞增殖,從而獲得大量的細(xì)胞群體的一種技 術(shù)。(2) 與植物組織培養(yǎng)的關(guān)系 植物組織培養(yǎng)是基礎(chǔ)。 目的不同:植物組織培養(yǎng)的目的是得到更多的 _,植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得人類所需的 無(wú)科植抹(3) 實(shí)例:成功地培養(yǎng)紅豆杉的細(xì)胞,從中提取出重 要的抗腫瘤藥物紫杉醇。4. 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1) 過(guò)程:靄瓷囂沁叫MW等。化學(xué)法一般是用(2) 誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括作為誘導(dǎo)劑。(3) 意義:(二)動(dòng)物細(xì)胞工程1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1) 概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的 ,將它分散成_,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。(2) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊()7剪碎7
3、用_ 處理分散成單個(gè)細(xì)胞-制成細(xì)胞懸液-轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞 繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就 ,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面_ 時(shí),細(xì)胞就會(huì),這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件 :培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的 ,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液, 防止。 :合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微_; pl 所必需的,量元素等。通常需加入 等天然成分。 :適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是 : 95濤氣+ 5%C
4、O Q是.CO的主要作用是。(5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè) 有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。2. 動(dòng)物組織培養(yǎng)(蘇教版):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物組織培養(yǎng)方法類似,主要區(qū)別是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需 要用胰蛋白酶等使組織塊中的細(xì)胞離散,而動(dòng)物組織培養(yǎng)過(guò)程中不需要使用胰蛋 白酶等。3. 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植 (比較容易)和體細(xì)胞核移植(比較難)。(2)選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞 細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。選修3知識(shí)點(diǎn)過(guò)關(guān)檢測(cè)測(cè)試題專題二、細(xì)胞工程(3)體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是:去4
5、4卵細(xì)Jte供體毋牛核移植沖制叢I 胚胎移植I另一頭母綿羊的于宮生戌隆鑼韋多利計(jì)«級(jí)»«5I1 供公牛SWI質(zhì)査.f »腑拉fittssa(4) 體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育; 生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;用于組織器官的移植等。保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)量;作為異種移植的供體;(5) 體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題: 克隆動(dòng)物存在著健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。4.動(dòng)物細(xì)胞融合(1) 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞 的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞, 雜父細(xì)胞。(2) 動(dòng)
6、物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有 稱為等。比較項(xiàng) 目細(xì)胞融合的原 理細(xì)胞融合的方 法誘導(dǎo)手段用法植物體 細(xì)胞雜 交細(xì)胞膜的流動(dòng) 性去除細(xì)胞壁后 誘導(dǎo)原生質(zhì)體 融合離心、電刺 激、振動(dòng),聚 乙二醇等試 劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜 交的不親和性, 獲得雜種植株(3) 動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了 ,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì) 胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。(4) 動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:動(dòng)物細(xì) 胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng) 性使細(xì)胞分散后 誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物 細(xì)胞雜交手 段外,再加滅 活的病毒誘 導(dǎo)制備單克隆抗 體
7、的技術(shù)之一5.單克隆抗體(1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種 。從血清中分離出的抗體_( 2)單克隆抗體的制備過(guò)程:抗原注入小鼠體內(nèi)B淋巴細(xì)胞細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培骨髓瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)細(xì)胞注入小培養(yǎng)基體內(nèi)培養(yǎng) I I體外培養(yǎng)從腹水提取從培養(yǎng)液提單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn): 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn): 單克隆抗體的作用:既能大量,又能產(chǎn)生(3)(4)(5) :準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 :主要用于治療 ,可制成“少量用于治療其它疾病。”,也有專題二、細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程1.理論基礎(chǔ)(原理):細(xì)胞全能性 全能性表達(dá)的難易程度:胞;受
8、精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)過(guò)程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞7植物體愈傷組織 試管苗(2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育。(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新 品種的最后一道工序。3.植物細(xì)胞培養(yǎng)(蘇教版,看看就行,不是人教版知識(shí)點(diǎn))(1 )概念:在實(shí)驗(yàn)室工廠化生產(chǎn)的條件下,將組織培養(yǎng)過(guò)程 中形成的愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中, 行懸浮培養(yǎng),得到分散游離的懸浮細(xì)胞,通過(guò)繼代培養(yǎng)使細(xì)胞 增殖,從而獲得大量的細(xì)胞群體的一種技術(shù)。(2 )與植物組織培養(yǎng)的關(guān)系 植物組織培養(yǎng)是基礎(chǔ)。 目的不同:植物組織培養(yǎng)的目的是得到
9、更多的植物 _ 植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得人類所需的細(xì)胞_(3)實(shí)例:成功地培養(yǎng) 紅豆杉的細(xì)胞,從中提取出重要的 抗腫瘤藥物紫杉醇。4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)過(guò)程:種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)植軸細(xì)尊B(yǎng)進(jìn)i®a蠶S囂產(chǎn)曲益沁叫Mg(2 )誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括 離心、振動(dòng)、電刺激 等。化學(xué)法一般是用 聚乙二醇(PE G_作為誘導(dǎo)劑。(3)意義: 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。(二)動(dòng)物細(xì)胞工程1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1) 概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)
10、物的器官或組織) 剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶 處理分散成單個(gè)細(xì)胞 T制成細(xì)胞懸液T轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行 原代培養(yǎng)-貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白 酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(3) 細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞 貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面 相互抑制時(shí),細(xì)胞 就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件 無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行 無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培 養(yǎng)液,防止 代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害 。 營(yíng)養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:
11、糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。 溫度:適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是 36.5 C + 0.5 C ; pH: 7.27.4。 氣體環(huán)境:95濤氣+ 5%0。O是細(xì)胞代謝所必需的,CO的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH(5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物 質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。2.動(dòng)物組織培養(yǎng)(蘇教版,看看就行,知道區(qū)別):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物組織培養(yǎng)方法類似,主要區(qū)別是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需 要用胰蛋白酶等使組織塊中的細(xì)胞離散,而動(dòng)物組織培養(yǎng)過(guò)程中不需要使用胰 _ 蛋白酶等。3. 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)哺乳動(dòng)物
12、核移植可以分為 胚胎細(xì)胞核移植(比較容易)和體細(xì)胞核移植(比 較難)。卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞(2)選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。(3)體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是:嗽脈沖利敎匡巫畫亥移植移植臉I(yè)t栓査*掐養(yǎng)分轉(zhuǎn)fltW集40林(濟(jì)査(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加諫家畜潰傳改良講程,促講良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)量;生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;作為異種移植的供體; 用于組織器官的移植等。(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:克隆動(dòng)物存在著 健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。4. 動(dòng)物細(xì)胞融合(1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的
13、過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為 雜父纟田胞。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的 方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的 病毒、電刺激等。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了 遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、 細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。(4 )動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:比較項(xiàng) 目細(xì)胞融合的原 理細(xì)胞融合的方 法誘導(dǎo)手段用法植物體 細(xì)胞雜 交細(xì)胞膜的流動(dòng) 性去除細(xì)胞壁后 誘導(dǎo)原生質(zhì)體 融合離心、電刺 激、振動(dòng),聚 乙二醇等試 劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜 交的不親和性, 獲得雜種植株動(dòng)物細(xì) 胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng) 性使細(xì)胞分散后 誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物 細(xì)胞雜交手 段外,再加滅 活的病毒誘 導(dǎo)制備單克隆抗 體的技術(shù)之一5.單克隆抗體(1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種 特異性抗體。從血清中分離出的抗體 產(chǎn) 量低、純度低、特異性差。(2)單克隆抗體的制備過(guò)程:I抗原注入小鼠體內(nèi)骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞細(xì)胞融合1雜交瘤細(xì)胞丨1細(xì)胞培1選擇培養(yǎng)細(xì)胞
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