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文檔簡介
1、實驗四 家兔動脈血壓的神經、體液調節【目的要求】1、學習直接測定和記錄家兔動脈血壓的急性實驗方法2、觀察神經,體液因素對心血管活動的影響【基本原理】在生理情況下,人和其它哺乳動物的血壓處于相對穩定狀態,這種相對穩定是通過神經和體液因素的調節而實現的,其中以頸動脈竇主動脈弓壓力感受性反射尤為重要。此反射既可在血壓升高時降壓,又可在血壓降低時升壓,反射的傳入神經為主動脈神經與竇神經。家兔的主動脈神經為獨立的一條神經,也稱減壓神經,易于分離和觀察其作用。在人、犬等動物,主動脈神經與迷走神經混為一條,不能分離。反射的傳出神經為心交感神經、心迷走神經和交感縮血管纖維,心交感神經興奮,其末梢釋放去甲腎上腺
2、素,去甲腎上腺素與心肌細胞膜上的b受體結合,引起心臟正性的變時變力變傳導作用,心迷走神經興奮,其末梢釋放乙酰膽堿,乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M受體結合,引起心臟負性的變時變力變傳導作用,交感縮血管纖維興奮時釋放去甲腎上腺素,后者與血管平滑肌細胞的a-受體結合引起阻力血管的收縮。 本實驗應用液壓傳遞系統直接測定動脈血壓。即由動脈插管、測壓管道及壓力換能器相互連通,其內充滿抗凝液體,構成液壓傳遞系統。將動脈套管插入動脈內,動脈內的壓力及其變化,可通過密閉的液壓傳遞系統傳遞壓力,通過壓力換能器將壓力變化轉換為電信號,用微機生物信號采集處理系統記錄動脈血壓變化曲線。 【預習要求】 1儀器設備知識:RM6
3、240微機生物信號采集處理系統的使用方法。 2實驗理論 實驗動物知識參見第三章第一節 生理科學實驗常用實驗動物的種類;第四章第一節 動物實驗的基本操作、第四節 實驗動物手術;統計學知識參見第5章第四節 常用統計指標和方法;生理學教材有關動脈血壓的調節。檢索全文數據庫中的相關研究論文,檢索方法參見第五章第五節。 3預繪制實驗原始數據記錄表格和統計表格。 【材料】 家兔,動脈插管,血壓換能器,生物信號采集處理系統,200g/L氨基甲酸乙酯,1000U/ml的肝素,0.1g/L去甲腎上腺素,10-2g/L乙酰膽堿。 【動物與器械】 家兔、麻醉箱,兔手術臺,常用手術器械,止血鉗(4把)、眼科鑷、支架、
4、雙凹夾、壓力傳感器,保護電極,氣管插管,動脈插管、動脈夾、三通管、注射器(1ml、5ml、20ml),乳膠管,20%25%氨基甲酸乙酯、肝素(200U/ml),腎上腺素(1:5000),乙酰膽堿(1:10000),紗布、棉球、生理鹽水,生物機能實驗系統【方法與步驟】 1實驗系統連接及參數設置 (1)頸動脈血壓測量記錄裝置。將血壓換能器固定于鐵支柱上,其位置應與心臟在同一平面。 (2)壓力換能器輸出線接微機生物信號處理系統第4通道(亦可選擇其它通道)。(3)微機生物信號處理系統參數設置: RM6240系統:點擊“實驗”菜單,選擇“循環”或“自定義實驗項目”菜單中的“兔動脈血壓調節”。系統進入該實
5、驗信號記錄狀態。儀器參數:4通道時間常數為直流,濾波頻率100Hz,靈敏度12Kpa,采樣頻率800Hz,掃描速度 500ms/div。連續單刺激方式,刺激強度510V,刺激波寬2ms,刺激頻率30 Hz。 2、實驗儀器的準備 打開計算機采集系統,接通壓力傳感器。從顯示器的“實驗項目”中找出“家兔血壓的調節”實驗。 3、連通液導系統并制壓 4、動物準備(1)麻醉:家兔稱重,由耳緣緩慢注射20氨基甲酸乙脂5mlkg。(2)固定:將家兔背位固定在手術臺上,用剪毛剪將頸部和劍突部的被毛剪去即可手術。(3)手術:沿頸部正中線作一長57厘米的皮膚切口,用止血鉗分離皮下結締組織,再向下分離氣管和血管神經束
6、頸部神經與頸總動脈位于氣管外側,用止血鉗先將血管神經束腹面的肌肉和結締組織分離,再用左手拇指和食指輕輕捏住分離的肌肉和皮膚,稍向外翻,即可將血管神經束翻于食指之上,然后用彎頭止血鉗分離頸動脈約厘米,穿線備用(注意:再分離頸總動脈及穿線時,切勿損傷與其伴行的神經;在頸總動脈近甲狀腺處有甲狀腺前動脈,分離時應稍靠其下,以免損傷)用同樣方法分離另一側頸總動脈,穿線備用輕輕提起右側頸總動脈下的備用線,即可清楚看到3條粗細不同的神經,迷走神經最粗,白色,一般位于外側,易識別;交感神經較細,略顯灰色,一般位于內側;減壓神經最細,常與交感神經貼在一起識別準確后,用玻璃分針縱向小分離順序由細到粗,神經分離2厘
7、米,即可穿線備用。(4)氣管插管法:用止血鉗由頸部正中線將肌肉結締組織分離,暴露出氣管在氣管下方用鑷子穿一線,打一活結,在喉頭下23厘米處的氣管上作一“”形切口,將氣管插管向心方向插入氣管中并用線結扎,并將多余的線系在氣管插管的分叉處固定,以免滑脫。(5)動脈插管法:在分離出來后右側頸動脈的遠心端(盡量靠近頭端)用棉線將動脈結扎,在頸總動脈近心端用動脈夾將動脈夾住與兩者之間另穿一線,打一活結備用在遠心端結扎線下方用剪膜剪在動脈上作一斜形切口,向心臟方向插入動脈插管,用備用線將插管尖端固定于動脈管內,并將余線結扎于插管的側枝上以防滑脫注意插管與血管方向一致,防止扭轉或插管尖端刺破動脈管壁。5、實
8、驗觀察與記錄:實驗裝置準備妥當,手術完畢后,慢慢放開動脈夾,即可看到少量血自頸總動脈沖向動脈插管,隨后可按照以下實驗項目進行觀察與描記。(1)記錄正常血壓曲線。調節掃描速度與增益,可以明顯地觀察的心室射血與主動脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數。有時可以觀察到血壓曲線隨呼吸變化,心搏為一級波,呼吸波為二級波。然后將掃描速度調慢。(2)輕輕提起對側完好頸總動脈的備用線,阻斷動脈內血流,觀察并記錄血壓的變化。(3)用手指壓迫頸內動脈和頸外動脈的分叉處,觀察血壓的變化。(4)刺激減壓神經用中等強度的電刺激通過保護電極刺激減壓神經,記錄血壓變化,然后進行雙結扎剪斷,再分別刺激中樞端和外周端。記
9、錄血壓變化。 (5)用同樣強度刺激迷走神經,雙結扎剪斷一側迷走神經分別刺中樞端和外周端,記血壓變化再結扎并剪斷另一側迷左神經,并觀察對比剪斷迷走神經,前后呼吸頻率與深度的變化(6)耳緣注射腎上腺素0.20.3ml,記錄BP變化(7)耳緣注射乙酰膽堿0.20.3ml,記錄BP變化6、整理實驗記錄,并將實驗結果打印。【注意事項】1、每項實驗后,需將血壓基本恢復后,再進行下一項實驗2、隨時注意插管位置,特別在掙扎時,避免扭轉而阻塞血流或刺破血管3、隨時注意動物麻醉情況,若掙扎厲害時可補少量麻醉劑兔動脈血壓的神經體液調節一、實驗準備: 實驗器械
10、和藥品:、血壓換能器、塑料動脈插管、試管夾、雙凹夾、鐵支柱、動脈夾、三通管、保護電極、兔手術臺、哺乳動物手術器械、照明燈、注射器(1毫升、2毫升、10毫升)、有色絲線、紗布、棉花、20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素(或5%檸檬酸鈉)0.01%腎上腺素、0.01%去甲腎上腺素。注意:動脈插管稍長。MedLab系統二、理論復習: 血壓的神經體液調節。三、參數設置:(一)RM6240系統:點擊“實驗”菜單,選擇“循環”或“自定義實驗項目”菜單中的“兔動脈血壓調節”。系統進入該實驗信號記錄狀態。儀器參數:4通道時間常數為直流,濾波頻率100Hz,
11、靈敏度12Kpa,采樣頻率800Hz,掃描速度 500ms/div。連續單刺激方式,刺激強度510V,刺激波寬2ms,刺激頻率30 Hz。(二)實驗內容1.正常血壓曲線。2.夾閉右側頸總動脈。3.刺激減壓神經:(1)刺激完整減壓神經 (2)刺激減壓神經中樞端 (3)刺激減壓神經外周端。4.刺激迷走神經外周端。(三)注意事項:1.分離減壓神經注意:減壓神經要從向心端開始往頭端分離,避免損傷神經,分離時不使神經上帶有結締組織膜,分離后滴加生理鹽水以防干燥,穿2根線備用。2.連接儀器:注意避免動脈插管滑出。3.夾閉頸總動脈時勿牽拉動脈(夾閉,血壓增高;牽拉,血壓下降)。4.刺激
12、減壓神經,如神經損傷,向頭端移動(與減壓神經放電移動方向相反)。5.刺激右側迷走神經末梢端,血壓.心率變化更為明顯。三、實驗報告要求:(10分)1.實驗結果: 各種影響因素引起動脈血壓變化曲線圖。(不要求觀察定量變化)2.實驗討論:(各1分)1)夾閉頸總動脈,血壓升高:夾閉頸總動脈頸動脈竇血壓下降頸動脈竇壓力感受器受到刺激減弱竇神經傳入沖動 心迷走中樞(抑制)迷走神經傳出沖動減少心跳加快.加強心輸出量增多
13、160;
14、160; 減少心交感中樞(興奮) 小靜脈收縮回心血量增多 血壓升高交感神經傳出沖動增多 交感縮血管中樞(興奮) 小動脈收縮外周阻力增大 2)刺激完整減壓神經及其中樞端均可引起血壓下降,而刺激該神經外周端基本不變:兔減壓神
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