1、    復(fù)方雙花口服液質(zhì)量控制的研究        摘要：采用薄層色譜法對(duì)復(fù)方雙花口服液中的黃芩、薄荷、陳皮進(jìn)行了鑒別；運(yùn)用HPLC法以綠原酸為指標(biāo)對(duì)口服液中的金銀花進(jìn)行了含量測(cè)定。定性及定量方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于該制劑的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞：復(fù)方雙花口服液；薄層色譜；HPLC；綠原酸；黃芩甙中分類號(hào)：R284.1The Quality Control on Compound Shuanghua Oral FluidYang Zhengyu(Beijing University

2、of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)ABSTRACT：By thin layer chromatography, Huangqin, Bohe and Chenpi were differentiated from the oral fluid. The content of Jinyinhua was determined by taking chlorogenic acid as index through HPLC method. The qualitative and quantitative methods are simp

3、le and convenient with accuracy, which can be used for the quality control on this preparation.KEY WORDS: Compound Shuanghua oral fluid; Thin layer chromatography; HPLC; Chlorogenic acid; Baicalin復(fù)方雙花口服液是由金銀花、薄荷、陳皮、黃芩等藥材制成的復(fù)方中藥制劑。用于治療風(fēng)熱感冒。為控制其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層色譜法鑒別了制劑中的黃芩、薄荷、陳皮；采用HPLC法對(duì)制劑中的金銀花進(jìn)行了含量測(cè)定。1儀器與試藥

4、島津HPLC-6A，紫外檢測(cè)器SPD-6AV，泵LP-6A，柱溫箱-HIC-6A。綠原酸對(duì)照品、黃芩甙對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)；四氫呋喃為色譜用試劑，其他試劑均為分析純；硅膠G(青島海洋化工廠)；復(fù)方雙花口服液(北京第四制藥廠實(shí)驗(yàn)室制備)2薄層色譜法定性鑒別2.1黃芩的鑒別取口服液20 mL，濾過，以鹽酸調(diào)pH 12，離心，分取沉淀，沉淀加1 mL甲醇溶解。濾過，為供試品溶液。另取黃芩甙對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg黃芩甙的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 L，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以醋酸乙酯丁酮甲酸水(5311)為展開劑，展開， 取出，晾干，噴以2%

5、 FeCl3乙醇試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的草綠色斑點(diǎn)。見1。2.2薄荷的鑒別取口服液20 mL，濾過，加石油醚(6090 )萃取2次(10 mL，10 mL)分取石油醚液，揮發(fā)至1 mL，作為供試品溶液。另取薄荷對(duì)照藥材0.8 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)。吸取上述兩種溶液各10 L，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G板上，以正己烷醋酸乙酯(173)為展開劑，展開，取出晾干，噴以5%香草醛的5%硫酸乙醇溶液，于105 加熱約10 min，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。見2。     1黃芩薄層色

6、譜1黃芩甙對(duì)照品2復(fù)方雙花口服液樣品3空白對(duì)照品     2薄荷薄層色譜1薄荷對(duì)照品2復(fù)方雙花口服液樣品3空白對(duì)照品2.3陳皮的鑒別取口服液20 mL蒸干，加甲醇10 mL，溶解后濾過，濾液濃縮至1 mL，為供試品溶液。另取陳皮對(duì)照藥材0.5 g，加甲醇10 mL超聲波提取30 min，濾過，濾液濃縮至1 mL，為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法吸取上述兩種溶液各10 L，分別點(diǎn)于同一用50%NaOH制備的硅膠G板上，以醋酸乙酯甲醇水(1001713)為展開劑，展開約3 cm，取出，晾干，再以甲苯醋酸乙酯甲酸水(201011)的上層溶液為展開劑，展至約8 cm

7、，取出晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈下(365 nm)檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。見3。     3陳皮薄層色譜1陳皮對(duì)照品2復(fù)方雙花口服液樣品3空白對(duì)照品3制劑中綠原酸的含量測(cè)定3.1色譜條件色譜柱YWG-C18(4.6 mm×150 mm)流動(dòng)相：甲醇水冰醋酸四氫呋喃(2.597156)檢測(cè)波長(zhǎng)326 nm，柱溫25 ，流速1.0 mL/min綠原酸的理論塔板數(shù)大于3 000。3.2供試品溶液的制備精密量取口服液10 mL，蒸干，加入30 mL 50%甲醇，超聲波提取30 min，放置室溫后濾入

8、50 mL容量瓶中，用50%甲醇洗滌容器和殘?jiān)鼣?shù)次，洗液并入容量瓶中，并以50%甲醇稀釋至刻度。3.3對(duì)照品溶液的制備精密稱定綠原酸對(duì)照品約10 mg，置10 mL容量瓶中，加入50%甲醇溶解并稀釋至刻度。精密吸取1 mL于10 mL容量瓶中，以50%甲醇稀釋至刻度。3.4空白溶液的制備按處方稱取除金銀花以外的其余藥材，按工藝制成不含金銀花的模似制劑，按供試品溶液項(xiàng)下方法操作，制得空白對(duì)照溶液。3.5線性關(guān)系考察精密吸取對(duì)照品溶液10、15、20、25 mL進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以峰面積積分值為縱座標(biāo)，對(duì)照品量為橫座標(biāo)，進(jìn)行回歸計(jì)算，得回歸方程Y=10087.4X+5943.5， r

9、=0.9996，結(jié)果表明綠原酸在12.5g范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。3.6精密度試驗(yàn)精密吸取綠原酸對(duì)照品液15 L，重復(fù)進(jìn)樣5次，綠原酸峰面積積分值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<2%，RSD=1.28。3.7樣品測(cè)定精密吸取供試品溶液15L按上述色譜條件測(cè)定，以回歸方程計(jì)算含量，測(cè)定了3批樣品的含量，結(jié)果見表1、4。3.8回收率測(cè)定精密吸取5 mL樣品5份，分別加入綠原酸對(duì)照品2 mg，同供試液制備法制備，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率，平均回收率為100.02%，RSD=1.12。表明本法有良好的回收率。結(jié)果見表2。表1綠原酸含量測(cè)定 (n=3)批號(hào)綠原酸含量/%RSD/%9104130.50780.949105150.49790.589106200.50910.57     表2回收率測(cè)定結(jié)果 (mg)樣品中綠原酸含量添加綠原酸量測(cè)出綠原酸總量回收率(%)2.54024.52099.002.47824.45698.902.50124.568101.352.50024.49799.852.51224.532101.00     4復(fù)方雙花口服液HPLC色譜A 綠原酸對(duì)照品B 復(fù)方雙花口服液樣品C