1、第三章 細(xì)胞生物學(xué)的研究方法名詞解釋1 .分辨率(resolution)2 .細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)3 .原代培養(yǎng)(primary cult)4 .傳代培養(yǎng)(secondary culture)5 .細(xì)胞系(cell lin)6 .等電聚焦電泳(isoelectric focusing)7 . cDNA 克隆(CDNA cloning)8 .非細(xì)胞體系(cell free system)9 .蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)10 .核酸原位雜交技術(shù)(in situ hybridization, ISH)11 .放射性自顯影技術(shù)(autoradiography)12 .顯微結(jié)構(gòu)(

2、microscopic structure)13 .超微結(jié)構(gòu)(ultramicroscopic structure)14 .單細(xì)胞測序技術(shù)(single cell sequencing)15 .轉(zhuǎn)基因小鼠(transgenic mouse)二、單項選擇題1 .離心法是分離細(xì)胞器及細(xì)胞組分的重要手段,下面描述錯誤的是A.差速離心法只能將大小顯著不同的成分分開B.平衡沉降法分離取決于細(xì)胞成分的大小和形狀C.利用免疫磁珠,無需高速離心，即可將膜性細(xì)胞器分離出來D.速度沉降可以使tRNA與其他成分分開E.超速離心法可以根據(jù)生物大分子的沉降系數(shù)較精確的測定其分子量2 .檢測特異DA分子的方法是A.噬菌體

3、展示B. ISH C. Western blotD. Southern blot E. ChlP3 .蘇丹染料可以顯示的細(xì)胞中成分是A.蛋白質(zhì)B. DNAC. RNAD.糖E.脂肪4 .掃描隧道顯微鏡的側(cè)分辨率約為A. 2 UmB. 0. 2 mnC. 0. 2nmD. 2nmE. 2A5.目前廣泛應(yīng)用的高效基因敲除技術(shù)是A. cDNA 克隆B. RNAiC. CRISPR/Cas9D. ChIPE.轉(zhuǎn)基因6 .可得到完整的細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)圖像的顯微鏡是A.透射電子顯微鏡B.熒光顯微鏡C.暗視野顯微鏡D.相差顯微鏡E.共聚焦激光掃描顯微鏡7 .關(guān)于免疫沉淀技術(shù)的錯誤描述是A.用耦聯(lián)在磁珠上的目的蛋

4、白抗體將目的蛋白及其相互作用的蛋白沉淀出 來8 .可通過SDS二PAGE或生物質(zhì)譜對沉淀出來的蛋白進行鑒定C.屬于體內(nèi)實驗方法,能得到細(xì)胞內(nèi)蛋白相互作用的動態(tài)結(jié)果D.細(xì)胞內(nèi)本來沒有相互作用的蛋白質(zhì)在破碎細(xì)胞時可能發(fā)生凝聚,產(chǎn)生假陽 性E.簡便易行8.無需染色、標(biāo)記,即可直接用于觀察活細(xì)胞狀態(tài)的顯微鏡是A.掃描電子顯微鏡8 .透射電子顯微鏡C.普通光學(xué)顯微鏡D.倒置相差顯微鏡E.熒光顯微鏡9 .關(guān)于RNAi的基本原理,錯誤的描述是A. Dicer酶將外源性雙鏈RNA切割成短SIRNAB. SIRNA參與形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物C.每個RISC都包含一個SIRNA和一個DicerD.激活RISC需

5、要依賴ATP將小分子RNA解雙鏈E.激活的RISC通過堿基配對定位到同源mRNA轉(zhuǎn)錄本上 10.制作透射電子顯微鏡超薄切片時，下列不必要的是A.固定B.包埋C.切片D.金屬投影E.染色n.能夠在溶液中對生物大分子進行高分辨率結(jié)構(gòu)測定的技術(shù)是A. X射線晶體衍射技術(shù)B.核磁共振技術(shù)C.掃描電子顯微鏡D.冷凍電鏡E.共聚焦激光掃描顯微鏡12 .透射電子顯微鏡借助一定的技術(shù)手段可獲取細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)的三維圖 像,下面手段不可行的是A.金屬投影B.金屬復(fù)型C.金屬染色D.冰凍斷裂E.冰凍蝕刻技術(shù)高13 .與化學(xué)合成的SIRNA相比，利用慢病毒構(gòu)建的短發(fā)卡shrna載體所具有 的顯著優(yōu)勢是A.更特異地阻斷

6、特定基因表達(dá)B.效率更高C.可以整合到受感染細(xì)胞的基因組,進行長時間的穩(wěn)定表達(dá)D.操作更簡便E.有正反互補的短干擾RNA序列14.關(guān)于冷凍電子顯微鏡技術(shù)的錯誤描述是A.對溶液中生物分子進行高分辨率結(jié)構(gòu)測定B.需要比較大量的樣品C.結(jié)構(gòu)解析主要是指單顆粒三維重構(gòu)技術(shù)D.不需要樣品結(jié)晶E.快速冷凍可以使蛋白質(zhì)保持其天然結(jié)構(gòu)狀態(tài)15.能夠從組織切片中精確分離單一細(xì)胞的方法是A.免疫磁珠法B.熒光激活細(xì)胞分選儀C. Percoll精細(xì)密度梯度離心D.細(xì)胞克隆E.激光捕獲顯微切割技術(shù)16.有關(guān)原子力顯微鏡的錯誤描述是A.在掃描隧道顯微鏡基礎(chǔ)之上發(fā)展起來的B.不需要所檢測的樣品具有導(dǎo)電性C.可對單個分子進

7、行操控D.分辨率比掃描隧道顯微鏡高E.顯示樣品表面微細(xì)結(jié)構(gòu)的三維特征17.用物理的方法裂解細(xì)胞產(chǎn)生的微粒體,主要來自的細(xì)胞器是A.過氧化物酶體B.高爾基復(fù)合體C.線粒體D.溶酶體E.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)18 . 一般情況下,細(xì)胞裂解液中不能含有的成分是A.滲透壓維持劑B.蛋白酶C.陰離子去垢劑SDSD.非離子型去垢劑Triton X-100E.兼性離子型去垢劑CHAPS19 .生物醫(yī)學(xué)研究中，最常用于個體水平基因操作特別是基因敲除的模式動 物是A.小鼠B.果蠅C.秀麗隱桿線蟲D.斑馬魚E.爪蟾20 .操作簡單、特異性強,能夠在多細(xì)胞懸液中分離特定細(xì)胞的方法是A.免疫磁珠法B.熒光激活細(xì)胞分選儀C. Perc

8、oll精細(xì)密度梯度離心D.利用細(xì)胞貼壁生長和懸浮生長的特性進行細(xì)胞培養(yǎng)E.激光捕獲顯微切割技術(shù)21 .細(xì)胞培養(yǎng)時所用的培養(yǎng)基中不包含A.血清B.氨基酸C.二氧化碳D.維生素E.微量元素22 .考察細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力變化的方法是A.嵌套小室(transwell法)B.軟瓊脂集落形成實驗C.細(xì)胞生長曲線繪制D.流式細(xì)胞儀的DNA倍體分析E.細(xì)胞活力檢測（MTT法）23 .常用于細(xì)胞DXA和RNA抽提的試劑是A.滲透壓維持劑B.蛋白酶抑制劑C.異硫氟酸呱D.陰離子去垢劑E.兼性離子型去垢劑24 .將細(xì)胞勻漿以100000g超速離心,上清液部分含有A.線粒體B.溶酶體C.細(xì)胞核D. RNAE.微粒體2

9、5 .超分辨顯微技術(shù)可使光學(xué)顯微鏡的分辨率達(dá)到A. 2 Um B. 50nm C. 0. 2nm D. 2nm E. 2A26 .對體外非細(xì)胞體系進行蛋白翻譯,不需要的成分或結(jié)構(gòu)是A.已知序列的mRNAB. IRNAC.核糖體D. ATP£.即人聚合酶1。11【）27 . 一般來說,分離純化蛋白質(zhì)最有效的方法是A.親和層析B.陰離子交換層析C.陽離子交換D.凝膠濾過層析E.疏水性層析28 .能揭示蛋白質(zhì)精確三維結(jié)構(gòu)的方法是A.掃描電子顯微鏡B.柱層析C.X射線晶體衍射技術(shù)D. SDS-PAGEE.共聚焦激光掃描顯微鏡29 .用凝膠濾過層析分離蛋白，最先流出的蛋白的分子量為A 500k

10、DaB. 200k DaC. lOOkDaA. 50kDaE. lOkdaO30 .從細(xì)胞中分離染色質(zhì),抽提液中不能含有A. DNA酶B. RNA酶C.異硫制酸呱D.氯仿E.蛋白酶K31.二硫蘇糖醇(DTT)在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中的作用是A.與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合B.使蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷C.使蛋白質(zhì)中的二硫鍵斷裂D.使蛋白質(zhì)分子折疊E.控制凝膠孔的大小32 .電子顯微鏡觀察生物標(biāo)本的分辨率約為A. 2 u mB. 0. 2 um C. 0. 2run D. 2nm E. 2A33 . SDS在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中的作用是A.與蛋白質(zhì)親水區(qū)結(jié)合B.控制凝膠孔的大小C.使蛋白質(zhì)中的二硫鍵斷

11、裂D.使蛋白質(zhì)分子折疊E.使蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷34.高通量測序技術(shù)可與其他基因組水平研究技術(shù)相聯(lián)合，但不包括A. Protein-sepB. RNA-seqC. ChlP-seqD. CLIP-seqE. Methyl-seq35.關(guān)于核酸電泳的錯誤描述是A.是核酸分離鑒定的主要方法B.樣品不需事先處理就可直接進行電泳C.核酸在堿性條件下向陽極移動D.可直接判定核酸的純度、完整性及片段大小E.瓊脂糖凝膠電泳分辨率高于丙烯酰胺凝膠電泳36.下列關(guān)于生物芯片技術(shù)的錯誤敘述是A.由生物學(xué)、微電子學(xué)、物理學(xué)和計算機科學(xué)等多學(xué)科交叉融合而成B.主要包括基因芯片和蛋白質(zhì)芯片C.基因芯片中，熒光素直接標(biāo)記待檢測

12、的mRNA分子D.可用于篩選候選基因E.可通過蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用對靶蛋白分子進行高通量檢測37.關(guān)于免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù),錯誤的描述是A.利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理來研究細(xì)胞中生物大分子的定位B.利用熒光染料標(biāo)記的抗體可以對細(xì)胞中的特定分子進行定位C.將熒光物質(zhì)或酶類直接標(biāo)記一級抗體可以提高檢測靈敏度D.利用膠體金標(biāo)記抗體,可在電鏡下觀察特定分子的分布情況E.可對器官、組織、細(xì)胞中的生物分子進行定性、定位研究38 . Western blot不可以用于檢測蛋白質(zhì)的A.含量B.大小C.三維結(jié)構(gòu)D.磷酸化E.泛素化39 .放射性自顯影技術(shù)是用放射性同位素標(biāo)記生物樣品中的大分子或其前體 物質(zhì)，

13、下列屬于強放射性同位素的是A. 1311 B. 35S C. 3H D. 32P E. 14C40 .可用于觀察細(xì)胞表面三維結(jié)構(gòu)的顯微鏡是A.掃描電子顯微鏡B.透射電子顯微鏡C.暗視野顯微鏡D.相差顯微鏡E.熒光顯微鏡41.關(guān)于綠色熒光蛋白（GFP）的錯誤描述是A.是研究蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位的報告分子B.是從水母中分離的一種構(gòu)象很穩(wěn)定的蛋白質(zhì)C.在藍(lán)色光源的激發(fā)下,可發(fā)射出綠色熒光D. GFP基因可以很容易地導(dǎo)入到多種類型的細(xì)胞中表達(dá)E.與目的基因融合后,所表達(dá)的融合蛋白的定位是由GFP決定的42 .關(guān)于Northern印跡分析的錯誤描述是A.可檢測組織或細(xì)胞中特定的mRNAB,可使用放射性物質(zhì)標(biāo)

14、記的寡核甘酸為探針C.不能有效地檢測小mirna分子D.能夠定量檢測mRNA的變化E.能夠提供基因不同轉(zhuǎn)錄本的轉(zhuǎn)錄長度信息43 .雙向電泳顯現(xiàn)的未知差異蛋白質(zhì)條帶或點,常常需要進一步鑒定,最精確的判定方法是A.免疫沉淀B.親和層析C.質(zhì)譜D.高壓液相層析E. Western blot44.研究蛋白質(zhì)與核酸相互作用的技術(shù)是A.酵母雙雜交B.染色質(zhì)免疫沉淀C.噬菌體展示D.基因芯片E.免疫沉淀45.使基因表達(dá)下調(diào)的常用技術(shù)是A. cDNA克隆 B. RNAi C.同源重組D. ChipE.轉(zhuǎn)基因46 . SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是A.疏水性B.分子量大小 C.所帶正電荷多少D.所帶

15、負(fù)電荷多少E.形狀特點47 .有關(guān)掃描電子顯微鏡的錯誤描述是A.可以直接觀察標(biāo)本表面的三維形態(tài)B.分辨率比透射電鏡高C.通過電子束照射在標(biāo)本后產(chǎn)生的二次電子成像D.樣品需經(jīng)固定、干燥并用重金屬膜覆蓋E.多用于細(xì)胞整體的觀察48 .將蛋白質(zhì)進行分級分離并最終進行純化，常需要綜合運用多種分離手段 才能夠完成，但A.鹽析B.有機溶劑沉淀C,親和層析D.高壓液相層析E.雙向電泳49 .能夠?qū)⑻囟ɑ虿迦氲交蚪M的技術(shù)是A. cDNA克隆B. RNAiC.酵母雙雜交D. ChIPE. CRISPR/Cas950.最早制造出笫一臺顯微鏡并用它觀察到細(xì)菌的科學(xué)家是A. L. HoekB. R. Hook C

16、. M. J SchleidenD. R. VirchowE. A. van Leeuwenhoek51 .與普通PCR不同的是，熒光實時定量PCR在反應(yīng)體系中需加入A.模板DAB.耐熱的DNA聚合酶C. dNTPD.熒光染料E.引物52 .關(guān)于超分辨顯微技術(shù)的錯誤敘述是A.利用380740nm可見光B.具有非接觸、無損傷的特點C.可觀測細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的特點D.難以進行內(nèi)部深層三維結(jié)構(gòu)成像E.可以觀測活的組織或細(xì)胞53 .以脂質(zhì)體為載體,將外源性基因?qū)胝婧思?xì)胞的過程稱A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)C.轉(zhuǎn)染D.感染E.轉(zhuǎn)位54 .檢測特異蛋白質(zhì)分子的方法是A. PCRB. FISHC. Southern bl

17、otD. Northern blot E. Western blot55.關(guān)于CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的錯誤描述是A. Cas有核酸酶活性B. Cas是CRISPR連接蛋白C. CRISPR序列轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生兩個非編碼RNA分子D. Cas蛋白能夠?qū)惗垠wRNA剪切加工成為成熟RNA分子E. Cas識別靶DNA位點的特異性完全由向?qū)蛄兴鶝Q定56 .細(xì)胞內(nèi)離子有著重要的生理功能,其中能夠起信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和促進膜融合作 用的離子是A.鈉B.鉀C.鈣D.銅E.鐵57 .高壓液相層析的反向?qū)游鲋３１挥脕矸蛛x小分子蛋白，其進行分離原 理是根據(jù)蛋白的A.疏水性B.分子量大C.所帶正電荷多少D.所帶負(fù)電

18、荷多少E.形狀特點58 .可用于研究DNA與蛋白質(zhì)相互作用，并能捕捉基因表達(dá)調(diào)控的瞬時事件 的方法是A. ChipB. EMSAC.酵母單雜交系統(tǒng)D. CLIPE.噬菌體展示59.單分子熒光成像是活細(xì)胞體系中單分子研究的核心技術(shù),其在細(xì)胞生物 學(xué)研究中的應(yīng)用A.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的解析B.配體與受體的結(jié)合C.蛋白質(zhì)的聚合和解聚D.mRNA的動力學(xué)行為E.病毒的示蹤60.關(guān)于紫外交聯(lián)免疫沉淀技術(shù)的錯誤敘述是A.能檢測整個細(xì)胞內(nèi)與特定RNA結(jié)合蛋白結(jié)合的RNA分子B.分辨率可達(dá)單個堿基水平C.常與高通量測序技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用D. 254nm紫外線照射交聯(lián)對細(xì)胞沒有損傷E.能夠在全基因組水平揭示RNA與RNA結(jié)合

19、蛋白相互作用多項選擇題1 .從實體組織中分離活細(xì)胞的第一步是制備游離的細(xì)胞懸液,關(guān)于常用的 酶解方法的正確描述是A. EDTA和EGTA能夠增加胰蛋白酶的活性B.胰蛋白酶、膠原酶消除細(xì)胞間的連接和細(xì)胞外基質(zhì)C.分離體系所用的溶液必須是等滲的D.分離體系應(yīng)保持低溫，以降低細(xì)胞的代謝活動E.所用的試劑、器皿需要過濾除菌或高壓滅菌2.關(guān)于染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)的正確描述是A.是一種體內(nèi)研究DA與蛋白質(zhì)相互作用的方法B.僅限于低通量的研究C.能夠捕捉到發(fā)生在染色質(zhì)上的基因表達(dá)調(diào)控的瞬時事件D.分離得到的DNA可直接測序獲得基因序列信息E.比電泳遷移率變動分析更能反映基因表達(dá)調(diào)控的真實情況3.關(guān)于核酸抽提的

20、正確敘述是A.異硫氟酸呱可使膜脂、蛋白變性B.氯仿可去除細(xì)胞內(nèi)的脂類C.在純化過程中加入對應(yīng)的核酸酶可選擇性地保留DNA或RNA分子D.通過離心沉淀的方式可獲得保留在水相中的核酸分子E.蛋白酶K能使DNA酶和RNA酶失活,不能添加在抽提液中4.酶細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)的基本原理是將酶與其底物共同孵育,使產(chǎn)物與顯色劑反 應(yīng),生成物一般包括A.熒光分子B.細(xì)胞色素C.有色沉淀D.高電子密度沉淀E.有色可溶性化合物5.單細(xì)胞測序技術(shù)取得突破的主要原因包括A.全基因組及轉(zhuǎn)錄組擴增的效率大幅度提高B.高通量測序技術(shù)的使用C.高效微流體技術(shù)分離單細(xì)胞技術(shù)的應(yīng)用D.高精密的熒光活化細(xì)胞分選技術(shù)的應(yīng)用E.激光顯微切割技

21、術(shù)的應(yīng)用6.可用于活細(xì)胞內(nèi)分子示蹤的技術(shù)是A.離子探針技術(shù)B.綠色熒光蛋白示蹤C.熒光共振能量轉(zhuǎn)移D.單分子示蹤E.印跡雜交7 .基因芯片技術(shù)可應(yīng)用于A.細(xì)胞的基因表達(dá)譜測定8 .篩選與基因相互作用的蛋白質(zhì)C.基因多態(tài)性分析D.基因突變分析E.篩選候選基因8.基因表達(dá)定量分析技術(shù)包括A.印跡雜交技術(shù)8 .原位雜交技術(shù)C.嵌套小室(transwell法)D.熒光實時定量PCR技術(shù)E.基因克隆技術(shù)9 .關(guān)于蛋白質(zhì)組學(xué)的正確描述是A.是基因組學(xué)研究進入功能基因組時代的主要標(biāo)志B.雙向電泳和質(zhì)譜技術(shù)是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的基本技術(shù)C.雙向電泳能有效分離高分子量及微量蛋白D.質(zhì)譜法能夠?qū)崿F(xiàn)高通量分析E.蛋白質(zhì)

22、的質(zhì)譜測序通常借助串聯(lián)質(zhì)譜10 .研究或利用蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)包括A.酵母雙雜交B.蛋白質(zhì)芯C.噬菌體展示D.紫外交聯(lián)免疫沉淀技術(shù)E.免疫沉淀參考答案名詞解釋1 .分辨率(resolution):指顯微鏡或人眼能夠區(qū)分相近兩點的最小距離。2 .細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture):指細(xì)胞在體外的培養(yǎng)技術(shù)，即無菌條件下，從機 體中取出組織或細(xì)胞，模擬機體內(nèi)正常生理狀態(tài)下生存的基本條件，讓它在 培養(yǎng)器皿中繼續(xù)生存、生長和繁殖的方法。3 .原代培養(yǎng)(primary culture)：直接從體內(nèi)獲取的組織或細(xì)胞進行首次培 養(yǎng)。4 .傳代培養(yǎng)(secondary culture)：當(dāng)原代細(xì)胞經(jīng)

23、增殖達(dá)到一定密度后，將 細(xì)胞分散，從一個培養(yǎng)器以一定比例移到另一個或幾個容器中的擴大培養(yǎng)。5 .細(xì)胞系(cell line)：指可以無限繁殖、傳代的腫瘤細(xì)胞或正常組織培養(yǎng) 的細(xì)胞在某些條件處理后產(chǎn)生的“不死”的變異細(xì)胞。6 .等電聚焦電泳(isoelectric focusing):是在丙烯酰胺凝膠兩端形成電場, 使含有不同等電點的兩性電解質(zhì)在電場當(dāng)中形成pH梯度，樣品中所有的蛋白 質(zhì)在電泳時都向自己的等電點處移動，最后聚集、靜止于各自的等點電。7 . cDNA克隆(cDNA cloning):又稱基因克隆,即將mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA 或通過體外聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)得到的基因片段，插入到能進行自我復(fù)制的載體 (通常是質(zhì)粒)，實現(xiàn)在受體細(xì)菌內(nèi)大量擴增的過程。8 .非細(xì)胞體系(cell free system)：用分級分離得到的具有生物學(xué)功能的細(xì) 胞抽提物組成的活性反應(yīng)體系。9 .蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)：以特定時空條件下某種細(xì)胞、組織或器官所含 有的全部蛋白質(zhì)的存在及其活動方式為研究對象的學(xué)科。10 .核酸原位雜交技術(shù)(in situ hybridization. ISH)：以短的單鏈cDNA、 RNA片段或寡核甘酸為探針,與經(jīng)過固定并提高了通透性的細(xì)胞、組織切片或 胚胎進行雜交，以熒光分子或顯色酶為報告基團，顯示特定RNA(mR