1、凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程(SOP文件)1目的作為介質輔助用于完全抗體及不完全抗體的臨床篩選檢測及輔 助用于臨床交叉配血實驗。2檢驗原理 紅細胞表面帶有大量的負電荷，以避免其產生自發性聚 集，當紅細胞懸浮在電解質時，陽離子會被紅細胞的負電荷 所吸 引，此時紅細胞則被擴散的雙層離子云所圍繞，而形成Zeta電 位，Zeta電位決定紅細胞之間的排斥作用。凝聚胺技術首先利用低離子溶液(LIM)，降低介質的離子強度，減少紅細胞周圍的陽離子云，以促進紅細胞和血清(血 漿)中 的抗體結合。其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一種高價陽離子多 聚物、肝素中和劑，溶

2、解后能產生很多正電荷，可以中和紅細胞表 面帶有的負電荷，使紅細胞Zeta電位降低，縮 短紅細胞之間的距 離，使紅細胞產生非特異性的凝聚。最后，加入懸浮液(Resuspending),Resuspending 具有中和凝聚胺(Polybrene)陽 離子的作用，使正常的紅細胞非特異性凝聚散開，試驗結果為陰 性旦如果紅細胞被相應的抗體致敏，則會被凝聚胺凝結，凝集就 不會散開，試驗結果為陽性。3儲存條件及有效期未開封試劑應貯存于2cs 25C、相對濕度不大于80%無腐蝕 性氣體的室內；已開封試劑應貯存于相對濕度不大于80%，無腐蝕 性氣體和通風良好的室溫環境，試劑用后應及時擰緊瓶蓋保存；未 開封試劑

3、的有效期為二年，在有效期內的已開封試劑應在開封后的 6個月內使用完。4樣本要求4.1 新鮮血清，含EDTA抗凝血漿、3%5 （的紅細胞懸液。4.2 不能使用溶血標本及含枸檬酸鈉、肝素抗凝血漿標本。5檢驗方法輔助交叉配血試驗5.1 取試管二支，標主次側，主側管加病人血清（血漿）2滴，加 供血者3%5%紅細胞懸液（洗滌或不洗滌均可）1滴，次側管 反之。5.2 各加LIMO.65ml,混合均勻后，再各加Polybrene溶液2滴， 并混合均勻。5.3 用離心機3400轉/min （相當于1000g離心力）離心10秒，然 后把上清液倒掉，不要瀝干，讓管底殘留約0.1ml液體。5.4 輕輕搖動試管，目測

4、紅細胞有無凝集，如無凝集，則必須要重 做。5.5 最后加入Resuspending 2滴，輕輕搖動試管混合并同時 觀察結果。如果在60秒內凝集散開，代表是由Polybrene引起的非特 異性聚集，配血結果相合；如凝集不散開，則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應，配血結果不相合。如反應可 疑，可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。6注意事項6.1 可以用含EDTA之血漿代替血清使用。6.2 若病人血清（血漿）含肝素，如洗腎患者，須多加46滴 Polybrene溶液以中和肝素。6.3 本試劑盒的操作方法也適用于抗體鑒定。6.4 若試劑使用前為低溫貯存，請回復室溫再行操作。6.5 加做輔助性抗人球蛋白試驗，

5、目的是增加檢測抗-K的敏感 性。6.6 在冬天室溫極低的情況下，操作交叉配血試驗，某些病人血清中可能含有冷凝集素等因素，而導致假陽性的結果出現。若 有此懷疑，建議在最后滴入Resuspending時，將試 管立即置入 37C水浴中，輕輕搖動試管混合，并在60秒內觀察結果。6.7 紅細胞抗原檢測步驟同抗體篩檢試驗，其檢測標準血清用已 知標準血清。3 /28凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程6.8 用戶可使用IgG抗D抗體（效價64）與RhD陽性紅細 胞反 應做陽性對照實驗，測試本試劑的有效性。#/28凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程ABO血型定型操作規程（SOP文件）1目的用于鑒定人ABO血型2檢驗原

6、理本品系用產生抗A或抗B血型抗體的雜交瘤細胞培養上清液 （或在上清液中加入少量同型腹水）配制而成，采用凝集試驗原 理，專供鑒定人ABO血型用。3樣本要求本試劑適用于全血或10%、5 %紅細胞懸液。4檢驗方法平板法（玻片法）：本品與受檢者全血或10%紅細胞生理 氯化鈉懸液按1:1攪勻，不必再稀釋，按照有無凝集判定結果5結果判斷血型抗A試劑抗B試劑A+BMB+O.AB+注：“+”有凝集反應無凝集反應6檢驗結果的解釋將已知的抗A、抗B血型定型試劑與受檢者的紅細胞混合時，與抗A血型定型試劑發生凝集者即為A型血型，與抗B血型定型ABO血型反定型操作規程（SOP文件）試劑發生凝集者即為B型血型，與抗A、抗

7、B血型定型試劑均發 生凝集者即為AB型血型，與抗A、抗B血型定 型試劑均不發生凝 集者即為0型血型。7注意事項7.1 對含有較多自身冷凝集的受檢者，在鑒定血型時往往被誤 認為AB血型，遇到此種情況，需用37生理氯化鈉溶液洗滌受 檢者細胞2-3次，以去除吸附在紅細胞上的凝集素，然后再鑒定 血型。7.2 在做配型試驗時，如發現有不配合現象，則取受檢者血 清，用已知A血型或B血型細胞進行反定型試驗，以核實原鑒定 的血型是否正確。7.3 用立即試管法不能測出亞型（如 Ax），需延長作用時 間。7.4 本品如出現渾濁或變色則不能使用，若開瓶使用時間較長 后，最好用已知ABO血型紅細胞檢查結果是否與已知血

8、型相符， 以防制品污染，變質失效，而造成鑒定錯誤。7.5 在有效期內使用。5/28凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程1目的用于ABO血型的反定型檢測，該產品不用于血源篩查。2檢驗原理本品系采用三人份同型混合的A1型、B型和。型合格人紅細胞經洗滌后懸浮于紅細胞保存液中配制而成。采用凝集試驗原 理，用已知的A1，B，O型紅細胞測定被檢者血清/血漿中有無相 應的抗A或抗B抗體（反定型試驗），結合正定型結果判定 ABO血型。3檢驗方法試管法3.1 取被檢者血清/血漿各503分別加入3支標記好的試管中；3.2 分別各加50ulA1、B、O試劑紅細胞；3.3 搖動試管，混勻。于900g離心15s，或室溫靜止1

9、h;3.4 首先檢查是否溶血，（溶血可能是陽性結果，或是細菌污 染。）輕輕搖動懸浮紅細胞。3.5 觀察凝集情況，并立即記錄結果。必要時可借助顯微鏡觀測。 4檢驗結果的解釋ABO血型正反定型反應格局表正定型反定型血型抗A試劑|抗B試劑A1細胞B細胞|。細胞ABO仰型于定型操作熱程 （SOP文件）.+一.B+.0+一一AB注：“+”有凝集反應，“丁無凝集反應5注意事項5.1 如果在反定型試驗中，受檢者的血清/血漿與。血型紅細胞試 劑產生陽性反應，貝懦要添加自身對照試驗。如果自身對照為陽 性，表明是冷凝集素導致。如果自身對照為陰性，則表明被檢者血 清或血漿中可能存在ABO系統以外的其他血型系統的抗體

10、干擾定型。請按照相關的試驗方法解決上述定型問 題。5.2 本品如出現紅細胞顏色變成暗紫色或紅細胞自發凝集，出現菌 落或溶血，則不能使用。若開瓶使用時間較長后，最好用注冊上市 的抗A、抗B血型定型試劑檢查結果是否與已知血型相符，以防 制品污染、變質失效、而造成檢定錯誤。5.3 為了便于鑒別，A1血型紅細胞試劑標簽為藍色，B血型紅細胞試劑標簽為黃色，0血型紅細胞試劑標簽為紅色。9/28凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程乙型肝炎病毒表面抗原操作規程（SOP文件）1 .目的用于血液的篩查和臨床乙型肝炎病毒感染的輔助診斷。2 .檢驗原理本品系用乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）包被的微孔板和酶標 記抗-HBs及

11、其他試劑制成，應用雙抗體夾心酶聯免疫法原理檢 測人血清和血漿中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）3 .適用儀器微量移液器；37 C恒溫水浴箱；振蕩器；洗板機或洗瓶；計時 器；酶標儀，檢測波長450nmT,參考波長630nmo4 .樣本要求4.1 樣本采集不需要特殊準備，按照正常的采血技術收集血液，全血樣本最好先放置37C處理2小時，再將血樣本充分離 心，3000轉/分鐘離心6分鐘以上，使血清（血漿）不含有或極 少含有血細胞。如果為抗凝血樣本，應將血樣本充分離心后，最好 再放置室溫2小時以上。4.2 樣本中含有疊氮鈉會影響試驗的結果，高度溶血的樣本、沒 完全收縮的血清樣本或有微生物污染的樣本可

12、能會引起錯誤的結 果。4.3 新鮮的樣本在2 s 8c無菌條件下可保存一周，新鮮樣本可長期 貯存在-20 C或以下,避免反復凍融。1.1 實驗準備：從冷藏環境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將洗滌液進行1 ：40倍稀釋。1.2 設陽性對照2孔，陰性對照3孔，空白對照1孔。1.3 力口樣：在陽性對照、陰性對照孔內分別加入陽性對照、 陰性對照50ul，其余每孔加待測血清或血漿50ul。蓋上封孔膠 片，置37c水浴孵育60分鐘。1.4 洗滌：棄去孔內液體，用稀釋后的洗滌液連續洗滌5次后， 拍干孔內液體。1.5 加酶結合物：空白孔除外，每孔各加酶結合物50ul。蓋上 封孔膠片，置37 c水浴孵

13、育30分鐘。1.6 洗滌：棄去孔內液體，用稀釋后的洗滌液連續洗滌5次后， 拍干孔內液體。1.7 加底物液：每孔先加底物液A50ul，再加底物液B50ul,混 勻，蓋上封孔膠片，置37C條件下避光顯色30分鐘后，加終止 液50ul，混勻，終止反應。6 .參考值（參考范圍）終止后盡快測定，波長450nm，先用空白孔校零，測0D值。如果選用雙波長測定，不必設置空白對照空。按下列公式計算：COV=陰性對照平均0D值X 2.1倍陰性對照平均0D值低于或等于0.05，按0.05計算；高于0.05時，按照實際OD值計算。7 .檢驗結果的解釋樣品OD值S/COV 1時，待測樣本HBsAg為陽性；樣品0D值S/

14、COVk 1時，待測樣本HBsAg為陰性。8 .注意事項8.1 本品僅用于體外診斷，僅限檢測人體血清或血漿；檢測結 果作為診斷指標之一。8.2 使用時，從冷藏環境取出試劑盒，置室溫平衡30分鐘 后，方可進行測試。剩余試劑應及時封存于冰箱內保存，備 用。8.3 結果判定需在反應終止后10分鐘內完成。8.4 封孔膠片不得重復使用。8.5 在有效期內，微孔板密封袋如有漏氣現象，不影響試驗結 果。試劑盒在有效期內使用，不同批號不得混用。8.6 陽性對照應呈陽性，否則全部試驗無效。8.7 確保樣本加樣量的準確，如果加樣不準確可能會導致錯誤 的試驗結果。8.8 使用微量移液器加樣時，每次應更換吸頭吸取樣本

15、。8.9 在操作過程中應盡量避免反應微孔中產生氣泡。8.10 準確控制反應溫度和反應時間。8.11 洗板：1用洗板機洗板時，洗板機的加液量應注意控制， 既避免洗液過量而溢出，又能充滿反應微孔，并經常檢查加液頭是 否堵塞；2洗板機最好每次使用前、后沖洗干凈，防止管路堵塞 或腐蝕；3洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。13/28凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程8.12 本試劑盒及臨床樣本均應視為傳染性物質或潛在傳染性物質，請按相關實驗室工作規范執行和處理。9 .參考文獻中國藥典2010年版三部；體外診斷試劑說明書編寫指 導原則（國食藥監械2007 240 號）# /凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程梅毒螺旋

16、抗體操作規程（SOP文件）1 .目的本試劑盒定性檢測人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。適用于血 液的篩查及臨床梅毒螺旋體感染的輔助診斷。2 .檢驗原理本試劑盒采用雙抗原夾心法酶聯免疫吸附試驗原理。在微 孔條上 預包被梅毒螺旋抗體的基因重組抗原，配以酶標記抗原及TMB顯 色劑等其他試劑，檢測人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。3 .適用儀器加樣器、溫箱、洗板機、含波長450nm的酶標儀。4 .樣本要求4.1 本試劑使用樣品為人血清或血漿，含有EDTA檸檬酸鈉或肝素等抗凝劑的樣品可用于本實驗。4.2 不能檢測含懸浮纖維蛋白或聚集物、重度溶血的樣品。4.3 樣品中應無微生物，可在2s8c儲存1周，長期儲存

17、應低溫 凍存，避免反復凍融。4.4 使用前請將樣品室溫平衡30分鐘以上，冷凍樣品實驗前需 混勻。5 .檢驗方法5.1 配液：將濃縮洗滌液用蒸儲水或去離子水20倍稀釋。5.2 編號：將樣品對應微孔板按序編號，每板應設陰性對照3孔，陽性對照2孔和空白對照1孔。（用雙波長檢測，可不設 空白對照孔）。5.3 加樣：分別在相應孔中加入待測樣品或陰性、陽性對照 100ul。5.4 溫育：用封板膜封板后，置 37+ 1C溫育60 2分鐘。5.5 洗板：小心揭掉封板膜，用洗板機洗滌5遍，最后一次盡量 扣干。5.6 加酶：酶孔加入酶標試劑1003，空白孔除外。5.7 溫育：用封板膜封板后，置 37+ 1C溫育3

18、0 1分鐘。5.8 洗板：操作同步驟5.55.9 顯色：沒孔加入顯色劑A.B液各50ul，輕輕震蕩混勻，37+ 1C避光顯色30 1分鐘。臨界值（CUTOFF計算臨界值二陰性對照孔A均值NC+0.18.7 .檢驗結果的解釋7.1 陰性對照孔A值W 0.10，陽性對照孔A值0.80.否則實驗 無效。7.2 若有1孔陰性對照A值大于0.1應舍棄，若兩孔或兩孔以上陰 性對照A值大于0.1，應重復實驗。7.3 陰性判定：樣品A值V臨界值（CUTOFF）者為TP陰性。7.4 陽性判定：樣品A值臨界值（CUTOFF者為TP陽性（注 意：初試陽性應重新取樣雙孔復試）。8 .注意事項8.1 本品僅用于體外診斷

19、，操作應按說明書嚴格進行。封板膜 不能重復使用，不同批號酶標板。酶標試劑和陰性、陽性對照不可 混用，不能與其他廠家試劑混用。8.2 避免在有揮發性物質及次氯酸類消毒劑（如84消毒劑）的 環境下操作。8.3 使用前請將試劑平衡至室溫（平衡30分鐘以上），實驗前 將試劑輕輕振蕩混勻，使用后立即放回2s 8C。未用完的微孔板條與干燥劑儀器用自封袋密封28 C保存。過期試劑請勿使用。8.4 加液時必須用加樣器，并經常校對加樣器的準確性。加入 不同樣品或不同試劑組分時，應更換加樣器吸頭和加樣槽，以防出 現交叉污染。8.5 洗滌時各孔均需加滿洗液，防止孔內有游離酶不能洗凈。使 用洗板機應設定30s60秒侵

20、泡時間。在洗板結束后，必須立即 進行下一步，不可使酶標板干燥。避免長時間的中斷實驗步驟，以 確保每孔實驗條件的均一。8.6 結果判定必須以酶標儀讀數為準。讀取結果時，應擦干酶 標板底部，且孔內不能有氣泡。不要觸碰孔底部的外壁，指印或劃 痕都可能影響板孔的讀值。8.7 所用樣品、廢液和廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 硫酸，使用時必須注意安全。8.8 顯色時必須加顯色劑A液后再加顯色劑B液，以免顯色過 低。8.9 由于ELISA反應原理的限制，本試劑檢測陰性并不排除TP 感染的可能。檢測的陽性結果必須結合臨床信息進行分析。21/甲型肝炎病毒igM抗體操作規程（SOP文件）1 .目的用本試劑盒檢測

21、人血清或血漿中的抗-HAV IgM,用于甲型肝炎的 早期診斷。2 .檢驗原理本品系用抗人IgM （u鏈）包被的微孔板、甲型肝炎病毒（HAV）抗原和酶標記抗甲型肝炎病毒（抗-HAV）及其他試劑制 成，應用捕獲法原理檢測人血清或血漿中的抗-HAV IgM，用于甲型肝炎的早期診斷。3 .適用儀器微量移液器；37 C恒溫水浴箱；振蕩器；洗板機或洗瓶； 計時器；酶標儀，檢測波長450nmT,參考波長630nmo 4.樣本要求1.1 樣本采集不需要特殊準備，按照正常的采血技術收集血液，全血樣本最好先放置37C處理2小時，再將血樣本充分離 心，3000轉/分鐘離心6分鐘以上，使血清（血漿）不含有或極 少含有

22、血細胞。如果為抗凝血樣本，應將血樣本充分離心后，最好 再放置室溫2小時以上。1.2 樣本中含有疊氮鈉會影響試驗的結果，高度溶血的樣本、沒完全收縮的血清樣本或有微生物污染的樣本可能會引起錯誤的結 果。1.3 新鮮的樣本在2 s 8c無菌條件下可保存一周，新鮮樣本 可長期貯存在-20 C或以下，避免反復凍融。5 .檢驗方法二步法5.1 實驗準備：從冷藏環境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將洗滌液進行1:40倍稀釋。5.2 設陽性對照2孔，陰性對照3孔，空白對照1孔。5.3 力口樣：在陽性對照、陰性對照孔內分別加入陽性對照、陰 性對照50ul，其余每孔加待測血清或血漿50ul （或將待測血清

23、 或血漿用生理鹽水1：1000稀釋后，加入到反應孔內），蓋上封 孔膠片，置37 c水浴孵育30分鐘。5.4 洗滌：棄去孔內液體，用稀釋后的洗滌液連續洗滌5次后， 拍干孔內液體。5.5 加酶結合物：取出酶結合物，充分混勻，每孔加50ul（空白孔除外），蓋上封孔膠片，置37 c水浴孵育30分鐘。5.6 洗板：同5.45.7 加底物液：每孔先加底物液A50ul，再加底物液B50ul,混 勻，蓋上封孔膠片，置37C條件下避光顯色15分鐘后，加終止液 50ul 混勻，終止反應。6 .參考值（參考范圍）終止后盡快測定，波長450nm，空白孔調零，測0D值。如果選 用雙波長測定，不必設置空白對照空。按下列公

24、式計算：COV=陰性對照平均0D值X 2.1倍樣品OD值SICOV 1時為陽性樣品OD值SICOV 1時為陰性注：陰性對照平均OD值低于或等于0.05,按0.05計算；高于0.05時，按照實際OD值計算。7 .檢驗結果的解釋7.1 陰性結果表明樣本中不含有抗-HAV IgM或抗-HAV IgM含量低 于試劑盒的檢測范圍。7.2 陽性結果表明樣本中含有抗-HAV IgM或產生非特異反 應。7.3 樣本的檢驗結果與臨床表現不符或存在疑問時應采用適當的 方法進行確認。7.4 對于待檢血清或血漿直接進行50ul加樣，結果判為陽性的標 本，應對其用生理鹽水1:1000稀釋后重復實驗并判定結果。8 .注意

25、事項8.1 本品僅用于體外診斷，僅限檢測人體血清或血漿；檢測結果 作為診斷指標之一。8.2 使用時，從冷藏環境取出試劑盒，置室溫平衡30分鐘后，方 可進行測試。剩余試劑應及時封存于冰箱內保存，備用。8.3 結果判定需在反應終止后10分鐘內完成。8.4 封孔膠片不得重復使用。8.5 在有效期內，微孔板密封袋如有漏氣現象，不影響試驗結果。8.6 試劑盒在有效期內使用，不同批號不得混用。8.7 確保樣本加樣量的準確，如果加樣不準確可能會導致錯誤的 試驗結果。8.8 使用微量移液器加樣時，每次應更換吸頭吸取樣本；如果采用滴瓶滴加時，請將滴瓶中液體搖勻，并棄去2滴后垂直均速滴 加，要避免組分中的液體觸到

26、或濺到微孔邊緣上，特別是酶結合 物。8.9 在操作過程中應盡量避免反應微孔中產生氣泡。8.10 準確控制反應溫度和反應時間。8.11 洗板：1用洗板機洗板時，洗板機的加液量應注意控制， 既避免洗液過量而溢出，又能充滿反應微孔，并經常檢查加液頭是 否堵塞；2洗板機最好每次使用前、后沖洗干凈，防止管路堵塞 或腐蝕；3洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。8.12 本試劑盒及臨床樣本均應視為傳染性物質或潛在傳染性物 質，請按相關實驗室工作規范執行和處理。9 .參考文獻中國生物制品規程2000年版凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程 丙型肝炎病毒抗體操作規程（SOP文件） 1.目的用于血液的篩查和臨床丙型肝炎病毒

27、感染的輔助診斷2 .檢驗原理本品系用丙型肝炎病毒（HCV抗原包被的微孔板和酶標記 抗人igG及其他試劑制成，應用簡接酶聯免疫法原理檢測人血清 或血漿樣品中的HCV抗體。3 .適用儀器微量移液器；37 C恒溫水浴箱；振蕩器；洗板機或洗瓶；計時 器；酶標儀，檢測波長450nmT,參考波長630nmo4 .樣本要求4.1 樣本采集不需要特殊準備，按照正常的采血技術收集血 液，全血樣本最好先放置37 C處理2小時，再將血樣本充分離 心，3000轉/分鐘離心6分鐘以上，使血清（血漿）不含有或極 少含有血細胞。如果為抗凝血樣本，應將血樣本充分離心后，最好 再放置室溫2小時以上。4.2 樣本中含有疊氮鈉會影

28、響試驗的結果，高度溶血的樣本、沒 完全收縮的血清樣本或有微生物污染的樣本可能會引起錯誤的結 果。4.3 新鮮的樣本在2 s 8c無菌條件下可保存一周，新鮮樣本可長期23/28凝聚胺介質交叉配血試驗操作規程貯存在-20 C或以下，避免反復凍融。5 .檢驗方法5.1 實驗準備：從冷藏環境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將洗滌液進行1:40倍稀釋。5.2 設陽性對照2孔，陰性對照3孔，不加樣品稀釋液，直接 加入陽性對照。陰性對照100 ul，另設空白對照1孔（只加底 物液及終止液）。5.3 加樣：在其余每孔加先加樣品稀釋液10Oul,再加待檢血清 或血漿10ul （空白孔除外），充分混勻，蓋

29、上封孔膠片，置37 C水浴孵育60分鐘。5.4 洗滌：棄去孔內液體，用稀釋后的洗滌液連續洗滌5次后， 拍干孔內液體。5.5 加酶結合物：空白孔除外，每孔各加酶結合物1003。蓋 上封孔膠片，置37 c水浴孵育30分鐘。5.6 洗滌：棄去孔內液體，用稀釋后的洗滌液連續洗滌5次后， 拍干孔內液體。5.7 加底物液：每孔先加底物液A50ul，再加底物液B503,混 勻，蓋上封孔膠片，置37C條件下避光顯色30分鐘后，加終止 液50ul，混勻，終止反應。6/-ztr-參考（E終止后盡快測定,波長450nm，空白孔調零，測0D值。如 果選用雙波長測定，不必設置空白對照空。按下列公式計算：COV=陰性對照

30、平均0D值X 2.1倍陰性對照平均0D值低于或等于0.1，按0.1計算；高于0.1 ,按照 實際0D值計算。7結果判斷樣品0D值SICOV 1時，待測樣本為陽性；樣品0D值SICOV 1時，待測樣本為陰性。8 .注意事項8.1 本品僅用于體外診斷，僅限檢測人體血清或血漿；檢測結 果作為診斷指標之一。8.2 使用時，從冷藏環境取出試劑盒，置室溫平衡30分鐘 后，方可進行測試。剩余試劑應及時封存于冰箱內保存，備用。8.3 結果判定需在反應終止后10分鐘內完成。8.4 封孔膠片不得重復使用。8.5 在有效期內，微孔板密封袋如有漏氣現象，不影響試驗結 果。8.6 試劑盒在有效期內使用，不同批號不得混用

31、。8.7 確保樣本加樣量的準確，如果加樣不準確可能會導致錯誤的 試驗結果。8.8 使用微量移液器加樣時，每次應更換吸頭吸取樣本。8.9 在操作過程中應盡量避免反應微孔中產生氣泡。8.10 準確控制反應溫度和反應時間。8.11 洗板：1用洗板機洗板時，洗板機的加液量應注意控制， 既避免洗液過量而溢出，又能充滿反應微孔，并經常檢查加液頭是 否堵塞；2洗板機最好每次使用前、后沖洗干凈，防止管路堵塞 或腐蝕；3洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。8.12 本試劑盒及臨床樣本均應視為傳染性物質或潛在傳染性物 質，請按相關實驗室工作規范執行和處理。9 .參考文獻中國藥典2010年版三部體外診斷試劑說明書編寫指

32、導原則（國食藥監械【2007240 號）31/HIV抗體初篩實驗室操作規程（SOP文件）1 .檢驗目的檢驗人體血清中是否感染HIV病毒2 .檢驗原理本產品系用純化基因工程人類免疫缺陷病毒“1”型和“2”（HIV-1和HIV-2）抗原包被的微孔板和酶聯記的HIV-1和HIV-2 抗原及其它試劑組成試劑盒，應用雙原夾心法原理檢測人血清或血 漿中的人類免疫缺陷病毒抗體，用于獻血員及高危人群中人類免疫 缺陷病毒的篩查。3 .檢驗條件3.1 操作人員對本實驗應心中有數，嚴格執行操作規程。3.2 洗板機，酶標儀，加樣器必須定期校正。試劑按規定保 存。4 .標本采集4.1 門診病人由檢驗科人員無菌抽取靜脈血

33、2ml分離血清備 用。4.2 住院病人由護士采血送檢驗科。4.3 要避免溶血。5 .設備和試劑5.1 設備全自動ZDM）型酶標洗板機，MR-96A酶標儀。5.2 試劑珠海麗珠試劑股份有限公司生產的抗HIV診斷試劑6 .操作方法6.1 實驗準備從冷環境中取出試劑盒，室溫平衡半小時，同 時將濃縮洗液用蒸儲水作1：20稀釋備用。6.2 編號每板應設空白對照1孔，陽性對照2孔，陰性對照 2孔，質控1孔。6.3 加樣每孔加入50ul樣品稀釋液，并分別在相應孔中加入 待測樣品或陰、陽對照、質控品50ul。空白孔內只加稀釋液。6.4 溫育用封板膜封板后置37 C溫育60分鐘。6.5 加酶除空白對照孔外，每孔加50ul酶標記物，輕輕震動 混勻，用封板膜將板孔封好，置37c溫育30分鐘。6.6 洗板小心將封板膜揭