1、院內感染監測與操作1、手的微生物監測采樣時間：在接觸患者或從事醫療活動前進行。采樣方法：被檢人五指并攏，將浸有無菌生理鹽水的棉拭子一支在雙手曲面從指根到指端 來回涂擦各兩遍（一只手涂擦面積約30cm2）,并隨之轉動采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子投入 10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，立即送檢。采樣面積按平方厘米 （cm2）計算。細菌菌落總數檢查：1ml采樣液放入滅菌平皿內，用普通營養瓊脂培養，放35c溫箱內2448 h計數菌落。手細菌菌落總數（cfu/ cm2）=平板上菌落數x采樣液稀釋倍數采樣面積（cm2）（cfu:是菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過涂布的方法，讓其內的微

2、生物單細 胞分散在瓊脂平板上，待培養后，每一活細胞就形成一個菌落。就表示每毫升菌液中含有多少單細胞。）衛生手消毒：w 10 cfu/ cm2外科手消毒： 5 cfu/ cm2一般醫護人員手不得檢出大腸桿菌、金黃色葡萄球菌；潔凈手術室、其他潔凈場所、非潔凈手術室、骨髓移植室、產房、導管室、新生兒室、器官 移植病房、ICU、燒傷病房、血液病病區等工作人員手不得檢出銅綠假單胞菌； 母嬰同室、新生兒室及兒科病房工作人員手不得檢出沙門氏菌，溶血性鏈球菌。 2、物體表面的微生物學監采樣時間：消毒處理后 4 h內采樣。采樣面積：被采表面100 cm2,取全部表面； 被采表面 100 cm2，取100 cm2

3、 。采樣方法：用5cm X 5 cm的標準滅菌規格板，放在被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉動棉拭子，連續采樣14個規格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子裝入5ml采樣液的試管內送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體的方法采樣。細菌菌落總數檢查：1ml采樣液放入滅菌平皿內， 用普通營養瓊脂培養， 放35c溫箱內培養2448 h計數 菌落。物體表面細菌菌落總數（cfu/ cm 2）=平板上菌落數x采樣液稀釋倍數采樣面積（cm2）潔凈手術室、其他潔凈場所、非潔凈手術室、骨髓移植室、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、ICU、燒傷病房、血液病

4、病區等：物體表面細菌菌落總數w5 cfu/ cm2 。兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析室、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等：物體表面細菌菌落總數w 10 cfu/ cm2 。一般的物體表面不得檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌；母嬰同室、早產兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌。3、空氣消毒效果的監測采樣時間：選擇消毒處理后與進行醫療活動之前期間采樣。采樣方法：自然沉降法，國內大多數醫院采用。采樣高度：與地面垂直高度 0.81.5 m。布點方法：室內面積w 30 m2,設一條對角線上取 3點，即中

5、心一點、兩端各距墻1m處取一點；室內面積30 m2,設東、西、南、北、中 5點，其中東、西、南、北點 均距墻1m。采樣方法：用9cm直徑的普通營養瓊脂平板，在采樣點將平板蓋打開，把蓋子扣在平板的邊緣上，暴露5 min后送檢培養，每個被監測的房間菌落數以平均數計算各類環境空氣、物體表面、醫護人員手細菌菌落總數衛生標1. I類區域-潔凈手術室（分成4個等級）：1特別潔凈手術室一手術區 0.2個/30min?。90皿， 周邊區0.4個/30min?。90皿；n標準潔凈手術室一手術區 0.75個/30min?。90皿，周邊 區1.5個/30min ?（）90皿；出一般潔凈手術室一手術區 2個/30mi

6、n ?（）90皿，周邊區4個/30min ? 4 90皿；IV準潔凈手術室一手術區 5個/30min? e 90皿；2. n類區域：非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官 移植病房、燒傷病房重癥監護病房、血液病病區空氣中的細菌菌落總數w4cfu/ （15min ?直徑9cm平皿）。3. m-IV類區域：兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥 室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細菌菌落總數w4cfu/（5min ?直徑9cm平皿）。新規范的檢測單位復雜，分別為：XXcfu

7、/（5min -直徑9cm平皿）、XXcfu（15min 直徑9cm平皿卜XXcfu/（30min 直徑9cm平皿）。不同的區域采樣時間的要求是不相同的，參考范圍 也不相同的。所以，在送檢的空氣平板上必須標明采樣的地點和時間。（原參考范圍：I類區域細菌總數w 10cfu/ m3,n類區域細菌總數w 200cfu/ m3,出類區域 細菌總數w 500cfu/ m3） b、層流手術室空氣監測細菌菌落數衛生標準（表）手術室分類衛生標準（以沉降法為標準）手術區周邊區I級特別潔凈手術室0.2 個 /30min0.4 個/30minn級標準潔凈手術室0.75 個/30min1.5 個/30min出一般潔凈

8、手術室2 個/30min4 個/30minIV級標準潔凈手術室5 個/30min5 個/30min層流手術室空氣監測沉降法空氣采樣選擇平皿數（表）被測區域潔凈度級別最少培養皿數（9cm,以沆降 30min 計）100131000510000310000023000002被測區域潔凈度級別最少培養皿數（9cm,以沆降 30min 計）1001310005100003100000230000025、壓力蒸汽滅菌器滅菌效果監測a、所有蒸汽和環氧乙烷氣體的滅菌器至少每周1次用活芽胞桿菌作滅菌效果評價，干熱滅菌每月監測1次。采樣時間：與被消毒或滅菌物品同時監測。布點方法：小型滅菌器選1個包裝物品放入指示

9、劑，置最底層中央；中型滅菌器選3個包裝 物品放入指示劑，上層中央放一個，下層前后各一個；大型滅菌器選5個包裝物品放入指示 劑，上、中層中央各放 1個，下層前、中、后部各放1個。監測方法：采用衛生部批準的化學指示劑和嗜熱脂肪芽胞桿菌（ ATCC 7953、ATCC 12980 或SSIK31株）作為生物指示劑。6、紫外線消毒效果監紫外線燈管輻射強度值的測定：1、開啟紫外線燈 5min后，按說明書操作，將測定波長為253.7 nm的紫外線強度測定儀（指定有效期內）探頭置被檢紫外線燈下垂直1m的中央處，儀表穩定后所示數據即為紫外線燈管的輻射強度值。其中30W直管型紫外燈新燈管輻射強度值a 90微瓦

10、秒/cm2,使用中輻射強度值a70微瓦秒/ cm2; 150W高強度紫外線新燈的輻射強度值a200微瓦秒/cm 2。70 微瓦 秒/cm 2。2、紫外線強度指示卡監測法（四環R牌）【性能與原理】紫外線強度指示卡由紫外線光敏色塊、標準色塊和卡片紙組成。紫外線光敏色塊以涂有聚乙烯膜的卡片紙為片基，將對波長253.7nm的紫外線敏感的化學物質和輔料均勻的涂布于片基上制成涂料卡，并粘貼在卡片紙中央制成。標準色塊的輻照強度值分別為 90微瓦 秒/cm2和70微瓦 秒/cm2 ,印制在紫外線光敏色塊的兩側。受 到規定波長的紫外線照射后，光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色。【使用范圍】檢測紫外線燈輻照強度值（90微瓦 秒/cm2和70微瓦 秒/cm2 ）是否達到使用要求。用于紫外線輻照強度值的日常監測，以便了解紫外線燈使用情況和及時進行更換。【使用方法】測定時，打開紫外線燈管5min待其穩定后，將指示卡置于距紫外線燈管下方垂直1m中央處，將有圖案一面朝向燈管，照射1min。受到規定波長的紫外線照射后，卡片紙中央的紫外線光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色。將其與標準色快相比， 即可測知紫外線輻照強度值是否達到使用要求。使用中的舊燈管，輻照強度值70微瓦秒/cm