1、補骨脂中補骨脂素和異補骨脂素的提取分離與檢識（一）目的要求學習香豆素類化合物的提取分離及檢識，通過實驗要求：1 .掌握用溶劑法提取香豆素類化合物的操作技術。2 .通過補骨脂素和異補骨脂素的分離，熟悉干柱色譜的操作技術。3 .掌握香豆素類化合物的檢識方法。（二）主要化學成分的結構及性質補骨脂 為豆科植物補骨脂 Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果實，全國 各地多有栽培。含有多種吠喃香豆素類成分，主要含補骨脂內酯（補骨脂素）、異補骨脂內酯 （異補骨脂素）和補骨脂次素等。其中補骨脂素和異補骨脂素為 抗白瘢風的主要有效成分，具有光敏性質。1 .補骨脂素（psoralen）又稱補骨

2、脂內酯，分子式 C11H6O3,分子量186.16。 無色針狀結晶（乙醇），mp.189190C,有揮發性。溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、 丙酮；微溶于水、乙醴和石油醴。2 .異補骨脂素（isopsoralen）分子式C11H6O3,分子量186.1&無色針狀結晶， mp.137138C,溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醴，難溶于 冷石油醴。補骨脂素異補骨脂素3 .補骨脂乙素（isobavachalcone）又稱補骨脂酮、異補骨脂查耳酮。分子式C20H20。4,分子量324.36。黃色片狀2晶（甲醇-水），mp. 166167Co4 .補骨脂甲素（coryfolin）又稱補骨脂

3、黃酮，分子式C20H20O4,分子量324.36。無色針狀結晶，mp.191192 c補骨脂乙素補骨脂甲素（三）實驗原理本實驗根據補骨脂素和異補骨脂素等在乙醇中溶解度大， 利用乙醇從中藥補 骨脂中提取補骨脂素及異補骨脂素等， 并用活性炭吸附脫色，再依據補骨脂素和 異補骨脂素的極性差異，利用柱色譜予以分離。（四）實驗內容1 :把20g補骨脂研磨后用50猿醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量體 積的乙醇。鋪薄層硅膠板，為了下次篩分離條件，鋪好 15塊板。2:用補骨脂素和異補骨脂素的標準品通過 TLC篩選硅膠柱色譜的分離條件。 根據文獻，設計了石油醴：乙酸乙酯 10: 1,石油醴：乙酸乙酯

4、8: 1,石油醴: 乙酸乙酯6: 1,石油醴：乙酸乙酯4: 1等幾組流動相配比，經過對 Rf值的比 較，最終決定用石油醴：乙酸乙酯 6: 1作為硅膠柱色譜分離的分離系統。把醇 提液減壓濃縮至剩下20ml水左右。萃取：濃縮后的混旋液加蒸儲水至 100ml, 用乙酸乙酯萃取三次。3 .柱色譜分離，采用濕法裝柱干法上樣。4 .檢識薄層色譜檢識薄層板：硅膠G-CMC-Na板試樣：補骨脂素乙醇液異補骨脂素乙醇液對照品：補骨脂素對照品乙醇液異補骨脂素對照品乙醇液5 開劑：石油醍-醋酸乙酯（6 ： 1）顯 色：紫外燈下觀察熒光（五）實驗說明及注意事項1 提取藥材應是未炮制過的補骨脂種子,其補骨脂素和異補骨脂素等成分含量較高。2補骨脂素和異補骨脂素含內酯結構，具有內酯類成分的通性，可用堿提酸沉法提取，但因補骨脂種子中含有大量油脂和糖類成分，易與堿水發生皂化反應和形成膠狀物，致使難以濾過，降低收得率，故選用50乙醇提取而不用堿溶酸沉法提取。3由補骨脂種子中提取所得的精制品，為補骨脂素和異補骨脂素的混合物結晶，兩者含量近于1 : 1,但隨藥材品種、質量等