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文檔簡介

1、細(xì)胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)基高博,蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)院藥理學(xué)系1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640 廣泛應(yīng)用于哺乳動物、 特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng), 是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。 主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。 其它像 K-562、HL-60 、 Jurkat、Daudi、 IM-9 等成淋巴細(xì)胞、 T 細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及 HCT-15 上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、Minimum Essential Medium ( MEM )也稱最低必需培養(yǎng)基,它僅含有 12 種必需氨基酸、谷氨酰胺和 8 種維生素。成分簡單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動物細(xì)胞類

2、型的培養(yǎng)。 MEM-Alpha 一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類型,而其它沒有特殊之處的細(xì)胞株則幾乎均可采用 MEM 來培養(yǎng)。3、DMEM- 高糖(標(biāo)準(zhǔn)型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基, 可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng) ,更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和 DNA 轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。4、DMEM- 低糖(標(biāo)準(zhǔn)型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。5、DMEM/F12DMEM/F12 培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。 F12 培養(yǎng)基成分

3、復(fù)雜,含有多種微量元素,和 DMEM 以 1:1 結(jié)合,稱為 DMEM/F12 培養(yǎng)基(DME/F12 medium ),作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ),以利用 F12 含有較豐富的成分和 DMEM 含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。為了增強(qiáng)該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F12 ( 1: 1)中加入115 mM HEPES 緩沖液。6、McCoy s 5AMcCoy s 5A Medium 主要為肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所設(shè)計(jì),可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、 一些淋巴細(xì)胞培

4、養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支持。 例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、 HT-29、 BHL-100 等上皮細(xì)胞。7、Iscove s Modified Dulbecco Medium (IMDM)Guilber 和 Iscove 將 Dulbecco Medium改良為 Iscove Mediums,用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體。 此種培養(yǎng)液含有硒、 額外的氨基酸和維生素、 丙酮酸鈉和 HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。 IMDM 還能夠促進(jìn)小鼠 B 淋巴細(xì)胞, LPS 刺激的 B 細(xì)胞,骨髓造血細(xì)胞, T 細(xì)胞和淋巴瘤細(xì)胞的生長。 IMDM 為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用

5、于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。8、M-199 Medium1950 年, Morgan 成功研制出具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,即M-199,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199 可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。9、Leibovitz Medium(L-15 )L-15 培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng),用于在CO2 缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。 此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系, 氨基酸組成進(jìn)一步改良, 并由半乳糖替代了葡萄糖。10、Ham s F-10 培養(yǎng)基適應(yīng)小鼠細(xì)胞、人類二倍體的培養(yǎng)。11、Ham s F-12 培養(yǎng)基可以在加入很少血清的情況下應(yīng)用,特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),是2無血清培養(yǎng)中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)液。12、William s Medium E用于大鼠肝上皮細(xì)胞的長期細(xì)胞培養(yǎng)。13、MCDB 131

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