1、自身免疫性疾病相關抗體的解讀趙久良北京協和醫院風濕免疫科彌漫性結締組織病的特點自身免疫應答反應強度與病情密切相關組織器官病理性損傷和相應的功能障礙產生高滴度的自身抗體或與自身組織起反應的T細胞自身抗體臨床意義與病情活動相關與病情活動相關抗ds-DNA抗體cANCAACL診斷特異性診斷特異性抗Sm抗體抗CCP抗體抗SSA/SSB預測預后臨床亞型預測預后臨床亞型抗Jo-1抗Scl-70抗rRNP器官特異性器官特異性CNS：抗rRNP抗體肺臟：抗Scl-70kDa 抗Jo-1抗體z臨床上具有多種常用自身抗體提供治療依提供治療依據據抗體陽性，抗體陽性，無臨床表現無臨床表現抗體陽性與抗體陽性與特定的臨床

2、事特定的臨床事件件常用實驗室檢查方法間接免疫熒光法間接免疫熒光下不同核型ANA染色模型分析（25種）z均質型均質型H：抗DNP，dsDNA，組蛋白，核小體z斑點型斑點型S：ENAz核仁型核仁型N：SSc相關抗體，RNA多聚酶I，PM-SCl,u3nRNPz核模型核模型M：y抗核包膜蛋白抗體（gp210，板層素），部分dsDNAz著絲點型：著絲點型：ACA陽性z胞漿型：胞漿型：分裂間期細胞細胞漿顏色陽性，線粒體型，核糖體型，Jo-1型，細顆粒型z混合型抗dsDNA抗體臨床意義z致病作用y在SLE患者的腎臟病變處發現了抗DNA抗體y在具有抗dsDNA抗體的人中，85%會在約5年內發展成為SLEzS

3、LE中陽性率60-90%y對于未治療SLE患者，Sp 90%，Se 70%z抗體水平與疾病活動度相關y活動期陽性率80-100%，非活動期30%抗ENA抗體抗ENA抗體z可提取性核抗原，為核中一類蛋白質，均不含有DNA、組蛋白z可以被鹽水提取zENA抗原可以從多種組織中獲得，無種屬間差異，但有明顯的組織不均一性免疫對流電泳CIEAb Ag O | O O O O O O O O | O O | O 陽極陽極+ - 陰極 免疫雙擴散(ID)已知已知Ab1:16已知已知Ab Ag1:1待測血清待測血清1:41:64 U1-RNP Sm SSA SSB雙擴散法解讀z免疫雙擴散(ID)檢測結果判斷z上

4、圖為抗Sm、U1-RNP抗體陽性y滴度均為1:4z下圖為抗SSA、SSB抗體陽性y抗SSA抗體滴度1:64y抗SSB抗體滴度1:16免疫印跡法(WB法)與抗ENA抗體特異性結合多肽抗原表位z 抗Sm 28/29、13.5KDz 抗U1RNP 73、32、17.5KDz 抗SSA 52、60KDz 抗SSB 45、47、48KDz 抗rRNP 38、16.5、15KDz 抗Jo-1 55KDz 抗ScL-70 86、70KD免疫印跡法解讀抗ENA及其臨床意義z抗RNPCTD 、 MCTD、SLEz抗SmSLE 30%z抗SSA(Ro)pSS 75%、SLE 25%z抗SSB(La)pSS 40%

5、、SLE 10%z抗rRNPSLEz抗Scl-70SSc 2030%z抗Jo-1PM 30%抗ENA抗體臨床意義z標記抗體y抗Sm 系統性紅斑狼瘡（SLE）y抗Scl-70系統性硬化癥y抗SSA/SSB干燥綜合征z病情活動度相關y細胞漿抗原JO-1z預測疾病預后和臨床亞型y抗Jo-1皮肌炎合并肺間質病變y抗rRNP狼瘡腦病特殊問題ANA18項z除外性診斷除外性診斷y對于臨床不考慮CTD患者z增加項目增加項目y抗抗CENP-B抗體：抗體：ACA共包括4型，以B型為主y抗核小體抗體：抗核小體抗體：多見于活動性SLE，尤其是狼瘡腎炎，可能是SLE的特異性抗體，Se 58-71%，Sp 97-99%z

6、初步篩查初步篩查y臨床考慮CTD，但具體分型未明類風濕關節炎相關抗體譜z類風濕因子y靈敏度高，特異度差（63%）z抗環瓜氨酸多肽抗體CCPyELISA，79%，陽性預測值84%z抗角蛋白抗體（AKA）：IFz抗核周因子抗體（APF）：IFzMCV類風濕關節炎多關節炎-關節變形-偶見臟器累及 (肺纖維化,胸膜炎, 心包炎, 鞏膜炎, 類風濕結節, 血管炎)- 30-50% RA患者在發病第一年可見關節損壞- 40%RA患者5年內病情發展導致喪失勞動力- 根據病情的嚴重程度，壽命縮短3 到14 年類風濕的關節損害類風濕的關節損害致畸的根源致畸的根源z 在疾病發生2年內即可發生的關節損壞，致殘率高y

7、19661971 at Middlesex Hospital, London,UK. y94例病程10個5RF和抗CCP抗體均陰性（）0RF或抗CCP抗體低滴度陽性（）2RF或抗CCP抗體高滴度陽性（）3（正常上限3倍） 6周 06周 1CRP和ESR均正常 0CRP或ESR升高 1中華風濕病學雜志中華風濕病學雜志2010年年4月第月第14卷第卷第4期期類風濕關類風濕關節炎診斷及治療指南節炎診斷及治療指南RARA新新四項四項抗抗CCPCCP抗體抗體類風類風濕因濕因子子C C反反應蛋應蛋白白血沉血沉結果比類風濕因子更可結果比類風濕因子更可靠靠早于影像學診斷早于影像學診斷持續陽性提示骨破壞持持續陽

8、性提示骨破壞持續加重續加重持續陽性致殘率極高持續陽性致殘率極高（兩年內（兩年內70%70%）抗磷脂抗體譜z廣義抗磷脂抗體譜包括：y抗心磷脂抗體：ACLy抗磷脂結合血漿蛋白抗體：x2GP1x凝血酶原（PT），蛋白C，蛋白Sx膜聯蛋白 Annexin A2和A5y抗磷脂-蛋白復合物抗體x磷脂酰肌醇 anti-PI，x磷脂酰乙醇胺 anti-PEx磷脂酰絲氨酸/凝血酶原（anti-PS/PT）x波形蛋白/心磷脂復合物：anti-vimentiny狼瘡抗凝物：功能性抗體，1952年發現，1972年命名狼瘡抗凝物（LAC） 一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復合物，阻斷活化的凝血因子V與凝血

9、酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時間延長 初篩試驗： 活化部分凝血酶原時間(APTT) 白陶土凝血時間(KCT) 稀釋蛇毒凝血時間(dRVVT) 稀釋凝血酶原時間(dPT) 通過糾正試驗確診：通過糾正試驗確診：若有LA，缺乏血小板正常血清不能糾正凝血時間，只有加入過量磷脂或血小板溶解物后，延長的APTT可被糾正 需排除其他原因，如肝素、因子復合物等抗心磷脂抗體（ACL） 最先發現的抗磷脂自身抗體之一，和血小板減少有明顯相關性 ACL陽性者，血小板減少3倍于ACL陰性者 習慣性流產與IgG型ACL關系密切，并可能和抗體的滴定度有關 檢測方法：ELISA 目前尚無金標準 兩種類型：38ACL

10、Ig類型類型與血栓形成與血栓形成常見疾病常見疾病2-GP1依賴高滴度IgG型密切相關自身免疫病、APS非2-GP1依賴低滴度IgM型不引起血栓梅毒、AIDS等感染性疾病抗2GP1抗體抗B2GP1抗體：特異度高（94.5%），靈敏度低24%結構域1=Domain I與臨床價值更相關 ANCA熒光染色模型對應對應抗原抗原主要抗原:蛋白酶3 (PR3)其它抗原:BPI, AZU等主要抗原:髓過氧化物酶 (MPO) 其它抗原:HLE, LF, CG等相關疾病相關疾病 肉芽腫伴多血管炎肉芽腫伴多血管炎(GPA): (GPA): 敏感性: 73 %特異性: 99 %感染等顯微鏡下多血管炎顯微鏡下多血管炎(

11、MPA):(MPA): 敏感性: 67 %特異性: 99 %IBD, RA, SLE等ANCA陽性患者的疾病譜余潔等，中華全科醫師雜志2010；9:26-30 xCTD患者如患者如RA、SLE和肌炎，和肌炎，偶可表現出偶可表現出ANCA陽性，但大多陽性，但大多是非是非MPO-ANCA, 和非和非PR3-ANCAx感染性心內膜炎、感染性心內膜炎、HIV感染，感染，偶爾會出現偶爾會出現ANCA陽性。陽性。 這有特這有特殊的臨床意義，感染可以出現酷殊的臨床意義，感染可以出現酷似血管炎的癥狀似血管炎的癥狀ANCA的臨床意義z結合臨床特征，ANCA陽性有助于診斷z單純免疫熒光陽性意義有限zANCA陰性不能排除ANCA-相關的血管炎zANCA與疾病活動度的關