1、水溶水溶C100中復原型抗壞血酸的測定中復原型抗壞血酸的測定 -2, 6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法 回想回想l維生素定義；特點；分類維生素定義；特點；分類l維生素維生素C；存在方式；理化性質；生理功能；存在方式；理化性質；生理功能l維生素維生素C缺乏癥；每日攝入量；來源缺乏癥；每日攝入量；來源l維生素維生素C的營養情況評價的營養情況評價一、目的一、目的l了解營養評價中實驗室檢查的意義了解營養評價中實驗室檢查的意義l掌握食物中復原型掌握食物中復原型VitC測定方法測定方法 l掌握如何對食物中復原型掌握如何對食物中復原型VitC的含量進的含量進展分析及評價展分析及評價抗壞血酸含有-OH基，

2、具有較強的復原性，能復原染料2,6-二氯酚靛酚。該染料在酸性溶液中呈紅色，被復原后為無色。在沒有雜質干擾時，一定量的食物溶液復原規范染料的量與其中的抗壞血酸成正比。二、原理及步驟二、原理及步驟藍色紅色無色無色步驟步驟 l用規范維生素用規范維生素C溶液標定溶液標定2, 6-二氯酚靛酚染料；二氯酚靛酚染料；l用標定后的用標定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定樣品，測二氯酚靛酚染料滴定樣品，測得其復原型維生素得其復原型維生素C的濃度。的濃度。操作步驟操作步驟l0.1%抗壞血酸規范貯藏液抗壞血酸規范貯藏液1mg/ml，冰箱保管待用已配制。，冰箱保管待用已配制。l1%草酸溶液：草酸溶液：1g草酸充沛溶解后

3、草酸充沛溶解后洗入洗入100ml量筒中，加蒸餾水至量筒中，加蒸餾水至100ml刻度，攪勻刻度，攪勻備用已配制備用已配制 。l配制抗壞血酸規范運用液：用移液管取配制抗壞血酸規范運用液：用移液管取1ml 0.1%抗壞血酸規范貯藏液抗壞血酸規范貯藏液于于50ml容量瓶，加容量瓶，加1%草酸至刻度，搖勻，留用。草酸至刻度，搖勻，留用。1mg/50mll空白實驗：在三角燒瓶中參與空白實驗：在三角燒瓶中參與10ml 1%草酸，用草酸，用2,6-二氯酚靛酚染料滴二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結果秒不褪色為終點。記錄結果Cml。兩次。兩次l標定二氯酚靛酚染料：在三角燒

4、瓶中參與標定二氯酚靛酚染料：在三角燒瓶中參與5ml抗壞血酸運用液、抗壞血酸運用液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為秒不褪色為終點。記錄所用染料終點。記錄所用染料Aml。 2, 6-二氯酚靛酚染料的標定二氯酚靛酚染料的標定操作流程操作流程2, 6-二氯酚靛酚染液A: 規范維生素C溶液(5ml)+草酸5ml，1%滴定滴定無色變為淡紅色15s內不褪色C: 空白組為草酸10ml，1%1ml染料相當于復原型維生素C的mgT (mg/ml) =0.1A-Cmll水溶水溶C100稀釋液制備：市售水溶稀釋液制備：市售水溶C1

5、00飲料冰箱待用。運飲料冰箱待用。運用前用草酸溶液稀釋用前用草酸溶液稀釋10倍已制備。倍已制備。l水溶水溶C100稀釋液中抗壞血酸濃度測定：在三角燒瓶中參稀釋液中抗壞血酸濃度測定：在三角燒瓶中參與與5ml水溶水溶C100稀釋液、稀釋液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結果秒不褪色為終點。記錄結果B ml。兩次。兩次 樣品中復原型維生素樣品中復原型維生素C的濃度的測定的濃度的測定 采用標定的采用標定的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定二氯酚靛酚染料滴定操作流程操作流程2, 6-二氯酚靛酚染液B: 稀釋后的樣

6、品5ml+草酸5ml，1%滴定滴定無色變為淡紅色15s內不褪色樣品中復原型維生素樣品中復原型維生素C濃度濃度 C樣mg/L=B C T5 ml 10 1000本卷須知本卷須知l由于抗壞血酸在許多條件下都容易被氧化，因此，測定過程要迅速，并且應防止接觸銅、鐵等金屬，普通不超越2min 。l樣品中能夠有其他雜質也能復原2, 6-二氯酚靛酚，但復原速度比復原型維生素C慢，故滴定時以15s內粉紅色不褪去為止；l維生素C規范品溶液：短期、棕色瓶、冷藏；l滴定終點的判別l結果分析與討論l配制抗壞血酸運用液：用移液管取1ml 0.1%抗壞血酸規范母液于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，搖勻，留用。l空白實驗

7、：在三角燒瓶中參與10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結果Cml。兩次l標定二氯酚靛酚染料：在三角燒瓶中參與5ml抗壞血酸運用液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄所用染料Aml。l1ml 二氯酚靛酚相當于抗壞血酸Tmg，T=0.1/AC。兩次l水溶C100稀釋液中抗壞血酸濃度測定：在三角燒瓶中參與5ml檸檬汁稀釋液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結果Bml。兩次C樣樣mg/L=B C T5 ml 10 1000l復原型抗壞血酸能復原染料2, 6-二氯酚