1、    蟲草花提取多糖的研究進(jìn)展    黎林玉?沈雪蓮?程丹丹?趙露?顏繼歡?王洪梅?賴寒摘 要：本文對目前從蟲草花提取多糖的各種方法的研究進(jìn)展進(jìn)行了歸納與總結(jié)，希望能從提取方法的演變中探尋出科學(xué)高效的提取思路，為工業(yè)穩(wěn)定生產(chǎn)蟲草花多糖提供有益的參考。關(guān)鍵詞：蟲草花;多糖;提取蟲草是一類具有重要研究價值的真菌，是子座（真菌部分）和菌核（昆蟲的軀殼）部分組成的復(fù)合物，隸屬于子囊菌門、真菌門、核菌綱、肉座菌目、麥角菌科、蟲草屬。蟲草花是一種僅用培養(yǎng)基培養(yǎng)或者培養(yǎng)于雜糧類包括于稻米、麥子、大豆等的蛹蟲草子實(shí)體，屬于一種真菌類的蛹蟲草菌。近年來，隨著人們對蟲草花

2、的有效成分之一蟲草多糖的研究愈發(fā)深入，人們發(fā)現(xiàn)蟲草多糖對艾滋病毒有直接抑制作用1，為艾滋病的阻斷藥提供了新的研究方向。20世紀(jì)80年代起，我國開始對蟲草多糖進(jìn)行提取、分離，并研究其藥理性質(zhì)和藥物活性。蟲草花多糖是一種高度分枝的半乳甘露聚糖，利用其易溶于水的性質(zhì)，常采用水提取法進(jìn)行提取。除最常用的水熱提法外，隨著提取技術(shù)的不斷發(fā)展，陸續(xù)出現(xiàn)超聲提法、高效液相提法，為了提高提取率，有人通過生物學(xué)或物理學(xué)進(jìn)行破壁預(yù)處理、多種技術(shù)聯(lián)用取得了一定的進(jìn)展，蟲草多糖在食品釀造、食品保健以及醫(yī)藥行業(yè)的應(yīng)用展現(xiàn)了巨大的潛力。1 主要提取方法1.1 水熱提法1）水熱提法原理。蟲草多糖是一種水溶性多糖，由于其物理性

3、質(zhì)，易溶于水而難溶于大多數(shù)有機(jī)物，故水熱提法是最普遍也是最常見的提取方法。2）水熱提法方法和步驟。取適量干燥后的蟲草花粉末（可過60-120目篩），加入適量體積的水在恒溫條件下回流一定時間，重復(fù)提取2-3次，合并濾液，濃縮，定容，含量測定。據(jù)研究，水熱提法提取率主要受料液比、溫度、提取時間的影響，也有學(xué)者將蟲草花粉末過篩目徑過作為影響因子進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計，結(jié)果表明其提取率會受影響，可能是因?yàn)楹线m目徑的蟲草花顆粒更易于溶于水，從而影響提取率。3）水熱提法成果。許曉煒2等人通過單因素實(shí)驗(yàn)比較得出水熱提法優(yōu)于超聲提取法，進(jìn)而設(shè)計正交試驗(yàn)，結(jié)果表明其主要受溫度影響，優(yōu)選條件為料液比15：1于80熱回流提取

4、三次，每次120min，在此條件下提取率為5.49%。王英娟3等在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，提取率主要影響因素與最佳實(shí)驗(yàn)條件與許曉煒一致，但提取率略低只有4.18%。1.2 超聲提取法1）超聲提取法原理。超聲波產(chǎn)生的能量使提取液不斷震蕩，產(chǎn)生的壓力作用于細(xì)胞壁上，有助于蟲草花中多糖的擴(kuò)散溶出。2）超聲提取法方法和步驟。取適量干燥后的蟲草花粉末過篩，加入適量溶劑（大多數(shù)情況下溶劑為水）超聲提取一定時間后，離心、濃縮，分離、純化，定容，含量測定。3）超聲提取法成果。王振吉4等通過超聲法提取蟲草多糖，在一定的條件下對蟲草花進(jìn)行提取，提取率為3.88%。葛曉宇5等利用design exper軟件設(shè)計響應(yīng)曲面試

5、驗(yàn)，結(jié)果表明當(dāng)功率為220.258w，提取時間為50.244min，提取溫度為70.564，加水倍數(shù)為30.998倍時，最佳提取率的理論值為7.174%。1.3 酶提取法1）酶提取法原理。酶提取法是利用酶的專一性和高效性，降解或水解植物細(xì)胞壁并分解提取液中的雜質(zhì)，使得多糖充分釋放出來并提高多糖的提取率。2）酶提取法方法和步驟。取適量干燥后的蟲草花粉末，加入一定量的酶、水溶液，在一定ph條件下，一定時間內(nèi)水熱提取，分離、純化，濃縮，定容，含量測定。3）酶提取法成果。李慧6等在超聲條件下考察酶提取法對蟲草花多糖提取率的影響，當(dāng)酶添加量為0.18%時，蟲草花多糖提取率最佳為6.441%。張素斌7等考

6、察不同酶法對多糖提取率的影響，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明果膠酶法>木瓜蛋白酶法>纖維素酶法，在優(yōu)選條件下果膠酶法最高提取率為22.23%。2 其他方法2.1 微波提取法微波提取法和超聲提取法原理相似，都是利用輻射產(chǎn)生能量，破壞植物細(xì)胞壁，促使細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)釋放，同時對溶液加熱，促進(jìn)多糖溶出。2.2 超濾膜技術(shù)超濾膜技術(shù)可通過壓力的作用使細(xì)胞內(nèi)含物快速溶出，不僅可以用于蟲草花多糖的粗提取，還可以實(shí)現(xiàn)分離、除雜、純化等目的，減少多糖的損失，是一種可以達(dá)到精制蟲草花多糖的高效方法。2.3 超臨界流體萃取技術(shù)超臨界流體萃取技術(shù)是一種綠色工藝，可代替除雜過程中有害有機(jī)溶劑，且對內(nèi)溶物具有高滲透性和較強(qiáng)的溶解性

7、，可實(shí)現(xiàn)蟲草花多糖的高純度提取。3 提取方法的優(yōu)劣比較水提法是最常見、最普遍、也是最易實(shí)現(xiàn)的方法，但提取率相較于其他方法而言，普遍不高。這是由于在提取過程中，蛋白質(zhì)、脂類等物質(zhì)也會一起被浸出，使得不能較大的提高提取率。但水熱提法因其操作簡單、方便、實(shí)驗(yàn)條件易滿足，仍使得該提取法受到廣大學(xué)者的喜愛。超聲提取法利用機(jī)械原理、空化和熱效應(yīng)促進(jìn)蟲草花中的活性物質(zhì)釋放，能有效提高蟲草花多糖的提取率，操作簡單，物料損失小，但超聲法溫度過高或超聲功率過大會導(dǎo)致多糖結(jié)構(gòu)受到破壞，反而影響其提取率。酶提取法充分利用酶的專一和高效等特點(diǎn)，能有效去除蛋白質(zhì)、小分子等雜質(zhì)，極大改善了提取工藝，在多糖的提取工藝中具有良

8、好的發(fā)展前景。但是酶具有多變性，提取過程中易受ph、提取溫度的影響，操作條件較為嚴(yán)格。綜上所述，每種蟲草花多糖提取的方法都各有優(yōu)缺點(diǎn)。在實(shí)驗(yàn)條件受限和不刻意追求高提取率的前提下。可選擇簡單易行的水熱提法;超聲法、微波法原理相似，提取效果大致相同，以上多種方法盡管都可實(shí)現(xiàn)對粗多糖的分離純化，但如果能將多種方法聯(lián)用，譬如將酶提取法與其他方法聯(lián)用，將會拓展提取思路與路徑，從而找到更為高效經(jīng)濟(jì)的提取方法。4 結(jié)論蟲草花多糖現(xiàn)已展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景，故建立一種穩(wěn)定提取蟲草花多糖的方法迫在眉睫。筆者主要總結(jié)的蟲草花多糖提取的幾種主要常見方法，但實(shí)際應(yīng)用于蟲草花多糖提取的方法不止本文列舉的這幾種，不斷有更多新興的技術(shù)正在被挖掘，希望本文能為蟲草花多糖的提取規(guī)范提供有益的參考。參考文獻(xiàn)1李連德，李增智，樊美珍等.蟲草多糖研究進(jìn)展（綜述）j.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2000，27（4）：413-416.2許曉煒.蛹蟲草固體培養(yǎng)基中蟲草多糖、蟲草素提取分離工藝研究d.天津大學(xué)，2006.3王英娟，李多偉，王義潮，鄭婷婷.蛹蟲草中蟲草素、蟲草多糖綜合提取工藝研究j.西北植物學(xué)報，2005（09）：1863-1867.4王振吉，楊申明，許云香，周林宗.蟲草花多糖提取工藝優(yōu)化及其抗氧化特性j.中國釀造，2019，38（09）：185-189.5葛曉宇.蛹蟲草子實(shí)體多