1、姜黃中姜黃素的提取姜黃中姜黃素的提取索氏提取法索氏提取法 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康?1.1.掌握用索氏提取法提取姜黃浸膏的原理及操作。掌握用索氏提取法提取姜黃浸膏的原理及操作。2.2.熟悉重量分析的基本步驟。熟悉重量分析的基本步驟。關(guān)鍵控制點(diǎn)：1.正確的選擇溶劑；2.抽提管中樣品的裝樣是否保持虹吸正常；3.抽提的次數(shù)與間隔時(shí)間會(huì)影響提取效果；難點(diǎn)：1.定量檢測(cè)時(shí)原料及成品的干燥稱(chēng)量； 2.溶劑的正確回收；二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理l姜黃素能溶于脂溶性有機(jī)溶劑。本實(shí)驗(yàn)利用能溶于脂溶性溶劑姜黃素能溶于脂溶性有機(jī)溶劑。本實(shí)驗(yàn)利用能溶于脂溶性溶劑這一特性，用脂溶性溶劑將姜黃素提取出來(lái)，借蒸發(fā)除去溶劑這一

2、特性，用脂溶性溶劑將姜黃素提取出來(lái)，借蒸發(fā)除去溶劑后稱(chēng)量。整個(gè)提取過(guò)程均在索氏提取器中進(jìn)行，通常使用的脂后稱(chēng)量。整個(gè)提取過(guò)程均在索氏提取器中進(jìn)行，通常使用的脂溶性溶劑為乙醚，或沸點(diǎn)為溶性溶劑為乙醚，或沸點(diǎn)為30306060的石油醚、二氯甲烷、的石油醚、二氯甲烷、乙醇等。用此法提取的脂溶性物質(zhì)除姜黃素外，還有脂肪、游乙醇等。用此法提取的脂溶性物質(zhì)除姜黃素外，還有脂肪、游離脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故稱(chēng)為離脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故稱(chēng)為“浸浸膏膏”。同時(shí)，樣品中結(jié)合狀態(tài)的脂類(lèi)（主要是脂蛋白）不能直。同時(shí)，樣品中結(jié)合狀態(tài)的脂類(lèi)（主要是脂蛋白）不能直接提取出來(lái)，所以該法又

3、稱(chēng)為游離脂類(lèi)定量測(cè)定法。接提取出來(lái)，所以該法又稱(chēng)為游離脂類(lèi)定量測(cè)定法。 索氏抽提法測(cè)定脂肪最大的不足是索氏抽提法測(cè)定脂肪最大的不足是，如能將樣品先，如能將樣品先回流回流1 12 2次次，然后，然后浸泡在溶劑中浸泡在溶劑中過(guò)夜過(guò)夜；次日再繼續(xù)抽提，；次日再繼續(xù)抽提，則可明顯則可明顯提高提取率提高提取率。 或改用棉花代替濾紙。用棉花墊底后直接裝樣虹吸。三、實(shí)驗(yàn)器材三、實(shí)驗(yàn)器材 l1.1.電子天平。電子天平。l操作指南：調(diào)整水平度，插上電源，啟動(dòng)操作指南：調(diào)整水平度，插上電源，啟動(dòng)“ON/OFFON/OFF”開(kāi)關(guān)，按一下回零擋開(kāi)關(guān)，按一下回零擋“TARETARE”，使屏，使屏幕上顯示幕上顯示0.00

4、000.0000。推開(kāi)玻璃門(mén)，輕輕將樣品置。推開(kāi)玻璃門(mén)，輕輕將樣品置于稱(chēng)量盤(pán)上，關(guān)上玻璃門(mén)，待屏幕上顯示的數(shù)于稱(chēng)量盤(pán)上，關(guān)上玻璃門(mén)，待屏幕上顯示的數(shù)字穩(wěn)定后記錄下來(lái)，即為樣品的重量（字穩(wěn)定后記錄下來(lái)，即為樣品的重量（g g）。）。注意，每次稱(chēng)量前都必須按一下回零擋注意，每次稱(chēng)量前都必須按一下回零擋“TARETARE”，使屏幕上顯示，使屏幕上顯示0.00000.0000。稱(chēng)量室內(nèi)尤。稱(chēng)量室內(nèi)尤其是稱(chēng)量盤(pán)上必須保持清潔、干燥；若有藥品其是稱(chēng)量盤(pán)上必須保持清潔、干燥；若有藥品撒落，立即用軟毛刷清理干凈撒落，立即用軟毛刷清理干凈。 2.HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋型數(shù)顯恒溫水浴鍋 3.101C-3型電熱鼓

5、風(fēng)干燥箱型電熱鼓風(fēng)干燥箱 l操作指南：插上電源插頭，按下綠按鈕（電源開(kāi)關(guān)）操作指南：插上電源插頭，按下綠按鈕（電源開(kāi)關(guān)）和黃按鈕（鼓風(fēng)開(kāi)關(guān)），將和黃按鈕（鼓風(fēng)開(kāi)關(guān)），將“設(shè)定設(shè)定/ /測(cè)量測(cè)量”按鈕置于按鈕置于設(shè)定擋，調(diào)節(jié)設(shè)定擋，調(diào)節(jié)“溫度設(shè)定溫度設(shè)定”旋鈕，使顯示器中的數(shù)字旋鈕，使顯示器中的數(shù)字為所需的溫度，再將為所需的溫度，再將“設(shè)定設(shè)定/ /測(cè)量測(cè)量”按鈕置于測(cè)量擋，按鈕置于測(cè)量擋，此時(shí)顯示器中的數(shù)字表示烘箱內(nèi)的實(shí)際溫度。將加熱此時(shí)顯示器中的數(shù)字表示烘箱內(nèi)的實(shí)際溫度。將加熱旋鈕（一共有旋鈕（一共有3 3個(gè)）打到適當(dāng)?shù)膿跷唬嫦溟_(kāi)始加熱。個(gè)）打到適當(dāng)?shù)膿跷?，烘箱開(kāi)始加熱。此時(shí)綠燈亮，當(dāng)溫度

6、達(dá)到所設(shè)定值時(shí)，紅燈亮，烘箱此時(shí)綠燈亮，當(dāng)溫度達(dá)到所設(shè)定值時(shí)，紅燈亮，烘箱停止加熱。以后烘箱會(huì)一直通過(guò)不斷的加熱停止加熱。以后烘箱會(huì)一直通過(guò)不斷的加熱- -停止過(guò)停止過(guò)程來(lái)保持恒溫，紅綠燈也會(huì)相應(yīng)地交替閃亮。請(qǐng)注意，程來(lái)保持恒溫，紅綠燈也會(huì)相應(yīng)地交替閃亮。請(qǐng)注意，本實(shí)驗(yàn)由于設(shè)定溫度為本實(shí)驗(yàn)由于設(shè)定溫度為120120，故在取出被烘干物品，故在取出被烘干物品時(shí)，請(qǐng)戴上手套時(shí)，請(qǐng)戴上手套。 4.索氏提取儀索氏提取儀l由冷凝管、抽提管和由冷凝管、抽提管和平底燒瓶三個(gè)部件組平底燒瓶三個(gè)部件組成，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)磨口相成，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)磨口相對(duì)接。對(duì)接。 l安裝裝置：用鐵架臺(tái)、只十字夾、只燒瓶安裝裝置：用鐵架臺(tái)、只十字

7、夾、只燒瓶夾、根乳膠管和套索氏提取儀來(lái)安裝裝置。夾、根乳膠管和套索氏提取儀來(lái)安裝裝置。注意按照注意按照由下而上的順序來(lái)安裝由下而上的順序來(lái)安裝。固定點(diǎn)分別固定點(diǎn)分別是平底燒瓶的頸部和提取管的頸部是平底燒瓶的頸部和提取管的頸部，索氏提取，索氏提取儀的高度以平底燒瓶的瓶頸略高于恒溫水浴鍋儀的高度以平底燒瓶的瓶頸略高于恒溫水浴鍋的液面為宜。注意：用燒瓶夾夾玻璃儀器時(shí)，的液面為宜。注意：用燒瓶夾夾玻璃儀器時(shí)，要先用手找好感覺(jué)，不能太緊（否則會(huì)夾破）要先用手找好感覺(jué)，不能太緊（否則會(huì)夾破）也不能太松（否則會(huì)打滑而導(dǎo)致索氏提取儀的也不能太松（否則會(huì)打滑而導(dǎo)致索氏提取儀的標(biāo)準(zhǔn)磨口接口漏氣）。標(biāo)準(zhǔn)磨口接口漏氣

8、）。 5.其它器材：其它器材： l不銹鋼鑷子、藥勺、不銹鋼鑷子、藥勺、濾紙、鐵架臺(tái)、十字濾紙、鐵架臺(tái)、十字夾、燒瓶夾、手套、夾、燒瓶夾、手套、乳膠管。乳膠管。 四、實(shí)驗(yàn)試劑四、實(shí)驗(yàn)試劑l稱(chēng)取稱(chēng)取10201020克樣品?？藰悠?。l將樣品在將樣品在8080100100電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)烘去水分，一般烘烘去水分，一般烘4h4h，烘干時(shí)要避免過(guò)，烘干時(shí)要避免過(guò)熱。樣品顆粒不宜太大，一般要在研缽熱。樣品顆粒不宜太大，一般要在研缽中研碎樣品。樣品若是液體，應(yīng)將一定中研碎樣品。樣品若是液體，應(yīng)將一定體積的樣品滴在濾紙上，在體積的樣品滴在濾紙上，在60608080電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)烘干后，再進(jìn)行實(shí)

9、驗(yàn)。電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)烘干后，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。l乙醇乙醇 五、實(shí)驗(yàn)操作五、實(shí)驗(yàn)操作l準(zhǔn)備工作：將恒溫水浴鍋的水溫事先加熱（準(zhǔn)備工作：將恒溫水浴鍋的水溫事先加熱（8080）。務(wù)必保證提取管和燒）。務(wù)必保證提取管和燒瓶?jī)?nèi)干燥、潔凈；若否，將其洗凈并置于干燥箱內(nèi)瓶?jī)?nèi)干燥、潔凈；若否，將其洗凈并置于干燥箱內(nèi)120120烘干。烘干。 l折濾紙斗：取一張折濾紙斗：取一張11cm11cm的濾紙，折成筒狀，再將其一端折起來(lái)封死，便的濾紙，折成筒狀，再將其一端折起來(lái)封死，便做成了濾紙斗。做成了濾紙斗。l稱(chēng)樣：取干燥的姜黃粉作為實(shí)驗(yàn)樣品。將濾紙斗在電子天平上稱(chēng)重，然后稱(chēng)樣：取干燥的姜黃粉作為實(shí)驗(yàn)樣品。將濾紙斗在電子天平

10、上稱(chēng)重，然后用藥勺取樣品裝入濾紙斗中，把濾紙斗的開(kāi)口處折起來(lái)封死；防止樣品泄用藥勺取樣品裝入濾紙斗中，把濾紙斗的開(kāi)口處折起來(lái)封死；防止樣品泄出濾紙斗。出濾紙斗。調(diào)整濾紙斗的高度，使其放在抽提管中時(shí)略低于虹吸管的上彎調(diào)整濾紙斗的高度，使其放在抽提管中時(shí)略低于虹吸管的上彎頭處。頭處。將裝好樣品的濾紙斗放在電子天平上稱(chēng)重，兩質(zhì)量之差即為樣品的將裝好樣品的濾紙斗放在電子天平上稱(chēng)重，兩質(zhì)量之差即為樣品的質(zhì)量。質(zhì)量。 提?。簩⑺魇咸崛x從下至上安裝。首先安裝好燒瓶，并調(diào)整提?。簩⑺魇咸崛x從下至上安裝。首先安裝好燒瓶，并調(diào)整其高度，使其剛好能浸入水浴鍋中的水中。將裝置從水浴鍋的其高度，使其剛好能浸入水浴鍋

11、中的水中。將裝置從水浴鍋的水中取出，繼續(xù)安裝提取管，把裝有樣品的濾紙斗放入提取管水中取出，繼續(xù)安裝提取管，把裝有樣品的濾紙斗放入提取管內(nèi)，向提取管中緩緩倒入乙醇直至液面達(dá)到虹吸管上彎頭部，內(nèi)，向提取管中緩緩倒入乙醇直至液面達(dá)到虹吸管上彎頭部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入乙醇，使其液面達(dá)到第一次正好虹吸一次；再向提取管中倒入乙醇，使其液面達(dá)到第一次液面的一半。用乳膠管將冷凝管與自來(lái)水管相連，將冷凝管安液面的一半。用乳膠管將冷凝管與自來(lái)水管相連，將冷凝管安裝到提取管上，檢查一下，確保所有接口均對(duì)接完好（不漏氣，裝到提取管上，檢查一下，確保所有接口均對(duì)接完好（不漏氣，不打滑）。輕輕打開(kāi)自來(lái)水（冷凝

12、用），將索氏提取儀整個(gè)裝不打滑）。輕輕打開(kāi)自來(lái)水（冷凝用），將索氏提取儀整個(gè)裝置放入恒溫水浴鍋中加熱提?。ㄋ疁刂梅湃牒銣厮″佒屑訜崽崛。ㄋ疁?090左右。提取時(shí)間左右。提取時(shí)間2 24h4h，約虹吸約虹吸2020次以上，記錄每次虹吸所需的時(shí)間和虹吸次數(shù)。次以上，記錄每次虹吸所需的時(shí)間和虹吸次數(shù)。附注：附注：若要將樣品的姜黃素提取完全，提取時(shí)間至少為若要將樣品的姜黃素提取完全，提取時(shí)間至少為12h12h以上。由于以上。由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間的限制，我們的提取率只能達(dá)到實(shí)驗(yàn)時(shí)間的限制，我們的提取率只能達(dá)到9090左右。左右。 回收乙醇：提取回收乙醇：提取2h2h后，當(dāng)乙醇在提取管中的液面后，當(dāng)乙醇在提取管

13、中的液面即將達(dá)到虹吸管的上彎頭處時(shí)，從水浴鍋中取出即將達(dá)到虹吸管的上彎頭處時(shí)，從水浴鍋中取出索氏提取儀裝置，讓乙醇虹吸而流入瓶中，取下索氏提取儀裝置，讓乙醇虹吸而流入瓶中，取下回流管，取出濾紙桶及姜黃粉，繼續(xù)放入恒溫水回流管，取出濾紙桶及姜黃粉，繼續(xù)放入恒溫水浴鍋中加熱回收乙醇（取下平底燒瓶，回收提取浴鍋中加熱回收乙醇（取下平底燒瓶，回收提取管中的乙醇）直至冷凝管下端無(wú)乙醇滴下，表明管中的乙醇）直至冷凝管下端無(wú)乙醇滴下，表明平底燒瓶中的乙醇已經(jīng)蒸干。注意：必須蒸干后平底燒瓶中的乙醇已經(jīng)蒸干。注意：必須蒸干后才能放入干燥箱烘干，否則會(huì)引起火災(zāi)。才能放入干燥箱烘干，否則會(huì)引起火災(zāi)。稱(chēng)量粗浸膏質(zhì)量：

14、將平底燒瓶放入稱(chēng)量粗浸膏質(zhì)量：將平底燒瓶放入120120的電熱的電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘鼓風(fēng)干燥箱中烘15min15min，取出冷卻后稱(chēng)重（須戴，取出冷卻后稱(chēng)重（須戴手套，以免燙傷）。添加適量乙醇溶解后加入適手套，以免燙傷）。添加適量乙醇溶解后加入適量硅膠粉，將燒瓶放入熱水中讓乙醇蒸發(fā)，到處量硅膠粉，將燒瓶放入熱水中讓乙醇蒸發(fā)，到處干粉。再將平底燒瓶用洗滌劑洗凈，于干粉。再將平底燒瓶用洗滌劑洗凈，于120120的的電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘干（約電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘干（約15min15min），取出冷卻），取出冷卻后稱(chēng)重，兩者的質(zhì)量之差就是粗浸膏的質(zhì)量。后稱(chēng)重，兩者的質(zhì)量之差就是粗浸膏的質(zhì)量。 l 清潔清潔

15、從提取管中取出濾紙斗，清洗提從提取管中取出濾紙斗，清洗提取管，整理好桌面上的儀器和試劑，并取管，整理好桌面上的儀器和試劑，并注意清潔自己的操作臺(tái)，請(qǐng)老師驗(yàn)收注意清潔自己的操作臺(tái)，請(qǐng)老師驗(yàn)收。 l 計(jì)算計(jì)算 樣品粗浸膏的含量（樣品粗浸膏的含量（% %）= =（粗浸（粗浸膏的質(zhì)量膏的質(zhì)量/ /樣品的質(zhì)量）樣品的質(zhì)量）* *100% 100% 索氏提取儀示意圖索氏提取儀示意圖 記錄與計(jì)算匯總記錄與計(jì)算匯總 虹吸次數(shù) 12345678910虹吸時(shí)間濾紙斗質(zhì)量 （g） 濾紙斗+樣品質(zhì)量（g） 樣品質(zhì)量（g） 燒瓶+粗浸膏質(zhì)量（g） 燒瓶質(zhì)量（g） 粗浸膏質(zhì)量（g） 虹吸時(shí)間（min） 提取次數(shù) 樣品中粗

16、浸膏的含量（%） 計(jì)算公式X=(m1-m2)/m100式中：X-樣品中粗脂肪的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%; m-樣品的質(zhì)量,g; m0 -脂肪燒瓶的質(zhì)量,g;m1 -脂肪和脂肪燒瓶的質(zhì)量,g.樣品的質(zhì)量m/g脂肪燒瓶的質(zhì)量m0/g脂肪和脂肪燒瓶的質(zhì)量m1/g第一次 第二次第 三次恒 重值思考題思考題1.簡(jiǎn)述索氏抽提器的提取原理及應(yīng)用范圍？2.潮濕的樣品可否采用乙醚直接提取？為什么？答：不可以，乙醚會(huì)溶解水，把水帶入脂層中，會(huì)影響乙醚的滲透與提取效果。3.使用乙醚作脂肪提取溶劑時(shí)，應(yīng)注意的事項(xiàng)有哪些？為什么？答：乙醚是易燃，易爆物質(zhì)，應(yīng)注意通風(fēng)并且不能有火源。乙醚若放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)產(chǎn)生過(guò)氧化物。過(guò)氧化物不穩(wěn)定，當(dāng)蒸餾或干燥時(shí)會(huì)發(fā)生爆炸，故使用前應(yīng)嚴(yán)格檢查，并除去過(guò)氧化物。檢查方法：取5mL乙醚于試管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振搖1min。靜置分層。若有過(guò)氧化物則放出游離碘，水層是黃色（或加4滴5 g/L淀粉指示劑顯藍(lán)色），則該乙醚需處理后使用。去除過(guò)氧化物的方法：將乙醚倒入蒸餾瓶中加一段無(wú)銹鐵絲或鋁絲，收集重蒸餾乙醚。4.影響萃取的萃取效率的因素？答：物質(zhì)的性質(zhì)、物料與溶劑的比例、時(shí)間、溫度、濃度、萃取劑與被萃取物的溶解度差值等因素有關(guān)。5.為什么包裝試樣的濾紙的上部不能高