1、 HLA-B*1502與卡馬西平誘導(dǎo)的毒性作用（臺(tái)灣） HLA-B*13:01與氨苯砜超敏綜合征第1頁(yè)/共41頁(yè)HLA與藥物超敏反應(yīng)HLA-B*1502與卡馬西平誘導(dǎo)的毒性作用（臺(tái)灣）2011The New England Journal of Medicine第2頁(yè)/共41頁(yè)HLA與藥物超敏反應(yīng)HLA-A*3101與卡馬西平誘導(dǎo)的超敏反應(yīng)（歐洲）2011The New England Journal of Medicine第3頁(yè)/共41頁(yè)HLA與藥物超敏反應(yīng)HLA-B*57:01與阿巴卡韋超敏反應(yīng)2012nature第4頁(yè)/共41頁(yè)HLA與藥物超敏反應(yīng)HLA-B*13:01與氨苯砜超敏綜合征

2、2013The New England Journal of Medicine第5頁(yè)/共41頁(yè)全基因關(guān)聯(lián)分析（GWAS）在人類全基因組范圍內(nèi)找出存在的序列變異，即單核苷酸多態(tài)性（SNP），從中篩選出與疾病相關(guān)的SNPs。患者全基因組范圍內(nèi)檢測(cè)出的SNP位點(diǎn)與對(duì)照組進(jìn)行比較，找出所有的變異等位基因頻率，從而避免了像候選基因策略一樣需要預(yù)先假設(shè)致病基因。第6頁(yè)/共41頁(yè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)流程第7頁(yè)/共41頁(yè)單核苷酸多態(tài)性（SNPs） 由單個(gè)核苷酸A,T,C或G的改變而引起的DNA序列的改變，從而造成的不同物種間或人體內(nèi)染色體基因組的多樣性。例如，來(lái)自兩個(gè)不同個(gè)體的DNA片段，其一個(gè)單核苷酸中的序列AAGCC

3、TA到AAGCTTA存在差異性。這種情況下，我們稱之為等位基因。 單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)的分布是不均勻的；單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)在非編碼區(qū)比在編碼區(qū)更常見(jiàn)；或者一般來(lái)說(shuō)，是自然選擇發(fā)揮著作用，傾向于保留最利于遺傳適應(yīng)性的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)。第8頁(yè)/共41頁(yè)人類白細(xì)胞抗原（HLA） 組織相容性抗原按其免疫性能可分為三類： 第一類是移植抗原，負(fù)責(zé)排斥外來(lái)的組織，存在于殺傷性T淋巴細(xì)胞中，為細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)所必需，人的I類基因編碼移植抗原HLA-A，B，C； 第二類是參與免疫反應(yīng)過(guò)程中細(xì)胞之間的信息傳遞，人的類區(qū)稱為HLA-D，又可分為4個(gè)亞區(qū)，排列順序?yàn)镈R，DQ，DZDO，DP； 補(bǔ)體蛋白質(zhì)提供了第三

4、類MHC，基因座位于S區(qū)，其編碼的蛋白 質(zhì)是血清的組成成分，負(fù)責(zé)同抗原抗體復(fù)合物作用以引起細(xì)胞的裂解。第9頁(yè)/共41頁(yè)第10頁(yè)/共41頁(yè)HLA-B*1502與卡馬西平誘導(dǎo)的毒性作用（臺(tái)灣）第11頁(yè)/共41頁(yè)2021-10-23第6號(hào)染色體第12頁(yè)/共41頁(yè)2021-10-23東南亞地區(qū). HLA-B15 等位基因在中國(guó)南部最普遍 第13頁(yè)/共41頁(yè)卡馬西平適應(yīng)癥：1癲癇發(fā)作2.三叉神經(jīng)痛和舌咽神經(jīng)痛發(fā)作3.預(yù)防或治療躁狂-抑郁癥4.中樞性部分性尿崩癥5. 酒精癖的戒斷綜合征第14頁(yè)/共41頁(yè)SJS-TEN StevensJohnson綜合征（SJS）：先出現(xiàn)類似流行性感冒的前驅(qū)癥狀，包括發(fā)燒、

5、喉嚨痛、頭痛，接著在皮膚出現(xiàn)錢(qián)幣大小的環(huán)狀紋（標(biāo)靶病征），面積逐漸擴(kuò)大，隨后出現(xiàn)水皰。 毒性表皮壞死綜合征（TEN）：典型發(fā)病開(kāi)始為疼痛性局部紅斑，很快蔓延，在紅斑上發(fā)生松弛性大泡或表皮剝離。若遇輕度觸碰或牽拉可導(dǎo)致大面積剝離。發(fā)生大面積裸露時(shí)可伴有疲乏、寒戰(zhàn)、肌痛和發(fā)熱。病人在2472小時(shí)內(nèi)發(fā)生廣泛的糜爛,包括所有粘膜。此時(shí)病情極為嚴(yán)重，受累皮膚類似度燙傷。可因液體和電解質(zhì)失衡和多臟器合并癥而導(dǎo)致死亡。第15頁(yè)/共41頁(yè)SJSTEN第16頁(yè)/共41頁(yè)研究背景 卡馬西平，抗癲癇和促進(jìn)情緒穩(wěn)定的藥物，在東南亞國(guó)家中是導(dǎo)致SJS-TEN及相關(guān)疾病主要原因。 卡馬西平導(dǎo)致的SJS-TEN與HLA-B

6、*1502顯著相關(guān)。 通過(guò)對(duì)HLA-B*1502病人的篩選，可以降低卡馬西平導(dǎo)致的SJS-TEN的發(fā)生。第17頁(yè)/共41頁(yè)研究方法 從23家醫(yī)院招募的4877名未服用卡馬西平的患者，對(duì)其外周血進(jìn)行DNA測(cè)序看是否攜帶HLA-B*1502等位基因。對(duì)攜帶HLA-B*1502等位基因（7.7%）的病人，建議其不要服用卡馬西平，改用其他藥物替代。對(duì)不攜帶HLA-B*1502等位基因（92.3%）的病人建議其服用卡馬西平。電話回訪每周一次共兩個(gè)月看是否有反應(yīng)。對(duì)照組是SJS-TEN歷史上估計(jì)的發(fā)生率。第18頁(yè)/共41頁(yè)第19頁(yè)/共41頁(yè)第20頁(yè)/共41頁(yè)研究結(jié)果4.3%的患者發(fā)生輕微皮疹；0.1%的患

7、者發(fā)生彌漫性皮疹。服用卡馬西平的HLA-B*1502陰性患者沒(méi)有一例發(fā)生SJS-TEN。相反，卡馬西平誘導(dǎo)的SJS-TEN歷史發(fā)生率（）轉(zhuǎn)化過(guò)來(lái)應(yīng)該有十例病人發(fā)生（）。第21頁(yè)/共41頁(yè)2021-10-23HLA-B*1502第22頁(yè)/共41頁(yè)第23頁(yè)/共41頁(yè)第24頁(yè)/共41頁(yè)研究結(jié)論 攜帶有HLA-B*1502等位基因的病人的確定及對(duì)該類病人避免使用卡馬西平可以有效降低卡馬西平誘導(dǎo)產(chǎn)生的SJS-TEN的發(fā)生。第25頁(yè)/共41頁(yè)HLA-B*13:01與氨苯砜超敏綜合征第26頁(yè)/共41頁(yè)2021-10-23第27頁(yè)/共41頁(yè)氨苯砜 為砜類抑菌劑，對(duì)麻風(fēng)桿菌有較強(qiáng)的抑菌作用，大劑量時(shí)顯示殺菌作用

8、。 可以單獨(dú)使用，也可與其他藥物聯(lián)合使用，用于治療感染性疾病如麻風(fēng)、瘧疾、HIV感染后卡氏肺囊蟲(chóng)病等，也可用于治療以嗜酸性粒細(xì)胞或中性粒細(xì)胞增多為主要特征的慢性炎癥性疾病如胞疹樣皮炎、膿皰性皮膚病等。Emil Fromm (18651928）第28頁(yè)/共41頁(yè)第29頁(yè)/共41頁(yè)氨苯砜超敏綜合征 氨苯砜(DDS)超敏綜合征是在服用DDS后出現(xiàn)的一組以發(fā)熱、皮疹、肝損害、黃疸、淋巴結(jié)腫大及溶血性貧血為主要表現(xiàn)的綜合征，是DDS所致的相對(duì)少見(jiàn)的嚴(yán)重藥物不良反應(yīng)。如果處理不及時(shí)、不正確會(huì)因肝功能衰竭很快死亡。第30頁(yè)/共41頁(yè)研究背景 氨苯砜用于感染與炎性疾病的治療，0.5%3.6%接受該藥治療的患者

9、可發(fā)生氨苯砜超敏綜合征，報(bào)告的與之相關(guān)的死亡率為9.9%。迄今尚無(wú)用于預(yù)測(cè)氨苯砜超敏危險(xiǎn)的檢測(cè)方法。第31頁(yè)/共41頁(yè)研究方法 采用單核苷酸多態(tài)性（SNPs）和差補(bǔ)計(jì)算得出HLA分子的對(duì)數(shù)加法檢驗(yàn)方法，進(jìn)行了一項(xiàng)納入將氨苯砜作為麻風(fēng)多藥治療之一的872例（39例DHS，833例對(duì)照）研究對(duì)象的全基因組關(guān)聯(lián)分析（GWAS）。在重復(fù)分析中，我們?cè)诹硗?1例氨苯砜超敏綜合征患者和1089例對(duì)照樣本中對(duì)24個(gè)SNPs進(jìn)行了基因分型，并對(duì)一組獨(dú)立的37例氨苯砜超敏綜合征患者和201例對(duì)照樣本中的HLA-B和HLA-C區(qū)域進(jìn)行了分辨率達(dá)到4位數(shù)的二代測(cè)序。第32頁(yè)/共41頁(yè)第33頁(yè)/共41頁(yè)研究結(jié)果 GW

10、AS結(jié)果顯示，位于HLA-B與MICA位點(diǎn)間的SNP rs2844573與麻風(fēng)患者中的氨苯砜超敏綜合征顯著相關(guān)（比值比為，P=3.8410-13）。HLA-B*13:01被證實(shí)為氨苯砜超敏綜合征的危險(xiǎn)因素（比值比為，P=6.8410-25）。攜帶HLA-B*13:01位點(diǎn)預(yù)測(cè)氨苯砜超敏綜合征的敏感性為85.5%，特異性為85.7%，如不攜帶該位點(diǎn)，則氨苯砜超敏綜合征危險(xiǎn)降低7倍（從1.4%到0.2%）。約2%20%的中國(guó)人群、1.5%的日本人群、1%12%的印度人群及2%4%的東南亞亞洲人群攜帶HLA-B*13:01位點(diǎn)，歐洲和非洲人群大都不攜帶該位點(diǎn)。第34頁(yè)/共41頁(yè)第35頁(yè)/共41頁(yè)顯示

11、HLA-B*13:01在MHC區(qū)域作為等位基因與氨苯砜超敏綜合征有很強(qiáng)的相關(guān)性。第36頁(yè)/共41頁(yè)顯示第37頁(yè)/共41頁(yè)研究結(jié)論 HLA-B*13:01與麻風(fēng)患者發(fā)生氨苯砜超敏綜合征有關(guān)。第38頁(yè)/共41頁(yè)相關(guān)機(jī)制研究1.人類白細(xì)胞抗原是一類呈遞病原衍生多肽給T細(xì)胞進(jìn)而啟動(dòng)免疫反應(yīng)的高度多態(tài)性蛋白質(zhì)。HLA多態(tài)性主要體現(xiàn)在“抗原結(jié)合縫”上，因而使不同的同種異型HLA篩選的自我衍生的和病原體衍生的抗原多肽形成多樣性。2. 越來(lái)越多的基于免疫的藥物反應(yīng)，包括“阿巴卡韋超敏反應(yīng)綜合癥”（AHS）和“卡馬西平”誘導(dǎo)的“StevensJohnson”綜合癥（SJS）等與特異的HLA等位基因有關(guān)。第39頁(yè)/共41頁(yè)2021-10-23相關(guān)機(jī)制研究3.研究表明未經(jīng)修飾的阿巴卡韋與HLA-B*57:01非共價(jià)結(jié)合，橫跨“抗原結(jié)合縫”的底部，伸入F口袋，F(xiàn)口袋是羧基端色氨酸錨定蛋白結(jié)合HLA-B*57:01的部位。阿巴卡韋與HLA-B*57:01精美特異性的結(jié)合，改變了“抗原結(jié)合縫”的形狀和化學(xué)特性，因此改變了內(nèi)生肽結(jié)合HLA-B*57：01的能力。通過(guò)這種方式，阿巴