1、一、填空題1 、植物組織培養成功與否，一方面取決于培養材料本身的性質；另一方面取決于培養基的種類和成分。2.一個已停止分裂的成熟細胞轉變為_分生 _狀態，并形成 _細胞團的現象稱為 脫分化 。3 植物組織培養技術的三大難題分別為褐變、污染和玻璃化。4 具有防止褐變作用的維生素是_維生素 C_。5 病毒在植物體內的運轉方式有短距離運轉和長距離運轉兩種，前者經過胞間連絲向鄰近細胞中擴散，速度很慢。后者通過寄主植物韌皮部的疏導組織隨著營養輸送進行轉移，速度很快。6 、6-BA / NAA的高低決定了外植體的發育方向，比值低時促進 _根 _的生長，這時 _分化 _占主導地位；比值高促進_苗 _的生長，

2、這時 _分裂 _占主導地位；懸浮培養的材料必須達到懸浮培養物質分散性多 、細胞核較小均一性好和 生長迅速等三個要求。7 、連續培養是指在培養過程中，以不斷抽取用過的培養基并注入 新鮮的培養基，使培養不斷得到養分補充，保持其穩定狀態的培養。8 培養基的母液一般是配成大量元素，微量元素，維生素和氨基酸類存放備用。培養基中組成大量元素的鹽類分別是硝酸鉀和 硝酸銨。9 一般情況下，細胞分裂/ 生長素的比值高，有利于愈傷組織長芽，比值低有利于長 根。10 在植物的材料滅菌中，酒精的濃度用70%75% ，處理時間一般在幾秒至幾十秒范圍，是靠_使蛋白質凝固 _殺菌的；升汞的濃度一般用1%2% ，處理的時間在

3、510min范圍，升汞是靠 _Hg2+_ 殺菌的；殺菌劑中的次氯酸鈉是靠_ClO-_ 殺菌的。11 培養植物適宜的溫度大多在25 2，光照強度在 1000lx ，光照時間在 16h 。12 、進行熱處理植物脫毒的溫度在_85_左右。13422-EDTA_ 。、配制螯合態鐵鹽需要的成分是 _FeSO 7HO_和_Na14、培養基中有機態 N 素營養主要是 硝態氮 和 銨態氮 。15、原生質體的融合可實現 _體細胞 _的雜交，其融合的方式分為 _自發融合 _和_誘導融合 _兩類。16、從再生植株倍性來看，小孢子培養通常產生單倍體 植株，胚培養通常產生 二倍體 植株，胚乳培養通常產生三倍體植株。17

4、.進行植物組織培養最基本的前提條件是配置培養基 。18. 離體葉片在誘導愈傷組織的培養基上培養，一般從葉緣或 葉脈 處容易發生愈傷組織。19. 某些生長調節物質及抗生素、酶類物質遇熱不穩定，對其滅菌時不能進行高壓蒸汽滅菌，而要進行過濾方法除菌。20 配制培養基時，一般先配制母液，其目的在于_使用方便 _和_用量準確 _。21 分生區域內無維管束，病毒只能通過_胞間連絲 _傳遞。22 在無毒苗的組織培養中，外植體的大小與其成活率成_正比 _，而與脫毒效果成 _反比 _。二、單項選擇題1 、( C)可作為植物外植體的表面消毒劑是。A. 漂白粉和水B. 次氯酸鈉溶液和聚乙二醇C. 氯化汞和新潔爾滅D

5、.酒精和氯化鈉2 、( B）大多數植物組織培養最適溫度一般為。12223 、(A ) 在適宜的培養條件下，還可使愈傷組織長期傳代生存下去，這種培養稱為。A . 繼代培養B. 再分化培養C.胚狀體培養D. 馴化4 、( B ) 大多數植物組織培養培養基最適pH 為。B.C.D. 、(A ）外植體褐變的原因是。A.外植體中的多酚氧化酶被激活，使細胞的代謝發生變化。B. 外植體中的琥珀酸脫氫酶被激活，使細胞的代謝發生變化。C. 外植體中的磷酸化酶被激活，使細胞的代謝發生變化。D. 外植體中的三磷酸腺苷酶被激活，使細胞的代謝發生變化。6 植物組培初代接種易污染的可能原因BC。A 材料過嫩B 材料過老C

6、 接種材料過大D 每瓶接種數量太少7.影響培養基凝固程度因素有_AD。A 瓊脂的質量好壞 ； B 高壓滅菌的時間； C 高壓滅菌的溫度； D 培養基的 PH8 愈傷組織不分化、生長過旺、疏松，其原因有CA 糖的濃度過高B 培養基的滲透壓過低C 生長素和分裂素過高D 生長素和分裂素過低9 有一種植物經初代培養得到株無菌苗，以后按每天繼代增殖一次，每次增殖倍數為倍，一年后繁殖苗有 CA3410株 B4 312株 C 310株 D 412 株10.下列不屬于生長素類的植物激素是 _AC。NAA （萘乙酸）、IBA （吲哚丁酸）、IAAABA； BNAA； CZT； D D6（吲哚乙酸 ）、苯乙酸（

7、PAA ）、2 ， 4 11.植物組織培養可用于： _ABCD。D（合成植物生長素 ）都屬于生長素類，A 快速繁殖； B 脫除病毒； C 提高品質； D 育種； E 減少品種變異有雙重效應， 可以促進生根、 頂端優勢。12 、誘導試管苗分化叢芽，培養基的調整應 _B。 不同器官對 IAA 敏感性：根 芽 莖。A 加大生長素的濃度 B 加大分裂素的濃度C 加活性炭6-BA 是 6- 芐氨基嘌呤，細胞分裂素的D 降低鹽的濃度。13.下列不屬于 MS 中微量元素的鹽是 _ABD。一種，促進芽的形成，也可以誘導愈傷A NH 4NO 3；B KNO 3；C ； D14.對生根培養不起作用的激素是： _A

8、_。A GA； BIAA； CNAA ； DIBA15 、 (D ) 在下列選項中，不需要采用植物組織培養技術的是d。A 、利用基因工程培育抗棉鈴蟲的棉花植株B、利用細胞工程技術培養“番茄一馬鈴薯”雜種植株C、利用花藥離體培養得到單倍體植株D 、利用秋水仙素處理萌發的種子或幼苗，得到染色體數目加倍的植株16 、 ( C）植物組織培養形成的愈傷組織進行培養，又可以分化形成根、芽等器官，這一過程稱為。A 、脫分化B、去分化C、再分化D 、脫分化或去分化17 、 (B）下列哪種不是原生質體分離所用的酶_B。A 、纖維素酶B、淀粉酶C、果膠酶D 、半纖維素酶18 、 (A ) 在花藥培養中下列哪種不是

9、花粉的發育過程_A_。A 、營養細胞發育途徑B、生殖細胞發育途徑C、胚狀體發育途徑D 、花粉均等分裂途徑19 、 (D ) 下列哪種在 MS 培養基中不起促進生長作用_D。A 、氨基酸B、肌醇C、維生素D 、瓊脂20 、 ( B)下列技術培育出的新個體中，遺傳物質只來源于一個親本的是。細胞組織培養細胞融合扦插誘導產生多倍體雜交育種轉基因工程A 、B、C、D 、21 、 ( a)下列那種不是無性繁殖的器官。A 、種子B、枝條C、塊莖D 、塊根22 、 ( b ) 植物離體保存的主要步驟是離體培養物的保存 離體培養與祛除病原物。種質離體收集遺傳穩定性鑒定A 、B、C、D 、23 、 ( c) 原生

10、質體純化步驟大致有如下幾步。將收集到的濾液離心，轉速以將原生質體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準，一般以500r min離心 15min 。用吸管謹慎地吸去上清液。將離心下來的原生質體重新懸浮在洗液中(除不含酶外， 其他成分和酶液相同 )，再次離心， 去上清液，如此重復三次。將原生質體混合液經篩孔大小為40 100um 的濾網過濾，以除去未消化的細胞團塊和篩管、導管等雜質，收集濾液。用培養基清洗一次， 最后用培養基將原生質調到一定密度進行培養。一般原生質體的培養密度為10 410 6 ml 。A 、B、C、D 、24 、 ( c)下列有關細胞全能性的含義，正確的是。A 、每個生物體內的所有細胞

11、都具有相同的功能B、生物體內的任何一個細胞可以完成該個體的全部功能C、生物體的每一個活細胞都具有發育成完整個體的潛能D 、生物體的每個細胞都經過產生、分裂、分化、生長、衰老、死亡的全過程25 、 (d)下列不屬于活性炭在組織培養中的作用是。A 、吸附有毒物質B、減少褐變，防止玻璃化C、創造黑暗環境，增加培養基的通透性，利于根的生長D 、增加培養基中的養分三、判斷題1 、（ ）胚狀體的維管組織與母體結構和外植體的維管組織一般沒有聯系。2 、（ ）培養基當中生長素與細胞分裂素的比例高時，僅形成愈傷組織。3 、（ ）對植物器官或愈傷組織上分離出的單細胞（或小細胞團）進行培養，形成單細胞無性系或再生植

12、株的技術稱為植物組織培養技術。4 、（ ）植物組織與細胞培養方法生產出藥品，農藥，香料，色素及食品添加劑。5 、（ ）超低溫保存是指在 -100 溫下使細胞代謝和生長處于基本停止的狀態，在適宜的條件下可迅速繁殖，生出新的植株，并保持原來的遺傳特性。6 、（ ）FAD 法可顯示細胞內脫氫酶的活性，脫氫酶使FAD 還原生成一種紅色的物質，作為檢驗活細胞的方法。7 、（ ）蔗糖可作為滲透性冰凍保護劑。8 、（ ）一方親本的細胞核和細胞質分另一方親本的少量核物質和全部細胞質融合9 、（ ）有些植物對病毒極為敏感，一旦感染病毒就會在其葉片乃至全株上表現特有的病斑，把這種植物稱為病毒敏感植物或指示植物。1

13、0 （ ）花藥和花粉培養可獲得單倍體植株。叫細胞質雜交。四、名詞解釋1、脫分化有高度分化能力 的植物組織或器官，產生愈傷組織 的過程。2、愈傷組織植物各器官的 外植體在離體的條件下，經細胞 脫分化（等一系列過程 改變了它們原有的特性）而形成的一種能 迅速增殖 的不特定結構和功能 的細胞團，稱為愈傷組織。3、人工種子是指將植物離體培養 產生的體細胞胚包埋 在含有營養成分和保護功能的物質中，在適宜的條件下 發芽出苗的顆粒體 。4、胚狀體 在離體或活體 條件下，通過體細胞經原胚期、球形胚期、心形胚期、魚雷胚期和子葉期等階段形成的胚叫體細胞胚狀體。5、植物快速繁殖利用離體培養技術 ，將來自 優良植株

14、的器官、組織和細胞 進行離體培養 ，在短期內獲得大量遺傳性一致 的個體的方法6、看護培養 把單個細胞置于一塊 活躍生長的愈傷組織 （也稱看護愈傷組織， nursecalli ）上培養，在愈傷組織和培養的細胞之間用一片濾紙相隔 。這培養的單細胞長出微小的細胞團之后，再移至瓊脂培養基上 。7 、植物種質保存利用天然或人工創造的適宜環境，使個體中所含有 的遺傳物質保持遺傳完整性，有高的活力，能通過繁殖將其遺傳特性傳遞下去。8 、連續培養是利用特別的培養容器 進行大規模細胞培養 的一種方式。連續培養過程中，不斷注入新鮮 培養基，排掉等體積的用過的培養基 ，培養液中的營養物質得到不斷補充。9 、馴化或煉

15、苗 :在移植之前必須對試管苗進行提高其適應能力的鍛煉，使植株生長粗壯，增強小苗體質以提高移苗成活率。同時進一步將瓶內植物打開進行煉苗。使試管苗慢慢適應外界環境。這個過程叫做馴化或煉苗。有瓶煉和盤煉，移栽方式有容器移栽和大田移栽。五、簡答題（一）、某培養基的配方是MS BAmg/L mg/L IBAmg/L+ %蔗糖瓊脂粉。 MS 母液的濃度分別是：大量元素50 倍，微量元素 100 倍，鐵鹽 20 倍，有機物 100 倍； BA 母液濃度mg/ml，NAA母液濃度 ml ， IBA 母液濃度 ml 。要配制 800ml 該培養基，需要吸取各種母液各多少ml 分別稱取蔗糖、瓊脂粉各多少克（要求寫

16、出計算步驟）BA=*1=NAA=*=4ml大量元素 :800/50=16ml微量元素 :800/100=8mlIBA=*1/=4ml蔗糖 =800*%=20g瓊脂粉 =800*%=Ms 綠色書 23 頁表（二）、如何減輕試管苗玻璃化現象如何防止外植體的真菌污染1. （第四章 21 頁）（1 ）利用固體培養方法，增加瓊脂濃度，降低培養基中的滲透勢，造成細胞吸水阻遏?；蛱岣吲囵B基中蔗糖含量或加入滲透劑，減少培養基中植物材料可獲得的水分，這也可以抑制玻璃化的發生。（2 ）適當降低培養基中的細胞分裂素和赤霉素的濃度?；蛘撸m當增加培養基中Ca、 Mg 、Mn 、 K、P、Fe、Cu 、Zn 元素含量，

17、降低N 和 CL 元素比例，特別是降低胺態氮的濃度，提高硝態氮量。（3 ）增加自然光照。因為自然光中的紫外線能促進試管苗成熟。（4 ）改善培養器皿的氣體交換狀態封口膜（5 ）在培養基中添加其他物質。如添加馬鈴薯汁可降低油菜的玻璃苗的產生頻率。2.（第三章 11 頁）在接種前要求無菌室內做到用空氣循環過濾裝置使空氣過濾滅菌或通過紫外線照射滅菌外，再利用超凈工作臺接種前，應開機15min以達到空氣的充分過濾滅菌。而且接種時嚴格操作，如在接種前去掉橡皮筋，打開棉塞時動作要輕及去掉瓶塞后瓶子應拿成斜角，最好瓶口放在酒精火焰的前方等等。（三）、簡答出一般莖段是怎樣選材消毒和接種的選材：較幼嫩的材料，器官

18、的生理狀態和發肓年齡，外植體的大小為(第三章 3頁)消毒：自來水較長時間沖洗+70% 酒精浸泡植物種 + 無菌水沖洗 23 次+2%10%NaClO（%HgCl2 ）12min+ 無菌水沖洗 3 次。（第三章 5 頁）接種：左手拿三角瓶或果醬瓶，用右手輕輕取下封口膜或蓋子將三角瓶或果醬瓶的口靠近酒精燈火焰，瓶口稍微傾斜，這樣瓶口外部在火焰上旋轉灼燒數秒鐘，后用鑷子將外植體送入瓶中。 （第四章 4頁）六、論述題為什么莖尖培養可獲得無特定病毒植株怎樣獲得無特定病毒的試管苗獲得的無病毒苗用一種方法鑒定其真的無特定病毒的植株1 ）感染病毒植株的體內病毒的分布并不均勻，病毒的數量隨植株部位及年齡而異，越靠近莖頂端區域的病毒的感染深度越低，生長點則幾乎不含或含病毒很少。2 ） 1.了解植物攜帶何種病毒，病毒在體內的分布位置2.母體植株的選擇和預處理 3.莖尖的剝離 4.脫毒效果檢測3 ）取培養植株的葉片置于研缽中，加入少量的水和等量的L 磷酸緩沖液（ pH ），磨成勻獎，將其涂抹在指示植株葉片上，在指示植物的葉片撒上金剛砂，通過輕輕