1、* 含量測(cè)定方法學(xué)確認(rèn)方案日期： 2016年 1月驗(yàn)證方案審查與批準(zhǔn)您下面的簽字表明您已審閱此份驗(yàn)證方案并同意實(shí)施。姓名職務(wù)簽名日期起草人姓名職務(wù)簽名日期審核人審核人姓名職務(wù)簽名日期批準(zhǔn)人錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽 錯(cuò)誤! 未定義書簽?zāi)夸?. 目的 2. 范圍 3. 驗(yàn)證機(jī)構(gòu)與職責(zé) 4. 定義 5. 參考文件 6. 風(fēng)險(xiǎn)因素分析 7. 驗(yàn)證準(zhǔn)備 8. 檢測(cè)方法的描述 9. 驗(yàn)證實(shí)施 10. 偏差與變更 11. 確認(rèn)結(jié)果評(píng)定與

2、結(jié)論 13. 附錄目錄 錯(cuò)誤! 未定義書簽12. 確認(rèn)周期 錯(cuò)誤! 未定義書簽1目的對(duì)苦參膜中的含量測(cè)定檢測(cè)方法進(jìn)行確認(rèn)，確保方法的可行性，以便為有效控制苦參 膜的含量提供依據(jù)。2范圍本方案適用于*藥業(yè)股份有限公司齊墩果酸片含量測(cè)定方法的確認(rèn)。3驗(yàn)證機(jī)構(gòu)與職責(zé)3.1驗(yàn)證小組成員姓名所在部門在驗(yàn)證中擔(dān)任職務(wù)簽名日期組長(zhǎng)組員組員3.2職責(zé)321驗(yàn)證小組組長(zhǎng)職責(zé)3.2.1.1 保證確認(rèn)方案及各種檢查表的起草。3.2.1.2 保證在執(zhí)行前完成對(duì)確認(rèn)方案及各種檢查表的審核和批準(zhǔn)。3.2.1.3 負(fù)責(zé)對(duì)確認(rèn)小組成員進(jìn)行本方案的培訓(xùn)。3.2.1.4 保證完全按照確認(rèn)方案實(shí)施。3.2.1.5 確保能及時(shí)發(fā)現(xiàn)偏

3、差，并按照已經(jīng)達(dá)成一致的偏差處理方法對(duì)其進(jìn)行記錄、糾 正、調(diào)查和最終確認(rèn)。3.2.1.6 確保確認(rèn)報(bào)告的生成、審核和批準(zhǔn)。3.2.2 QA職責(zé)3.2.2.1 執(zhí)行前完成對(duì)確認(rèn)方案及各種檢查表的審核。3.2.2.2 負(fù)責(zé)確認(rèn)過(guò)程的監(jiān)控和檢查，保證確認(rèn)方案的實(shí)施，參與確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)。3.2.2.3 參與確認(rèn)偏差的調(diào)查、處理、和評(píng)估。3.2.2.4 確認(rèn)過(guò)程中，如有變更，保證按變更處理程序執(zhí)行。3.2.3 其它成員職責(zé)3.2.3.1 執(zhí)行前確認(rèn)確認(rèn)方案已批準(zhǔn)，并經(jīng)過(guò)培訓(xùn)。3.2.3.2 按確認(rèn)方案實(shí)施確認(rèn)，收集、整理確認(rèn)數(shù)據(jù)，完成確認(rèn)記錄和報(bào)告3.2.3.3 參與確認(rèn)偏差的調(diào)查和處理，確認(rèn)通過(guò)偏差修訂

4、和解決方案。3.2.3.4 確認(rèn)確認(rèn)過(guò)程中的變更在實(shí)施前已經(jīng)批準(zhǔn)。4 定義4.1 線性： 指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。4.2 準(zhǔn)確度：指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。4.3 重復(fù)性：再規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用 6 個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。4.4 中間精密度：在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員或用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間 的精密度， 稱為中間精密度。5 參考文件5.1 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（ 2010 年修訂版）5.2 藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南5.3 中國(guó)藥典（ 2015 年版）二部5.4 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)

5、5.5 公司相關(guān)文件：5.5.1 苦參膜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)規(guī)程（）5.5.2 驗(yàn)證管理（）5.5.3 變更控制操作規(guī)程（）5.5.4 偏差處理操作程序（）5.5.5 糾正措施與預(yù)防措施操作規(guī)程 （）5.5.6 2016 年度驗(yàn)證總計(jì)劃6 風(fēng)險(xiǎn)因素分析風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估將采用失效模式及影響（FMEA的工具來(lái)評(píng)估和衡量方法參數(shù)失效后對(duì)產(chǎn)品分 析結(jié)果的影響。評(píng)估過(guò)程將參照公司質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理的要求，風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)為低、中、 高級(jí)別的必 須給出合理的建議措施， 之后再次對(duì)建議的風(fēng)險(xiǎn)控制措施進(jìn)行評(píng)估以確保風(fēng)險(xiǎn)的降低， 分析、 評(píng)估結(jié)果見(jiàn)附錄 1風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估表。7 驗(yàn)證準(zhǔn)備確保所有方法SOP是最新版本且經(jīng)過(guò)批準(zhǔn)，將檢查結(jié)果記錄在附錄

6、2文件檢查內(nèi)。確認(rèn)參與驗(yàn)證的人員都經(jīng)過(guò)此方案和相關(guān) SOP的培訓(xùn)，和識(shí)別所有簽字和草簽本方案任 何數(shù)據(jù)表的人員。將檢查結(jié)果記錄在附錄 3培訓(xùn)檢查和簽名確認(rèn)內(nèi)。7.3 確認(rèn)驗(yàn)證過(guò)程中用到設(shè)備、計(jì)量?jī)x器都是經(jīng)過(guò)校驗(yàn)，并在有效期內(nèi)，將檢查結(jié)果記錄 在附錄 4確認(rèn)用儀器 / 儀表校準(zhǔn)檢查內(nèi)。8 檢測(cè)方法的描述藥品與試劑的準(zhǔn)備* 對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定院提供） ， * （為* 藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)） ； 硅鎢酸試液、碘化汞鉀試液、苦味酸、氯仿、甲醇、濃氨、稀碘化鉍鉀試液、鹽酸液（L）、氫氧化鈉液（1mol/L ）、氫氧化鈉滴定液（L）、硫酸滴定液（L）、甲基紅示液、磷酸、乙 腈、無(wú)水乙醇。儀器分析

7、條件電子天平（FA2014、超聲池（KQ-300DE、電熱恒溫水浴鍋（DK-98-1）、高效液相（ LC-10ATVP）8.3 檢測(cè)方法顯色鑒別、色譜鑒別、酸堿滴定法、高效液相色譜法檢測(cè)操作鑒別顯色鑒別：樣品連續(xù)三批，A、B兩位組員各取樣品1號(hào)、樣品2號(hào)約，分置三支試管中，加水2ml使溶解，分別加硅鎢酸試液、碘化汞鉀試液及苦味酸試液12滴，分別生成白色、淡黃色及黃色沉淀。薄層鑒別：樣品連續(xù)三批，A、B兩位組員分別取本品，加甲醇10ml使溶解，超聲提取15 分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取苦參堿及氧化苦參堿對(duì)照品適量，加甲醇制 成每1ml中各含5mg的溶液作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法 （

8、附錄W B）試驗(yàn)，取上述三種 溶液各23卩I，分別點(diǎn)于同一以 滋甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G薄層板上，以三氯甲 烷-甲醇-濃氨試液（5:）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色 譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的兩個(gè)斑點(diǎn)。酸堿滴定法：連續(xù)三批樣品，兩位組員分別取樣品1、樣品2,各10片，剪碎，取一片重兩 份，各精密稱定，加氯仿25ml回流3次，每次1小時(shí)，合并提取液，置水浴上揮干，殘?jiān)?用L鹽酸液5ml使溶解，濾過(guò)，濾液置入分液漏斗中，用水 10ml分次洗滌容器，洗液并入 分液漏斗中，加氯化鈉約6g與1mol/L氫氧化鈉液5ml,搖勻，用三氯甲烷振搖提取 5次（

9、25、20、10、10、10ml）,每次三氯甲烷提取液均用同一飽和氯化鈉液5ml振搖洗滌，再依次分別通過(guò)同一裝有無(wú)水硫酸鈉 1g的脫脂棉層濾過(guò)。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定 液（L） 10ml及新沸過(guò)的冷水20ml，振搖提取后，分取酸層，氯仿層再用新沸過(guò)的冷水洗滌 3次，每次10ml，合并酸液與洗滌液，置水浴上加熱，除去殘留的三氯甲烷，放冷至室 溫，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸液（L）相當(dāng)于的 GsHhNbQ。本品每片含總生物堿以*%相對(duì)偏差（dr%）不得超過(guò)%V1 C1 V2 3 T m C2C4C00100 00計(jì)算公式：M 100C1 :硫酸滴定液的實(shí)

10、際濃度（mol/L）;C2:硫酸滴定液的理論濃度（mol/L）;C3 :氫氧化鈉滴定液的實(shí)際濃度（mol/L）;C4 :氫氧化鈉滴定液的理論濃度（mol/L）;V1:加入硫酸滴定液的體積（ml）;V2 :消耗氫氧化鈉滴定液的體積（ml）;T :標(biāo)示量（；m :該批20片苦參膜的平均重量（g）;M :使用苦參膜的量（g）。.4高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用氨基鍵合硅膠為填充劑：以乙腈-無(wú)水乙醇-3%磷酸溶液（85:）為流動(dòng)相；柱溫30C，檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm流速/ min,理論塔板數(shù)按氧化 苦參堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于5000。對(duì)照品溶液的制備：取*對(duì)照品適量，精密稱定，置同一量瓶中，加乙

11、腈-無(wú)水乙醇（85:15）制成每1ml含苦參堿和氧化苦參堿35卩g的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備：取已剪碎的樣品約，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加濃氨水，精密加入三氯甲烷25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，加三氯甲烷補(bǔ)足損失重量，濾過(guò)， 精密吸取續(xù)濾液5ml，水浴上揮干，用乙腈-無(wú)水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，搖勻， 用ym濾膜濾過(guò)，即得。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液5卩l(xiāng)與供試品溶液510卩l(xiāng)，注入高效液相 色譜儀，測(cè)定，即得。本品每片含*不得少于mg。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不得過(guò)2%計(jì)算公式: C mg/g樣品峰面積對(duì)照品濃度對(duì)照品平均峰面積樣品稱量樣品平均片重A:對(duì)照品進(jìn)

12、兩針的平均峰面積;A1：對(duì)照品第一針?lè)迕娣e；A2：對(duì)照品第二針?lè)迕娣e。9驗(yàn)證實(shí)施線性實(shí)驗(yàn)?zāi)康模涸谠O(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度應(yīng)符合規(guī)定 滴定法 實(shí)驗(yàn)過(guò)程同一人同時(shí)取同一批樣品，各 10片，剪碎，取一片重樣品 1、樣品 2、樣品 3、樣品 4、樣 品 5 ，各精密稱定，加氯仿 25ml 回流 3 次，每次 1 小時(shí)，合并提取液，置水浴上揮干，殘 渣用L鹽酸液5ml使溶解，濾過(guò)，濾液置入分液漏斗中，用水10ml分次洗滌容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化鈉約 6g與1mol/L氫氧化鈉液5ml,搖勻，用三氯甲烷振搖提取 5次 （25、20、10、10、10ml）, 每次

13、三氯甲烷提取液均用同一飽和氯化鈉液 5ml 振搖洗滌，再 依次分別通過(guò)同一裝有無(wú)水硫酸鈉 1g的脫脂棉層濾過(guò)。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定 液（L）10ml及新沸過(guò)的冷水20ml，振搖提取后，分取酸層，氯仿層再用新沸過(guò)的冷水洗滌 3次，每次10ml，合并酸液與洗滌液，置水浴上加熱，除去殘留的三氯甲烷，放冷至室 溫，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸液（L）相當(dāng)于的 C15H24N2O2。本品每片含總生物堿以氧化苦參堿（C15HmMo）計(jì)，應(yīng)為標(biāo)示量的 % %相對(duì)偏差（dr%） 不得超過(guò) %。以樣品滴定過(guò)程中消耗氫氧化鈉的體積為橫坐標(biāo)，以樣品含量為縱坐標(biāo)，繪制回歸方

14、程。 可接受標(biāo)準(zhǔn)（相關(guān)系數(shù) dr%）。記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在 * 滴定含量測(cè)定線性實(shí)驗(yàn)記錄 內(nèi)， 見(jiàn)附錄 。高效液相對(duì)照品配制：取 * 一瓶精密稱取置 25ml 容量瓶中、 * 對(duì)照品兩瓶精密稱取置 50ml 量瓶 中，加乙腈：無(wú)水乙醇（85:15 ）溶解至刻度。分別精密量取氧化苦參堿、苦參堿 5ml;氧 化苦參堿1ml、苦參堿10ml;氧化苦參堿2ml、苦參堿20ml，分別置25ml容量瓶中，加乙 腈：無(wú)水乙醇（ 85:15）至刻度。既得。樣品制備：取已剪碎的樣品約，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加濃氨水，精密加入三氯甲烷 25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，加三氯甲烷補(bǔ)足損失重量，濾過(guò)

15、，精密吸取續(xù) 濾液5ml，水浴上揮干，用乙腈-無(wú)水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，搖勻，用卩m濾膜 濾過(guò)，即得。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液5卩l(xiāng)與供試品溶液510卩l(xiāng)，注入高效液相色譜儀， 測(cè)定，即得。本品每片 * ，不得少于 mg。以對(duì)照品的吸取量（峰面積）為橫坐標(biāo)，以樣品含量（峰面積）為縱坐標(biāo)，繪制回歸方程 可接受標(biāo)準(zhǔn)（相關(guān)系數(shù) RSD2%） 。記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在 * 高效含量測(cè)定線性實(shí)驗(yàn)記錄 內(nèi)， 見(jiàn)附錄 5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)?zāi)康模涸谝?guī)定范圍內(nèi)，取同一批次的樣品品，用 5 個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，得到的結(jié)果 RSD 應(yīng)符合要求。滴定法：實(shí)驗(yàn)過(guò)程取同一批樣品， 10 片，剪碎，取一片重

16、樣品 1、樣品 2、樣品 3、樣品 4、樣品 5 各精密稱 定，加氯仿25ml回流3次，每次1小時(shí)，合并提取液，置水浴上揮干，殘?jiān)?L鹽酸液5ml 使溶解，濾過(guò)，濾液置入分液漏斗中，用水10ml分次洗滌容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化鈉約6g與1mol/L氫氧化鈉液5ml,搖勻，用三氯甲烷振搖提取5次（25、20、10、10、 10ml）,每次三氯甲烷提取液均用同一飽和氯化鈉液5ml振搖洗滌，再依次分別通過(guò)同一裝有無(wú)水硫酸鈉1g的脫脂棉層濾過(guò)。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定液（L）10ml及新沸過(guò)的冷水20ml，振搖提取后，分取酸層，氯仿層再用新沸過(guò)的冷水洗滌3次，每次10ml，合并酸液與洗

17、滌液，置水浴上加熱，除去殘留的三氯甲烷，放冷至室溫，加甲基紅指示液 2滴，用氫氧化鈉滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸液（L）相當(dāng)于的CdHiNO。本品每片含總生物堿以*%相對(duì)偏差（dr%）不得超過(guò)%可接受標(biāo)準(zhǔn)（相關(guān)系數(shù) dr%）。記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在 * 滴定含量測(cè)定重復(fù)性實(shí)驗(yàn)記錄 內(nèi)， 見(jiàn)附錄 5。高效實(shí)驗(yàn)過(guò)程對(duì)照品配制： 對(duì)照品溶液的制備： 取苦參堿、氧化苦參堿對(duì)照品母液適量，置同一量瓶 中，加乙腈-無(wú)水乙醇（85:15）制成每1ml含苦參堿和氧化苦參堿35卩g的溶液，搖勻，即 得。樣品制備：取同一批樣品 10片，剪碎并分別取樣品 1、樣品 2、樣品 3、樣品 4、樣品 5約， 精密稱定

18、，置具塞錐形瓶中，加濃氨水，精密加入三氯甲烷25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，加三氯甲烷補(bǔ)足損失重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液5ml，水浴上揮干，用乙腈-無(wú)水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，搖勻，用卩m濾膜濾過(guò)，即得 測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液5卩l(xiāng)與供試品溶液510卩l(xiāng)，注入高效液相色譜儀， 測(cè)定，即得。本品每片含苦參總堿以苦參堿 （SHmNO）與氧化苦參堿（GsHmNIQ）的總量計(jì)， 不得少于 mg。可接受標(biāo)準(zhǔn)（相關(guān)系數(shù) RSD2%） 。記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在 * 高效含量測(cè)定重復(fù)性實(shí)驗(yàn)記錄 內(nèi)， 見(jiàn)附錄 5。中間精密度實(shí)驗(yàn)?zāi)康模汉繙y(cè)定中，一個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同的人、在不同時(shí)

19、間（通常是不同天）測(cè)定得到的結(jié)果RSD應(yīng)符合要求。滴定含量實(shí)驗(yàn)過(guò)程兩名實(shí)驗(yàn)人員分別在不同時(shí)間 （通常是不同天）各取同一批號(hào)苦參膜 10片，精密稱定，剪 碎，各精密稱取本品3份（每份約），加氯仿25ml回流3次，每次1小時(shí)，合并提取液， 置水浴上揮干，殘?jiān)肔鹽酸液5ml使溶解，濾過(guò)，濾液置入分液漏斗中，用水 10ml分次 洗滌容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化鈉約 6g與1mol/L氫氧化鈉液5ml,搖勻，用三氯 甲烷振搖提取 5 次（ 25、20、10、10、10ml） , 每次三氯甲烷提取液均用同一飽和氯化鈉液 5ml振搖洗滌，再依次分別通過(guò)同一裝有無(wú)水硫酸鈉 1g的脫脂棉層濾過(guò)。合并三氯甲

20、烷 液，精密加硫酸滴定液（L）10ml及新沸過(guò)的冷水20ml，振搖提取后，分取酸層，氯仿層再 用新沸過(guò)的冷水洗滌3次，每次10ml，合并酸液與洗滌液，置水浴上加熱，除去殘留的三 氯甲烷，放冷至室溫，加甲基紅指示液 2滴，用氫氧化鈉滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸 液（L）相當(dāng)于的CsHHQ。可接受標(biāo)準(zhǔn)（同一人實(shí)驗(yàn)結(jié)果 RSD% %兩人間的RSD% % 記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在 * 滴定含量測(cè)定中間精密實(shí)驗(yàn)記錄內(nèi)，見(jiàn)附錄 5。高效兩名實(shí)驗(yàn)人員用同一批對(duì)照品分別在不同時(shí)間 （通常是不同天） 各取同一批號(hào)苦參膜 10片， 精密稱定，剪碎，各精密稱取本品 3 份（每份約）， 置具塞錐形瓶中，加濃氨水，精

21、密加入 三氯甲烷25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，加三氯甲烷補(bǔ)足損失重量，濾過(guò)，精 密吸取續(xù)濾液5ml，水浴上揮干，用乙腈-無(wú)水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，搖勻， 用ym濾膜濾過(guò)，即得。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液5卩l(xiāng)與供試品溶液510卩l(xiāng)，注入高效液相色譜儀， 測(cè)定，即得。本品每片含苦參總堿以苦參堿 （SHmNO）與氧化苦參堿（GsHmNIQ）的總量計(jì)， 不得少于 mg?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)（同一人實(shí)驗(yàn)結(jié)果 RSD% %兩人間的RSD% % 。記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在 * 高效含量測(cè)定中間精密度實(shí)驗(yàn)記錄內(nèi)，見(jiàn)附 5。含量測(cè)定準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?含量測(cè)定中， 用已確定的方法測(cè)定的結(jié)

22、果與真實(shí)值或參考值接近的程度， 一般用回 收率（%表示，得到的結(jié)果RSD應(yīng)符合要求。實(shí)驗(yàn)過(guò)程精密稱取同一已知含量的供試品 9 份（每份約），分別置于圓底燒瓶中，分成三組，分別向 第一組的每一份供試品中加入濃度為（35卩g/ml）的氧化苦參堿對(duì)照品2 ml ;向第二組的 每一份供試品中加入濃度為（35卩g/ml ）的氧化苦參堿對(duì)照品5ml ;向第三組的每一份供試 品中加入濃度為（35卩g/ml ）的氧化苦參堿對(duì)照品7 ml。加氯仿25ml回流3次，每次1小 時(shí)，合并提取液，置水浴上揮干，殘?jiān)?L鹽酸液5ml使溶解，濾過(guò)，濾液置入分液漏斗 中，用水10ml分次洗滌容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化

23、鈉約6g與1mol/L氫氧化鈉液5ml,搖勻，用三氯甲烷振搖提取 5次（25、20、10、10、10ml）,每次三氯甲烷提取液均用 同一飽和氯化鈉液5ml振搖洗滌，再依次分別通過(guò)同一裝有無(wú)水硫酸鈉1g的脫脂棉層濾過(guò)。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定液 （L） 10ml及新沸過(guò)的冷水20ml，振搖提取后，分 取酸層，氯仿層再用新沸過(guò)的冷水洗滌 3次，每次10ml，合并酸液與洗滌液，置水浴上加 熱，除去殘留的三氯甲烷，放冷至室溫，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸液（L）相當(dāng)于的CsHmMQ。測(cè)定法將測(cè)得的總含量減去供試品中已知含量，計(jì)算每組的回收率?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)（實(shí)驗(yàn)結(jié)果回收率 %）。記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在 * 滴定含量測(cè)定準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)記錄內(nèi)，見(jiàn)附錄 8。高效對(duì)照品制備：對(duì)照品溶液的制備： 取苦參堿、氧化苦參堿對(duì)照品母液適量，置同一量瓶 中，加乙腈-無(wú)水乙醇（85:15 ）制成每1ml含苦參堿和35卩g的溶液，搖勻，即得。供試品制備： 精密稱取同一已知含量的供試品 9 份（每份約） ，置具塞錐形瓶中，加濃氨水，精密加入三 氯甲烷25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，加三氯甲烷補(bǔ)足損失重量，濾過(guò)，精密 吸取續(xù)濾