1、44文件編號：LABOPMY020第 頁，共 頁 版本：A/0生效日期：2008-02-01XXXXXX 醫院檢驗科免疫室分析項目作業指導書 Cobas E 601/E 411乙絨毛膜促性腺激素+亞單位1. 分析原理采用雙抗體夾心法原理，整個過程18 分鐘完成。 第1 步：20 l（Elecsys2010,E170）或15 l（Elecsys1010）標本、生物素化的抗HCG 單克隆抗體和釕（Ru）標記的抗HCG 單克隆抗體混勻，形成夾心復物。 第2 步：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應結合到微粒上。 第3 步：反應混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附

2、到電極上，未結合的物質被清洗液洗去，電極加電壓后產生化學發光，通過光電倍增管進行測定。檢測結果由機器自動從標準曲線上查出。此曲線由儀器通過2 點定標校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標準曲線而得。2：標本采集和準備：必須選擇以下的標本進行測定血清：使用標準取樣試管或含分離膠的試管采集血清：按標準常規方法采集。血漿：肝素、EDTA-K3 、枸櫞酸鈉或草酸鉀抗凝均可。標本在28 度可穩定8 小時，-20 度可穩定12 個月。凍融一次。標本如有沉淀需離心后再使用。不要加熱滅活標本。標本和質控品禁用疊氮鈉防腐。在測定前，保證試劑、定標液、質控液到達室溫。考慮到可能揮發的因素，建議標本、定標液、質控液

3、上機后在2小時內進行測定。3：試劑、校準品、質控品和其他所需材料采用羅氏原裝配套試劑。試劑： M：鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1 瓶，6.5ml 。鏈霉親和素包被的微粒濃度0.72mg/ml，生物素結合能力：470ng 生物素/mg 粒子。含防腐劑。R1：生物素化的抗HCG 單克隆抗體（灰蓋），1 瓶，10ml 。生物素化的抗HCG 單克隆抗體濃度6.3mg/l，磷酸緩沖液0.04mol/l，pH7.5 。含防腐劑。R2：Ru(bpy)3 2+ 標記的抗HCG 單克隆抗體（黑蓋），1 瓶，10ml 。Ru(bpy)3 2+ 標記的抗HCG 單克隆抗體濃度4.6mg/l，磷酸緩沖液0.04

4、mol/l，pH6.5 。含防腐劑。校準品： 每批HCG+試劑有一條形碼標簽，含有該批試劑定標所需的特殊信息。應用HCG+CalSet 定標液定標。 定標頻率： 每批試劑必須用新鮮試劑（試劑經儀器注冊24 小時以內）標定一次， 如再次標定即根據下列要求： Cobas E 601或E411： 一個月（同一批號試劑） 7 天（放置儀器上的同一試劑盒） 各種分析儀均適用的情況： 根據要求進行標定：如質控結果超出范圍時。質控品： Elecsys 通用質控品（PreciControl Universal）1 和2 以及其它合適的質控品。各濃度區域的質控至少每24 小時或每一次定標后測定一次。質控間隔期應

5、適用于各實驗室的具體要求。檢測值應落在確定的范圍內，如出現質控值落在范圍以外，應采取校正措施。其他所需材料：貨號：11973193，100 人份的Elecsys HCG+試劑盒包含： M 鏈霉親和素包被的微粒 R1 生物素化的抗HCG 抗體 R2 三聯吡啶釕標記的抗HCG 抗體需要的材料（未提供）： Elecsys HCG +定標液（CalSet）貨號11973207 Elecsys 通用質控品（PreciControl Universal）貨號11731416 Elecsys 通用稀釋液 貨號11732277Cobas E 601或E411 分析儀 Elecsys 系統緩沖液（ProCell

6、）貨號11662988 Elecsys 測量池清洗液（CleanCell）貨號11662970 Elecsys 添加劑液（SysWash）貨號11930346 Elecsys 系統清洗液（SysClean）貨號119331594：儀器和校準使用儀器：瑞士羅氏診斷公司生產Cobas E 601/E 411全自動電化學發光免疫自動分析儀 儀器校準：每批HCG+試劑有一條形碼標簽，含有該批試劑定標所需的特殊信息。應用HCG+CalSet 定標液定標。 定標頻率： 每天批試劑必須用新鮮試劑（試劑經儀器注冊24 小時以內）標定一次， 如再次標定即根據下列要求： Cobas E 601或E411： 一個月

7、（同一批號試劑） 7 天（放置儀器上的同一試劑盒） 各種分析儀均適用的情況： 根據要求進行標定：如質控結果超出范圍時。 質控： Elecsys 通用質控品（PreciControl Universal）1 和2 以及其它合適的質控品。各濃度區域的質控至少每24 小時或每一次定標后測定一次。質控間隔期應適用于各實驗室的具體要求。檢測值應落在確定的范圍內，如出現質控值落在范圍以外，應采取校正措施。5：操作步驟（Cobas E 601為例）5.1 校準操作步驟：在編緝各項目的參數時，已經在ApplicationCalib菜單中定義好了定標類型和幾點定標。因此在對各項目進行定標時，只需在定標菜單Cal

8、ibration中進行即可。3.2進入CalibrationStatus菜單，用鼠標選擇需定標的項目，再根據需要點單點定標（BLANK鍵）或兩點定標（TWO POINT鍵）、跨距定標（SPAN鍵）、多點定標（FULL鍵），再選擇其它項目進行相應選擇，最后點SAVE，將定標物放入在CalibrationCalibrator中定義好的位置，點Start，再點Start，儀器開始定標。 在CalibrationStatus菜單中看定標結果，點Calibration Result鍵看定標結果，點Reaction Monitor鍵看每個定標物的反應曲線。5.2 樣本檢測程序： 單個樣本輸入，在主菜單下選

9、擇Workplace- Testslection，在Sequence No欄輸入標本號，然后選擇該標本所需做的單個項目或組合項目，點SAVE鍵，樣本號自動累加。批量常規標本的輸入，在主菜單下選擇Workplace- Testslection，在Sequence No欄輸入起始標本號，然后選擇該標本所需做的單個項目或組合項目，點REPEAT，輸入該批標本的最后一個標本號，點OK即可。進樣分析，將標本按在Workplace菜單中輸入的標本號順序在樣本架上排好，放入進樣盤內,按START鍵，輸入該批上機標本的起始標本號，再點START鍵，儀器自動開始推架檢測標本。6：質量控制 Elecsys 通用質

10、控品（PreciControl ）1 和2 或其它合適的質控品。各濃度區域的質控至少每24 小時或每一次定標后測定一次。質控間隔期應適用于各實驗室的具體要求。檢測值應落在確定的范圍內，如出現質控值落在范圍以外，應采取校正措施。7：計算方法 對每一個標本，儀器會自動計算HCG+含量，單位是mIU/ml 或IU/L 8：參考范圍 1112位非懷孕健康婦女，其97.5%百分位數為3mIU/ml 236位更年期后婦女6 mIU/ml 3277為男性，其97.5%百分位數為2 mIU/ml。9：分析性能 0.100-200.0mIU/ml 結果若低于檢測限，儀器將報告結果200.0mIU/ml10：干擾

11、因素該方法不受黃疸（膽紅素24mg/dl）、溶血（血紅蛋白1.0g/dl）、脂血（脂質1400mg/dl）和生物素5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8 小時后才能采血。不受類風濕因子干擾（3400U/ml）。15 種常用藥物經試驗對本測定無干擾。HCG+濃度高達300000mIU/ml 也不出現鉤狀效應。接受過小鼠單抗治療或體內診斷的病人會出現假陽性反應。ElecsysHCG+檢測結果應結合病史、臨床其他檢查結果綜合起來進行診斷。11：稀釋：高于檢測范圍的標本可用通用稀釋液稀釋。建議1:100 稀釋。稀釋后的標本HCG+含量必須高于100mIU/ml 。如用手工稀釋，結果應乘上稀釋倍數。如果是機器自動稀釋，機器會自動計算結果。12：臨床意義 與FSH 、TSH 和LH一樣，HCG 也是糖蛋白，由二種亞單位（-和-）組成.這四種激素中，鏈是完全相同的，而鏈具特異性，負責特定激素功能。 懷孕時HCG由卵巢產生。HCG由許多的亞激素組成，他們具有相同的生理活性，分子量不同。人類絨毛膜促性腺激素的生理功能是維持妊娠黃體及影響類固醇產生。懷孕婦女中的HGC主要是完整的HCG。檢測HCG 濃度可在受孕一周后診斷懷孕，在妊娠前三個月測定HCG 特別重