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文檔簡介
1、實驗二 食品中抗壞血酸含量測定,食物中抗壞血酸有還原型和脫氫型兩種形式,兩者可通過氧化還原互變,均具有生物活性,合稱為總抗壞血酸。 通常抗壞血酸在酸性條件下以還原型存在,易氧化成脫氫型抗壞血酸。,目的: 新鮮食物中的抗壞血酸主要以還原型形式存在,測定還原型抗壞血酸可粗略了解該食品中抗壞血酸的濃度。 通過本實驗的學習,使學生掌握還原型抗壞血酸的測定原理及其測定方法。,一、還原型抗壞血酸的測定 (2,6-二氯酚靛酚滴定法),實驗原理,用標準碘酸鉀溶液標定抗壞血酸溶液; 用已標定的抗壞血酸溶液標定2,6-二氯酚靛酚染料,再用此染料滴定樣品中的抗壞血酸。,3C6H6O6+KIO3C6H4O6+KI+3
2、H2O,H0-C=C-OH具有強還原性,極容易被氧化,能把+5價的碘還原成-1價的碘離子,用標準碘酸鉀溶液標定抗壞血酸溶液,IO3-+5I-+6H+=3I2+3H2O,滴定樣品,標定溶液,【實驗儀器與試劑】,1.儀器:組織搗碎機、5.0ml微量滴定管、100m1容量瓶、50m1具塞量筒。 2.試劑 (1) 1%草酸溶液、2%草酸溶液、白陶土。 (2) 0.01mol/L碘酸鉀標準儲備液: (3) 0.0001mol/L碘酸鉀標準應用液: (4) 1%淀粉溶液: (5) 6%碘化鉀溶液: (6) 抗壞血酸溶液: (7) 碳酸氫鈉溶液: (8) 2,6-二氯酚靛酚溶液:,【操作步驟】,(1) 標定
3、抗壞血酸標準溶液:吸取抗壞血酸溶液(20g/m1)5.0m1于錐形瓶中,加入6%碘化鉀溶液0.5m1,1%淀粉溶液3滴,再以0.000lmol/L碘酸鉀標準溶液滴定,終點為藍色。,V1滴定時所消耗0.001mol/L碘酸鉀溶液的體積(ml) V2所取抗壞血酸溶液的體積(ml) 0.05280.0001mol/L的碘酸鉀1.0ml相當于抗壞血酸0.0528mg,(2)標定2,6-二氯酚靛酚溶液:,取已標定的抗壞血酸溶液5.0m1,1%草酸溶液5.0m1于錐形瓶中,搖勻,用欲標定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至呈淡紅色,15s不褪色為止。,C抗壞血酸溶液的濃度(mg/ml) V1抗壞血酸溶液的體積(
4、ml) V2滴定時消耗的2,6-二氯酚靛酚的體積(ml),2. 樣品測定,(1) 取樣品100g剪碎后置搗碎機中,按1:1(w/v)加入2%草酸制成勻漿。 (2) 稱取勻漿10g于小燒杯中,倒入50m1具塞量筒中,用1%草酸溶液沖洗燒杯,稀釋至刻度,振搖。如有泡沫影響定容可加數滴戊醇。,2. 樣品測定,(3) 將振搖后上層清液約20m1倒入100m1錐形瓶中,加白陶士一勺,振搖數次,使充分脫色,靜置。同時,取一錐形瓶,加入1%草酸20m1,加白陶士一勺,振搖數次作為空白。 (4) 取靜置后上清液過濾,吸取濾液5.0m1,以標定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定,至溶液呈淡紅色,l5s內不變化,記錄染料的用量。,【實驗計算】,式中: V0空白實驗消耗的染料體積(m1)
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