除菌過濾系統驗證方案驗證方案的申請與審批 驗證方案的起草起草部門起草人起草日期驗證方案的審核審核部門審核人審核日期驗證方案的批準職務批準人簽名日 期目錄1.概述及驗證方案說明1.1.概述1.2.驗證目的1.3.驗證范圍1.4.驗證職責2.驗證儀器、試劑及文件說明2.1.驗證儀器2.2.驗證試劑2.3.相關文件3.驗證內容3.1.細菌截留驗證及濾芯化學兼容性驗證3.1.1.殺菌性能驗證3.1.2.驗證前準備3.1.3.驗證步驟3.2.溶出物驗證3.2.1.驗證前準備3.2.2.驗證步驟3.3.吸附驗證3.4.可見異物檢查4.驗證結果評價及結論5.正常運行后的控制要點6.驗證周期1.概述及驗證方案說明1.1.概述我公司的凍干粉針劑為非最終滅菌的無菌制劑，除菌過濾是整個工藝流程中保證藥液無菌的重要環節。公司在生產中使用的除菌過濾系統包括濾芯、濾殼。濾芯為上海金科生產的0.2um的除菌級聚醚砜濾芯，規格為5英寸；過濾設備為山東濰坊精鷹生產的配液、除菌過濾系統。1.2驗證目的：通過此驗證，證明該除菌過濾系統符合本公司注射用生長抑素凍干粉針劑生產工藝要求和GMP規定。1.3驗證范圍本方案適用于本公司的注射用生長抑素凍干粉針劑在新建凍干粉針劑車間的除菌過濾系統驗證。1.4驗證職責小組職務姓 名所在部門職 責組 長組 員組 員組 員組 員組 員組 員2.驗證儀器、試劑及文件說明2.1驗證儀器儀器名稱型號或規格校正時間標準規定是否符合要求過濾器完整性檢測儀除菌過濾系統除菌過濾濾芯PH計高效液相色譜儀不溶性微粒檢測儀電子天平偏差分析及總結：確認人日期復核人日期2.2.驗證試劑試劑名稱廠家備注甘露醇藥用醋酸生長抑素原料藥缺陷假單胞菌規格：107CFU/片2.3.相關文件公司文件編號濾芯的供應商審計報告除菌過濾系統安裝確認、運行確認高效液相色譜使用SOPxxx型完整性測試儀使用SOP不溶性微粒檢測儀使用SOP注射用生長抑素生產工藝規程注射用生長抑素半成品配制SOP5.驗證內容：5.1. 細菌截留驗證及濾芯化學兼容性驗證取規格為107CFU/片的菌片，將其培養成1010CFU/ml的菌懸液，備用。根據10版GMP要求，驗證細菌截留時，濾膜單位面積除菌量不得低于107CFU/cm2。2.5寸的濾芯過濾面積為1250cm2，因此所需菌液量不能少于1.251010CFU缺陷假單胞菌。5.1.1殺菌性能驗證3.1.1.1從生產線中取已配置好的生長抑素半成品溶液100ml，用移液槍移加入1ml濃度為1010CFU/ml的菌懸液，混勻。取混勻后溶液1ml，稀釋涂布培養，平行操作兩份，作為對照組。3037培養48小時候后，計算菌落數，通過菌落數推算菌懸液濃度。帶菌藥液放置8小時后，取1ml溶液，稀釋涂布培養，平行操作兩份，作為樣品組。3037條件下培養48小時候后，計算菌落數，通過菌落數推算菌懸液濃度。將其結果記錄于下表：項目對照組實驗組差值培養基編號12平均值12平均值理論菌懸液濃度(CFU/ml)菌落數(CFU)實際菌懸液濃度(CFU/ml)菌懸液濃度計算公式：菌懸液濃度=(菌落數稀釋倍數)/取樣量偏差分析及總結：確認人日期復核人日期3.1.1.2.樣品實際菌懸液濃度與對照品實際菌懸液濃度對比，若前者比后者細菌濃度降低1個對數值時，則為殺菌性藥液，分析殺菌原因，選擇替代藥液或方案重新進行驗證。否則，可以認為是非殺菌性藥液，驗證繼續。3.1.2驗證前準備3.1.2.1.濾芯先用注射用水充分潤濕。3.1.2.2.按照注射用生長抑素半成品配制SOP在配液罐中配制生長抑素半成品溶液40000ml，備用。3.1.2.3.將除菌過濾系統各個部件連接好，用注射用水對除菌過濾系統進行檢漏，無漏液現象則進行以下操作，不然分析原因并改進。3.1.2.4.將除菌過濾實驗用到的儀器設備放到高溫滅菌鍋中12160分鐘滅菌。3.1.3.驗證步驟注：在細菌截留試驗中，應考慮生產過程中的較差條件。分析過濾的條件中，過濾壓力的高低可能對除菌過濾造成較差的影響，故我們選擇過濾壓力：高于通常情況的0.30 Mpa；通常條件下的0.20 Mpa；低于通常情況的0.10Mpa。另外，在藥液的體積上，我們也比正常生產情況的34000ml稍大一些，采用40000ml。3.1.3.1.用移液槍移取1010CFU/ml的缺陷假單胞菌菌液2ml加入到生長抑素半成品溶液中，將溶液混勻。取5ml將其放置到離心管中，冷藏作為對照備用。3.1.3.2.將滅菌后的除菌過濾設備取出連接，用完整性測試儀進行起泡點測試，測試使用注射用水作為潤濕液時的起泡點（BPw1）并記錄。3.1.3.3.過濾帶菌藥液，用滅菌的離心管取5ml過濾液作為樣品液；過濾結束后，用完整性測試儀進行起泡點測試，測產品起泡點（BPp）并記錄。3.1.3.4用氫氧化鈉溶液清洗、再用注射用水清洗，再測試起泡點（BPw2）并記錄，則BPw=（BPw1+ BPw2）/2，并作為標準。產品氣泡點的比率：實際產品的起泡點/水潤濕的起泡點 BPpBPR = -BPw起泡點偏差表 品名：注射用生長抑素凍干粉針劑 規格： /支濾芯批號批號：批號：批號：BPR的均值BPw1BPw2均值BPpBPR偏差分析及總結：確認人日期復核人日期3.1.3.5對比BPw1和BPw2的起泡點測試數據，若BPw2的值相比BPw1無明顯的降低，則本濾芯對于藥液的化學兼容性好，適合用于注射用生長抑素藥液的除菌過濾。否則，化學兼容性差，需更換濾芯并重新進行驗證。3.1.3.6取對照液及樣品液各1ml，稀釋涂布培養，各平行操作兩份，在3037條件下培養48小時候后，統計菌落數。以上操作分別在過濾壓力為0.1Mpa、0.2Mpa、0.3 Mpa情況下各操作一次。將結果記錄于表：過濾壓力0.1 MPa0.2 MPa0.3 MPa所用微生物菌種起泡點壓力測試合格標準0.34 MPa濾前濾后濾芯規格批號對照組菌落數1號2號樣品組菌落數1號2號偏差分析及總結：確認人日期復核人日期3.2.溶出物驗證3.2.1驗證前準備3.2.1.1.除菌過濾系統的清洗3.2.1.2.除菌過濾系統的滅菌3.2.1.3.準備三個不同批次的濾芯3.2.2驗證操作3.2.2.1.按照注射用生長抑素半成品配制SOP配制藥液2000ml，攪拌均勻。3.2.2.2.將藥液用壓縮空氣打入除菌過濾系統中，注滿整個濾筒，將系統的進、出液口封閉，放置6小時，為樣品1。3.2.2.3.將剩余的藥液不打入過濾系統，放置到冰箱中冷藏保存，放置6小時，為樣品2。3.2.2.4將樣品1從過濾系統中放出,用攪拌器（型號為）攪拌10min。3.2.2.5以樣品2為對照，檢測樣品1中的有關物質。從而通過有關物質的變化判斷是否有物質從濾芯中溶出。3.2.2.6三個批次的濾芯按上述步驟個操作一次，將其結果記錄于下表：項目批號樣品中物質對照品中物質濾芯偏差分析及總結：確認人日期復核人日期3.3.吸附驗證將3.2.2.4試驗中過濾系統內的的藥液取樣，檢測有效成分初始時含量和放置6小時后的含量，將其結果記錄下表：項目批號吸附前有效成分含量吸附后有效成分含量吸附前后差值濾芯差值標準差值要求小于2%偏差分析及總結：確認人日期復核人日期3.4 可見異物檢查從3.2.2.4樣品1中取適量藥液放入到透明的玻璃試管中，觀察藥液中是否有顆粒物和纖維等可見異物。若有異物存在，說明濾芯材質不合格，對濾芯