第三節除草劑生物測定 一 除草劑室內試驗技術 試材的選擇和培養 穩定的試驗環境條件 科學的試驗方法 合理的試驗設計 試驗結果的評價和數據處理二 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 除草劑混用的目的和意義 除草劑混用后的聯合作用類型 除草劑混用聯合作用類型的評價方法三 除草劑混用配方篩選試驗及評價方法的具體應用 確定混劑配比篩選評價方法的原則 除草劑混合使用聯合作用類型評價實例 除草劑室內試驗技術 應用于除草劑的發現 活性測定以及作用特性和應用技術等研究 規范除草劑生物活性試驗方法的目的在于 使之達到真正意義上為田間試驗和應用優化做技術支撐 除草劑室內試驗技術 試材的選擇和培養 應選擇 在分類學上 經濟上或地域上有一定代表性的栽培植物或雜草等 對藥劑敏感性符合要求 且對藥劑的反應便于定性 定量測定 達到劑量 反應相關性良好 易于培養 繁育和保存 能為試驗及時提供相對標準一致的試材 試驗的靶標植物 可以選擇栽培植物 雜草或其他組織器官細胞以及藻類等生物靶標 用于研究除草劑特性的較為規范的室內方法大都以栽培植物為試材 比如 玉米根長法 高梁法 小麥去胚乳法等 溫室盆栽法 稗草中胚軸法等試驗方法所用的雜草 需要對種子采集 儲藏 打破休眠和發芽率測定等處理后使用 除草劑室內試驗技術 試材的選擇和培養 除草劑室內試驗常用靶標雜草 溫室盆栽法 除草劑室內試驗技術 穩定的試驗環境條件 在試驗中 土壤 光照 溫度 濕度等環境條件不僅影響靶標生物的生長狀態 也影響藥劑的吸收 傳導及藥效的發揮 在試驗時 土壤性質如 OM pH等要明確 選擇中性輕質土壤 光照 溫度 濕度等環境條件應在具有一定控制系統的硬件配套設施中進行 要保證所有處理在相對一致的環境下測試 結果具有重現性和可行性 除草劑室內試驗技術 科學的生測試驗方法 室內方法如下 以植物整株測試的試驗方法有 溫室盆栽法 培養皿法 小杯法 高粱法 玉米根長法 稗草中胚軸法 用于篩選 除草活性和安全性大小的定性定量評價 除草劑室內試驗技術 科學的生測試驗方法 以單細胞藻類或其器官測試的試驗方法 蘿卜子葉法 黃瓜幼苗形態法 小麥去胚乳法 燕麥法 菜豆葉片法 葉鞘滴注法 浮萍法 小球藻法 光合呼吸儀測定法等 用于不同類別除草劑的作用特性研究 以組織細胞為靶標的試驗方法 測定有絲分裂指數 光合 呼吸 蒸騰 膜透性 酶活力 葉綠素含量等生理生化指標 用于除草劑生理作用機理影響研究 除草劑室內試驗技術 科學的生測試驗方法 溫室盆栽方法最為有效定性定量應用廣泛與田間結果相關遵守的原則 針對測定藥劑的應用范圍選擇代表性的2 6種主要雜草作為測試靶標 根據藥劑特性選擇芽前或芽后早期土壤噴霧處理 或苗后一定植物葉齡的莖葉噴霧處理 噴霧設施的噴頭霧滴 壓力 速度等條件要相對穩定 要求在溫室內對處理前后的試材統一培養和管理 除草劑室內試驗技術 合理的試驗設計 生物的復雜性 多樣性 需掌握以下原則 設空白對照 不含有效成分的對照 必要時 和標準藥劑的對照 以排除偶然性誤差 取得可信的試驗數據 應有一定的數量并設置重復 減輕個體反應程度的差異 以保證其代表性和結果的可靠性 除草劑室內試驗技術 試驗結果的評價和數據處理 試驗結果與藥劑 靶標 測試條件等多種因素相關 故在記錄和評價活性時 要有詳細的試驗原始記錄 并隨試驗報告一起歸檔保存 原始記錄應記載藥劑的特性 劑型 含量 生產日期 樣品提供者 配制過程 施藥方法 靶標生育期 培養條件 噴霧速度壓力霧滴情況等基礎數據 以及處理后的試材培養條件及管理方法 結果調查方法與調查結果等 調查方法有視植物受害癥狀及程度的綜合評價目測法和根長 鮮重 株高 分枝 蘗 數 株數 葉面積等的定量化指標測定 除草劑室內試驗技術 試驗結果的評價和數據處理 除草活性和作物安全性目測法評價標準 除草劑室內試驗技術 試驗結果的評價和數據處理 數據處理對于試驗得到的大量數據 通過計算機如DPS數據統計分析軟件的處理才能發現其內在關系與規律 如 建立相關系數R 0 9的劑量 反應相關模型 獲得ED90或ED50 ED10 能正確闡述試驗結果的科學性 除草劑室內試驗技術 試驗結果的評價和數據處理 結果分析以藥劑對主要敏感雜草的最低有效劑量ED90為除草劑活性評價指標 以藥劑對應用作物的抑制率不超過10 時的最高安全劑量ED10 NOEL 為作物安全性評價指標 以gai ha或gai hm2 克有效成分 公頃 為劑量單位 選擇性系數為ED10 ED90 2時 認為藥劑具有一定選擇性 可以進行田間試驗 結論和討論對試驗結果進行數據分析后 根據試驗的研究目的和性質 需要在結論部分給出客觀的結論 并進行相關討論 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 將兩種或兩種以上的除草劑混配在一起應用的施藥方法叫做除草劑的混用 常用的有2種混用形式 現混現用或桶混 習慣上簡稱除草劑混用 除草混劑 是由兩種或兩種以上的有效成份 助劑 填料等按一定配比 經過加工而成的農藥制劑 除草劑混用的目的和意義 擴大殺草譜 減少用藥次數 減少用藥量 降低成本 取長補短 提高防效 降低使用成本 延長施藥適期 減少殘留活性 延緩抗藥性 耐藥性 雜草的發生與發展 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 除草劑混用后的聯合作用類型 兩種或兩種以上的除草劑混用后 較單用相比對雜草的防除效果可能是增加 降低 或不增不減 混用后的聯合作用類型主要表現為以下三種情況 相加作用additivity 增效作用synergism 拮抗作用antagonism 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 混用聯合作用類型的評價方法 Gowing法 首先測定單劑及混劑對靶標雜草的防效 再通過單劑的實測防效計算出混劑的理論防效 將其與混劑的實測防效相比來評價聯合作用類型 理論防效計算公式為 E0 X Y XY 100X 用量為P時A的雜草防效 Y 用量為Q時B的雜草防效 E0 用量為 P Q 時A B的理論防效 E 各處理的實測防效 當E E0 10 時 說明混配產生增效作用 當E E0 10 時 說明混配產生拮抗作用 當E E0值介于 10 時 說明混配產生加成作用 該方法試驗設計和數據處理簡單 尤其適合評價殺草譜互補型除草劑的聯合作用類型 明確配比的合理性 但僅能對兩種除草劑的混用進行配比的合理評價 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 混用聯合作用類型的評價方法 Colby法 Colby 1976 法是Gowing法的公式變形 其理論防效計算公式為E0 XY 100 式中 X 用量為P時A的雜草存活率 Y 用量為Q時B的雜草存活率 E0 用量為 P Q 時A B的理論雜草存活率 E 表示各處理的實際雜草存活率 當E0 E 10 時 說明產生增效作用 當E0 E 10 時 說明產生拮抗作用 當E0 E值介于 10 時 說明產生加成作用 Colby法是評價除草劑混用效果的快速而實用的方法 尤其適合評價殺草譜互補型除草劑的聯合作用類型 明確配比的合理性 且2種以上除草劑的混用測定也可應用該法進行評價 理論值計算公式為E0 X Y Z n 100 n 1 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 混用聯合作用類型的評價方法 等效線法 千版法 1 分別求出兩個單劑的ED50 或ED90 2 連線兩軸上ED50 或ED90 作為理論上兩種除草劑混用的等效線 3 求出各混用的ED50 或ED90 4 在坐標圖中標出混用的ED50 或ED90 的各點 若混用后ED50 或ED90 各點均在A B線之下 則為增效作用 在其上則為拮抗作用 接近與等效線則為相加作用 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 混用聯合作用類型的評價方法 本法比較準確 適于室內測定 不僅能評價二元除草劑混劑的聯合作用類型 還能確定最適宜的配比 但該法試驗規模較大 且只能對二元除草劑混用進行測定 同時要求被測定的組成混劑的各個單劑對同一靶標雜草均有較好的活性 否則會產生單邊效應 不適于評價殺草譜互補型的除草劑混配 辛酰溴苯腈與2 4 D丁酯混用配方篩選 測定辛酰溴苯腈與2 4 D丁酯對鴨跖草的鮮重防效 最佳配比以辛酰溴苯腈在100 220gai ha的劑量下遞增 與2 4 D丁酯在1200 440gai h的劑量下遞減的范圍內相互混用增效作用較大 即二者混用以2 4 D丁酯 辛酰溴苯腈 2 10 1的范圍內選擇配比效果較好 注 1為相加作用效應AB線 2為以辛酰溴苯腈為基準的ED90等效線 3為以2 4 D丁酯為基準的ED90等效線 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 混用聯合作用類型的評價方法 孫云沛的共毒系數法是經典的殺蟲劑混配聯合毒力評價方法 先以常規方法測定組成混劑的各單劑及混劑的ED50 或ED90 值 再以其中的某個單劑為標準藥劑計算各單劑的毒力指數 標準藥劑的毒力指數為100 混劑的實測毒力指數及理論毒力指數 最后計算共毒系數 判斷標準為共毒系數在80 120之間時為相加作用 明顯120時為增效作用 可對二元及多元除草劑混用后的不同混用配比進行篩選 結果較為準確 可靠 但該方法的試驗處理較多 規模較大 且需要在正式試驗進行各單劑設計3 5個劑量的預試驗 再以此為基礎設計合理的劑量范圍進行配方篩選測定 除草劑混合使用配比篩選及評價方法 混用聯合作用類型的評價方法 交互作用圖解法 先確定組分A或組分B單用時防效為50 或90 的劑量 然后假設2種藥劑表現為相加作用 則A的劑量增減可以通過B的劑量來彌補 如可采用A 1 4A 3 4B 1 2A 1 2B 3 4A 1 4B B等不同配比處理 AB直線為2劑相加作用的準線 若混用后防效各點均在準線之上 表示增效 反之即為減效 此法的優點是在田間或室內易于進行 設計簡單 最少用3個處理就可看出結果 但此法對2種藥劑的增效減效不能因其比例的不同而變化 除草劑混用配方篩選試驗及評價方法的具體應用 確定混劑配比篩選評價方法的原則 殺草譜相近型 原則上介紹的5種評價方法均可 但以等效線法和共毒系數法較好 即能測定出混用后的聯合作用類型 還可篩選出相對較好的混用配比 但需要的試驗處理較多 試驗規模較大 Gowing法 Colby法和交互作用圖解法以較少的處理即可評價混用的聯合作用類型 但這三種方法不同混配組合的變化較少 用來篩選最佳混用配比效果會略差 但能有效評判已知配方的合理性 若為三元除草劑的混用則可采用共毒系數法或Colby法進行測定 殺草譜互補型 原則上不宜采用等效線法和交互作用圖解法 試驗時可以選擇至少2種代表雜草分別進行混用聯合作用的評價 應用Gowing法或Colby法多劑量組合處理進行評價比較有效 若為三元混用則用Colby法較好 除草劑混用配方篩選試驗及評價方法的具體應用 確定混劑配比篩選評價方法的原則 值得注意的是 現在很多除草劑混劑基本上是市場上大量應