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文檔簡介

1 檢測細胞色素P4501A酶的高選擇性比率雙光子熒光探針 文獻出處 DOI 10 1021 jacs 5b09854J Am Chem Soc 2015 137 14488 14495 2 Contents Introduction 1 2 Experimentalsection 1 2 3 4 ResultsandRepresentation 3 1 Introduction CYP1A 抗干擾差成像效果差毒性大 人體藥物新陳代謝酶 對致癌物質(zhì)活性有重要影響 活性腔中有豐富的羥基氨基酸 氫鍵和 相互作用可能對基底的組成產(chǎn)生作用 傳統(tǒng)單顯微鏡熒光探針 NCMN的設(shè)計依據(jù) CYP1Ad的底物偏好對位有較強的脫烷基化作用 2 Experimentalsection 3 表征 結(jié)論 NCMN作為檢測CYP1A的探針可行 肉眼色比 112nm紅移 機理 3 表征 結(jié)論 NCMN的脫甲基化具有良好的反應(yīng)性和理想的動力學行為 有潛能對復雜生物體中的CYP1A進行定量測定 表征人肝微粒體中CYP1A的量化 結(jié)論 a b c 確定了NCMN的高選擇性 d e f 表面NCMN可以作為CYP1A調(diào)節(jié)器的篩選和表征 活細胞成像應(yīng)用 11 2 單光子 雙光子 未加抑制劑 加CYP1A抑制劑 結(jié)論 熒光響應(yīng)是由于CYP1A調(diào)節(jié)NCMN所致 NCMN可以用單光子 雙光子激發(fā)成像來檢測活細胞中CYP1A的活性 NCMNe在完整細胞和細胞勻漿內(nèi)檢測CYP1A的量 正常 1nMTCDD 10nMTCDD 結(jié)論 NCMN可以被用于篩選有效的CYP1A誘導劑 并檢測活細胞中生成的CYP1A的酶活性 小鼠肝組織中CYP1A的三維深度成像 放大圖 結(jié)論 NCMN組織滲透力強 組織中的CYP1A適合用雙光子深度熒光成像 15 3 Resultsanddiscussion CYP1A2 CYP1A1 亞鐵血紅素 鐵原子 結(jié)論 三條H bond表明 COOH在識別和對接CYP1A中的重要作用催化

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