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文檔簡介
DB13河北省質量技術監督局發布I本標準按照GB/T1.1-2009給本標準起草單位:河北省海洋與水產科學研究院、河北農業大學海洋學院、保定市水產本標準主要起草人:肖國華、宮春光、高曉田、任雪蓮、張建修、徐榮郅、王東輝、胡1西伯利亞鱘種質鑒定規范下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版GB/T18654.1養殖魚類種質檢驗第1部分GB/T18654.2養殖魚類種質檢驗第2部分GB/T18654.3養殖魚類種質檢驗第3部分GB/T18654.4養殖魚類種質檢驗第4部分:年齡與生GB/T18654.6養殖魚類種質檢驗第6部分:繁殖性GB/T18654.13養殖魚類種質檢驗第13部分:同工酶電泳GB/T18654.14養殖魚類種質檢驗第14部分:DNA含GB/T18654.15養殖魚類種質檢驗第15部分:RA魚體修長,呈紡錘形,橫切呈五角形,向尾部延伸變細,吻長尖,口腹位,口裂較小,歪形尾,鰓蓋骨愈合為一,鰓蓋膜彼此不相連而與頰部相連。體裸露無鱗具5列骨板,1列背骨側骨板,2列腹骨板;第一背骨板不是最大的骨板,身體最高點不在第一骨板處;側骨板通常與近口裂。鰓耙有結節,一般為3個。魚體背部呈淡灰黑色2圖1西伯利亞鱘外形4.2可數性狀背鰭鰭式:D.30~56。臀鰭鰭式:A.17~33。背骨板數:10~20。側骨板數:37~56,通常為42~47。腹骨板數:7~16。第一鰓弓(左)外側鰓耙數:20~49,通常為27~32。4.3可量性狀比例西伯利亞鱘可量性狀比例見表1。表1西伯利亞鱘的可量性狀比例(平均值士標準差)10齡魚5生長與繁殖在人工養殖條件下,不同年齡組的西伯利亞鱘魚體長和體重范圍見表2。3DB13/T2746—2018表2西伯利亞鱘各年齡組體長和體重范圍1齡魚體長(cm)體重(g)性成熟年齡:自然條件下雌魚為19齡~20齡,雄魚為17齡~18齡;人工養殖條件下雌魚為7齡以上,雄魚為5齡以上。繁殖周期:野生狀態下為2年以上;人工養殖條件下為1年以上。懷卵量占體重的10%~6遺傳學特征6.1西伯利亞鱘DNA含量6.2生化遺傳學特征西伯利亞鱘肝臟酯酶(EST)同工酶有6條酶帶,電泳圖及酶帶電泳模式圖見圖2。圖2西伯利亞鱘肝臟酯酶電泳圖譜及模式圖6.3分子遺傳學標記6.3.1西伯利亞鱘特異性RAPD遺傳圖譜的建立及特征標記4圖3RAPD引物的擴增產物6.3.2西伯利亞鱘微衛星DNA分子標記的建立采用14對微衛星引物進行基因型鑒定,西伯利亞鱘在這14對引物的等位基因長度范圍見表3?;蛐蛿祿治鼋Y果見圖4。表314個微衛星引物序列及其在西伯利亞鱘的等位基因長度范圍引物序列等位基因長度范圍F:TATCCCCTCCACTGGAAATR:GTTAAACATCCCTF:CGATTTGATTGGCTCTTGTAR:TGCAAATAAF:GGCAGGATTACATCTCCTGAR:TTACTAACTGCTAGATAATAF:ACCCGAGCTGTCACATTACTR:AAAATAACGF:GCAATTCGTGTTATGTTCATTTR:TGCATTCAGF:TGCATGACACAGGACTTACCR:TGCCTCTCAF:ACCCGCAATTATTAGGACR:CAGGACAF:TCACGCAGTCTCACAAGGR:TTCAATGF:ACACTATCCCGCCACAATR:CCACTGAF:CATCTTAGCCGTCTGTGGTACR:CAGGTCCCTF:TCCACAATCCTGAATAATGACR:GCACCATCTAATACGAAATTGF:TTCTGAAGTTCACACATTGR:ATGGAGCF:CTCTAGTCTTTGTTGATTACAGR:CAAAGGACF:TTATTGCATGGTGTAGCTAAACR:AGCCCAACACAGA51、西伯利亞鱘品種池,2、非西比利亞鱘樣品。圖4微衛星標記基因型數據分析結果圖7.5DNA含量測定7.7分子遺傳學標記方法伸5min。6退火溫度(℃)Atr-1101Atr-105Atr-107Atr-109Atr-114Atr-117Afu19Afu22Afu39Afu54Afu68使用95%酒精把長板擦洗一遍,待酒精揮發后涂1.5mL親和溶液;再使用95%酒精遍,待酒精揮發后涂200μL剝離溶液。取μL的10%過硫酸銨(現用現配),充分混勻后灌入兩塊玻璃之間。用鯊魚齒梳子的背面沿兩玻璃板縫隙水平插入膠中約5mm~6mm。等約1.5h待凝膠聚合后,拔出梳子,用水將玻璃板干后裝在
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