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微生物的純培養技術主講教師：須瑛敏蘇州農業職業技術學院SuzhouAgriculturalVocationalandTechnicalCollege1無菌操作技術2微生物的分離3微生物的培養微生物的純培養技術Part1無菌操作技術01無菌操作技術無菌操作技術01無菌室、超凈工作臺。試管、培養皿、三角瓶等。環境玻璃儀器材料人生理鹽水培養基。消毒酒精燈火焰5厘米范圍內操作。無菌操作技術01Part2微生物的分離02微生物的分離0201平板劃線分離法02稀釋傾注平板分離法03涂布分離法02微生物的分離平板劃線分離法用接種環以無菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增多而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養后，可在平板表面得到單菌落。微生物的分離02分區劃線（適用于濃度較大的樣品）。特點：快速、方便。連續劃線（適用于濃度較小的樣品）。微生物的分離0202微生物的分離②傾注平板法將待分離的材料用無菌生理鹽水進行一系列稀釋。然后取不同稀釋液少許(一般是1ml)分別與已熔化并冷卻到50℃左右的瓊脂培養基混合倒入無菌平皿中，冷凝后進行培養。如果稀釋得當，在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落，這樣的菌落可能是由一個細胞繁殖而來的，隨后挑取該單個菌落，或重復以上操作數次，就可得到純培養。比較常用的方法，但對熱敏感菌及嚴格耗氧菌不太適合。操作過程圖示：微生物的分離021ml1ml1ml1ml1ml1ml9ml9ml9ml9ml02微生物的分離③平板涂布分離法先用固體培養基制成無菌平板。將一定稀釋度的少量樣品（一般0.2-0.5ml）加到平板上，并用無菌玻璃涂棒將菌液均勻涂布到整個平板表面，經過培養后挑取單個菌落。是最常用的方法。簡單易行，但易造成機械損傷02微生物的分離Part3微生物的培養0303微生物的培養①好氧培養與厭氧培養。②分批培養、流加培養和連續培養。03微生物的培養1、好氧培養靜置培：試管、平板震蕩培養：搖床小型發酵罐：幾升—幾十升厭氧培養箱微生物的培養03厭氧培養獨立封閉的系統微生物的培養032、分批培養、流加培養和連續培養補料邊補料邊以同樣速度排出發酵液微生物的培養032、分批培養、流加培養和連續培養感謝觀看主講教師：須瑛敏蘇州農業

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