刑偵破案DNA的應(yīng)用基因組測序插入人胰島素基因的大腸桿菌基因工程親子鑒定那么，DNA能否像光合色素一樣可以被提取呢？如果成功提取，我們又如何去鑒定呢？第2節(jié)

DNA的粗提取與鑒定第3章基因工程010203關(guān)注基因工程的誕生和發(fā)展歷程，參與討論基礎(chǔ)理論和技術(shù)發(fā)展如何催生基因工程。（社會責(zé)任）探究DNA的物理與化學(xué)性質(zhì)，進(jìn)行DNA分子的提取與鑒定。（科學(xué)思維）學(xué)習(xí)目標(biāo)運(yùn)用結(jié)構(gòu)與功能觀說明基因工程的各種工具的特點(diǎn)。（生命觀念）任務(wù)一粗提取DNA問題1：粗提取DNA可以選擇那些材料？為什么？問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？1628331238（一）選材原則：DNA含量高、材料易得、便于提取、新鮮的材料注意事項(xiàng)：（哺乳動物的成熟紅細(xì)胞）無細(xì)胞核和線粒體，幾乎不含DNA，不適合；雞血中紅細(xì)胞有核DNA。任務(wù)一粗提取DNA問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？細(xì)胞核核膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞膜細(xì)胞壁思考1：如何保護(hù)DNA?DNA酶Mg2+EDTA任務(wù)一粗提取DNA問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？細(xì)胞核核膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞膜細(xì)胞壁思考1：如何保護(hù)DNA?DNA酶Mg2+EDTA抑制思考2：DNA如何穿過核膜、細(xì)胞膜?膜成分：主要是脂質(zhì)和蛋白質(zhì)SDS：使蛋白質(zhì)變性，瓦解生物膜任務(wù)一粗提取DNA問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？細(xì)胞核核膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞膜細(xì)胞壁思考3：DNA如何穿過細(xì)胞壁?成分：主要是纖維素和果膠機(jī)械外力破碎------研磨細(xì)胞外思考4：在細(xì)胞外要提供怎樣的環(huán)境?Tris-HCl緩沖液：維持PH環(huán)境，穩(wěn)定DNA任務(wù)一粗提取DNA思考5：在研缽中，可能存在哪些物質(zhì)?細(xì)胞壁碎片、生物膜、DNA、蛋白質(zhì)等其他細(xì)胞內(nèi)容物思考6：如何將DNA與其他物質(zhì)分離開?過濾高濃度NaCl溶液：溶解DNA，鹽析蛋白質(zhì)任務(wù)一粗提取DNA（二）試劑及作用：試劑作用SDSEDTATris-HCl緩沖液NaCl溶液蛋白質(zhì)變性，瓦解生物膜抑制DNA酶維持PH環(huán)境，穩(wěn)定DNA溶解DNA，鹽析蛋白質(zhì)思考6：過濾可以分離不可溶性雜志，那么細(xì)胞中可溶性物質(zhì)又該如何與DNA分離呢?蛋白質(zhì)等溶解在酒精中，DNA不溶于酒精而析出；研磨液任務(wù)一粗提取DNA取材研磨過

濾DNA析出（三）實(shí)驗(yàn)步驟：任務(wù)一粗提取DNA（四）注意事項(xiàng)：1、研磨不充分，會使DNA分子不能從細(xì)胞核中釋放出來，從而使研磨液中

的DNA含量較低，影響最終提取的DNA量。2、過濾不能否用濾紙代替紗布，因?yàn)镈NA會被吸附到濾紙上而大量損失，影響最終提取的DNA量。3、4℃冰箱低溫放置，低溫抑制DNA水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解4、離心轉(zhuǎn)速過低（過高）、時間不足（太長）：高速離心或長時間離心會導(dǎo)致DNA斷裂，使DNA也沉淀，低速離心或短時間離心使細(xì)胞碎片、多糖等未徹底去除。5、冷酒精作用①可抑制DNA水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解；②抑制分子運(yùn)動，使DNA易形成沉淀析出；③低溫有利于增加DNA分子的柔韌性，減少其斷裂6、攪拌時應(yīng)輕緩、并沿一個方向目的：減少DNA斷裂，以便獲得較完整的DNA分子任務(wù)二鑒定DNA思考1：如何檢測白色絲狀物中含有DNA?二苯胺試劑設(shè)置對照：實(shí)驗(yàn)組：加入白色絮狀物對照組：不加入白色絮狀物需要現(xiàn)用現(xiàn)配有毒，需通風(fēng)任務(wù)二鑒定DNA實(shí)驗(yàn)步驟：溶解DNA鑒定任務(wù)二鑒定DNA實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論1號試管2號試管加入2mol/LNaCl溶液絲狀物/沉淀物（DNA）用玻璃棒攪拌加入二苯胺試劑沸水浴冷卻后，觀察現(xiàn)象變藍(lán)不加入加入5mL5mL4mL5min絲狀物溶解5min4mL無不變藍(lán)白色絲狀物中含有DNA二苯胺試劑鑒定呈現(xiàn)藍(lán)色說明實(shí)驗(yàn)基本成功；如果不呈現(xiàn)藍(lán)色，可能的原因有所提取的DNA含量低，或者在實(shí)驗(yàn)操作過程中出現(xiàn)了失誤等。1.提取出絲狀物或沉淀物一定是白色的嗎？用二苯胺試劑鑒定的結(jié)果如何？觀察提取的DNA的顏色，如果不是白色絲狀物，說明DNA中的雜質(zhì)較多。

本實(shí)驗(yàn)粗提取的DNA可能仍然含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)。2.你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些雜質(zhì)嗎？3.本實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果藍(lán)色較淺的原因可能是什么？①材料中的核物質(zhì)沒有充分釋放出來，如研磨不充分。②加入酒精后搖動或攪拌時過猛，DNA被破壞。③二苯胺最好現(xiàn)用現(xiàn)配，二苯胺易被空氣氧化，影響鑒定效果。結(jié)果分析與評價任務(wù)二鑒定DNA（1）DNA純度：看提取物顏色（2）DNA的量：看與二苯胺反應(yīng)顏色的深淺任務(wù)四拓展與延伸如果選用雞血細(xì)胞該進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?zāi)?？D沸水浴加熱5min以上，冷卻后可觀察到較為明顯的現(xiàn)象

隨堂檢測例2、2024·江蘇揚(yáng)州高二下期中)某實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行了“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。下列說法正確的是(

)A.溶液甲是NaCl溶液，加入它的目的是溶解DNAB.溶液乙在使用時需用50～60℃水浴加熱5minC.實(shí)驗(yàn)也可用雞血、豬血等動物組織作為材料D.粗提取的DNA中含有RNA、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)D解析：DNA不溶于酒精，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可用酒精將DNA與蛋白質(zhì)等初步分離，加入溶液甲后獲得白色絲狀物主要為DNA，故溶液甲為體積