考情解讀考點1.基因工程的誕生。2.基因工程的原理及技術(shù)(含PCR技術(shù))。3.基因工程的應(yīng)用。4.蛋白質(zhì)工程。5.植物組織培養(yǎng)。6.動物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆。7.細(xì)胞融合與單克隆抗體。8.動物胚胎發(fā)育的基本過程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)。9.胚胎干細(xì)胞的移植。10.胚胎工程的應(yīng)用。11.轉(zhuǎn)基因生物的安全性。12.生物武器對人類的威脅。13.生物技術(shù)中的倫理問題。14.簡述生態(tài)工程的原理。15.生態(tài)工程的實例。考情1.考查題型：多以簡答題呈現(xiàn)。2.命題趨勢：基因工程幾乎每年均有考查，多以基因工程的基本程序為背景，既可單獨考查其中相關(guān)的生物學(xué)原理和注意事項，也常結(jié)合細(xì)胞工程和胚胎工程進行綜合考查。1．(選修3P4～6正文)基因工程的工具包括_____________________________，最常用的載體是________________________________________________________________________。2．(選修3P8～11正文)獲取目的基因常用的三種方法：從基因文庫中獲取目的基因、________________________________及________________________________________。3．(選修3P10正文)PCR技術(shù)擴增的過程是：目的基因DNA受熱(90～95℃)變性后解鏈為_________________，_____________與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合(55～60℃，即“復(fù)性”)，然后在________________________________作用下延伸，如此重復(fù)循環(huán)。4．(選修3P11正文)________________是基因工程的核心，一個基因表達(dá)載體的組成除目的基因外，還必須有________、________及________等。5．(選修3P11正文)標(biāo)記基因的作用是____________________________________________。6．(選修3P27正文)蛋白質(zhì)工程是指以______________________及其與____________的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過________________________，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。7.(選修3P36正文)植物組織培養(yǎng)就是在________________條件下，將____________________，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生________________，最終形成____________。8．(選修3P36正文)進行植物體細(xì)胞雜交之前，必須先利用________________去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體，再用________________誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。9．(選修3P44正文)動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有____________、____________________、動物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等。10．(選修3P45正文)人們通常將動物組織經(jīng)_________________處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，將貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用____________等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)稱為____________。11．(選修3P47正文)動物細(xì)胞核移植是將動物的一個細(xì)胞的__________，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。12．(選修3P54正文)單克隆抗體制備過程中涉及兩次篩選，第一次是利用特定的________________________，排除未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞，只留下雜交瘤細(xì)胞；第二次是________________________，獲得足夠數(shù)量的___________________。13．(選修3P61～63正文)哺乳動物精子的發(fā)生是從_________開始的連續(xù)過程，卵子的發(fā)生自胎兒期即形成初級卵母細(xì)胞，排卵前后完成減數(shù)第一次分裂，至受精時完成減數(shù)第二次分裂。14．(選修3P63正文)當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以觀察到________極體時，表明卵子已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵子是否受精的重要標(biāo)志。15．(選修3P64～65正文)_______________________________是阻止多精入卵的兩道屏障。16．(選修3P69正文)用____________處理，使實驗動物排出更多的卵子，然后從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。17．(選修3P79正文)進行胚胎分割時，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的____________________。要注意將____________均等分割。18．(選修3P80正文)哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，是由______________________中分離出來的一類細(xì)胞。19．(選修3P101～105正文)生態(tài)工程所遵循的基本原理有________________________、________________、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理。考點一基因工程(含PCR技術(shù)與應(yīng)用)1．基因工程的理論基礎(chǔ)2．基因工程的3種基本工具3．熟記基因工程的四個操作步驟(1)目的基因的獲取途徑(2)基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)的構(gòu)建(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(4)目的基因的檢測與鑒定4．圖解記憶蛋白質(zhì)工程5．PCR技術(shù)原理與條件6．PCR技術(shù)的過程1．(2021·全國乙，38)用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示。回答下列問題：(1)常用的DNA連接酶有E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，上圖中__________________酶切割后的DNA片段可以用E·coliDNA連接酶連接，上圖中__________________________切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是________________________________________________________________________。(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中______________；質(zhì)粒DNA分子上有________________________，便于外源DNA的插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因(如某種抗生素抗性基因)，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞，方法是_____________________________________________。(4)表達(dá)載體含有啟動子，啟動子是指_______________________________________________。2．(2022·全國乙，38)新冠疫情出現(xiàn)后，病毒核酸檢測和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用。回答下列問題：(1)新冠病毒是一種RNA病毒，檢測新冠病毒RNA(核酸檢測)可以采取RT—PCR法。這種方法的基本原理是先以病毒RNA為模板合成cDNA，這一過程需要的酶是________________，再通過PCR技術(shù)擴增相應(yīng)的DNA片段。根據(jù)檢測結(jié)果判斷被檢測者是否感染新冠病毒。(2)為了確保新冠病毒核酸檢測的準(zhǔn)確性，在設(shè)計PCR引物時必須依據(jù)新冠病毒RNA中的________________________來進行。PCR過程每次循環(huán)分為3步，其中溫度最低的一步是______________。(3)某人同時進行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測(檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體)，若核酸檢測結(jié)果為陰性而抗體檢測結(jié)果為陽性，說明________________________(答出1種情況即可)；若核酸檢測和抗體檢測結(jié)果均為陽性，說明________________________。(4)常見的病毒疫苗有滅活疫苗、蛋白疫苗和重組疫苗等。已知某種病毒的特異性蛋白S(具有抗原性)的編碼序列(目的基因)。為了制備蛋白疫苗，可以通過基因工程技術(shù)獲得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是______________________________________________________。思維延伸——填充(1)(2019·全國Ⅰ，38節(jié)選)在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是______________。在PCR反應(yīng)中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是______________________________________________________________。(2)(2018·江蘇，32節(jié)選)為了便于擴增的DNA片段與表達(dá)載體連接，需在引物的____________端加上限制性酶切位點，且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點，主要目的是_______________________________________________________________________________。(3)(2018·海南，31節(jié)選)用農(nóng)桿菌感染時，應(yīng)優(yōu)先選用黃瓜__________(填“受傷的”或“完好的”)葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是_____________________。(4)(2016·全國Ⅰ，40節(jié)選)某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到氨芐青霉素抗性基因(Ampr)或四環(huán)素抗性基因(Tetr)中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述處理后大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是______________；并且含有質(zhì)粒載體和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是________________________________________________。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有__________的固體培養(yǎng)基。(5)(2017·全國Ⅱ，38節(jié)選)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是________________________________(答出兩點即可)。(6)(2017·全國Ⅰ，38節(jié)選)某同學(xué)從人的基因組文庫中獲得了基因A(有內(nèi)含子)，以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白A，其原因是_______________________________________。(7)(2017·全國Ⅱ，38節(jié)選)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(目的基因——幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是______________________________________________________________________________________。(8)(2019·海南，31節(jié)選)人的T細(xì)胞可以產(chǎn)生某種具有臨床價值的蛋白質(zhì)(Y)，天然的Y通常需要在低溫條件下保存。假設(shè)將Y的第6位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱商岣咂錈岱€(wěn)定性，若要根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理對Y進行改造以提高其熱穩(wěn)定性，具體思路是__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。題組一基因工程1．(2022·四川內(nèi)江高三模擬預(yù)測)W是一種具有特定功能的人體蛋白質(zhì)。某研究小組擬仿照制備乳腺生物反應(yīng)器的研究思路，制備一種膀胱生物反應(yīng)器來獲得W，基本過程如圖所示。回答下列問題：(1)該基因工程的目的基因是____________。通常要將目的基因與載體結(jié)合，而不是直接導(dǎo)入受體細(xì)胞，原因是_______________________________________。(2)步驟①中需要使用的工具酶有________________、________________，步驟②所代表的操作是________________。④過程的早期胚胎能成功移植到代孕母體子宮中的免疫學(xué)基礎(chǔ)是________________________________________________________________________。(3)與乳腺生物反應(yīng)器相比，膀胱生物反應(yīng)器具有哪些優(yōu)點_____________________________________________________________________________________________(答出1點即可)。(4)從上述流程可知，制備膀胱生物反應(yīng)器涉及胚胎工程，在胚胎工程中所用到的主要技術(shù)有__________________________________________________________________(答出2點即可)。2．(2022·內(nèi)蒙古海拉爾第二中學(xué)模擬預(yù)測)科研人員利用基因工程技術(shù)，從長穗偃麥草中獲取抗赤霉病主效基因Fhb7。將Fhb7導(dǎo)入小麥，其表達(dá)產(chǎn)物可減輕赤霉菌對小麥的感染，從而避免小麥赤霉病大規(guī)模爆發(fā)。圖中EcoRⅠ、SacⅠ、HindⅢ和PstⅠ是限制酶切割位點。回答下列問題：(1)基因工程的核心工作是______________________________________________________。(2)該基因工程操作中，先將Fhb7基因與質(zhì)粒組裝，最好選擇________________兩種限制酶，再組裝35S啟動子，最好選擇________________________兩種限制酶。組裝后的重組質(zhì)粒還缺少________________________________________________________________________。(3)利用PCR技術(shù)擴增Fhb7基因的前提是________________________________，以便合成引物，引物在溫度為__________________條件下結(jié)合到互補DNA鏈上，然后在________________的催化下從引物開始進行互補鏈的合成。(4)艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻，也可以說是基因工程的先導(dǎo)，如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么這一啟示是________________________________________________________