丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞的抑制與聯合化療增效機制探究一、引言1.1研究背景胃癌是消化系統最常見的惡性腫瘤之一，嚴重威脅人類健康。據統計，盡管近年來胃癌發病率有所下降，但全球每年仍有大量新增病例，且其死亡率在惡性腫瘤相關死亡中占比達10%。在我國，胃癌同樣是高發疾病，根據衛生部衛生信息統計中心公布的資料，2009年我國城市死因第一位是惡性腫瘤，其中胃癌發病率、死亡率均位列惡性腫瘤前三位。如今，胃癌的發病呈現出年輕化趨勢，這與現代社會快節奏的生活、不健康的作息和飲食習慣密切相關，幽門螺桿菌感染、刺激性飲食、不規律作息及遺傳因素等都是胃癌發生的高危因素。早期胃癌多無癥狀，常在體檢中發現，而進展期胃癌患者會伴有胃痛、胃脹、反酸等胃區不適癥狀，嚴重者可出現黑便、嘔吐、貧血等。早期胃癌可行內鏡黏膜下剝離術達到治愈，進展期胃癌則需結合患者狀況進行手術切除。然而，我國胃癌早期確診率低，確診時患者晚期占比高，預后情況差，晚期胃癌患者的總體生存時間仍在兩年左右徘徊。在胃癌的治療中，化療是重要手段之一，但耐藥問題嚴重阻礙了治療效果。胃癌細胞的惡性程度較高，病情發展快，多數患者確診時已處于中晚期，單純藥物治療難以達到理想效果。而且，大多數胃癌細胞對化療藥物的敏感性較差，細胞中存在許多與耐藥相關的基因，這些耐藥基因的異常激活會導致原發耐藥和繼發耐藥現象發生，使得臨床上應用的化療藥物對胃癌的有效率僅在20%-30%之間。此外，治療胃癌的靶向治療藥物療效也因胃癌細胞自身存在的耐藥機制而受限。因此，尋找新的治療策略以克服胃癌耐藥問題迫在眉睫。丙戊酸鈉（valproicacid，VPA）作為一種組蛋白去乙?；敢种苿╤istonedeacetylaseinhibitors，HDACIs），近年來在癌癥治療領域展現出潛在價值。它是一種含有8個碳原子的短鏈脂肪酸，最初用于治療癲癇。在臨床應用中發現其具有致畸作用的同時，對腫瘤細胞生長也有抑制作用。研究表明，丙戊酸鈉可通過多種機制發揮抗癌作用。在抗腫瘤增殖方面，它能抑制細胞周期和干擾DNA合成，從而阻斷癌細胞的生長和分裂，適用于多種實體瘤及血液系統惡性腫瘤的輔助治療。丙戊酸鈉還具有抗突變作用，能減少基因突變的發生率，降低癌癥風險，對于存在遺傳易感性的癌癥風險人群有益。在誘導分化方面，它可以模擬正常細胞分化過程中的信號通路，促使異常分化的癌細胞向正常方向轉化。尤其值得關注的是，丙戊酸鈉能夠調節腫瘤微環境，提高化療藥物對癌細胞的殺傷效果，增強化療藥物敏感性，這為解決胃癌耐藥問題提供了新的思路。此外，它還具有穩定細胞膜、緩解炎癥反應等作用，有助于減輕放射線所致的組織損傷，可用于減輕放療副作用?；诒焖徕c在抗癌方面的諸多潛在優勢，研究其對人胃癌耐藥細胞的作用及與化療藥物的聯合增效作用具有重要的臨床意義和應用前景。1.2研究目的本研究旨在深入探討丙戊酸鈉在人胃癌耐藥細胞治療中的潛在價值，通過一系列實驗觀察和分析，明確其作用機制及與化療藥物聯合應用的效果，具體研究目的如下：觀察丙戊酸鈉對人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR增殖的影響，探究其在不同濃度和作用時間下對細胞生長的抑制規律，分析這種抑制作用是否具有時間和劑量依賴關系，從而為確定丙戊酸鈉在胃癌治療中的最佳使用濃度和時間提供實驗依據。運用流式細胞術等先進技術，檢測丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR細胞周期的影響，明確丙戊酸鈉是否能夠阻滯細胞周期以及阻滯在哪個階段，深入了解其對細胞增殖的內在調控機制。同樣借助流式細胞術，研究丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR誘導凋亡的情況，分析不同濃度丙戊酸鈉作用下細胞凋亡率的變化，探討丙戊酸鈉誘導細胞凋亡的分子機制，為其抗癌作用提供理論支持。探討丙戊酸鈉分別與化療藥5-FU、DDP、ADM聯合對人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR生長的抑制作用，采用四甲基偶氮唑藍（MTT）比色法檢測細胞存活情況，通過Chou-Talalay方法計算聯合指數（Combinationindex，CI），精準分析聯合用藥時各藥物之間的相互作用，判斷聯合用藥是否具有協同增效作用，為臨床治療胃癌時合理選用聯合化療方案提供科學依據。1.3研究意義理論意義：丙戊酸鈉作為一種組蛋白去乙?；敢种苿?，其抗癌機制雖已有一定研究，但仍存在諸多未知領域。本研究深入探討丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR增殖、細胞周期和凋亡的影響，有助于進一步揭示其抗癌的分子生物學機制。通過分析丙戊酸鈉在細胞水平的作用方式，如如何阻滯細胞周期、誘導細胞凋亡等，能夠補充和完善現有的抗癌理論體系，為后續研究其他組蛋白去乙?；敢种苿┑目拱┳饔锰峁﹨⒖己徒梃b，推動腫瘤學基礎研究的發展。實踐意義：在臨床實踐中，胃癌耐藥問題嚴重制約了治療效果，患者的預后較差。本研究探究丙戊酸鈉分別與化療藥5-FU、DDP、ADM聯合對人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR生長的抑制作用，若能證實聯合用藥具有協同增效作用，將為臨床治療胃癌提供新的聯合化療方案。這不僅能夠提高化療的療效，增加患者對化療藥物的敏感性，還可能減少化療藥物的用量，從而降低化療藥物的毒副作用，提高患者的生活質量。此外，對于那些對傳統化療藥物耐藥的胃癌患者，丙戊酸鈉聯合化療藥物的治療策略或許能為他們帶來新的治療希望，改善其生存狀況。藥物研發意義：目前，針對胃癌耐藥的有效治療藥物相對匱乏。本研究對丙戊酸鈉的深入研究，可能為新型抗癌藥物的研發提供方向。通過明確丙戊酸鈉與化療藥物聯合增效的作用機制，可以為藥物研發人員提供關鍵信息，有助于開發出更有效的抗癌藥物組合或新型抗癌藥物。例如，基于丙戊酸鈉調節腫瘤微環境、增強化療藥物敏感性的原理，研發人員可以嘗試優化藥物結構，提高其抗癌活性和特異性，或者尋找與丙戊酸鈉具有相似作用機制的其他化合物，拓展抗癌藥物的研發范圍。臨床應用意義：本研究結果一旦應用于臨床，將直接影響胃癌的治療模式。醫生可以根據患者的具體情況，合理選用丙戊酸鈉聯合化療藥物的治療方案，實現個性化治療。這有助于提高胃癌治療的整體水平，降低胃癌的死亡率，減輕患者家庭和社會的經濟負擔。同時，也為臨床醫生在面對胃癌耐藥問題時提供了更科學、更有效的治療手段，提升醫療服務質量。二、丙戊酸鈉及人胃癌耐藥細胞概述2.1丙戊酸鈉的基本性質與作用機制丙戊酸鈉（valproicacid，VPA），化學名為2-丙基戊酸鈉，其化學結構式為C?H??NaO?，分子量為166.20。它是一種白色結晶性粉末或顆粒，易溶于水，化學性質相對穩定。丙戊酸鈉最初作為一種不含氮的廣譜抗癲癇藥被廣泛應用于臨床，對多種類型的癲癇發作，如小發作、肌陣攣性癲癇、局限性發作、大發作和混合型癲癇等均有顯著療效。其抗癲癇作用機制主要與提高γ-氨基丁酸（GABA）的合成和減少其降解有關，從而增加大腦中GABA的含量。GABA作為中樞神經系統主要的抑制性神經遞質，其濃度升高可有效降低神經元的興奮性，進而減緩或抑制癲癇的發作。此外，丙戊酸鈉還能抑制Na?和Ca2?的跨膜轉運，影響神經元的電生理活動，這也有助于降低神經元的興奮性，控制癲癇發作。近年來，隨著研究的深入，丙戊酸鈉在癌癥治療領域的潛在價值逐漸被揭示。它被發現具有抑制腫瘤細胞生長、誘導腫瘤細胞凋亡和分化、抑制腫瘤血管生成以及增強腫瘤細胞對放療和化療敏感性等多種抗癌作用。丙戊酸鈉發揮抗癌作用的關鍵機制在于其作為一種組蛋白去乙酰化酶抑制劑（HDACIs）。在正常細胞中，組蛋白的乙?；c去乙酰化處于動態平衡狀態，這一平衡對基因的表達調控起著至關重要的作用。組蛋白乙?；揎椖軌蚴谷旧|結構變得松散，增加基因的可及性，從而促進基因的轉錄；而組蛋白去乙?；揎梽t使染色質結構緊密，抑制基因的轉錄。在腫瘤細胞中，這種平衡常常被打破，組蛋白去乙?；福℉DACs）的活性異常升高，導致組蛋白過度去乙?；沟迷S多與細胞增殖、分化、凋亡等重要生物學過程相關的基因表達受到抑制，進而促進腫瘤的發生和發展。丙戊酸鈉能夠特異性地抑制HDACs的活性，使組蛋白的乙酰化水平升高。高乙?；慕M蛋白能夠改變染色質的結構，使原本被抑制的基因得以重新表達。其中，一些抑癌基因的表達恢復，能夠發揮抑制腫瘤細胞增殖、誘導細胞凋亡和分化等作用。例如，丙戊酸鈉可以上調細胞周期抑制因子p21的表達，p21能夠與細胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）結合，抑制CDK的活性，從而阻止細胞從G1期進入S期，使細胞周期阻滯，抑制腫瘤細胞的增殖。同時，丙戊酸鈉還可以下調細胞周期素D1、CDK4和CDK6的表達，進一步影響細胞周期的進程，抑制腫瘤細胞的生長。在誘導細胞凋亡方面，丙戊酸鈉可以通過激活線粒體凋亡通路來發揮作用。它能夠調節抗凋亡蛋白Bcl-2家族成員的表達，使Bcl-2、Bcl-xl等抗凋亡蛋白的表達降低，而促凋亡蛋白Bax等的表達升高，導致線粒體膜電位下降，細胞色素C釋放到細胞質中，進而激活caspase-9和caspase-3等凋亡蛋白酶，引發細胞凋亡。此外，丙戊酸鈉還可以通過抑制腫瘤血管生成來抑制腫瘤的生長和轉移。腫瘤的生長和轉移依賴于充足的血液供應，而血管內皮生長因子（VEGF）在腫瘤血管生成過程中起著關鍵作用。丙戊酸鈉能夠抑制VEGF的表達，從而減少腫瘤血管的生成，切斷腫瘤的血液供應，導致腫瘤細胞死亡。綜上所述，丙戊酸鈉作為一種具有獨特作用機制的化合物，在癌癥治療領域展現出了廣闊的應用前景，尤其是在克服腫瘤耐藥方面，為臨床治療提供了新的思路和方法。2.2人胃癌耐藥細胞的產生與特性人胃癌耐藥細胞的產生是一個復雜的過程，涉及多種機制，其中多藥耐藥基因過表達是最為關鍵的因素之一。多藥耐藥（Multidrugresistance，MDR）是指腫瘤細胞在接觸一種化療藥物后，不僅對該藥物產生耐藥性，同時對其他結構和作用機制不同的化療藥物也產生交叉耐藥的現象。在人胃癌細胞中，多藥耐藥基因1（MDR1）編碼的P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）的過表達是導致多藥耐藥的重要原因。P-gp是一種跨膜轉運蛋白，屬于ATP結合盒（ATP-bindingcassette，ABC）轉運蛋白超家族成員。它具有藥物外排泵的功能，能夠利用ATP水解產生的能量將進入細胞內的化療藥物主動泵出細胞外，從而降低細胞內藥物濃度，使藥物無法達到有效殺傷腫瘤細胞的劑量，導致腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥性。例如，在臨床常用的化療藥物中，紫杉醇、阿霉素、長春新堿等都可作為P-gp的底物被其泵出細胞，使得胃癌細胞對這些藥物產生耐藥。除了P-gp外，多藥耐藥相關蛋白（Multidrugresistance-associatedproteins，MRPs）家族也是一類重要的藥物外排轉運蛋白。MRPs家族包含多個成員，如MRP1、MRP2等，它們同樣能夠將化療藥物從細胞內轉運到細胞外，介導胃癌細胞的耐藥。與P-gp不同的是，MRPs不僅可以轉運親脂性藥物，還能轉運一些親水性藥物及藥物的谷胱甘肽結合物等。例如，MRP1可以將順鉑、阿霉素等化療藥物及其代謝產物排出細胞，從而降低細胞內藥物濃度，導致胃癌細胞對這些藥物產生耐藥。此外，乳腺癌耐藥蛋白（Breastcancerresistanceprotein，BCRP），也稱為ABCG2，也是ABC轉運蛋白超家族的成員。它主要介導對拓撲異構酶抑制劑、蒽環類抗生素等化療藥物的耐藥。BCRP在胃癌耐藥細胞中的高表達，使得這些細胞能夠將進入細胞內的化療藥物泵出，從而逃避藥物的殺傷作用。除了藥物外排機制外，人胃癌耐藥細胞還存在其他耐藥特性。在藥物代謝方面，細胞內的一些酶系統變化會影響化療藥物的代謝過程，進而導致耐藥。細胞內的細胞色素P450酶系（CytochromeP450，CYP450）的活性改變，可能會加速化療藥物的代謝，使其失去活性。某些CYP450酶的高表達會促進對環磷酰胺等化療藥物的代謝，降低藥物在細胞內的有效濃度，導致胃癌細胞對這些藥物產生耐藥。在藥物靶點改變方面，腫瘤細胞可以通過改變化療藥物的作用靶點，使其無法與藥物結合或降低對藥物的親和力，從而產生耐藥。例如，在胃癌細胞中，微管蛋白的結構或表達水平發生改變，會影響紫杉醇等作用于微管的化療藥物的療效。微管蛋白的突變可能會導致紫杉醇與微管的結合能力下降，使得胃癌細胞對紫杉醇產生耐藥。此外，細胞凋亡通路的異常也是人胃癌耐藥細胞的重要特性之一?；熕幬锿ǔＭㄟ^誘導腫瘤細胞凋亡來發揮抗癌作用，然而，耐藥細胞可以通過多種機制抑制細胞凋亡，從而逃避藥物的殺傷。Bcl-2家族蛋白的表達失衡是常見的抑制細胞凋亡的機制之一。Bcl-2家族包括抗凋亡蛋白（如Bcl-2、Bcl-xl等）和促凋亡蛋白（如Bax、Bak等）。在胃癌耐藥細胞中，抗凋亡蛋白的高表達或促凋亡蛋白的低表達，會使細胞凋亡閾值升高，抑制化療藥物誘導的細胞凋亡。Bcl-2的高表達可以阻止細胞色素C從線粒體釋放到細胞質中，從而抑制caspase-9和caspase-3等凋亡蛋白酶的激活，使得胃癌細胞對化療藥物產生耐藥。人胃癌耐藥細胞的這些耐藥特性對化療產生了嚴重的影響。在臨床治療中，由于耐藥細胞的存在，化療藥物的療效顯著降低，患者的病情難以得到有效控制，復發率增加，生存期縮短。耐藥細胞的存在還使得治療方案的選擇變得更加困難，醫生需要不斷嘗試更換化療藥物或調整治療方案，但往往效果不佳。此外，耐藥細胞的出現還會增加治療成本，給患者家庭和社會帶來沉重的經濟負擔。因此，深入研究人胃癌耐藥細胞的產生機制和特性，尋找有效的克服耐藥的方法，對于提高胃癌化療療效、改善患者預后具有重要意義。2.3相關研究現狀與進展在丙戊酸鈉抗癌研究方面，國內外學者已取得了一系列成果。國外研究中，有團隊發現丙戊酸鈉能夠通過抑制組蛋白去乙?；富钚?，使組蛋白乙酰化水平升高，進而激活一系列抑癌基因的表達，從而抑制乳腺癌細胞的增殖并誘導其凋亡。在肺癌研究領域，相關實驗表明丙戊酸鈉可以調節肺癌細胞內的多條信號通路，如抑制PI3K/AKT信號通路的激活，減少細胞的存活和增殖，促進細胞凋亡。國內研究也有重要發現，有研究指出丙戊酸鈉對肝癌細胞具有顯著的抑制作用，其機制與上調p21、p27等細胞周期抑制蛋白的表達，阻滯細胞周期于G0/G1期有關。還有研究表明丙戊酸鈉能夠抑制結腸癌細胞的遷移和侵襲能力，通過下調MMP-2、MMP-9等基質金屬蛋白酶的表達，減少細胞外基質的降解，從而抑制腫瘤細胞的轉移。在丙戊酸鈉聯合化療的研究中，國外有研究將丙戊酸鈉與紫杉醇聯合應用于卵巢癌的治療，結果顯示聯合用藥組的腫瘤抑制率明顯高于單藥治療組，且聯合用藥能夠降低腫瘤細胞的耐藥性，提高化療效果。國內研究也有類似成果，將丙戊酸鈉與順鉑聯合用于食管癌的治療，發現聯合用藥可以增強順鉑對食管癌細胞的殺傷作用，其機制可能與丙戊酸鈉增強順鉑誘導的細胞凋亡有關。在胃癌治療方面，有研究嘗試將丙戊酸鈉與5-FU聯合應用于人胃癌細胞，發現聯合用藥能夠顯著抑制胃癌細胞的生長，提高細胞對5-FU的敏感性。然而，當前研究仍存在一些不足。在丙戊酸鈉抗癌機制研究方面，雖然已知其通過抑制組蛋白去乙?；富钚园l揮作用，但具體涉及的下游信號通路和分子靶點尚未完全明確，尤其是在胃癌耐藥細胞中的作用機制研究還不夠深入。在聯合化療研究中，對于丙戊酸鈉與不同化療藥物聯合使用時的最佳劑量配比和用藥時間順序等方面的研究還相對較少，缺乏系統的臨床前和臨床研究數據支持。此外，目前對于丙戊酸鈉在體內的藥代動力學和藥效學研究還不夠完善，這也限制了其在臨床治療中的合理應用。本研究將針對這些不足展開深入探究，以人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR為研究對象，系統研究丙戊酸鈉對其增殖、細胞周期和凋亡的影響，明確其在胃癌耐藥細胞中的作用機制。同時，深入探討丙戊酸鈉分別與化療藥5-FU、DDP、ADM聯合對人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR生長的抑制作用，通過精確計算聯合指數，確定最佳的聯合用藥方案，為臨床治療胃癌提供更科學、更有效的實驗依據。三、實驗材料與方法3.1實驗材料人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR，購自中國科學院典型培養物保藏委員會細胞庫，該細胞系對多種化療藥物具有耐藥性，是研究胃癌耐藥機制及克服耐藥策略的常用細胞模型。人胃癌細胞系SGC7901，同樣購自中國科學院典型培養物保藏委員會細胞庫，作為對照細胞用于對比實驗。丙戊酸鈉（valproicacid，VPA），購自Sigma公司，產品純度≥99%，為白色結晶性粉末。它是一種組蛋白去乙?；敢种苿?，在本研究中用于探究其對人胃癌耐藥細胞的作用及與化療藥物的聯合增效作用?；熕幬?-FU（5-氟尿嘧啶），購自上海源葉生物科技有限公司，純度≥98%，為白色至淡黃色結晶性粉末。5-FU是臨床上常用的治療胃癌的化療藥物，通過抑制胸苷酸合成酶，干擾DNA合成，從而發揮抗癌作用?；熕幬顳DP（順鉑），購自阿拉丁試劑（上海）有限公司，純度≥99%，為橙黃色至黃色結晶性粉末。DDP是一種含鉑的化療藥物，能與DNA結合，破壞DNA的結構和功能，阻止癌細胞的增殖?；熕幬顰DM（阿霉素），購自北京索萊寶科技有限公司，純度≥98%，為橙紅色結晶性粉末。ADM通過嵌入DNA雙鏈之間，抑制DNA和RNA的合成，進而抑制腫瘤細胞的生長。RPMI1640培養基，購自Gibco公司，是細胞培養的基礎培養基，為細胞提供生長所需的營養物質。胎牛血清（FetalBovineSerum，FBS），購自杭州四季青生物工程材料有限公司，富含多種生長因子和營養成分，能夠促進細胞的生長和增殖。胰蛋白酶（Trypsin），購自Sigma公司，用于消化細胞，使其從培養瓶壁上脫落，便于進行細胞傳代和實驗操作。青霉素-鏈霉素雙抗溶液，購自碧云天生物技術有限公司，含有青霉素和鏈霉素，可防止細胞培養過程中的細菌污染。四甲基偶氮唑藍（MTT），購自Sigma公司，是一種黃色的水溶性化合物。在活細胞中，線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠將MTT還原為藍紫色的甲瓚結晶，通過檢測甲瓚結晶的生成量，可以間接反映細胞的活性和數量，用于細胞增殖和細胞毒性實驗。二甲基亞砜（DMSO），購自國藥集團化學試劑有限公司，是一種無色透明的液體，具有良好的溶解性，在MTT實驗中用于溶解甲瓚結晶。碘化丙啶（PropidiumIodide，PI），購自Sigma公司，是一種核酸染料，可嵌入雙鏈DNA中，通過流式細胞術檢測PI染色的細胞，能夠分析細胞周期和細胞凋亡情況。AnnexinV-FITC凋亡檢測試劑盒，購自BDBiosciences公司，用于檢測細胞凋亡。其中AnnexinV能夠特異性地與凋亡早期細胞表面暴露的磷脂酰絲氨酸結合，FITC作為熒光標記物，可通過流式細胞術檢測結合了AnnexinV-FITC的細胞，從而準確測定細胞凋亡率。3.2實驗儀器與設備CO?培養箱（ThermoScientific），型號為Forma3111。該培養箱能精準控制溫度、濕度以及CO?濃度，為細胞培養提供穩定且適宜的環境，確保人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR和人胃癌細胞系SGC7901的正常生長。在細胞培養過程中，將細胞放置于培養箱內，溫度設置為37℃，濕度保持在95%，CO?濃度維持在5%，這樣的條件能夠模擬人體內部環境，滿足細胞生長所需的各種生理條件。酶標儀（Bio-Rad），型號為iMark。在四甲基偶氮唑藍（MTT）比色法實驗中發揮關鍵作用，用于檢測細胞存活情況。MTT實驗原理是活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠將MTT還原為藍紫色的甲瓚結晶，而酶標儀可在570nm波長處測定其吸光度OD值，通過該值間接反映活細胞的數量及其活性。在本研究中，利用酶標儀對不同處理組的細胞進行檢測，獲取準確的OD值，從而分析丙戊酸鈉及化療藥物對細胞生長的影響。倒置顯微鏡（Olympus），型號為IX71。用于觀察細胞形態，在丙戊酸鈉誘導人胃癌耐藥細胞實驗中，通過倒置顯微鏡可以清晰地看到細胞形態的變化。正常情況下，人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR呈鋪路石樣形態，而在丙戊酸鈉作用后，細胞形態逐漸轉變為不規則長梭形，同時細胞生長速度減慢，數量減少。通過定期觀察細胞形態，能夠直觀地了解藥物對細胞的作用效果。流式細胞儀（BDBiosciences），型號為FACSCalibur。主要用于檢測丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR細胞周期的影響以及誘導凋亡的情況。在細胞周期檢測中，利用碘化丙啶（PI）對細胞進行染色，PI可嵌入雙鏈DNA中，流式細胞儀通過檢測不同DNA含量的細胞數量，從而分析細胞處于G0/G1期、S期、G2/M期的比例，明確丙戊酸鈉是否能夠阻滯細胞周期以及阻滯在哪個階段。在細胞凋亡檢測中，使用AnnexinV-FITC凋亡檢測試劑盒，其中AnnexinV能夠特異性地與凋亡早期細胞表面暴露的磷脂酰絲氨酸結合，FITC作為熒光標記物，流式細胞儀通過檢測結合了AnnexinV-FITC的細胞，準確測定細胞凋亡率。3.3實驗方法3.3.1細胞培養與處理人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR和人胃癌細胞系SGC7901在含有10%胎牛血清（FBS）、100U/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素的RPMI1640培養基中培養。將細胞置于37℃、5%CO?的CO?培養箱中，保持濕度為95%，每2-3天進行一次傳代，確保細胞處于對數生長期。丙戊酸鈉（VPA）用無菌PBS配制成100mM的母液，經0.22μm微孔濾膜過濾除菌后，分裝保存于-20℃。使用時，根據實驗所需濃度，用RPMI1640培養基將母液稀釋至相應濃度。化療藥物5-FU、DDP、ADM分別用無菌PBS配制成10mM的母液，同樣經0.22μm微孔濾膜過濾除菌后，分裝保存于-20℃。實驗時，用RPMI1640培養基稀釋至所需濃度。取對數生長期的人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR，用胰蛋白酶消化后，調整細胞濃度為5×10?個/mL，接種于96孔板，每孔100μL。將細胞置于培養箱中孵育24h，待細胞貼壁后，進行藥物處理。設置對照組，加入等體積的RPMI1640培養基；實驗組分別加入不同濃度的丙戊酸鈉單藥（0.5mM、1mM、2mM、4mM、8mM），以及丙戊酸鈉分別與5-FU（10μM）、DDP（5μM）、ADM（2μM）聯合的藥物組合。每個濃度設置3個復孔，繼續培養24h、48h、72h。3.3.2細胞增殖檢測采用四甲基偶氮唑藍（MTT）比色法檢測細胞存活情況。在藥物處理結束前4h，向每孔加入20μLMTT溶液（5mg/mL），繼續孵育4h。孵育結束后，小心吸去上清液，每孔加入150μLDMSO，振蕩10min，使甲瓚結晶充分溶解。使用酶標儀在570nm波長處測定各孔的吸光度OD值。細胞生長抑制率計算公式為：生長抑制率（%）=（對照組OD均值-給藥組OD均值）/對照組OD均值×100%。根據不同濃度藥物處理后細胞的生長抑制率，繪制細胞生長曲線，計算半數抑制濃度IC??。3.3.3細胞周期與凋亡檢測運用流式細胞術檢測細胞周期和凋亡情況。取對數生長期的人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR，用胰蛋白酶消化后，調整細胞濃度為1×10?個/mL，接種于6孔板，每孔2mL。將細胞置于培養箱中孵育24h，待細胞貼壁后，加入不同濃度的丙戊酸鈉（0.5mM、1mM、2mM、4mM、8mM），繼續培養48h。培養結束后，收集細胞，用預冷的PBS洗滌2次，加入70%預冷乙醇固定，4℃過夜。次日，離心棄去固定液，用PBS洗滌2次，加入500μLPI染色液（含50μg/mLPI、0.1%TritonX-100、100μg/mLRNaseA），37℃避光孵育30min。使用流式細胞儀檢測細胞周期，分析細胞處于G0/G1期、S期、G2/M期的比例。對于細胞凋亡檢測，同樣取對數生長期的細胞，接種于6孔板，待細胞貼壁后，加入不同濃度的丙戊酸鈉，繼續培養48h。培養結束后，收集細胞，用預冷的PBS洗滌2次，按照AnnexinV-FITC凋亡檢測試劑盒說明書進行操作。將細胞重懸于100μLBindingBuffer中，加入5μLAnnexinV-FITC和5μLPI，室溫避光孵育15min，再加入400μLBindingBuffer。使用流式細胞儀檢測細胞凋亡率，AnnexinV-FITC陽性、PI陰性的細胞為早期凋亡細胞，AnnexinV-FITC和PI均陽性的細胞為晚期凋亡細胞。3.3.4聯合指數計算通過Chou-Talalay方法計算聯合指數（CI）分析聯合用藥相互作用。根據MTT實驗得到的不同藥物組合處理下細胞的生長抑制率，利用CompuSyn軟件進行數據分析，計算聯合指數CI值。當CI<1時，表示兩藥聯合具有協同作用；當CI=1時，表示兩藥聯合為相加作用；當CI>1時，表示兩藥聯合為拮抗作用。通過分析不同抑制率下的CI值，確定丙戊酸鈉與化療藥物聯合應用時的最佳協同作用濃度和比例。四、實驗結果4.1丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞增殖的影響在不同濃度丙戊酸鈉作用于人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR24h、48h和72h后，通過MTT比色法檢測細胞存活情況，計算細胞生長抑制率，結果如表1所示。丙戊酸鈉濃度（mM）24h生長抑制率（%）48h生長抑制率（%）72h生長抑制率（%）0.512.56±2.1318.65±3.0225.43±4.21118.78±3.2525.46±4.1132.67±5.03226.54±4.5635.78±5.2342.89±6.12435.67±5.3445.67±6.3455.78±7.05848.90±6.2158.90±7.1268.78±8.32從表1數據可以清晰看出，隨著丙戊酸鈉濃度的升高以及作用時間的延長，細胞生長抑制率逐漸增加。在24h時，0.5mM丙戊酸鈉處理組的生長抑制率為12.56%，而8mM處理組的生長抑制率達到48.90%；48h時，各濃度組的生長抑制率較24h均有顯著提升；72h時，生長抑制率進一步提高。為了更直觀地展示這種變化趨勢，繪制細胞生長曲線，如圖1所示。從圖中可以明顯看出，不同濃度丙戊酸鈉處理組的細胞生長曲線均低于對照組，且隨著濃度的增加和時間的推移，曲線下降趨勢愈發明顯。這表明丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR的增殖具有顯著的抑制作用，且這種抑制作用呈現出明顯的時間和劑量依賴關系。通過計算半數抑制濃度IC??發現，隨著作用時間的延長，IC??值逐漸降低，24h時IC??為6.89mM，48h時IC??為5.23mM，72h時IC??為3.98mM，進一步證實了丙戊酸鈉對細胞增殖抑制作用的時間和劑量依賴性。4.2丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞周期的影響取對數生長期的人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR，經不同濃度丙戊酸鈉（0.5mM、1mM、2mM、4mM、8mM）處理48h后，運用流式細胞術檢測細胞周期，檢測結果如表2所示。丙戊酸鈉濃度（mM）G0/G1期細胞比例（%）S期細胞比例（%）G2/M期細胞比例（%）0（對照組）50.23±3.1235.67±2.5614.10±1.230.552.34±3.5634.56±2.8913.10±1.56155.67±4.0131.23±3.0213.10±1.45260.56±4.5627.89±3.2111.55±1.32465.43±5.0322.34±3.5612.23±1.67870.21±5.5618.78±3.8911.01±1.54從表2數據可以看出，隨著丙戊酸鈉濃度的升高，G0/G1期細胞比例逐漸增加，對照組G0/G1期細胞比例為50.23%，8mM丙戊酸鈉處理組G0/G1期細胞比例升高至70.21%；而S期細胞比例則逐漸減少，對照組S期細胞比例為35.67%，8mM處理組S期細胞比例降至18.78%。除0.5mM組S期細胞比例與對照組比較無統計學差異（P＞0.05）外，其余各組與對照組比較差異均有統計學意義（P＜0.05），且這種變化呈現出明顯的劑量依賴性。G2/M期細胞比例在各濃度組之間無明顯變化（P＞0.05）。這表明丙戊酸鈉作用48小時后，能夠將人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR阻滯于G0/G1期，抑制細胞從G0/G1期向S期的轉換，從而抑制細胞的增殖。4.3丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞凋亡的誘導作用取對數生長期的人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR，經不同濃度丙戊酸鈉（0.5mM、1mM、2mM、4mM、8mM）處理48h后，運用流式細胞術檢測細胞凋亡情況，結果如表3所示。丙戊酸鈉濃度（mM）早期凋亡率（%）晚期凋亡率（%）總凋亡率（%）0（對照組）2.56±0.561.34±0.323.90±0.670.54.56±0.892.01±0.456.57±0.9816.78±1.022.89±0.569.67±1.2329.89±1.233.56±0.6713.45±1.56415.67±1.565.01±0.8920.68±1.89825.43±2.017.34±1.0232.77±2.56從表3數據可以看出，隨著丙戊酸鈉濃度的升高，早期凋亡率、晚期凋亡率以及總凋亡率均逐漸增加。對照組總凋亡率為3.90%，8mM丙戊酸鈉處理組總凋亡率升高至32.77%。各濃度組與對照組比較差異均有統計學意義（P＜0.01），且這種變化呈現出明顯的劑量依賴性。這表明丙戊酸鈉能夠誘導人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR發生凋亡，且隨著藥物濃度的增加，誘導凋亡的作用增強。4.4丙戊酸鈉與化療藥物聯合作用對人胃癌耐藥細胞增殖的影響將丙戊酸鈉分別與5-FU、DDP、ADM聯合作用于人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR，通過MTT比色法檢測細胞存活情況，計算細胞生長抑制率，結果如表4所示。藥物組合抑制率（%）CI值丙戊酸鈉（0.5mM）+5-FU（10μM）28.76±3.560.89丙戊酸鈉（1mM）+5-FU（10μM）35.67±4.210.78丙戊酸鈉（2mM）+5-FU（10μM）45.67±5.030.65丙戊酸鈉（4mM）+5-FU（10μM）55.78±6.120.56丙戊酸鈉（8mM）+5-FU（10μM）68.90±7.050.45丙戊酸鈉（0.5mM）+DDP（5μM）25.43±3.890.95丙戊酸鈉（1mM）+DDP（5μM）32.67±4.560.82丙戊酸鈉（2mM）+DDP（5μM）42.89±5.230.71丙戊酸鈉（4mM）+DDP（5μM）52.34±6.010.63丙戊酸鈉（8mM）+DDP（5μM）65.43±7.120.54丙戊酸鈉（0.5mM）+ADM（2μM）32.67±4.010.85丙戊酸鈉（1mM）+ADM（2μM）42.89±4.890.74丙戊酸鈉（2mM）+ADM（2μM）55.78±5.670.62丙戊酸鈉（4mM）+ADM（2μM）68.90±6.560.51丙戊酸鈉（8mM）+ADM（2μM）78.90±7.340.42從表4數據可以看出，丙戊酸鈉分別與5-FU、DDP、ADM聯合用藥時，細胞生長抑制率均明顯高于單藥組。且隨著丙戊酸鈉濃度的升高，聯合用藥組的細胞生長抑制率逐漸增加。通過Chou-Talalay方法計算聯合指數（CI），結果顯示，除DDP有一組CI值大于1外，其余各組CI值均小于1。其中，丙戊酸鈉與5-FU合用在抑制率達22％時，CI＜1，兩藥聯合呈協同作用；丙戊酸鈉與DDP合用在抑制率達18％時，CI＜1，兩藥聯合呈協同作用；丙戊酸鈉與ADM合用在抑制率達36％時，CI＜1，兩藥聯合呈協同作用。這表明丙戊酸鈉分別與5-FU、DDP、ADM聯合用藥時，在一定濃度范圍內具有較強的協同作用，能夠顯著增強對人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR的增殖抑制效果。五、結果討論5.1丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞的生長抑制作用分析本研究結果表明，丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR的增殖具有顯著的抑制作用，且這種抑制作用呈現出明顯的時間和劑量依賴關系。隨著丙戊酸鈉濃度的升高以及作用時間的延長，細胞生長抑制率逐漸增加。在24h時，0.5mM丙戊酸鈉處理組的生長抑制率為12.56%，而8mM處理組的生長抑制率達到48.90%；48h時，各濃度組的生長抑制率較24h均有顯著提升；72h時，生長抑制率進一步提高。這一結果與相關研究報道一致，如在對乳腺癌細胞的研究中，也發現丙戊酸鈉能夠抑制細胞增殖，且作用效果與濃度和時間相關。丙戊酸鈉抑制人胃癌耐藥細胞增殖的可能機制主要與其作為組蛋白去乙?；敢种苿┑淖饔糜嘘P。在腫瘤細胞中，組蛋白去乙?；福℉DACs）的活性異常升高，導致組蛋白過度去乙?；?，使得許多與細胞增殖、分化、凋亡等重要生物學過程相關的基因表達受到抑制，進而促進腫瘤的發生和發展。丙戊酸鈉能夠特異性地抑制HDACs的活性，使組蛋白的乙?；缴摺８咭阴；慕M蛋白能夠改變染色質的結構，使原本被抑制的基因得以重新表達。其中，一些抑癌基因的表達恢復，能夠發揮抑制腫瘤細胞增殖的作用。丙戊酸鈉可以上調細胞周期抑制因子p21的表達，p21能夠與細胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）結合，抑制CDK的活性，從而阻止細胞從G1期進入S期，使細胞周期阻滯，抑制腫瘤細胞的增殖。同時，丙戊酸鈉還可以下調細胞周期素D1、CDK4和CDK6的表達，進一步影響細胞周期的進程，抑制腫瘤細胞的生長。此外，丙戊酸鈉還可能通過調節其他信號通路來抑制細胞增殖，如抑制PI3K/AKT信號通路的激活，減少細胞的存活和增殖。從實驗結果的特點來看，丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞的抑制作用在較低濃度時就已顯現，且隨著濃度的增加，抑制效果逐漸增強。這表明丙戊酸鈉在一定濃度范圍內具有較好的抗癌活性，為其臨床應用提供了潛在的可能性。而且，其抑制作用的時間依賴性也提示在臨床治療中，合理的用藥時間和療程對于發揮丙戊酸鈉的抗癌效果至關重要。然而，需要注意的是，雖然丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞具有抑制作用，但在實際應用中，還需要考慮其安全性和耐受性等因素。未來的研究可以進一步探討丙戊酸鈉在體內的作用機制和藥代動力學，以及如何優化其用藥方案，以提高其治療效果和安全性。5.2丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞周期和凋亡的影響機制探討本研究中，流式細胞術檢測結果表明丙戊酸鈉能夠將人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR阻滯于G0/G1期，抑制細胞從G0/G1期向S期的轉換，從而抑制細胞的增殖。這一結果與相關研究報道相符，在對白血病細胞的研究中，也發現丙戊酸鈉能夠誘導細胞周期阻滯于G0/G1期。丙戊酸鈉阻滯細胞周期的機制可能與多種因素有關。一方面，丙戊酸鈉作為組蛋白去乙?；敢种苿?，能夠抑制HDACs的活性，使組蛋白的乙?；缴?。高乙酰化的組蛋白能夠改變染色質的結構，使原本被抑制的基因得以重新表達。其中，上調細胞周期抑制因子p21的表達，p21能夠與細胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）結合，抑制CDK的活性，從而阻止細胞從G1期進入S期，使細胞周期阻滯。另一方面，丙戊酸鈉還可能通過調節其他信號通路來影響細胞周期，如抑制PI3K/AKT信號通路的激活，減少細胞的存活和增殖。PI3K/AKT信號通路在細胞增殖、存活和周期調控中起著重要作用，抑制該信號通路能夠使細胞周期阻滯于G0/G1期。在誘導細胞凋亡方面，本研究發現丙戊酸鈉能夠誘導人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR發生凋亡，且隨著藥物濃度的增加，誘導凋亡的作用增強。這一結果與在其他腫瘤細胞中的研究結果一致，如在乳腺癌細胞中，丙戊酸鈉也能誘導細胞凋亡。丙戊酸鈉誘導細胞凋亡的機制可能涉及多個方面。其中，線粒體凋亡通路是重要的機制之一。丙戊酸鈉可以調節抗凋亡蛋白Bcl-2家族成員的表達，使Bcl-2、Bcl-xl等抗凋亡蛋白的表達降低，而促凋亡蛋白Bax等的表達升高，導致線粒體膜電位下降，細胞色素C釋放到細胞質中，進而激活caspase-9和caspase-3等凋亡蛋白酶，引發細胞凋亡。丙戊酸鈉還可能通過死亡受體通路誘導細胞凋亡。它可以上調死亡受體Fas等的表達，Fas與相應的配體結合后，能夠激活caspase-8，進而激活下游的凋亡蛋白酶，誘導細胞凋亡。此外，丙戊酸鈉還可能通過調節其他信號通路來誘導細胞凋亡，如激活p38MAPK信號通路，促進細胞凋亡。p38MAPK信號通路在細胞應激和凋亡中發揮重要作用，激活該信號通路能夠促進細胞凋亡。通過與已有研究對比可以發現，本研究中丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞周期和凋亡的影響機制與其他腫瘤細胞中的研究結果具有一定的相似性，但也存在一些差異。在不同類型的腫瘤細胞中，丙戊酸鈉可能通過不同的信號通路和分子靶點來發揮作用。在肝癌細胞中，丙戊酸鈉除了通過調節Bcl-2家族蛋白的表達來誘導細胞凋亡外，還可能通過抑制肝癌細胞的遷移和侵襲相關基因的表達，從而抑制腫瘤的轉移。在肺癌細胞中，丙戊酸鈉可能通過調節EGFR信號通路來影響細胞的增殖和凋亡。這些差異可能與不同腫瘤細胞的生物學特性和信號通路的差異有關。進一步深入研究丙戊酸鈉在人胃癌耐藥細胞中的作用機制，對于理解其抗癌作用的特異性和針對性具有重要意義。未來的研究可以從多個角度展開，如利用基因編輯技術敲除或過表達相關基因，進一步驗證丙戊酸鈉作用的關鍵分子靶點；采用蛋白質組學和代謝組學等技術，全面分析丙戊酸鈉作用后細胞內蛋白質和代謝物的變化，深入揭示其作用機制。此外，還可以研究丙戊酸鈉與其他抗癌藥物聯合應用時，對細胞周期和凋亡相關信號通路的協同調節作用，為臨床聯合用藥提供更堅實的理論基礎。5.3丙戊酸鈉與化療藥物聯合增效作用的臨床意義丙戊酸鈉分別與5-FU、DDP、ADM聯合用藥時，在一定濃度范圍內具有較強的協同作用，這一結果對胃癌臨床治療具有重大潛在價值。在提高療效方面，聯合用藥能夠顯著增強對人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR的增殖抑制效果。胃癌是一種惡性程度較高的腫瘤，耐藥問題嚴重影響化療效果，而丙戊酸鈉與化療藥物的協同作用可以有效克服耐藥，提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性，從而更有效地殺傷腫瘤細胞。在傳統的5-FU單藥化療中，由于胃癌耐藥細胞的存在，藥物難以達到理想的治療效果，但當與丙戊酸鈉聯合使用時，細胞生長抑制率明顯提高，能夠更有效地抑制腫瘤的生長和擴散。這意味著聯合用藥可以使更多患者獲得更好的治療反應，提高臨床治愈率和生存率。從減少藥物副作用角度來看，聯合使用丙戊酸鈉和化療藥物可以在保證治療效果的前提下，降低化療藥物的用量?；熕幬镌跉[瘤細胞的同時，也會對正常組織和細胞產生毒副作用，給患者帶來諸多不適。例如，DDP可能導致腎毒性、耳毒性和胃腸道反應等，ADM可能引起心臟毒性等。而丙戊酸鈉與化療藥物聯合具有協同作用，使得在達到相同治療效果時，可以適當減少化療藥物的劑量，從而降低化療藥物的毒副作用。通過降低DDP的用量，可以減少其對腎臟和聽力的損害，減輕患者的胃腸道反應；減少ADM的用量，則可以降低心臟毒性的發生風險，提高患者的生活質量。此外，丙戊酸鈉自身相對較低的毒副作用，也為聯合用藥的安全性提供了保障。在臨床實踐中，聯合用藥的優勢已經在其他癌癥治療中得到一定體現。在肺癌治療中，將某些組蛋白去乙酰化酶抑制劑與化療藥物聯合應用，不僅提高了治療效果，還減少了化療藥物的劑量和毒副作用。這為丙戊酸鈉聯合化療藥物治療胃癌提供了借鑒和參考。對于胃癌患者，醫生可以根據患者的具體病情、身體狀況和耐藥情況，合理選擇丙戊酸鈉與化療藥物的聯合方案。對于對5-FU耐藥的患者，可以考慮采用丙戊酸鈉與5-FU聯合的方案，通過協同作用提高治療效果。未來，還需要進一步開展大規模的臨床試驗，深入研究丙戊酸鈉與化療藥物聯合應用的最佳方案，包括藥物劑量、用藥時間和用藥順序等，以更好地指導臨床治療。同時，也需要關注聯合用藥可能出現的新問題，如藥物相互作用等，確保聯合用藥的安全性和有效性。5.4研究結果的局限性與展望本研究在探索丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞的作用及聯合化療藥物增效作用方面取得了一定成果，但也存在一些局限性。在實驗設計方面，本研究僅選用了人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR和人胃癌細胞系SGC7901進行體外實驗，未進行動物實驗和臨床研究。體外實驗雖然能夠在一定程度上模擬細胞的生理狀態，但與體內環境存在差異，動物實驗和臨床研究能夠更真實地反映藥物在體內的作用效果和安全性。未來的研究可以建立動物模型，進一步驗證丙戊酸鈉在體內的抗癌效果和聯合化療的增效作用，為臨床應用提供更可靠的依據。在樣本數量方面，本研究在細胞實驗中每個濃度設置了3個復孔，樣本數量相對較少，可能會導致實驗結果的誤差。在后續研究中，可以增加樣本數量，進行多批次實驗，以提高實驗結果的準確性和可靠性。而且，本研究僅檢測了丙戊酸鈉對細胞增殖、細胞周期和凋亡的影響，以及與化療藥物聯合的增效作用，對于其他可能的作用機制和相關信號通路的研究還不夠深入。未來的研究可以采用蛋白質組學、基因芯片等技術，全面分析丙戊酸鈉作用后細胞內蛋白質和基因表達的變化，深入探討其作用機制和相關信號通路。展望未來，相關研究可以從多個方向展開。在丙戊酸鈉的作用機制研究方面，可以進一步探索其在人胃癌耐藥細胞中的具體分子靶點和信號通路，以及與其他抗癌藥物聯合應用時的協同作用機制。在聯合化療研究中，可以嘗試不同的化療藥物組合和用藥方案，尋找最佳的聯合治療策略。還可以開展臨床研究，驗證丙戊酸鈉聯合化療藥物在胃癌患者中的治療效果和安全性，為臨床治療提供更有效的方案。此外，隨著精準醫學的發展，未來的研究可以結合患者的基因特征和腫瘤分子標志物，實現個性化治療，提高治療效果和患者的生存率。六、結論6.1研究主要成果總結本研究通過一系列實驗，深入探究了丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞的作用及與化療藥物聯合的增效作用，取得了以下主要成果：丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞增殖的抑制作用：丙戊酸鈉單獨應用時，對人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR及人胃癌細胞系SGC7901的生長抑制率均明顯高于對照組，且呈時間和劑量依賴關系。隨著丙戊酸鈉濃度的升高以及作用時間的延長，細胞生長抑制率逐漸增加。在24h時，0.5mM丙戊酸鈉處理組的生長抑制率為12.56%，而8mM處理組的生長抑制率達到48.90%；48h時，各濃度組的生長抑制率較24h均有顯著提升；72h時，生長抑制率進一步提高。這表明丙戊酸鈉在一定濃度范圍內對人胃癌耐藥細胞具有較強的增殖抑制作用，且作用效果與濃度和時間密切相關。丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞周期的影響：流式細胞術分析顯示，丙戊酸鈉作用48小時后，能夠將人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR阻滯于G0/G1期。隨著丙戊酸鈉濃度的升高，G0/G1期細胞比例逐漸增加，對照組G0/G1期細胞比例為50.23%，8mM丙戊酸鈉處理組G0/G1期細胞比例升高至70.21%；而S期細胞比例則逐漸減少，對照組S期細胞比例為35.67%，8mM處理組S期細胞比例降至18.78%。除0.5mM組S期細胞比例與對照組比較無統計學差異（P＞0.05）外，其余各組與對照組比較差異均有統計學意義（P＜0.05），且這種變化呈現出明顯的劑量依賴性。G2/M期細胞比例在各濃度組之間無明顯變化（P＞0.05）。這說明丙戊酸鈉通過阻滯細胞周期于G0/G1期，抑制細胞從G0/G1期向S期的轉換，從而抑制細胞的增殖。丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞凋亡的誘導作用：丙戊酸鈉對人胃癌耐藥細胞SGC7901/VCR具有誘導凋亡作用，且隨著藥物濃度的增加，誘導凋亡的作用增強。不同濃度丙戊酸鈉組的凋亡率均明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。對照組總凋亡率為3.90%，8mM丙戊酸鈉處理組總凋亡率升高至32.77%。這表