本標準附錄A、附錄B為規范性附錄。本標準由河北省畜牧局提出。本標準起草單位：河北科技師范學院。本標準主要起草人：李佩國、張建文、李蘊玉、楊宗澤、張艷英、張香齋、史秋梅、曹旺斌。12規范性引用文件的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。NY5035無公害食品肉雞飼養獸藥使用準則NY/T5038無公害食品肉雞飼養管理準則中華人民共和國動物防疫法(第八屆全國人大常委會1997年7月3日頒布)3術語和定義由傳染性法氏囊病病毒(IBDV)所引起的一種4.1流行特點4.1.1發病日齡主要發生于2周齡以上的雛雞，以3周齡～6周齡時最易感。4.1.2發病率和病死率衛生條件、應激因素、防治措施等方面的因素直接相關。一般易感雞群發病率可達80%～100%,病死率一般為20%~30%。4.1.3傳染途徑4.2臨診癥狀a)該病潛伏期為2d~3d,易感雞群感染后發病突然，病程7d~8d,典型發病雞群的死亡曲線2從死亡或撲殺臨床癥狀出現后1d~3d(最好未經藥物治療)的肉仔雞，采取法氏囊、脾臟作病料。若病料送到實驗室需要6h以上時，應將其置冰瓶中將病料剪碎后置于盛有滅菌砂粒的乳缽中研磨，用生理鹽水或0.5%濃度的水解乳蛋白液配成混懸液，3000r/min離心沉淀30min,取上清液用20%氯仿處理，加入青、鏈霉素各1000IU/ml,置4℃作用6h~10h后進行樣品無菌檢驗。取經處理且無菌檢驗合格的樣品，以0.2ml每胚的量絨毛尿囊膜(CAM)途徑接種9日齡~11日齡無特定病原(SPF)雞胚，每個樣品接種4個~5個雞胚，于37℃環境中孵育，每日照蛋。或將樣品以口服、滴眼方式接種于24日齡~35日齡肉仔雞。a)感染雞胚常于接種后3d~5d死亡，7d以后死亡者極少，主要出現以下肉眼病變：1)腹部水腫性擴張；2)膚充血或點狀出血，趾關節和大腦部偶有出血；3)肝有斑駁狀壞死和出血(晚期);4)心呈半煮熟樣，心肌色淡；5)腎充血并有少量斑駁狀壞死；36)肺極度充血；7)脾蒼白，偶有小壞死灶；8)絨毛尿囊膜上偶見小出血區；1)法氏囊感出現水腫和出血，體積和重量增大約兩倍，第3d-4d體積開始縮小，第5d恢復到原來的重量，以后迅速萎縮，至第8d時僅為原來重量的1/3左右，感染后第2d~3d2)脾輕度增大，表面上有均勻散布的小壞死灶；3)腺胃肌胃交界處的粘膜中偶見出血。4.4.3病毒的鑒定4.4.3.1病毒的形態學鑒定取經4.4.2.1方法收獲的樣品，差速離心處理后，以磷鎢酸或醋酸鈾負染，進行電鏡觀察。若在淋巴細胞和異嗜性白細胞的胞漿中靠近細胞核處見有卵圓形的包涵體，在包涵體中有許多直徑為20nm~62nm,呈晶格狀排列，近似六角形，二十面體對稱結構等典型法氏囊病病毒特征的病毒顆粒，4.4.3.2血清學鑒定按附錄A規定的病毒瓊脂擴散試驗方法和附錄B規定的免疫熒光抗體試驗方法進行測定。4.3.3病毒感染仔雞鑒定取經4.4.2.1收獲的樣品感染仔雞，當出現4.2和4.3所述臨診癥狀、病理剖檢及組織學病變則可5防治5.1養殖環境衛生5.1.1每批雞出欄后應對雞舍、籠具及用具進行清洗、消毒，消毒劑的選擇應符合《中華人民共和5.1.2清理完畢到下次進雞前應空舍至少2周。處理。5.3飲水管理毒劑應符合《中華人民共和國獸藥典》及相關法規的規定。5.4喂料管理4當瓊脂擴散試驗陽性率在50%以下時，首次免疫時間應在7日齡～14日齡進行，間隔1周~2周后進行第2次免疫；當瓊脂擴散試驗抗體陽性率在50%以上時，首免時間在21日齡進行，間隔1周~2周后，進行第2次免疫。疫苗可采用中等毒力株活疫苗。劑和金屬離子，在飲水中加入2%的脫脂奶粉，停水時間要合適(春夏季4h,秋冬季6h)以保證內，最多不超過1h飲完。生產日期，治療時間、劑量、療程、療效及停藥時間。記錄應在清群后保存2年以上。6病死雞處理6.1深埋法加快腐敗分解；地勢高、地下水位低，并避開山洪的沖刷；場地應筑有2m高的圍墻，墻內挖一個4m然后再鋪2cm~5cm厚的石灰，填土夯實。尸體掩埋后，上面應作按十字形挖兩條溝，溝長2.6m,寬0.6m,深0.5m。在兩溝交叉處坑底堆放千草和木5附錄A(規范性附錄)a)瓊脂、氯化鈉、苯酚、碳酸氫鈉(分析純);b)法氏囊標準陽性抗原、法氏囊標準陽性血清、法氏囊標準陰性血清、蒸餾水(雙蒸)。A.2待檢抗原取4.4.1采集的病料，按4.4.2.1方法處理過的上清液即為待檢抗原。A.3儀器d)分析天平(感量0.001g)。A.4.1瓊脂板制備稱取瓊脂1g,氯化鈉8g,量取苯酚0.1ml,蒸餾水100ml加入250ml錐形瓶中，水浴溶化后用5.6%碳酸氫鈉調pH6.8~pH7.2,分裝備用。需用前將其溶化，倒入平皿內，制成厚度3mm的瓊脂板，冷卻后置4℃冰箱內保存。A.4.2打孔2mm和3mm直徑薄壁圓型金屬小管，外周孔徑為2mm,中央孔徑為3mm,孔間距3mm。打孔切下的瓊脂A.3.3抗原及血清的添加點樣前在裝有瓊脂的平皿上貼上膠布或用瓊脂墨水寫上日期及編號，中央孔7加入標準陽性血清0.02ml,1、4孔加入標準陽性抗原，2、3、5、6孔各加入待檢抗原，添加量以孔滿而不溢為宜，待孔中液體吸千后將平皿倒置。在37℃條件下培育72小時判定結果。A.5判定標準成沉淀線，或者陽性抗原的沉淀線末端向毗鄰的待檢抗原孔內側偏彎者，此待檢者抗原判為陽性。A.5.2陰性6附錄B(規范性附錄)B.1試劑B.2儀器B.3步驟B.3.2