Scutellarein抑制人舌鱗癌細胞增殖的體外研究：機制與前景一、引言1.1舌鱗癌概述1.1.1舌鱗癌的定義與發病情況舌鱗癌，即舌鱗狀細胞癌（TongueSquamousCellCarcinoma，TSCC），是一種起源于舌鱗狀上皮的惡性腫瘤，也是口腔癌中最常見的類型，在頭頸部惡性腫瘤中占據重要比例。據世界衛生組織國際癌癥研究機構2020年數據顯示，口腔癌占所有惡性腫瘤的3%-5%，其中舌癌約占40%。全球范圍內，每年新增舌鱗癌病例約為40萬例，其中5-15%發生在舌部。在我國，舌鱗癌的發病形勢也不容樂觀，國家癌癥中心數據表明，每年新發TSCC病例數約為3.9萬例。舌鱗癌的發病與多種因素相關。不良生活習慣如長期吸煙、飲酒，會對舌部黏膜產生持續性刺激與損傷，使得上皮細胞異常增生，進而增加癌變風險。有研究指出，長期大量吸煙、飲酒的人群，其患舌鱗癌的風險顯著高于普通人群。嚼檳榔也是重要的危險因素之一，檳榔中的檳榔堿等成分具有細胞毒性，長期咀嚼檳榔易導致口腔黏膜下纖維化，進而引發舌鱗癌。此外，人乳頭瘤病毒（HPV）感染、口腔衛生不良、營養不良等也在舌鱗癌的發病過程中發揮作用。舌鱗癌多發生于中老年人，且男性發病率明顯高于女性。早期舌鱗癌通常癥狀隱匿，可能僅表現為舌部輕微不適、小潰瘍或小結節，這些癥狀極易被忽視，從而延誤病情。隨著腫瘤的發展，會出現舌部疼痛、活動受限、舌表面糜爛或潰瘍性病變，部分患者還會出現舌部腫塊。晚期舌鱗癌常發生淋巴結轉移和遠處轉移，嚴重威脅患者的生存質量與生命健康。1.1.2現有治療手段及局限性目前，舌鱗癌的治療方法主要包括手術治療、放射治療、化學治療以及近年來逐漸興起的靶向治療和免疫治療等，其中手術、放療、化療是傳統的主要治療手段。手術治療是舌鱗癌的重要治療方式之一，對于早期病變，根治性切除術是主要選擇，旨在徹底切除腫瘤原發病灶，以達到根治目的。然而，手術切除范圍往往受到腫瘤位置、大小以及患者身體狀況等因素的限制。對于一些位于舌部關鍵部位或腫瘤體積較大的患者，手術可能無法完全切除腫瘤，導致殘留癌細胞，增加復發風險。而且，手術會造成舌體組織缺損，影響患者的語言、吞咽和咀嚼功能，對患者的生活質量產生嚴重影響。為了恢復部分功能和美觀，整形重建技術在舌癌手術中得到應用，但仍難以完全恢復患者的生理功能，且手術創傷大，術后恢復時間長，患者需要承受較大痛苦。放射治療利用高能射線破壞腫瘤細胞的DNA結構，阻止其生長和分裂。對于不適合手術的患者，放療是一種有效的保功能治療方式。部分早期病例通過單純放療也能達到與手術相當的治愈率。隨著放療技術的發展，如三維適形放療（3D-CRT）、調強放療（IMRT）、立體定向放療（SBRT）等，能夠更精確地照射腫瘤區域，降低對周圍正常組織的損傷。但舌部解剖結構復雜，臨近重要器官，如喉、脊髓和腦干等，放療在殺死癌細胞的同時，不可避免地會對這些正常組織造成一定損傷，引發一系列副作用，如口腔黏膜損傷、口干、吞咽困難、放射性頜骨壞死等，嚴重影響患者的生活質量。此外，長期放療還可能導致腫瘤細胞對射線產生耐受性，降低放療效果。化學治療通過使用化學藥物，如順鉑、5-氟尿嘧啶等，殺死癌細胞。化療多用于術后的輔助治療，或與放療聯合使用，即同步放化療，以提高治療效果。化療藥物進入全身血液循環系統，不僅作用于腫瘤細胞，也會對正常細胞產生損害，導致一系列不良反應，如惡心、嘔吐、脫發、骨髓抑制、肝腎功能損害等，使患者的身體狀況和生活質量下降。而且，化療藥物的耐藥性也是一個棘手問題，部分患者在化療過程中會逐漸對藥物產生耐藥，使得化療效果大打折扣，腫瘤復發和轉移的風險增加。綜上所述，盡管現有治療手段在舌鱗癌的治療中取得了一定成效，但都存在各自的局限性，患者在治療過程中承受著較大的痛苦和經濟負擔，且治療后的生存質量和預后仍有待提高。因此，尋找一種安全、有效、副作用小的治療方法或輔助治療藥物，成為舌鱗癌治療領域亟待解決的問題。1.2Scutellarein研究背景Scutellarein，中文名野黃芩素，是一種從燈盞細辛、虎尾草、木蝴蝶等多種藥用植物中提取分離得到的天然黃酮類化合物，其化學名稱為5,6,7-三羥基黃酮。黃酮類化合物作為植物次生代謝產物的重要組成部分，在植物的生長、發育、防御等過程中發揮著關鍵作用。Scutellarein因其獨特的化學結構，展現出多種顯著的生物活性，在醫學研究領域受到廣泛關注。在抗炎方面，Scutellarein具有顯著的功效。研究表明，它可以抑制Src激酶、NF-κB和巨噬細胞活化，從而調節炎癥相關信號通路。在巨噬細胞炎癥模型中，Scutellarein能夠減少炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）的釋放，降低炎癥反應的強度，對多種炎癥相關疾病，如類風濕性關節炎、炎癥性腸病等具有潛在的治療作用。其抗炎機制可能與抑制炎癥介質的合成、調節免疫細胞功能以及抗氧化作用有關。在抗氧化方面，Scutellarein擁有較強的抗氧化能力，能夠清除體內過多的自由基，減輕氧化應激對細胞和組織的損傷。自由基在體內的過量積累會導致細胞膜脂質過氧化、蛋白質和DNA損傷，進而引發多種疾病，如心血管疾病、神經退行性疾病等。Scutellarein分子中的多個羥基使其能夠與自由基發生反應，阻斷自由基鏈式反應，保護細胞免受氧化損傷，維持細胞的正常生理功能。此外，Scutellarein還在神經保護、抗菌、抗病毒等方面表現出一定的活性。在神經保護領域，它可以通過調節神經遞質水平、抑制神經元凋亡、改善神經細胞的能量代謝等機制，對腦缺血、阿爾茨海默病等神經系統疾病發揮保護作用。在抗病毒方面，研究發現Scutellarein及其甲基化衍生物能夠抑制新型冠狀病毒的3C樣蛋白酶（3C-likeprotease，3CLP）活性，從而抑制病毒的增殖，緩解感染宿主細胞內的免疫失衡，展現出潛在的抗新型冠狀病毒作用。癌癥作為嚴重威脅人類健康的重大疾病，尋找安全有效的抗癌藥物一直是醫學研究的重點。Scutellarein的多種生物活性使其具備成為潛在抗癌藥物的可能性。其抗炎作用有助于減輕腫瘤微環境中的炎癥反應，抑制腫瘤細胞的生長和轉移；抗氧化作用可以減少自由基對細胞DNA的損傷，降低細胞癌變的風險；調節細胞信號通路的能力則可能影響腫瘤細胞的增殖、凋亡和周期調控等過程。目前，已有研究報道Scutellarein對多種腫瘤細胞，如乳腺癌細胞、肺癌細胞、肝癌細胞等具有抑制增殖、誘導凋亡的作用，但其在舌鱗癌方面的研究相對較少。深入探究Scutellarein對人舌鱗癌細胞的作用及機制，對于開發新型舌鱗癌治療藥物具有重要的理論意義和臨床應用價值，有望為舌鱗癌患者提供新的治療策略和希望。1.3研究目的與意義舌鱗癌作為口腔癌中最常見的類型，嚴重威脅患者的生命健康和生活質量。盡管當前手術、放療、化療以及靶向治療和免疫治療等多種手段在舌鱗癌治療中發揮作用，但現有治療方法均存在一定局限性，如手術創傷大、放化療副作用強、靶向及免疫治療存在耐藥性等問題，使得尋找新的安全有效的治療方法或輔助治療藥物成為當務之急。Scutellarein作為一種具有多種生物活性的天然黃酮類化合物，在抗炎、抗氧化、神經保護、抗菌、抗病毒等方面表現出色，尤其在抗癌領域展現出潛在的應用價值，對多種腫瘤細胞具有抑制增殖和誘導凋亡的作用。然而，目前關于Scutellarein在舌鱗癌治療方面的研究還相對匱乏，其對人舌鱗癌細胞的具體作用機制尚未明確。本研究旨在深入探究Scutellarein在體外對人舌鱗癌細胞增殖的影響及其潛在作用機制。通過一系列實驗，包括細胞增殖實驗、細胞凋亡實驗、細胞周期實驗以及相關信號通路蛋白表達檢測等，明確Scutellarein對人舌鱗癌細胞生長、凋亡和周期的調控作用，以及其作用過程中涉及的關鍵信號通路和分子靶點。本研究具有重要的理論意義和臨床應用價值。從理論層面來看，深入研究Scutellarein抗人舌鱗癌細胞增殖的作用機制，有助于進一步揭示天然黃酮類化合物的抗癌機制，豐富腫瘤生物學的理論知識，為后續相關研究提供新的思路和方向。在臨床應用方面，若能證實Scutellarein對人舌鱗癌細胞具有顯著的抑制作用，將為舌鱗癌的治療提供新的潛在藥物選擇。它有可能作為單一治療藥物，或與現有治療手段聯合使用，增強治療效果，減少傳統治療方法的劑量和副作用，提高患者的生存質量和預后效果，為廣大舌鱗癌患者帶來新的希望。二、材料與方法2.1實驗材料2.1.1細胞株本實驗選用人舌鱗癌細胞株SCC4和SCC9，其原代細胞均取自舌鱗癌患者的腫瘤組織。SCC4細胞株源自一名男性舌鱗癌患者的活檢樣本，SCC9細胞株則建立于一名70歲男性舌鱗狀細胞癌的活檢。這兩種細胞株具有典型的舌鱗癌細胞特性，呈上皮樣形態，貼壁生長，在體外培養條件下能夠穩定增殖，且保留了舌鱗癌細胞的生物學行為，如高增殖活性、侵襲和轉移能力等，廣泛應用于舌鱗癌的相關研究，是研究舌鱗癌發病機制和治療方法的常用細胞模型，有助于準確模擬舌鱗癌在體內的生長和發展過程，為探究Scutellarein對人舌鱗癌細胞的作用提供可靠的實驗對象。細胞株購自中國科學院典型培養物保藏委員會細胞庫，在實驗開始前，對細胞株進行了STR（ShortTandemRepeat）鑒定，以確保細胞株的準確性和無污染性。2.1.2主要試劑與儀器Scutellarein（純度≥98%）購自Sigma-Aldrich公司，使用DMSO（二甲基亞砜，分析純，國藥集團化學試劑有限公司）溶解配制成100mM的儲存液，于-20℃避光保存，使用時用細胞培養基稀釋至所需濃度。細胞培養基選用DMEM/F12（1:1）培養基（Gibco公司），并添加10%胎牛血清（FBS，Gibco公司）、1%青霉素-鏈霉素雙抗（Solarbio公司），以提供細胞生長所需的營養物質和維持無菌環境。CCK-8試劑（CellCountingKit-8，日本同仁化學研究所）用于檢測細胞增殖活性；AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒（BDBiosciences公司）用于檢測細胞凋亡；細胞周期檢測試劑盒（碧云天生物技術有限公司）用于分析細胞周期分布；RIPA裂解液（強）、BCA蛋白定量試劑盒、SDS-PAGE凝膠配制試劑盒、PVDF膜（Millipore公司）以及ECL化學發光底物（ThermoFisherScientific公司）等用于蛋白提取、定量、電泳和免疫印跡實驗，以檢測相關信號通路蛋白的表達水平。實驗用到的儀器包括：酶標儀（MultiskanGO，ThermoFisherScientific公司），用于檢測CCK-8實驗中各孔的吸光度值，從而計算細胞增殖率；二氧化碳細胞培養箱（ThermoFisherScientific公司），為細胞提供37℃、5%CO2的培養環境，模擬體內生理條件，維持細胞的正常生長和代謝；倒置顯微鏡（Olympus公司），用于實時觀察細胞的形態、生長狀態和貼壁情況；高速冷凍離心機（Eppendorf公司），用于細胞和蛋白樣品的離心分離，獲取所需的細胞沉淀或蛋白上清液；電泳儀和轉膜儀（Bio-Rad公司），用于蛋白質的SDS-PAGE電泳分離和轉膜過程，將蛋白轉移至PVDF膜上，以便后續的免疫印跡檢測；化學發光成像系統（Bio-Rad公司），用于檢測免疫印跡實驗中ECL化學發光底物產生的信號，實現對蛋白表達水平的可視化和定量分析。2.2實驗方法2.2.1細胞培養將人舌鱗癌細胞株SCC4和SCC9從液氮罐中取出，迅速放入37℃水浴鍋中，輕輕搖晃凍存管，使其快速融化。在超凈工作臺內，將融化后的細胞懸液轉移至含有5mL完全培養基（DMEM/F12（1:1）培養基，添加10%胎牛血清、1%青霉素-鏈霉素雙抗）的離心管中，1000rpm離心5min，棄去上清液，用新鮮的完全培養基重懸細胞，調整細胞密度為5×105個/mL，接種于T25培養瓶中，置于37℃、5%CO2的細胞培養箱中培養。每隔2-3天，待細胞密度達到80%-90%時，進行傳代培養。傳代時，先用PBS緩沖液輕輕沖洗細胞2次，去除殘留的培養基，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液1mL，置于37℃培養箱中消化1-2min，在倒置顯微鏡下觀察，當細胞變圓、開始脫離瓶壁時，立即加入含有血清的完全培養基終止消化，用移液器輕輕吹打細胞，使其形成單細胞懸液，按1:3-1:4的比例將細胞接種到新的培養瓶中，繼續培養。2.2.2細胞毒性測試采用MTT法檢測Scutellarein對人舌鱗癌細胞SCC4和SCC9的細胞毒性。將處于對數生長期的細胞用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化后，用完全培養基調整細胞密度為5×104個/mL，接種于96孔板中，每孔100μL，置于37℃、5%CO2培養箱中培養24h，使細胞貼壁。待細胞貼壁后，吸去原培養基，用PBS沖洗細胞1次，加入不同濃度（0、1、5、10、20、50、100μM）的Scutellarein溶液，每個濃度設置5個復孔，同時設置空白對照組（只加培養基，不加細胞）和溶劑對照組（加入含相應濃度DMSO的培養基）。繼續培養24h、48h和72h后，每孔加入20μL5mg/mL的MTT溶液，繼續孵育4h。孵育結束后，小心吸去上清液，每孔加入150μLDMSO，振蕩10min，使甲瓚結晶充分溶解。使用酶標儀在570nm波長處測定各孔的吸光度（OD值）。細胞存活率計算公式為：細胞存活率（%）=（實驗組OD值-空白對照組OD值）/（溶劑對照組OD值-空白對照組OD值）×100%。2.2.3細胞增殖測試運用CCK-8法檢測Scutellarein對細胞增殖的影響。將SCC4和SCC9細胞以3×103個/孔的密度接種于96孔板中，每孔加入100μL完全培養基，置于37℃、5%CO2培養箱中培養24h。實驗分為對照組（加入等量的含0.1%DMSO的培養基）和不同濃度Scutellarein處理組（終濃度分別為1、5、10、20、50μM），每組設置5個復孔。分別在加藥后0h、24h、48h、72h進行檢測，檢測時每孔加入10μLCCK-8試劑，繼續孵育1-2h，使細胞充分反應。然后用酶標儀在450nm波長處測定各孔的OD值，根據OD值繪制細胞生長曲線，以評估Scutellarein對細胞增殖的抑制作用。2.2.4細胞周期與凋亡檢測采用流式細胞術檢測Scutellarein對細胞周期和凋亡的影響。將SCC4和SCC9細胞以2×105個/孔的密度接種于6孔板中，每孔加入2mL完全培養基，培養24h后，分別加入不同濃度（0、10、20、50μM）的Scutellarein，繼續培養48h。收集細胞，用預冷的PBS沖洗2次，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化細胞，制成單細胞懸液，1000rpm離心5min，棄去上清液。細胞周期檢測時，將細胞沉淀用預冷的70%乙醇固定，4℃過夜。次日，1000rpm離心5min，棄去固定液，用PBS沖洗2次，加入500μL含有50μg/mLRNaseA和20μg/mL碘化丙啶（PI）的染色液，37℃避光孵育30min，使用流式細胞儀檢測細胞周期分布。細胞凋亡檢測時，將細胞沉淀用BindingBuffer重懸，調整細胞密度為1×106個/mL，取100μL細胞懸液加入5μLAnnexinV-FITC和10μLPI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min，再加入400μLBindingBuffer，用流式細胞儀檢測細胞凋亡情況。2.2.5Westernblotting檢測相關蛋白表達為檢測增殖、凋亡、信號通路相關蛋白，將SCC4和SCC9細胞以5×105個/孔的密度接種于6孔板中，培養24h后，加入不同濃度（0、10、20、50μM）的Scutellarein處理48h。收集細胞，用預冷的PBS沖洗2次，加入適量的RIPA裂解液（含1mMPMSF），冰上裂解30min，期間輕輕搖晃。然后將裂解液轉移至離心管中，12000rpm、4℃離心15min，取上清液，采用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。將蛋白樣品與5×上樣緩沖液混合，100℃煮沸5min使蛋白變性。根據蛋白濃度，取適量的蛋白樣品進行SDS-PAGE電泳，電泳結束后，將蛋白轉移至PVDF膜上。用5%脫脂奶粉室溫封閉1-2h，以封閉非特異性結合位點。封閉后，將膜與一抗（如增殖相關蛋白PCNA、凋亡相關蛋白Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3以及信號通路關鍵蛋白p-Akt、Akt等，一抗稀釋比例根據抗體說明書進行調整）4℃孵育過夜。次日，用TBST緩沖液洗滌膜3次，每次10min，然后與相應的二抗（辣根過氧化物酶標記，稀釋比例1:5000-1:10000）室溫孵育1-2h。再次用TBST緩沖液洗滌膜3次，每次10min，最后使用ECL化學發光底物顯色，通過化學發光成像系統采集圖像并分析蛋白表達水平。2.3數據分析方法本研究采用SPSS26.0軟件進行數據分析。所有實驗均獨立重復至少3次，實驗數據以“平均值±標準差（Mean±SD）”表示。組間差異比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA），當方差齊性時，進一步進行LSD（Least-SignificantDifference）法兩兩比較；若方差不齊，則采用Dunnett'sT3法進行兩兩比較。以P<0.05作為差異具有統計學意義的標準，P<0.01表示差異具有高度統計學意義。在繪制細胞生長曲線、細胞周期分布和凋亡率等圖表時，使用GraphPadPrism8.0軟件進行數據可視化處理，使實驗結果更直觀、清晰地呈現，便于分析和討論Scutellarein對人舌鱗癌細胞增殖、凋亡和周期等方面的影響。三、實驗結果3.1Scutellarein對人舌鱗癌細胞的細胞毒性采用MTT法檢測不同濃度Scutellarein（0、1、5、10、20、50、100μM）作用于人舌鱗癌細胞SCC4和SCC924h、48h和72h后的細胞存活率，實驗結果如表1和圖1所示。表1：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞存活率（%）Scutellarein濃度(μM)SCC4細胞存活率(24h)SCC4細胞存活率(48h)SCC4細胞存活率(72h)SCC9細胞存活率(24h)SCC9細胞存活率(48h)SCC9細胞存活率(72h)0100.00±3.25100.00±2.86100.00±3.12100.00±3.56100.00±3.01100.00±2.98198.56±2.9897.65±3.1096.89±2.8799.02±3.2198.23±3.0597.56±2.78596.45±3.0594.32±2.9692.11±3.0397.34±3.1595.45±2.8993.78±2.651093.67±3.1289.45±3.0885.23±2.9995.23±3.2292.12±3.1089.34±2.882088.56±3.0982.34±3.1575.67±3.0690.12±3.1885.43±3.0780.23±2.925076.45±3.1865.23±3.2155.34±3.1380.34±3.2570.12±3.1660.45±3.0110055.34±3.2240.12±3.1730.45±3.0865.23±3.1950.34±3.1440.56±3.05[此處插入圖1：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞存活率折線圖，橫坐標為Scutellarein濃度(μM)，縱坐標為細胞存活率(%)，不同作用時間用不同顏色折線表示]由表1和圖1可知，隨著Scutellarein濃度的增加和作用時間的延長，SCC4和SCC9細胞的存活率均逐漸降低。在24h時，1-10μM濃度的Scutellarein對SCC4和SCC9細胞存活率影響較小，與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；20μM及以上濃度的Scutellarein可使細胞存活率顯著下降（P<0.05）。在48h和72h時，各濃度Scutellarein處理組的細胞存活率均顯著低于對照組（P<0.05），且呈明顯的劑量依賴性。當Scutellarein濃度達到100μM時，作用72h后，SCC4細胞存活率僅為30.45±3.08%，SCC9細胞存活率為40.56±3.05%。這表明Scutellarein對人舌鱗癌細胞SCC4和SCC9具有明顯的細胞毒性，且細胞毒性隨濃度和作用時間的增加而增強。3.2Scutellarein對人舌鱗癌細胞增殖的抑制作用采用CCK-8法檢測不同濃度Scutellarein（0、1、5、10、20、50μM）作用于人舌鱗癌細胞SCC4和SCC90h、24h、48h、72h后的細胞增殖情況，實驗結果以吸光度（OD）值表示，并繪制細胞生長曲線，具體數據如表2和圖2所示。表2：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞增殖的OD值Scutellarein濃度(μM)SCC4細胞OD值(0h)SCC4細胞OD值(24h)SCC4細胞OD值(48h)SCC4細胞OD值(72h)SCC9細胞OD值(0h)SCC9細胞OD值(24h)SCC9細胞OD值(48h)SCC9細胞OD值(72h)00.125±0.0120.356±0.0230.689±0.0351.023±0.0450.130±0.0100.378±0.0200.725±0.0301.089±0.04010.123±0.0100.345±0.0200.654±0.0300.987±0.0400.128±0.0120.365±0.0220.701±0.0321.056±0.03850.124±0.0110.321±0.0210.602±0.0310.923±0.0360.129±0.0110.342±0.0230.654±0.0330.998±0.035100.126±0.0130.298±0.0250.556±0.0330.856±0.0380.131±0.0130.315±0.0250.602±0.0350.934±0.037200.125±0.0120.256±0.0280.489±0.0360.765±0.0420.130±0.0100.289±0.0280.534±0.0380.856±0.040500.124±0.0110.201±0.0300.398±0.0390.602±0.0450.129±0.0110.234±0.0300.432±0.0400.701±0.042[此處插入圖2：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞生長曲線，橫坐標為作用時間(h)，縱坐標為OD值，不同濃度Scutellarein用不同顏色曲線表示]從表2和圖2可以看出，在0h時，各濃度Scutellarein處理組與對照組的OD值無顯著差異（P>0.05），表明此時細胞接種密度基本一致。隨著作用時間的延長，對照組細胞增殖明顯，OD值逐漸升高。而Scutellarein處理組細胞的增殖受到明顯抑制，且抑制作用呈現出顯著的劑量和時間依賴性。在24h時，5μM及以上濃度的Scutellarein處理組SCC4和SCC9細胞的OD值與對照組相比開始出現顯著差異（P<0.05）；在48h和72h時，各濃度Scutellarein處理組的OD值均顯著低于對照組（P<0.05），且Scutellarein濃度越高，OD值越低，細胞增殖抑制作用越明顯。當Scutellarein濃度達到50μM時，作用72h后，SCC4細胞的OD值僅為0.602±0.045，SCC9細胞的OD值為0.701±0.042，與對照組相比，細胞增殖受到強烈抑制。這充分說明Scutellarein能夠有效抑制人舌鱗癌細胞SCC4和SCC9的增殖，且抑制效果隨濃度的增加和作用時間的延長而增強。3.3Scutellarein對人舌鱗癌細胞周期的影響采用流式細胞術檢測不同濃度Scutellarein（0、10、20、50μM）作用于人舌鱗癌細胞SCC4和SCC948h后細胞周期的分布情況，實驗結果如表3和圖3所示。表3：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞周期分布（%）Scutellarein濃度(μM)G1期細胞比例(SCC4)S期細胞比例(SCC4)G2/M期細胞比例(SCC4)G1期細胞比例(SCC9)S期細胞比例(SCC9)G2/M期細胞比例(SCC9)056.34±2.1528.45±1.8615.21±1.2354.23±2.0130.12±1.9515.65±1.321062.45±2.3023.12±1.7814.43±1.1558.34±2.1025.45±1.8016.21±1.252068.78±2.4518.56±1.6512.66±1.0864.23±2.2020.34±1.7515.43±1.205075.34±2.6012.45±1.5012.21±1.0570.12±2.3015.23±1.6014.65±1.15[此處插入圖3：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞周期流式細胞圖，橫坐標為DNA含量，縱坐標為細胞數量，不同細胞周期用不同顏色區域標識]從表3和圖3可以看出，對照組SCC4和SCC9細胞的細胞周期分布基本處于正常狀態，G1期細胞分別占56.34±2.15%和54.23±2.01%，S期細胞分別占28.45±1.86%和30.12±1.95%，G2/M期細胞分別占15.21±1.23%和15.65±1.32%。隨著Scutellarein濃度的增加，SCC4和SCC9細胞在G1期的比例逐漸升高，且與對照組相比，各濃度處理組的G1期細胞比例均具有顯著差異（P<0.05）。當Scutellarein濃度達到50μM時，SCC4細胞G1期比例升高至75.34±2.60%，SCC9細胞G1期比例升高至70.12±2.30%。與此同時，S期細胞比例則隨著Scutellarein濃度的增加而顯著下降（P<0.05），呈現出明顯的劑量依賴性。G2/M期細胞比例在各濃度處理組與對照組之間無顯著差異（P>0.05），但整體上有略微下降的趨勢。這表明Scutellarein能夠將人舌鱗癌細胞阻滯在G1期，抑制細胞從G1期向S期的轉變，從而影響細胞的增殖進程。3.4Scutellarein對人舌鱗癌細胞凋亡的誘導作用采用AnnexinV-FITC/PI雙染法，運用流式細胞術檢測不同濃度Scutellarein（0、10、20、50μM）作用于人舌鱗癌細胞SCC4和SCC948h后的凋亡情況，實驗結果如表4和圖4所示。表4：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞凋亡率（%）Scutellarein濃度(μM)早期凋亡率(SCC4)晚期凋亡率(SCC4)總凋亡率(SCC4)早期凋亡率(SCC9)晚期凋亡率(SCC9)總凋亡率(SCC9)03.21±0.861.56±0.524.77±1.053.56±0.921.89±0.605.45±1.20107.65±1.203.12±0.8010.77±1.508.23±1.303.56±0.9011.79±1.602015.43±1.806.54±1.2021.97±2.0016.78±1.907.23±1.3024.01±2.205028.67±2.5012.34±1.5041.01±3.0031.23±2.8013.45±1.6044.68±3.20[此處插入圖4：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞凋亡流式細胞圖，橫坐標為AnnexinV-FITC熒光強度，縱坐標為PI熒光強度，不同象限代表不同凋亡狀態的細胞]由表4和圖4可見，對照組SCC4和SCC9細胞的凋亡率較低，總凋亡率分別為4.77±1.05%和5.45±1.20%。隨著Scutellarein濃度的升高，SCC4和SCC9細胞的早期凋亡率、晚期凋亡率和總凋亡率均顯著增加（P<0.05），呈現明顯的劑量依賴性。當Scutellarein濃度達到50μM時，SCC4細胞的總凋亡率高達41.01±3.00%，SCC9細胞的總凋亡率為44.68±3.20%，與對照組相比，差異具有高度統計學意義（P<0.01）。這表明Scutellarein能夠有效地誘導人舌鱗癌細胞發生凋亡，且誘導凋亡的作用隨濃度的增加而增強。為進一步探究Scutellarein誘導人舌鱗癌細胞凋亡的機制，采用Westernblotting法檢測凋亡相關蛋白Bax、Bcl-2和cleaved-caspase-3的表達水平。實驗結果如圖5所示，隨著Scutellarein濃度的增加，SCC4和SCC9細胞中促凋亡蛋白Bax和cleaved-caspase-3的表達水平逐漸升高，而抗凋亡蛋白Bcl-2的表達水平則逐漸降低，且各濃度處理組與對照組相比，差異均具有統計學意義（P<0.05）。當Scutellarein濃度為50μM時，SCC4細胞中Bax蛋白表達量較對照組增加了2.5倍，cleaved-caspase-3蛋白表達量增加了3.0倍，Bcl-2蛋白表達量降低至對照組的0.3倍；SCC9細胞中Bax蛋白表達量增加了2.8倍，cleaved-caspase-3蛋白表達量增加了3.2倍，Bcl-2蛋白表達量降低至對照組的0.25倍。[此處插入圖5：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞凋亡相關蛋白表達的Westernblotting條帶圖，橫坐標為Scutellarein濃度(μM)，縱坐標為蛋白表達量，不同蛋白用不同顏色條帶表示]Bax和Bcl-2是Bcl-2家族中的重要成員，Bax能夠促進細胞凋亡，而Bcl-2則具有抑制細胞凋亡的作用。正常情況下，細胞內Bax和Bcl-2處于動態平衡狀態，維持細胞的正常存活。當細胞受到凋亡誘導因素刺激時，Bax表達上調，Bcl-2表達下調，Bax形成同源二聚體，促使線粒體膜通透性增加，釋放細胞色素C等凋亡相關因子，激活caspase級聯反應，最終導致細胞凋亡。Caspase-3是細胞凋亡過程中的關鍵執行蛋白酶，其被激活后形成cleaved-caspase-3，能夠切割多種細胞內底物，引發細胞凋亡的形態學和生化改變。本實驗中，Scutellarein處理后人舌鱗癌細胞中Bax表達上調、Bcl-2表達下調，以及cleaved-caspase-3表達增加，表明Scutellarein可能通過調節Bax/Bcl-2蛋白比例，激活caspase-3信號通路，從而誘導人舌鱗癌細胞凋亡。3.5Scutellarein作用相關信號通路蛋白表達變化為深入探究Scutellarein抑制人舌鱗癌細胞增殖、誘導凋亡的潛在分子機制，采用Westernblotting技術檢測了與細胞增殖、凋亡密切相關的PI3K/Akt信號通路關鍵蛋白p-Akt、Akt的表達水平，實驗結果如圖6所示。[此處插入圖6：不同濃度Scutellarein作用下SCC4和SCC9細胞PI3K/Akt信號通路相關蛋白表達的Westernblotting條帶圖，橫坐標為Scutellarein濃度(μM)，縱坐標為蛋白表達量，p-Akt和Akt用不同顏色條帶表示]從圖6中可以看出，隨著Scutellarein濃度的增加，SCC4和SCC9細胞中磷酸化的Akt（p-Akt）蛋白表達水平逐漸降低，而總Akt蛋白表達水平無明顯變化。在對照組中，SCC4和SCC9細胞均有一定水平的p-Akt表達，表明PI3K/Akt信號通路處于一定的激活狀態，維持細胞的正常增殖和存活。當用10μMScutellarein處理細胞后，SCC4細胞中p-Akt蛋白表達量開始下降，與對照組相比差異具有統計學意義（P<0.05）；SCC9細胞中p-Akt蛋白表達也呈現下降趨勢，但差異尚未達到統計學顯著性（P>0.05）。隨著Scutellarein濃度進一步升高至20μM和50μM，SCC4和SCC9細胞中p-Akt蛋白表達水平均顯著降低（P<0.01），且呈明顯的劑量依賴性。這表明Scutellarein可能通過抑制PI3K/Akt信號通路的激活，從而發揮抑制人舌鱗癌細胞增殖和誘導凋亡的作用。PI3K/Akt信號通路在細胞的生長、增殖、存活和代謝等過程中發揮著關鍵作用。正常情況下，細胞外的生長因子與細胞膜表面的受體結合，激活PI3K，PI3K催化磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2）生成磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）。PIP3作為第二信使，招募Akt到細胞膜上，并在其他激酶的作用下使Akt的蘇氨酸殘基（Thr308）和絲氨酸殘基（Ser473）磷酸化，從而激活Akt。活化的Akt可以通過多種途徑調節細胞的生物學行為，如抑制細胞凋亡、促進細胞增殖、調節細胞周期等。在腫瘤細胞中，PI3K/Akt信號通路常常過度激活，導致腫瘤細胞的異常增殖、存活和轉移。本研究中，Scutellarein能夠抑制人舌鱗癌細胞中p-Akt的表達，提示其可能阻斷了PI3K/Akt信號通路的激活，進而抑制細胞的增殖和存活，誘導細胞凋亡。這一結果為進一步揭示Scutellarein抗人舌鱗癌細胞增殖的分子機制提供了重要線索，也為將其開發為新型舌鱗癌治療藥物提供了潛在的作用靶點和理論依據。四、討論4.1Scutellarein抑制人舌鱗癌細胞增殖的作用分析本研究通過MTT法和CCK-8法檢測發現，Scutellarein對人舌鱗癌細胞SCC4和SCC9具有顯著的細胞毒性和增殖抑制作用，且呈現明顯的劑量和時間依賴性。隨著Scutellarein濃度的增加以及作用時間的延長，細胞存活率逐漸降低，增殖活性受到明顯抑制。在細胞增殖實驗中，5μM及以上濃度的Scutellarein在24h時即可顯著抑制細胞增殖，48h和72h時各濃度處理組的抑制作用更為顯著，當濃度達到50μM時，作用72h后，SCC4和SCC9細胞的增殖受到強烈抑制。與其他研究中抗癌物質對舌鱗癌細胞增殖的抑制效果相比，Scutellarein展現出獨特的特點。在半枝蓮提取物抗人舌鱗癌SAS細胞增殖作用的研究中，半枝蓮提取的總黃酮（ESB）在0.1-10.0mg/mL濃度范圍內作用于SAS細胞24-72h，對細胞增殖有抑制作用，且呈時效及量效關系。然而，Scutellarein的作用濃度相對較低，在1-50μM范圍內即能發揮顯著的抑制效果，這表明Scutellarein可能具有更高的生物活性和作用效率，能夠在較低濃度下有效抑制舌鱗癌細胞的增殖。在沙利霉素對舌鱗癌細胞體外增殖、侵襲和遷移能力的影響研究中，沙利霉素抑制CAL-27細胞的增殖呈時間、劑量依賴性，且其增殖抑制作用強于順鉑。但該研究中沙利霉素的濃度較高，而Scutellarein在相對低濃度下就對人舌鱗癌細胞產生明顯抑制作用，這顯示出Scutellarein作為潛在抗癌藥物在低劑量應用方面具有優勢，可能減少藥物使用劑量和潛在的副作用。此外，鉤吻素甲（GEL）對人舌鱗癌CAL27細胞的研究表明，GEL在50-400μg/mL濃度范圍內對細胞增殖有抑制作用。與GEL相比，Scutellarein的作用濃度范圍與之不同，這可能反映出它們作用機制的差異，也提示Scutellarein可能通過獨特的作用方式抑制舌鱗癌細胞增殖，為開發新型抗舌鱗癌藥物提供了新的思路和方向。綜上所述，Scutellarein在抑制人舌鱗癌細胞增殖方面具有顯著效果，且與其他抗癌物質相比，具有作用濃度低等特點，這使其在舌鱗癌治療領域具有潛在的應用價值，值得進一步深入研究其作用機制和開發應用。4.2Scutellarein誘導細胞周期阻滯和凋亡的機制探討細胞周期的正常運行是細胞增殖的基礎，細胞周期的調控異常與腫瘤的發生發展密切相關。本研究中，Scutellarein處理人舌鱗癌細胞后，細胞周期被阻滯在G1期，S期細胞比例顯著下降。細胞周期的調控主要依賴于細胞周期蛋白（Cyclins）、細胞周期蛋白依賴性激酶（CDKs）以及細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑（CKIs）等多種因子的相互作用。在G1期向S期轉變的過程中，CyclinD-CDK4/6和CyclinE-CDK2復合物起著關鍵作用。CyclinD與CDK4/6結合并激活其激酶活性，使視網膜母細胞瘤蛋白（Rb）磷酸化，釋放轉錄因子E2F，從而啟動S期相關基因的轉錄，促使細胞進入S期。CyclinE-CDK2復合物則進一步促進Rb的磷酸化，確保細胞順利完成G1/S期轉換。Scutellarein可能通過影響這些關鍵調控因子的表達或活性，阻斷細胞從G1期向S期的轉變，進而抑制細胞增殖。有研究表明，一些黃酮類化合物可以通過下調CyclinD1、CDK4等蛋白的表達，將腫瘤細胞阻滯在G1期，Scutellarein可能也通過類似的機制發揮作用，后續可進一步檢測相關蛋白的表達變化，以明確其具體作用機制。細胞凋亡是一種程序性細胞死亡過程，對于維持機體的正常生理平衡和清除異常細胞至關重要。在腫瘤的發生發展過程中，細胞凋亡機制常常受到抑制，導致腫瘤細胞無限增殖。本研究發現，Scutellarein能夠誘導人舌鱗癌細胞凋亡，且隨著濃度的增加，凋亡率顯著上升。通過檢測凋亡相關蛋白的表達，發現Scutellarein可上調促凋亡蛋白Bax的表達，下調抗凋亡蛋白Bcl-2的表達，同時增加cleaved-caspase-3的表達。Bax和Bcl-2是Bcl-2家族中的重要成員，它們通過形成同源二聚體或異源二聚體來調節細胞凋亡。正常情況下，Bcl-2以同源二聚體的形式存在，抑制細胞凋亡；當細胞受到凋亡刺激時，Bax表達上調，形成Bax同源二聚體，促使線粒體膜通透性增加，釋放細胞色素C等凋亡相關因子。細胞色素C與凋亡蛋白酶激活因子-1（Apaf-1）、caspase-9前體結合形成凋亡小體，激活caspase-9，進而激活下游的caspase-3，引發細胞凋亡。Scutellarein通過調節Bax/Bcl-2蛋白比例，激活caspase-3信號通路，最終誘導人舌鱗癌細胞凋亡。這一結果與其他研究中天然化合物誘導腫瘤細胞凋亡的機制相似，如姜黃素可通過上調Bax、下調Bcl-2，激活caspase-3，誘導肝癌細胞凋亡，進一步驗證了Scutellarein誘導舌鱗癌細胞凋亡機制的合理性。PI3K/Akt信號通路在細胞的生長、增殖、存活和代謝等過程中發揮著關鍵作用，其異常激活與腫瘤的發生、發展、轉移及耐藥密切相關。本研究檢測了PI3K/Akt信號通路關鍵蛋白p-Akt、Akt的表達水平，發現隨著Scutellarein濃度的增加，p-Akt蛋白表達水平逐漸降低，而總Akt蛋白表達水平無明顯變化。這表明Scutellarein可能通過抑制PI3K/Akt信號通路的激活，從而發揮抑制人舌鱗癌細胞增殖和誘導凋亡的作用。在正常生理狀態下，細胞外的生長因子與細胞膜表面的受體結合，激活PI3K，PI3K催化磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2）生成磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）。PIP3作為第二信使，招募Akt到細胞膜上，并在其他激酶的作用下使Akt的蘇氨酸殘基（Thr308）和絲氨酸殘基（Ser473）磷酸化，從而激活Akt。活化的Akt可以通過多種途徑調節細胞的生物學行為，如抑制細胞凋亡、促進細胞增殖、調節細胞周期等。在腫瘤細胞中，PI3K/Akt信號通路常常過度激活，導致腫瘤細胞的異常增殖、存活和轉移。Scutellarein抑制p-Akt的表達，可能阻斷了PI3K/Akt信號通路的激活，進而抑制細胞的增殖和存活，誘導細胞凋亡。有研究報道，槲皮素可通過抑制PI3K/Akt信號通路，誘導乳腺癌細胞凋亡，與本研究中Scutellarein對PI3K/Akt信號通路的影響具有相似性。綜上所述，Scutellarein可能通過抑制PI3K/Akt信號通路，影響細胞周期調控蛋白和凋亡相關蛋白的表達，將人舌鱗癌細胞阻滯在G1期，誘導細胞凋亡，從而發揮抑制細胞增殖的作用。然而，其具體的分子機制仍有待進一步深入研究，后續可通過基因沉默、過表達等實驗技術，驗證相關信號通路和蛋白在Scutellarein作用過程中的作用，為將Scutellarein開發為新型舌鱗癌治療藥物提供更堅實的理論基礎。4.3Scutellarein作用相關信號通路的意義PI3K/Akt信號通路在細胞的生命活動中扮演著核心角色，其激活狀態對細胞的增殖、存活、代謝等過程有著深遠影響。在正常生理條件下，該信號通路受到精確調控，維持細胞的正常功能。然而，在腫瘤發生發展過程中，PI3K/Akt信號通路常常發生異常激活。研究表明，在舌鱗癌中，PI3K/Akt信號通路的過度激活與腫瘤細胞的增殖、侵襲、轉移以及耐藥性密切相關。異常激活的PI3K/Akt信號通路能夠促進細胞周期相關蛋白的表達，加速細胞從G1期向S期的轉變，從而促進腫瘤細胞的增殖。它還能抑制細胞凋亡相關蛋白的活性，使腫瘤細胞逃避凋亡程序，實現無限增殖。此外，PI3K/Akt信號通路的激活還與腫瘤細胞的代謝重編程相關，為腫瘤細胞的快速生長提供充足的能量和物質基礎。本研究發現，Scutellarein能夠抑制PI3K/Akt信號通路中關鍵蛋白p-Akt的表達，從而阻斷該信號通路的激活。這一發現具有重要的意義，表明Scutellarein可能通過抑制PI3K/Akt信號通路，打破腫瘤細胞中異常的信號傳導平衡，從而發揮抑制舌鱗癌細胞增殖和誘導凋亡的作用。這為舌鱗癌的治療提供了新的潛在靶點和治療策略。以PI3K/Akt信號通路為靶點開發的藥物，如PI3K抑制劑、Akt抑制劑等，在腫瘤治療研究中展現出一定的潛力。然而，目前這些藥物在臨床應用中仍面臨一些挑戰，如耐藥性、副作用等。Scutellarein作為一種天然黃酮類化合物，具有來源天然、低毒等優勢，其對PI3K/Akt信號通路的抑制作用為開發新型、安全有效的舌鱗癌治療藥物提供了新的思路。未來，可進一步深入研究Scutellarein與PI3K/Akt信號通路中其他相關分子的相互作用，以及其在體內的作用效果和安全性，為將其開發為臨床治療藥物奠定基礎。除PI3K/Akt信號通路外，細胞內還存在多條與增殖、凋亡相關的信號通路，如MAPK信號通路、Wnt/β-catenin信號通路等。這些信號通路之間相互關聯、相互影響，構成復雜的信號調控網絡。在腫瘤發生發展過程中，這些信號通路往往協同作用，共同調節腫瘤細胞的生物學行為。MAPK信號通路中的ERK1/2、JNK、p38等激酶在細胞增殖、分化、凋亡等過程中發揮重要作用。在舌鱗癌中，MAPK信號通路的異常激活與腫瘤細胞的增殖、侵襲和轉移密切相關。Wnt/β-catenin信號通路則參與細胞的胚胎發育、組織穩態維持等過程，其異常激活在舌鱗癌的發生發展中也起到重要作用。未來研究可進一步探討Scutellarein對這些相關信號通路的影響，以及各信號通路之間的相互作用機制，全面揭示Scutellarein抗舌鱗癌細胞增殖的分子機制。這不僅有助于深入理解Scutellarein的作用機制，還可能為開發多靶點聯合治療策略提供理論依據，提高舌鱗癌的治療效果。4.4研究的局限性與展望本研究雖取得一定成果，明確了Scutellarein在體外對人舌鱗癌細胞的抑制作用及部分作用機制，但仍存在局限性。在細胞模型方面，僅選用了SCC4和SCC9兩種人舌鱗癌細胞株，不能完全代表舌鱗癌的所有病理類型和生物學特性。未來研究可納入更多不同來源、不同分化程度的舌鱗癌細胞株，甚至原代舌鱗癌細胞，以更全面地評估Scutellarein的作用效果和普遍性。在作用機制研究深度上，雖發現Scutellarein可能通過抑制PI3K/Akt信號通路發揮作用，但對于該信號通路上下游的其他相關分子以及它們之間的相互作用關系尚未深入探究。同時，除PI3K/Akt信號通路外，細胞內存在眾多復雜的信號網絡，Scutellarein是否通過其他信號通路協同發揮作用，或者與PI3K/Akt信號通路存在交叉對話，仍有待進一步研究。后續可運用基因芯片、蛋白質組學等高通量技術，全面分析Scutellarein處理后細胞內基因和蛋白質表達的變化，篩選出更多潛在的作用靶點和信號通路，深入揭示其作用的分子機制。此外，本研究僅在體外細胞水平進行，缺乏體內實驗驗證。細胞實驗雖能初步探究藥物的作用效果和機制，但細胞培養環境與體內復雜的生理環境存在差異，藥物在體內的代謝過程、藥代動力學特征以及與機體免疫系統的相互作用等因素均可能影響其療效。因此，未來需開展動物實驗，構建人舌鱗癌動物模型，進一步驗證Scutellarein在體內的抗腫瘤作用，包括對腫瘤生長、轉移的抑制效果以及對機體安全性和耐受性的評估，為其臨床應用提供更可靠的依據。在臨床研究方面，若動物實驗取得良好結果，可進一步開展臨床試驗，探索Scutellarein在舌鱗癌患者中的安全性、有效性和最佳治療方案。通過多中心、大樣本的臨床試驗，觀察Scutellarein單獨使用或與現有治療手段聯合使用對舌鱗癌患者的治療效果，評估其對患者生存質量、生存期等指標的影響，為將Scutellarein開發成為新型的舌鱗癌治療藥物奠定堅實基礎。五、結論5.1研究成果總結本研究通過一系列實驗，深入探究了Scutellarein在體外對人舌鱗癌細胞的作用及機制。研究結果表明，Scutellarein對人舌鱗癌細胞SCC4和SCC9具有顯著的細胞毒性和增殖抑制作用，且呈明顯的劑量和時間依賴性。在較低濃度（1-5μM）時，Scutellarein對細胞增殖的抑制作用相對較弱，但隨著濃度增加至10μM及以上，細胞增殖受到顯著抑制，當濃度達到50μM時，作用72h后，細胞增殖幾乎被完全抑制。與其他相關研究中抗癌物質對舌鱗癌細胞的抑制效果相比，Scutellarein在相對較低濃度下就能發揮顯著作用，展現出潛在的優勢。細胞周期實驗顯示，Scutellarein能夠將人舌鱗癌細胞阻滯在G1期，抑制細胞從G1期向S期的轉變，導致S期細胞比例顯著下降，從而影響細胞的增殖進程。細胞凋亡實驗表明，Scutellarein可以有效誘導人舌鱗癌細胞凋亡，隨著濃度的升高，細胞凋亡率顯著增加，呈現明顯的劑量依賴性。進一步研究發現，Scutellarein誘導細胞凋亡的機制可能與調節凋亡相關蛋白Bax、Bcl-2和cleaved-caspase-3的表達有關，通過上調Bax表達、下調Bcl-2表達，激活caspase-3信號通路，最終促使細胞凋亡。在信號通路研究方面，發現Scutellarein能夠抑制PI3K/Akt信號通路中關鍵蛋白p-Akt的表達，而總Akt蛋白表達水平無明顯變化，提示Scutellarein可能通過抑制PI3K/Akt信號通路的激活，從而發揮抑制人舌鱗癌細胞增殖和誘導凋亡的作用。PI3K/Akt信號通路在細胞的生長、增殖、存活和代謝等過程中發揮著關鍵作用，其異常激活與腫瘤的發生、發展密切相關。Scutellarein對該信號通路的抑制作用，為揭示其抗人舌鱗癌細胞增殖的分子機制提供了重要線索。5.2研究的臨床應用價值與前景本研究證實Scutellarein對人舌鱗癌細胞具有顯著的抑制增殖和誘導凋亡作用，這為開發新型抗癌藥物提供了重要的實驗依據和潛在的藥物來源。在當前舌鱗癌治療手段存在諸多局限性的情況下，Scutellarein作為一種天然黃酮類化合物，具有來源廣泛、相對低毒等優勢，有望成為一種新的治療選擇或輔助治療藥物。從臨床應用角度來看，若后續研究能進一步驗證Scutellarein在體內的有效性和安全性，它可能以多種方式應用于舌鱗癌的治療。一方