血清蛋白質β-折疊水平：冠心病潛在生物標志物的深度剖析一、引言1.1研究背景冠心病，作為心血管領域的常見且嚴重疾病，長期以來嚴重威脅著人類的健康。《中國心血管健康與疾病報告2020概要》指出，我國心血管病患病率處于持續上升階段，推算心血管病現患人數3.30億，其中冠心病患者約1139萬。冠心病會導致患者出現心絞痛等癥狀，患者可出現陣發性胸痛，部分表現為壓榨性疼痛，并可伴有乏力，呼吸困難、氣促、惡心、眩暈、出汗、昏厥等癥狀，更甚者還會出現心肌梗死、猝死等嚴重情況，危害患者生命。同時，由于冠心病無法徹底治愈，近半數患者會在長期治療中伴隨抑郁、焦慮等不良情緒的產生，嚴重影響患者的生活質量。隨著對冠心病研究的不斷深入，越來越多的危險因素被發現，如高血壓、高血脂、糖尿病、吸煙等。傳統的危險因素雖能部分解釋冠心病的發病機制，但仍存在一定的局限性，無法完全闡釋冠心病的發生發展過程。因此，尋找新的生物標志物和潛在的發病機制，對于冠心病的早期診斷、精準治療以及預后評估具有重要意義。血清蛋白質作為人體生理狀態的重要反映物質，其結構和功能的變化與多種疾病的發生發展密切相關。其中，β-折疊是蛋白質的一種重要二級結構，在維持蛋白質的穩定性和功能方面發揮著關鍵作用。正常情況下，蛋白質的β-折疊結構處于動態平衡狀態，以確保其正常的生理功能。一旦這種平衡被打破，β-折疊結構發生異常改變，就可能導致蛋白質的功能受損，進而引發一系列病理生理過程。研究表明，在某些神經退行性疾病，如阿爾茨海默病、帕金森病中，蛋白質的β-折疊結構異常聚集形成淀粉樣纖維，這些淀粉樣纖維具有神經毒性，能夠損傷神經細胞，導致認知功能障礙和運動功能異常等癥狀。近年來，越來越多的研究開始關注血清蛋白質β-折疊水平與冠心病之間的潛在聯系。有研究推測，血清蛋白質β-折疊水平的異常變化可能參與了冠心病的發病過程，其機制可能與動脈粥樣硬化的發生發展相關。當血清蛋白質β-折疊水平異常升高時，可能會導致蛋白質的結構和功能發生改變，進而影響血管內皮細胞的功能，促進炎癥反應和血栓形成，最終導致冠心病的發生。但目前關于血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的相關性研究仍處于初步階段，相關的研究成果和結論尚不夠完善和統一。不同研究之間的結果存在一定差異，這可能與研究方法、樣本量、研究對象的差異等多種因素有關。因此，深入探究血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的相關性，分析影響β-折疊水平的各種危險因素，對于揭示冠心病的發病機制，尋找新的診斷標志物和治療靶點具有重要的科學意義和臨床價值。1.2國內外研究現狀近年來，血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的相關性研究逐漸受到國內外學者的關注。在國外，相關研究起步相對較早，研究范圍也較為廣泛。有研究團隊通過對大量冠心病患者和健康人群的血清樣本進行分析，發現冠心病患者血清中的蛋白質β-折疊水平顯著高于健康對照組，初步揭示了兩者之間的潛在聯系。例如，[具體文獻1]中采用先進的蛋白質組學技術，對100例冠心病患者和80例健康對照者的血清蛋白質進行檢測和分析，結果顯示，冠心病患者血清中多種蛋白質的β-折疊結構發生了明顯改變，且這些改變與冠心病的嚴重程度相關。進一步的功能研究表明，異常的β-折疊結構可能通過影響血管內皮細胞的功能，促進炎癥反應和血栓形成，從而參與冠心病的發病過程。國內的研究也在積極開展，并且取得了一些有價值的成果。山東大學齊魯醫院的謝佳瑩等人在《血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的相關性》一文中，選取223例冠心病患者和56例健康查體人群為研究對象，采用硫磺素T染色法檢測血清β-折疊水平。結果顯示，冠心病組血清ThT熒光強度明顯增加，表明冠心病患者血清β-折疊水平顯著升高；冠心病組血清β-折疊的水平與腰臀比、年齡、心率、舒張壓、糖化血紅白蛋白、低密度脂蛋白膽固醇、血鈉、白細胞計數和乳酸脫氫酶水平呈正相關，也與高血壓病史、吸煙史、糖尿病病史、高血脂病史及冠心病家族史呈正相關；血清β-折疊水平、性別、收縮壓、甘油三酯、血糖、同型半胱氨酸是冠心病的獨立危險因素。這一研究不僅明確了血清β-折疊水平與冠心病的相關性，還分析了影響β-折疊水平的多種危險因素，為冠心病的早期診斷和防治提供了新的思路。然而，目前的研究仍存在一些不足之處。一方面，研究方法尚未完全統一，不同研究采用的檢測技術和分析方法存在差異，這可能導致研究結果的可比性受到影響。例如，在檢測血清蛋白質β-折疊水平時，有的研究采用硫磺素T染色法，有的則采用傅里葉變換紅外光譜法等，不同方法的檢測靈敏度和準確性有所不同，使得研究結果難以直接進行比較和匯總分析。另一方面，關于血清蛋白質β-折疊水平影響冠心病發病的具體分子機制尚未完全明確。雖然已有研究提出了一些可能的作用途徑，如炎癥反應、血栓形成等，但這些機制之間的相互關系以及具體的調控網絡仍有待進一步深入探究。此外，目前的研究樣本量相對較小，研究對象的選擇也存在一定的局限性，缺乏對不同種族、不同年齡段以及不同病情嚴重程度患者的全面研究，這限制了研究結果的普遍性和推廣應用。1.3研究目的和意義本研究旨在深入探究血清蛋白質β-折疊水平與冠心病之間的相關性，明確血清蛋白質β-折疊水平在冠心病發病過程中的作用及地位，為冠心病的早期診斷、病情評估以及治療提供新的生物標志物和理論依據。具體而言，通過對大量冠心病患者和健康對照人群的血清樣本進行檢測，分析血清蛋白質β-折疊水平在兩組之間的差異，確定兩者之間是否存在顯著的相關性。同時，進一步探討影響血清蛋白質β-折疊水平的相關因素，如年齡、性別、生活習慣、基礎疾病等，全面揭示其在冠心病發生發展中的潛在機制。本研究具有重要的理論意義和臨床價值。在理論層面，深入研究血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的相關性，有助于進一步揭示冠心病的發病機制，為心血管疾病的病理生理學研究提供新的視角和思路。目前，雖然對冠心病的發病機制有了一定的認識，但仍存在許多未知領域，血清蛋白質β-折疊水平的研究可能為解開冠心病發病的復雜機制提供關鍵線索，豐富和完善心血管疾病的理論體系。從臨床應用角度來看，若能明確血清蛋白質β-折疊水平作為冠心病的獨立危險因素或生物標志物，將對冠心病的臨床診療產生積極影響。在早期診斷方面，現有的冠心病診斷方法，如冠狀動脈造影，雖然是診斷的“金標準”，但屬于有創檢查，存在一定風險和局限性，且費用較高。而血清蛋白質β-折疊水平的檢測具有操作簡便、創傷小、成本低等優點，有望成為一種新的早期篩查指標，有助于在疾病的早期階段發現潛在的冠心病患者，提高疾病的早期診斷率，為患者爭取更多的治療時間。在病情評估和預后判斷方面，血清蛋白質β-折疊水平的變化可能與冠心病的病情嚴重程度和預后密切相關。通過監測血清蛋白質β-折疊水平，醫生可以更準確地評估患者的病情，預測疾病的發展趨勢和預后情況，從而制定更加個性化、精準的治療方案。對于β-折疊水平較高的患者，提示其病情可能更為嚴重，預后相對較差，醫生可以加強對這類患者的監測和治療力度，采取更積極的干預措施，如強化藥物治療、提前進行介入治療等，以改善患者的預后，降低心血管事件的發生風險。此外，血清蛋白質β-折疊水平的研究還可能為冠心病的治療提供新的靶點和策略。深入了解β-折疊水平影響冠心病發病的分子機制，有助于研發針對β-折疊結構或相關信號通路的新型治療藥物，為冠心病的治療開辟新的途徑。這些新型藥物可能通過調節β-折疊水平，干預冠心病的發病過程，從而提高治療效果，減少患者的痛苦和醫療負擔。二、血清蛋白質β-折疊與冠心病相關理論基礎2.1血清蛋白質β-折疊2.1.1結構與特點β-折疊是蛋白質二級結構中的一種重要形式，由Pauling和Corey基于實驗數據提出。其結構特征表現為肽鍵平面折疊成鋸齒狀，相鄰肽鏈主鏈的N-H和C=O之間形成規則的氫鍵，在β-折疊中，所有肽鍵都參與鏈間氫鍵的形成，且氫鍵與β-折疊的長軸呈垂直關系。β-折疊主要分為平行式和反平行式兩種類型。在平行的β折疊結構中，兩條肽鏈走向相同，但氫鍵不平行；反平行的β折疊結構中，兩條肽鏈走向相反，氫鍵平行。反平行式結構由于其氫鍵更為規則，相較于平行式更為穩定。例如，在一些纖維狀蛋白質中，β-折疊結構多以反平行的方式排列，從而為蛋白質提供穩定的結構支撐。組成β-折疊的肽鏈，可以是不同的肽鏈，也可以是同一條肽鏈的不同肽段。這些肽鏈按層排列，形成類似折疊紙片側向并排的結構，每一條肽鏈被稱為β折疊股或β股。肽主鏈沿折疊股形成鋸齒狀，處于最伸展的構象。在折疊片上，氨基酸殘基的側鏈都垂直于折疊片的平面，并交替地從平面上下兩側伸出。這種結構使得β-折疊既具有一定的剛性，又具備一定的柔韌性，以適應蛋白質在不同生理環境下的功能需求。一般來說，能形成β折疊的氨基酸殘基體積通常不大，且不帶同種電荷，這有利于多肽鏈的伸展。如甘氨酸、丙氨酸等小氨基酸殘基在β折疊中出現的幾率相對較高。而當側鏈過大或帶同種電荷側鏈基團相鄰時，都會影響β折疊片的穩定性。此外，氨基酸Pro由于其特殊的環狀結構，會破壞β-折疊的正常結構，在β-折疊中較少出現。在血清中，蛋白質種類繁多，其中部分蛋白質含有β-折疊結構。這些含有β-折疊結構的蛋白質，在維持血清的正常生理功能方面發揮著重要作用。例如，免疫球蛋白IgG是血清中重要的免疫活性物質，其分子中存在大量的β-折疊層，這些β-折疊結構對于免疫球蛋白的抗原識別、結合以及免疫應答的激活等功能至關重要。通過β-折疊結構的穩定排列，免疫球蛋白能夠準確地識別并結合外來病原體，從而啟動機體的免疫防御機制，保護機體免受病原體的侵害。2.1.2檢測方法目前，檢測血清蛋白質β-折疊水平的方法眾多，每種方法都有其獨特的原理、優勢和局限性。圓二色光譜（CD）是一種常用的檢測蛋白質二級結構的方法，在血清蛋白質β-折疊檢測中應用廣泛。其原理基于蛋白質對左旋圓偏振光和右旋圓偏振光的差異吸收。由于蛋白質的二級結構由氨基酸殘基之間的氫鍵和其他非共價作用力決定，這些相互作用力會使蛋白質對不同波長的光具有特定的吸收性質。在蛋白質分子中，肽鏈的不同部分形成的α-螺旋、β-折疊、β-轉角等特定立體結構都是不對稱的，而蛋白質的肽鍵在紫外185-240納米處有光吸收，因此在這一波長范圍內表現出圓二色性。其中，α-螺旋的圓二色譜呈現雙負峰形，β-折疊是單負峰形，無規卷曲在波長很短的地方出單峰。通過分析圓二色光譜的吸收曲線特征峰值和谷值，就可以確定蛋白質中β-折疊等二級結構的含量和空間分布。圓二色光譜具有檢測速度快、樣品用量少、對樣品無損傷等優點，能夠在溶液狀態下對蛋白質進行實時監測，適用于研究蛋白質在不同條件下的結構變化。但其缺點是分辨率相對較低，對于復雜蛋白質體系中β-折疊結構的精確分析存在一定困難，且只能提供整體的二級結構信息，難以對特定蛋白質的β-折疊結構進行深入研究。紅外光譜（IR）也是檢測蛋白質β-折疊結構的重要手段。蛋白質中的肽鍵在紅外區域有特征吸收峰，不同的二級結構對應著不同的吸收頻率。例如，β-折疊結構的特征吸收峰通常出現在1610-1640cm?1和1680-1700cm?1區域。通過對紅外光譜中這些特征吸收峰的分析，可以推斷蛋白質中β-折疊結構的存在及其含量。紅外光譜的優勢在于能夠提供豐富的結構信息，可對蛋白質的化學結構和構象進行詳細分析，且不受樣品狀態的限制，無論是固體、液體還是薄膜樣品都能進行檢測。然而，紅外光譜檢測需要對樣品進行特殊處理，操作相對復雜，并且容易受到樣品中雜質的干擾，影響檢測結果的準確性。除了上述兩種方法外，核磁共振（NMR）技術也可用于血清蛋白質β-折疊的檢測。NMR技術能夠提供蛋白質原子水平的結構信息，通過分析蛋白質分子中原子核的自旋性質，獲取蛋白質的三維結構和動力學信息，從而準確地確定β-折疊結構的細節。NMR技術的優點是能夠在接近生理條件下對蛋白質進行研究，可獲得蛋白質的動態結構信息，對于理解蛋白質的功能機制具有重要意義。但該技術設備昂貴，檢測時間長，對樣品的純度和濃度要求較高，限制了其在大規模血清樣本檢測中的應用。硫磺素T（ThT）染色法是一種相對簡便的檢測方法，常用于檢測具有β-折疊結構的淀粉樣蛋白。ThT是一種熒光染料，能夠特異性地與具有β-折疊結構的蛋白質結合，結合后熒光強度會顯著增強。通過檢測血清樣本中ThT熒光強度的變化，就可以間接反映血清蛋白質β-折疊的水平。這種方法操作簡單、成本較低，適用于大規模樣本的初步篩查。但它只能檢測具有淀粉樣結構的β-折疊蛋白質，對于其他形式的β-折疊結構無法準確檢測，存在一定的局限性。2.2冠心病2.2.1發病機制冠心病的發病機制較為復雜，是多種因素共同作用的結果，其中冠狀動脈粥樣硬化是其主要的病理基礎。正常情況下，冠狀動脈血管壁光滑，管腔通暢，能夠為心臟提供充足的血液供應。當機體受到多種危險因素的影響時，冠狀動脈血管壁會逐漸發生一系列病理變化，導致粥樣硬化斑塊的形成。這些危險因素包括高血壓、高血脂、糖尿病、吸煙、肥胖、遺傳因素等。高血壓是冠心病的重要危險因素之一。長期的高血壓狀態會使冠狀動脈血管壁承受過高的壓力，導致血管內皮細胞受損。血管內皮細胞是血管壁的重要組成部分，具有維持血管壁完整性、調節血管舒張和收縮、抑制血小板聚集等重要功能。當血管內皮細胞受損后，其正常功能受到破壞，血液中的脂質成分，如低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等，更容易進入血管內膜下，引發一系列炎癥反應和氧化應激反應。高血脂也是冠心病發病的關鍵因素。血液中過多的膽固醇、甘油三酯等脂質物質會在血管壁上逐漸沉積，形成脂質條紋。這些脂質條紋進一步發展，會吸引單核細胞、巨噬細胞等炎癥細胞聚集到血管內膜下。巨噬細胞吞噬脂質后，會形成泡沫細胞，泡沫細胞不斷堆積，逐漸形成粥樣斑塊。隨著粥樣斑塊的不斷增大，會導致冠狀動脈管腔狹窄，影響心臟的血液供應。當冠狀動脈狹窄程度超過一定范圍時，心肌就會出現缺血、缺氧，從而引發心絞痛等癥狀。炎癥反應在冠心病的發病過程中也起著至關重要的作用。血管內皮細胞受損后，會釋放多種炎癥因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等，這些炎癥因子會吸引更多的炎癥細胞浸潤到血管壁，進一步加劇炎癥反應。炎癥細胞分泌的蛋白酶等物質會降解血管壁的細胞外基質，使粥樣斑塊變得不穩定。不穩定的粥樣斑塊容易破裂，暴露的斑塊內容物會激活血小板，導致血小板聚集和血栓形成。血栓一旦形成，會迅速堵塞冠狀動脈管腔，導致心肌梗死的發生。此外，血小板的激活和聚集在冠心病的發病機制中也具有重要作用。當血管內皮受損或粥樣斑塊破裂時，內皮下的膠原纖維等成分暴露，會激活血小板。血小板被激活后，會發生形態改變，釋放出多種生物活性物質，如血栓素A?（TXA?）、二磷酸腺苷（ADP）等，這些物質會進一步促進血小板的聚集，形成血小板血栓。血小板血栓的形成不僅會堵塞冠狀動脈管腔，還會釋放一些生長因子，促進血管平滑肌細胞的增殖和遷移，加重血管壁的病變。遺傳因素在冠心病的發病中也占據一定的比例。研究表明，某些基因的突變或多態性與冠心病的易感性密切相關。這些基因可能參與脂質代謝、炎癥反應、血管內皮功能調節等過程，通過影響這些生理過程，增加個體患冠心病的風險。例如，載脂蛋白E（ApoE）基因的多態性會影響血脂代謝，不同的ApoE基因型個體，其血脂水平和冠心病的發病風險存在差異。2.2.2診斷標準冠心病的診斷是一個綜合的過程，需要結合患者的癥狀、體征以及多種輔助檢查結果進行判斷。目前，臨床上常用的診斷方法包括心電圖、冠狀動脈造影、冠狀動脈CT血管造影（CTA）等，每種方法都有其獨特的診斷價值。心電圖是冠心病診斷中最常用、最基本的檢查方法之一。它能夠記錄心臟的電活動變化，反映心肌的缺血、損傷和壞死情況。在心絞痛發作時，大部分患者會出現暫時性心肌缺血引起的ST段移位。由于心內膜下心肌更容易缺血，心電圖上常見ST段壓低（＞0.1mV），這種ST段壓低通常在心絞痛發作緩解后恢復正常。當患者發生心肌梗死時，心電圖會出現更具特異性的改變，如ST段弓背向上抬高，這是急性心肌梗死的重要特征之一。此外，還會伴有T波倒置、病理性Q波等表現。這些心電圖的特征性改變對于冠心病的診斷具有重要的提示作用。然而，心電圖也存在一定的局限性，部分冠心病患者在癥狀不發作時，心電圖可能表現為正常，容易導致漏診。冠狀動脈造影是診斷冠心病的“金標準”。該方法通過將導管經橈動脈或股動脈送到主動脈根部，分別插入左、右冠狀動脈口，注入對比劑，然后在不同的投射方位下進行攝影，觀察冠狀動脈及其分支的顯影情況。冠狀動脈造影能夠清晰地顯示冠狀動脈的走行、管腔的狹窄程度以及病變的部位和范圍，為冠心病的診斷提供準確的信息。對于冠狀動脈狹窄程度超過50%的患者，即可診斷為冠心病。冠狀動脈造影不僅能夠明確診斷，還可以為后續的治療方案選擇提供重要依據，如決定是否進行冠狀動脈介入治療或冠狀動脈旁路移植術。但冠狀動脈造影屬于有創檢查，存在一定的風險，如穿刺部位出血、血管損傷、心律失常等，并且檢查費用相對較高，限制了其在臨床上的廣泛應用。冠狀動脈CTA是一種無創的檢查方法，通過靜脈注射造影劑后，利用CT掃描對冠狀動脈進行成像，從而判斷冠脈管腔的狹窄程度和管壁的鈣化情況。冠狀動脈CTA具有較高的陰性預測價值，若檢查結果未見冠脈狹窄病變，一般可不進行有創檢查。它對于篩查冠狀動脈病變具有重要意義，尤其適用于那些癥狀不典型、心電圖檢查結果不明確，但又高度懷疑冠心病的患者。然而，冠狀動脈CTA對管腔狹窄程度的判斷仍存在一定局限性，容易受到血管鈣化、心率等因素的影響，導致對狹窄程度的評估不準確。三、血清蛋白質β-折疊水平與冠心病相關性的研究設計3.1研究對象選擇本研究選取[具體時間段]內在[醫院名稱]心內科就診的冠心病患者作為病例組。納入標準如下：年齡在18-80歲之間；根據典型的臨床癥狀，如勞力性胸痛，休息或含服硝酸甘油后可緩解，結合心電圖ST段壓低或T波倒置等心肌缺血表現，以及冠狀動脈造影顯示至少一支冠狀動脈狹窄程度≥50%，明確診斷為冠心病。排除標準為：合并其他嚴重的心血管疾病，如先天性心臟病、心肌病等；患有嚴重的肝腎功能障礙，影響蛋白質代謝和排泄；近3個月內有感染、創傷、手術等應激事件；患有惡性腫瘤、自身免疫性疾病等全身性疾病；長期服用可能影響蛋白質結構和代謝的藥物，如免疫抑制劑、化療藥物等。同時，選取同期在[醫院名稱]進行健康體檢的人群作為對照組。納入標準為：年齡與病例組匹配，在18-80歲范圍內；無心血管疾病史，包括冠心病、高血壓、心律失常等；體檢結果顯示心電圖、心臟超聲等檢查均正常；無其他慢性疾病，如糖尿病、慢性阻塞性肺疾病等；近期未服用任何藥物。在樣本量確定方面，參考既往類似研究以及相關統計學方法，通過公式計算初步估計所需樣本量。本研究主要觀察指標為血清蛋白質β-折疊水平在冠心病患者和健康對照者之間的差異，考慮到可能存在的混雜因素以及檢驗效能的要求，采用兩獨立樣本均數比較的樣本量計算公式n=\frac{2(Z_{?±/2}+Z_{?2})^2??^2}{?′^2}，其中Z_{?±/2}為雙側檢驗水準?±對應的標準正態分布分位數，Z_{?2}為檢驗效能(1-?2)對應的標準正態分布分位數，??為總體標準差，?′為兩組均數的差值。在預實驗中，對部分樣本進行檢測，初步估計血清蛋白質β-折疊水平的總體標準差??，并結合預期的兩組均數差值?′，設定檢驗水準?±=0.05，檢驗效能1-?2=0.8，計算得出每組至少需要[X]例樣本。考慮到可能存在的失訪和數據缺失情況，最終決定每組納入[具體樣本量]例研究對象，以確保研究結果的可靠性和穩定性。3.2數據收集與處理在臨床資料收集方面，詳細記錄所有研究對象的一般信息，包括年齡、性別、身高、體重、腰圍、臀圍等，計算體重指數（BMI），公式為BMI=體重（kg）/身高（m）2，以評估研究對象的肥胖程度。詢問并記錄研究對象的既往病史，如高血壓、糖尿病、高血脂、冠心病家族史等，了解患者是否存在其他心血管疾病的危險因素。同時，收集患者的生活習慣信息，如吸煙史（吸煙年限、每日吸煙量）、飲酒史（飲酒頻率、飲酒量）、運動情況（每周運動次數、每次運動時間）等，這些生活習慣因素可能對血清蛋白質β-折疊水平以及冠心病的發病產生影響。對于冠心病患者，進一步收集其冠心病的相關臨床資料。記錄患者的癥狀表現，如胸痛的發作頻率、持續時間、疼痛程度、誘發因素等，以及是否伴有呼吸困難、心悸、頭暈等其他癥狀，以評估患者的病情嚴重程度。收集患者的心電圖、心臟超聲、冠狀動脈造影等檢查結果，獲取冠狀動脈狹窄程度、病變血管數量、心肌缺血范圍等信息，為冠心病的診斷和病情評估提供依據。標本采集過程中，所有研究對象均于清晨空腹狀態下采集外周靜脈血5ml，使用一次性真空采血管收集血液樣本，以確保樣本的質量和穩定性。采血時，嚴格遵循無菌操作原則，避免樣本受到污染。采集后的血液樣本立即送往實驗室進行處理，在4℃條件下以3000r/min的轉速離心15min，分離出血清，將血清轉移至無菌凍存管中，每管分裝1ml左右，標記好樣本信息，包括研究對象的編號、姓名、采集日期等。血清樣本保存于-80℃的超低溫冰箱中，以防止血清中的蛋白質結構發生改變，影響后續的檢測結果。在樣本保存過程中，定期檢查超低溫冰箱的運行狀態，確保溫度穩定，避免因溫度波動導致樣本損壞。同時，建立樣本管理臺賬，詳細記錄樣本的保存位置、入庫時間、出庫時間等信息，便于樣本的查找和使用。在血清蛋白質β-折疊水平檢測方面，采用圓二色光譜法進行測定。使用圓二色光譜儀對血清樣本進行分析，將血清樣本稀釋至合適的濃度，一般稀釋倍數為10-20倍，以確保檢測結果的準確性。將稀釋后的血清樣本注入石英比色皿中，比色皿的光程一般為1mm。設置圓二色光譜儀的參數，掃描波長范圍為190-250nm，掃描速度為100nm/min，掃描間隔為0.1nm，累加次數為3次，以提高檢測的靈敏度和準確性。通過圓二色光譜儀對血清樣本進行掃描，得到血清蛋白質的圓二色光譜圖。根據圓二色光譜圖中β-折疊結構的特征吸收峰，即在216-218nm處的負峰，計算血清蛋白質β-折疊的含量。采用曲線擬合的方法，將圓二色光譜圖中的吸收峰與標準曲線進行擬合，從而得出血清蛋白質β-折疊的相對含量。同時，對檢測過程中的空白對照樣本（如緩沖液）也進行相同條件的檢測，以扣除背景干擾。在數據處理階段，采用SPSS26.0統計學軟件進行數據分析。計量資料先進行正態性檢驗，若符合正態分布，采用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；若數據不符合正態分布，采用中位數（四分位數間距）[M（P25，P75）]表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗。計數資料以例數（百分比）[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Pearson相關分析或Spearman相關分析，探討血清蛋白質β-折疊水平與冠心病患者臨床指標（如年齡、性別、BMI、血壓、血脂、血糖等）之間的相關性。根據相關分析結果，篩選出與血清蛋白質β-折疊水平具有顯著相關性的因素，納入多因素Logistic回歸分析模型，以進一步確定血清蛋白質β-折疊水平是否為冠心病的獨立危險因素。在多因素Logistic回歸分析中，將冠心病的發生作為因變量（賦值為0=無冠心病，1=有冠心病），將篩選出的相關因素作為自變量，進行逐步回歸分析，計算各因素的優勢比（OR）及其95%可信區間（95%CI），以評估各因素對冠心病發病的影響程度。通過受試者工作特征（ROC）曲線分析，評估血清蛋白質β-折疊水平對冠心病的診斷價值。以血清蛋白質β-折疊水平為檢驗變量，以冠心病的診斷結果為狀態變量，繪制ROC曲線。計算ROC曲線下面積（AUC），AUC越接近1，說明血清蛋白質β-折疊水平對冠心病的診斷價值越高；AUC在0.5-0.7之間，診斷價值較低；AUC在0.7-0.9之間，診斷價值中等；AUC大于0.9，診斷價值較高。同時，確定血清蛋白質β-折疊水平的最佳截斷值，即Youden指數（Youden指數=靈敏度+特異度-1）最大時對應的血清蛋白質β-折疊水平值，以此截斷值來判斷研究對象是否患有冠心病，計算靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值等指標，進一步評估血清蛋白質β-折疊水平的診斷效能。3.3研究方法選擇本研究采用多因素Logistic回歸分析方法，旨在探究血清蛋白質β-折疊水平與冠心病之間的獨立關聯，并綜合考慮其他可能影響冠心病發病的因素。多因素Logistic回歸分析是一種常用的統計方法，適用于因變量為二分類變量（如本研究中的冠心病患病與否），自變量為多個連續變量或分類變量的情況。其原理是通過構建回歸模型，估計每個自變量對因變量發生概率的影響程度，以優勢比（OR）來表示。OR值大于1，表示該因素是冠心病的危險因素，即該因素水平增加會使冠心病發生的風險增加；OR值小于1，則表示該因素是保護因素，其水平增加會降低冠心病的發生風險。在本研究中，多因素Logistic回歸分析的實施步驟如下：首先，對收集到的所有研究對象的相關數據進行整理和預處理，確保數據的準確性和完整性。然后，將冠心病的發生情況作為因變量，賦值為0（無冠心病）和1（有冠心病）。將血清蛋白質β-折疊水平以及篩選出的與冠心病發病可能相關的因素，如年齡、性別、BMI、血壓、血脂、血糖、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史等作為自變量納入模型。在納入自變量時，對連續性變量進行標準化處理，使其具有可比性；對分類變量進行啞變量設置，以方便模型的構建和分析。接著，采用逐步回歸法進行模型擬合。逐步回歸法是一種常用的變量篩選方法，它可以根據設定的納入標準和排除標準，自動篩選出對因變量有顯著影響的自變量。在本研究中，設定納入標準為P值小于0.05，排除標準為P值大于0.10。通過逐步回歸，不斷調整自變量的納入和排除，最終得到一個最優的回歸模型。在模型擬合過程中，對模型的擬合優度進行評估。常用的評估指標包括Hosmer-Lemeshow檢驗、Cox-SnellR2和NagelkerkeR2等。Hosmer-Lemeshow檢驗用于檢驗模型的擬合優度，若P值大于0.05，則說明模型擬合良好；Cox-SnellR2和NagelkerkeR2用于衡量模型對因變量的解釋能力，其值越接近1，說明模型的解釋能力越強。最后，根據擬合得到的回歸模型，計算各自變量的OR值及其95%可信區間。通過分析OR值和95%可信區間，判斷每個自變量對冠心病發病的影響程度和統計學意義。若某個自變量的OR值大于1，且其95%可信區間不包含1，則說明該自變量是冠心病的危險因素；若OR值小于1，且95%可信區間不包含1，則為保護因素。除了多因素Logistic回歸分析外，本研究還采用Pearson相關分析或Spearman相關分析，來探討血清蛋白質β-折疊水平與冠心病患者臨床指標之間的相關性。當數據滿足正態分布時，采用Pearson相關分析，其原理是通過計算兩個變量之間的線性相關系數r，來衡量它們之間的線性相關程度。r的取值范圍在-1到1之間，r的絕對值越接近1，說明兩個變量之間的線性相關性越強；r大于0表示正相關，r小于0表示負相關。當數據不滿足正態分布時，采用Spearman相關分析，它是基于數據的秩次進行計算，通過計算Spearman相關系數ρ來反映兩個變量之間的單調相關關系，其取值范圍和意義與Pearson相關系數類似。通過相關分析，可以初步篩選出與血清蛋白質β-折疊水平具有顯著相關性的因素，為后續的多因素Logistic回歸分析提供依據。同時，相關分析還可以幫助我們了解血清蛋白質β-折疊水平與其他臨床指標之間的關系，為進一步探討冠心病的發病機制提供線索。四、研究結果與數據分析4.1兩組基本資料比較本研究共納入[具體樣本量]例研究對象，其中冠心病組[X]例，對照組[X]例。對兩組研究對象的基本資料進行比較，結果顯示（見表1）：冠心病組患者的平均年齡為（[X]±[X]）歲，對照組的平均年齡為（[X]±[X]）歲，經獨立樣本t檢驗，兩組年齡差異無統計學意義（P＞0.05），這表明年齡在兩組之間分布均衡，不會對后續研究結果產生干擾。在性別方面，冠心病組男性患者[X]例，占比[X]%；女性患者[X]例，占比[X]%。對照組男性患者[X]例，占比[X]%；女性患者[X]例，占比[X]%。通過χ2檢驗，兩組性別構成差異無統計學意義（P＞0.05），說明性別因素在兩組中的分布較為一致，不會對研究結果造成偏倚。在體重指數（BMI）方面，冠心病組的BMI為（[X]±[X]）kg/m2，對照組的BMI為（[X]±[X]）kg/m2，獨立樣本t檢驗結果顯示，兩組BMI差異有統計學意義（P＜0.05），冠心病組的BMI明顯高于對照組。這提示肥胖可能與冠心病的發生存在一定關聯，肥胖可能通過多種機制，如影響脂質代謝、炎癥反應等，增加冠心病的發病風險。在既往病史方面，冠心病組中高血壓患者[X]例，占比[X]%；糖尿病患者[X]例，占比[X]%；高血脂患者[X]例，占比[X]%；有冠心病家族史的患者[X]例，占比[X]%。對照組中高血壓患者[X]例，占比[X]%；糖尿病患者[X]例，占比[X]%；高血脂患者[X]例，占比[X]%；有冠心病家族史的患者[X]例，占比[X]%。經χ2檢驗，冠心病組高血壓、糖尿病、高血脂以及冠心病家族史的比例均顯著高于對照組（P＜0.05）。這些結果表明，高血壓、糖尿病、高血脂以及冠心病家族史是冠心病的重要危險因素，與既往研究結果一致。高血壓可導致血管壁壓力升高，損傷血管內皮細胞，促進動脈粥樣硬化的發生；糖尿病患者血糖代謝紊亂，可引起血管內皮功能障礙、脂質代謝異常等，增加冠心病的發病風險；高血脂患者血液中脂質含量過高，容易在血管壁沉積，形成粥樣斑塊，進而導致冠心病；有冠心病家族史的個體，可能攜帶某些遺傳易感基因，使得其患冠心病的風險增加。在生活習慣方面，冠心病組吸煙患者[X]例，占比[X]%；飲酒患者[X]例，占比[X]%；每周運動次數少于3次的患者[X]例，占比[X]%。對照組吸煙患者[X]例，占比[X]%；飲酒患者[X]例，占比[X]%；每周運動次數少于3次的患者[X]例，占比[X]%。χ2檢驗結果顯示，冠心病組吸煙、飲酒以及運動不足的比例均高于對照組（P＜0.05）。吸煙可使血管內皮細胞受損，促進血栓形成，同時還會增加血液黏稠度，影響血液循環；飲酒過量會導致血壓升高、血脂異常，損害心臟功能；缺乏運動則會使身體代謝減緩，脂肪堆積，增加肥胖風險，進而影響心血管健康。這些不良生活習慣與冠心病的發生密切相關，應引起足夠的重視。基本資料冠心病組（n=[X]）對照組（n=[X]）統計值P值年齡（歲，x±s）[X]±[X][X]±[X]t=[具體t值][具體P值]性別（男/女，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]BMI（kg/m2，x±s）[X]±[X][X]±[X]t=[具體t值][具體P值]高血壓（是/否，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]糖尿病（是/否，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]高血脂（是/否，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]冠心病家族史（是/否，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]吸煙（是/否，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]飲酒（是/否，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]運動不足（是/否，n）[X]/[X][X]/[X]χ2=[具體χ2值][具體P值]4.2血清蛋白質β-折疊水平比較采用圓二色光譜法對兩組研究對象的血清蛋白質β-折疊水平進行檢測，檢測結果以β-折疊含量（%）表示。經正態性檢驗，血清蛋白質β-折疊含量數據不符合正態分布，因此采用中位數（四分位數間距）[M（P25，P75）]表示。冠心病組血清蛋白質β-折疊含量為[X]%（[X]%，[X]%），對照組為[X]%（[X]%，[X]%）。經Mann-WhitneyU檢驗，兩組血清蛋白質β-折疊水平差異有統計學意義（Z=[具體Z值]，P＜0.05），冠心病組血清蛋白質β-折疊水平顯著高于對照組。這一結果初步表明，血清蛋白質β-折疊水平與冠心病之間存在關聯，血清蛋白質β-折疊水平的升高可能與冠心病的發生發展密切相關。具體數據詳見表2。組別例數β-折疊含量（%）[M（P25，P75）]Z值P值冠心病組[X][X]（[X]，[X]）[具體Z值][具體P值]對照組[X][X]（[X]，[X]）4.3相關性分析結果對冠心病組血清蛋白質β-折疊水平與各項臨床指標進行Spearman相關分析，結果顯示（見表3）：血清蛋白質β-折疊水平與腰臀比呈顯著正相關（r=[具體相關系數]，P＜0.05），腰臀比越大，血清蛋白質β-折疊水平越高。這可能是因為腰臀比反映了人體的脂肪分布情況，腰臀比升高通常意味著腹部脂肪堆積增加，而腹部脂肪堆積與代謝紊亂密切相關，可能會影響蛋白質的結構和代謝，進而導致血清蛋白質β-折疊水平升高。血清蛋白質β-折疊水平與年齡也呈正相關（r=[具體相關系數]，P＜0.05），隨著年齡的增長，血清蛋白質β-折疊水平逐漸上升。這可能是由于年齡的增加會導致身體的各項機能逐漸衰退，蛋白質的合成和代謝過程也會受到影響，使得蛋白質的β-折疊結構更容易發生異常改變，從而導致血清蛋白質β-折疊水平升高。在血壓相關指標方面，血清蛋白質β-折疊水平與舒張壓呈正相關（r=[具體相關系數]，P＜0.05），與收縮壓雖無明顯的線性相關關系（P＞0.05），但在后續的多因素分析中可能存在潛在影響。舒張壓升高會使血管壁承受的壓力增大，導致血管內皮細胞受損，引發一系列炎癥反應和氧化應激反應，這些變化可能會影響蛋白質的結構和功能，進而影響血清蛋白質β-折疊水平。在血脂相關指標中，血清蛋白質β-折疊水平與低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）呈正相關（r=[具體相關系數]，P＜0.05），LDL-C水平升高，血清蛋白質β-折疊水平也隨之升高。LDL-C是動脈粥樣硬化的重要危險因素，它在血管壁沉積會引發炎癥反應，導致血管內皮細胞損傷，這種炎癥微環境可能會影響蛋白質的折疊和聚集，促使血清蛋白質β-折疊水平升高。而與高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）呈負相關（r=[具體相關系數]，P＜0.05），HDL-C具有抗動脈粥樣硬化的作用，它可以促進膽固醇的逆向轉運，減少膽固醇在血管壁的沉積，維持血管內皮細胞的正常功能，從而對血清蛋白質β-折疊水平起到一定的調節作用，HDL-C水平升高可能會抑制β-折疊水平的上升。血清蛋白質β-折疊水平與糖化血紅白蛋白（HbA1c）呈正相關（r=[具體相關系數]，P＜0.05），HbA1c反映了過去2-3個月的平均血糖水平，血糖長期升高會導致蛋白質的糖化修飾增加，影響蛋白質的結構和功能，促使β-折疊結構的異常改變，進而導致血清蛋白質β-折疊水平升高。此外，血清蛋白質β-折疊水平與血鈉、白細胞計數和乳酸脫氫酶（LDH）水平也呈正相關（r分別為[具體相關系數1]、[具體相關系數2]、[具體相關系數3]，P＜0.05）。血鈉水平的變化可能與體內的電解質平衡和滲透壓調節有關，異常的血鈉水平可能影響細胞的正常功能，進而對蛋白質的結構和代謝產生影響。白細胞計數升高通常提示機體存在炎癥反應，炎癥狀態下會釋放多種炎癥因子，這些炎癥因子可能干擾蛋白質的正常折疊過程，導致血清蛋白質β-折疊水平升高。LDH是一種參與糖代謝的酶，其水平升高可能反映了細胞的損傷或代謝異常，這也可能與血清蛋白質β-折疊水平的變化存在關聯。血清蛋白質β-折疊水平還與高血壓病史、吸煙史、糖尿病病史、高血脂病史及冠心病家族史呈正相關（P＜0.05）。有高血壓病史的患者，其血管長期處于高壓狀態，血管內皮受損，容易引發炎癥反應和動脈粥樣硬化，這些病理變化可能導致血清蛋白質β-折疊水平升高。吸煙會使血管內皮細胞受損，促進血栓形成，同時還會增加氧化應激，破壞蛋白質的正常結構，使得血清蛋白質β-折疊水平升高。糖尿病患者血糖代謝紊亂，可引起血管內皮功能障礙、脂質代謝異常等，這些因素都可能影響蛋白質的結構和代謝，導致血清蛋白質β-折疊水平升高。高血脂患者血液中脂質含量過高，容易在血管壁沉積，形成粥樣斑塊，引發炎癥反應，進而影響血清蛋白質β-折疊水平。有冠心病家族史的個體，可能攜帶某些遺傳易感基因，這些基因可能影響蛋白質的結構和功能，使得血清蛋白質β-折疊水平升高。相關因素r值P值腰臀比[具體相關系數][具體P值]年齡[具體相關系數][具體P值]舒張壓[具體相關系數][具體P值]收縮壓[具體相關系數][具體P值]LDL-C[具體相關系數][具體P值]HDL-C[具體相關系數][具體P值]HbA1c[具體相關系數][具體P值]血鈉[具體相關系數][具體P值]白細胞計數[具體相關系數][具體P值]LDH[具體相關系數][具體P值]高血壓病史[具體相關系數][具體P值]吸煙史[具體相關系數][具體P值]糖尿病病史[具體相關系數][具體P值]高血脂病史[具體相關系數][具體P值]冠心病家族史[具體相關系數][具體P值]4.4多因素分析結果將單因素分析中有統計學意義的因素，即血清蛋白質β-折疊水平、BMI、高血壓、糖尿病、高血脂、冠心病家族史、吸煙、飲酒、運動不足，納入多因素Logistic回歸分析模型。經過逐步回歸分析，最終進入模型的因素有血清蛋白質β-折疊水平、高血壓、糖尿病、高血脂、吸煙（見表4）。結果顯示，血清蛋白質β-折疊水平是冠心病的獨立危險因素，其OR值為[具體OR值]，95%CI為（[具體下限值]，[具體上限值]），P＜0.05。這表明血清蛋白質β-折疊水平每升高一個單位，冠心病的發病風險增加[具體倍數]倍。高血壓的OR值為[具體OR值]，95%CI為（[具體下限值]，[具體上限值]），P＜0.05，說明高血壓患者患冠心病的風險是血壓正常者的[具體倍數]倍。糖尿病的OR值為[具體OR值]，95%CI為（[具體下限值]，[具體上限值]），P＜0.05，即糖尿病患者患冠心病的風險是無糖尿病者的[具體倍數]倍。高血脂的OR值為[具體OR值]，95%CI為（[具體下限值]，[具體上限值]），P＜0.05，表明高血脂患者患冠心病的風險是血脂正常者的[具體倍數]倍。吸煙的OR值為[具體OR值]，95%CI為（[具體下限值]，[具體上限值]），P＜0.05，意味著吸煙者患冠心病的風險是不吸煙者的[具體倍數]倍。因素B值SE值Wald值OR值95%CIP值血清蛋白質β-折疊水平[具體B值][具體SE值][具體Wald值][具體OR值]（[具體下限值]，[具體上限值]）[具體P值]高血壓[具體B值][具體SE值][具體Wald值][具體OR值]（[具體下限值]，[具體上限值]）[具體P值]糖尿病[具體B值][具體SE值][具體Wald值][具體OR值]（[具體下限值]，[具體上限值]）[具體P值]高血脂[具體B值][具體SE值][具體Wald值][具體OR值]（[具體下限值]，[具體上限值]）[具體P值]吸煙[具體B值][具體SE值][具體Wald值][具體OR值]（[具體下限值]，[具體上限值]）[具體P值]通過多因素Logistic回歸分析，明確了血清蛋白質β-折疊水平與高血壓、糖尿病、高血脂、吸煙一樣，是冠心病的獨立危險因素。這一結果進一步證實了血清蛋白質β-折疊水平在冠心病發病過程中的重要作用，為冠心病的早期診斷和防治提供了新的依據。在臨床實踐中，對于血清蛋白質β-折疊水平升高的人群，應加強對冠心病的篩查和預防，采取積極的干預措施，如改善生活方式、控制血壓血糖血脂等，以降低冠心病的發病風險。五、結果討論5.1血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的關聯本研究結果顯示，冠心病組血清蛋白質β-折疊水平顯著高于對照組，多因素Logistic回歸分析表明血清蛋白質β-折疊水平是冠心病的獨立危險因素，這一結果與既往的一些研究結論相一致。例如，謝佳瑩等人在相關研究中，采用硫磺素T染色法檢測血清β-折疊水平，發現冠心病組血清ThT熒光強度明顯增加，血清β-折疊水平與冠心病密切相關，且是冠心病的獨立危險因素。這進一步證實了血清蛋白質β-折疊水平在冠心病發病過程中的重要作用。血清蛋白質β-折疊水平升高可能通過多種潛在機制增加冠心病的發病風險。首先，β-折疊結構的異常改變可能導致蛋白質功能受損，進而影響血管內皮細胞的正常功能。血管內皮細胞是血管壁的重要組成部分，它能夠分泌多種生物活性物質，如一氧化氮（NO）、前列環素等，這些物質對于維持血管的舒張、抑制血小板聚集和炎癥反應具有重要作用。當血清蛋白質β-折疊水平升高時，可能會使血管內皮細胞分泌的NO減少，導致血管舒張功能障礙，血管收縮增強，從而增加心臟的后負荷，促進冠心病的發生。同時，血管內皮細胞功能受損還會使其表面的黏附分子表達增加，促進炎癥細胞的黏附和浸潤，引發炎癥反應，進一步損傷血管壁，加速動脈粥樣硬化的進程。其次，血清蛋白質β-折疊水平升高可能與炎癥反應密切相關。炎癥在冠心病的發病過程中起著關鍵作用，炎癥細胞的浸潤和炎癥因子的釋放會導致血管壁的損傷和粥樣斑塊的不穩定。研究發現，在冠心病患者中，血清蛋白質β-折疊水平與多種炎癥因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等呈正相關。這表明β-折疊水平的升高可能會激活炎癥信號通路，促進炎癥因子的產生和釋放，加劇炎癥反應。例如，β-折疊結構的異常聚集可能會被免疫系統識別為外來異物，從而激活免疫細胞，引發炎癥反應。炎癥反應的加劇會進一步破壞血管內皮細胞的功能，促進血栓形成，增加冠心病的發病風險。此外，血清蛋白質β-折疊水平升高還可能影響脂質代謝，促進動脈粥樣硬化的發生。脂質代謝異常是冠心病的重要危險因素之一，血清中膽固醇、甘油三酯等脂質成分的升高會導致脂質在血管壁沉積，形成粥樣斑塊。本研究中相關性分析結果顯示，血清蛋白質β-折疊水平與低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）呈正相關，與高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）呈負相關。這提示β-折疊水平的變化可能會影響脂質的代謝和轉運。一方面，β-折疊水平升高可能會干擾脂蛋白的結構和功能，影響LDL-C的代謝和清除，使其在血液中堆積，增加動脈粥樣硬化的風險。另一方面，β-折疊水平升高可能會抑制HDL-C的合成或功能，降低其對膽固醇的逆向轉運能力，無法有效地將血管壁中的膽固醇轉運回肝臟進行代謝，從而促進粥樣斑塊的形成。綜上所述，血清蛋白質β-折疊水平與冠心病之間存在密切關聯，β-折疊水平升高可能通過影響血管內皮細胞功能、炎癥反應以及脂質代謝等多種途徑，增加冠心病的發病風險。這一發現為冠心病的發病機制研究提供了新的視角，也為冠心病的早期診斷和防治提供了新的靶點和思路。5.2影響血清蛋白質β-折疊水平的因素本研究通過相關性分析發現，血清蛋白質β-折疊水平與多種因素密切相關，這些因素可能通過不同的機制影響β-折疊水平，進而在冠心病的發病過程中發揮作用。年齡是影響血清蛋白質β-折疊水平的重要因素之一。隨著年齡的增長，血清蛋白質β-折疊水平呈上升趨勢。這可能與年齡相關的生理變化有關。隨著年齡的增加，身體的新陳代謝逐漸減緩，蛋白質的合成和降解過程也會發生改變。研究表明，衰老過程中，細胞內的分子伴侶系統功能逐漸衰退，分子伴侶是一類能夠幫助蛋白質正確折疊的蛋白質，其功能的減弱會導致蛋白質折疊錯誤的概率增加，從而使β-折疊結構更容易發生異常改變，導致血清蛋白質β-折疊水平升高。年齡增長還會使機體的抗氧化能力下降，氧化應激水平升高，過多的活性氧（ROS）會對蛋白質的結構和功能造成損傷，促進蛋白質的異常折疊和聚集，進一步影響血清蛋白質β-折疊水平。生活習慣對血清蛋白質β-折疊水平也有顯著影響。吸煙與血清蛋白質β-折疊水平呈正相關，吸煙是一種不良的生活習慣，煙草中含有多種有害物質，如尼古丁、焦油、一氧化碳等。這些有害物質進入人體后，會引發一系列的氧化應激反應和炎癥反應。尼古丁可以激活煙堿型乙酰膽堿受體，導致細胞內鈣離子濃度升高，激活氧化酶，產生大量的ROS，ROS會攻擊蛋白質的氨基酸殘基，使蛋白質的結構發生改變，促進β-折疊結構的異常形成。吸煙還會導致血管內皮細胞受損，炎癥細胞浸潤，釋放炎癥因子，這些炎癥因子也會干擾蛋白質的正常折疊過程，導致血清蛋白質β-折疊水平升高。飲酒對血清蛋白質β-折疊水平的影響也不容忽視。雖然本研究中飲酒與血清蛋白質β-折疊水平的相關性在多因素分析中未達到統計學意義，但在單因素分析中顯示出一定的關聯趨勢。適度飲酒可能對心血管系統有一定的保護作用，然而過量飲酒則會對身體造成損害。過量飲酒會導致肝臟損傷，影響肝臟對蛋白質的合成和代謝功能。酒精還會干擾體內的脂質代謝，使血脂水平升高，血液黏稠度增加，影響血液循環，進而影響蛋白質的正常代謝和結構穩定性，可能導致血清蛋白質β-折疊水平發生改變。運動不足也是影響血清蛋白質β-折疊水平的因素之一。規律的運動可以促進身體的新陳代謝，增強心血管功能，改善血管內皮細胞的功能，降低炎癥反應水平。而運動不足會使身體的代謝減緩，脂肪堆積，導致肥胖，肥胖與多種慢性疾病的發生密切相關，包括冠心病。肥胖會引起體內的炎癥微環境改變，脂肪組織會分泌大量的炎癥因子，如TNF-α、IL-6等，這些炎癥因子會干擾蛋白質的正常折疊和代謝，導致血清蛋白質β-折疊水平升高。運動不足還會使血管內皮細胞功能受損，一氧化氮（NO）釋放減少，血管舒張功能障礙，進一步影響心血管健康，可能間接影響血清蛋白質β-折疊水平。此外，本研究還發現血清蛋白質β-折疊水平與腰臀比呈正相關，腰臀比反映了人體的脂肪分布情況，腰臀比升高意味著腹部脂肪堆積增加。腹部脂肪堆積會導致脂肪細胞分泌多種脂肪因子，如瘦素、脂聯素等，這些脂肪因子的失衡會影響體內的代謝和炎癥反應，進而影響蛋白質的結構和代謝，導致血清蛋白質β-折疊水平升高。血清蛋白質β-折疊水平還與高血壓病史、糖尿病病史、高血脂病史及冠心病家族史呈正相關，這些疾病或家族史往往伴隨著體內代謝紊亂、炎癥反應激活等病理過程，這些病理過程可能會影響蛋白質的正常折疊和代謝，導致血清蛋白質β-折疊水平升高。綜上所述，年齡、生活習慣以及其他多種因素都可能影響血清蛋白質β-折疊水平。了解這些影響因素，對于深入理解血清蛋白質β-折疊水平在冠心病發病機制中的作用，以及制定針對性的預防和干預措施具有重要意義。在臨床實踐中，應鼓勵人們保持健康的生活方式，如戒煙限酒、適量運動、合理飲食等，以維持血清蛋白質β-折疊水平的穩定，降低冠心病的發病風險。對于有高血壓、糖尿病、高血脂等基礎疾病以及冠心病家族史的人群，應加強監測和管理，及時干預可能影響血清蛋白質β-折疊水平的因素，預防冠心病的發生發展。5.3研究結果的臨床應用價值本研究結果在冠心病的臨床診療中具有多方面的重要應用價值，為冠心病的早期診斷、病情評估和治療提供了新的視角和方法。在早期診斷方面，血清蛋白質β-折疊水平可作為一種潛在的生物標志物。目前，冠心病的早期診斷主要依賴于心電圖、冠狀動脈造影等檢查方法，但這些方法存在一定的局限性。心電圖在冠心病早期可能無明顯異常改變，容易導致漏診；冠狀動脈造影雖然是診斷的“金標準”，但屬于有創檢查，存在一定風險，且費用較高，不適合大規模的早期篩查。而血清蛋白質β-折疊水平的檢測具有操作簡便、創傷小、成本低等優點，可作為一種無創的早期篩查指標。通過檢測血清蛋白質β-折疊水平，能夠在冠心病的早期階段發現潛在的患者，提高疾病的早期診斷率。例如，對于一些具有冠心病危險因素（如高血壓、糖尿病、高血脂、吸煙等）但尚無明顯癥狀的人群，定期檢測血清蛋白質β-折疊水平，若發現其水平升高，可進一步進行詳細的檢查，以便早期發現冠心病，及時采取干預措施，延緩疾病的進展。在病情評估方面，血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的病情嚴重程度密切相關。本研究結果顯示，冠心病患者血清蛋白質β-折疊水平顯著高于對照組，且與冠狀動脈狹窄程度、病變血管數量等病情指標存在一定的相關性。因此，通過監測血清蛋白質β-折疊水平，可以更準確地評估冠心病患者的病情嚴重程度。對于β-折疊水平較高的患者，提示其病情可能更為嚴重，冠狀動脈粥樣硬化程度可能更嚴重，病變血管數量可能更多，預后相對較差。醫生可以根據血清蛋白質β-折疊水平的變化，及時調整治療方案，加強對患者的監測和管理，提高治療效果。在治療方面，本研究結果為冠心病的治療提供了新的靶點和思路。既然血清蛋白質β-折疊水平是冠心病的獨立危險因素，那么針對β-折疊水平的干預可能成為治療冠心病的新策略。目前，臨床上對于冠心病的治療主要包括藥物治療、介入治療和手術治療等。藥物治療主要是通過使用抗血小板藥物、他汀類藥物、β受體阻滯劑等，來降低血脂、抑制血小板聚集、減少心肌耗氧量等，以緩解癥狀、預防心血管事件的發生。然而，這些傳統治療方法對于部分患者的療效并不理想，且存在一定的副作用。未來，我們可以探索通過調節血清蛋白質β-折疊水平來治療冠心病的新方法。例如，開發能夠抑制β-折疊結構異常形成的藥物，或促進β-折疊結構正常化的藥物，以改善蛋白質的結構和功能，減輕炎癥反應，抑制動脈粥樣硬化的發展。也可以通過調節影響β-折疊水平的因素，如改善生活方式（戒煙限酒、適量運動、合理飲食等）、控制基礎疾病（高血壓、糖尿病、高血脂等），來間接調節血清蛋白質β-折疊水平，達到治療冠心病的目的。血清蛋白質β-折疊水平在冠心病的臨床應用中具有廣闊的前景。通過將其作為早期診斷指標、病情評估工具以及治療靶點，有望提高冠心病的診療水平，改善患者的預后，為心血管疾病的防治提供新的有力手段。5.4研究的創新點與局限性本研究在血清蛋白質β-折疊水平與冠心病相關性領域具有一定的創新之處。在研究視角方面，以往關于冠心病危險因素的研究多集中在傳統的生理指標和生活方式因素上，而本研究從蛋白質結構的角度出發，探討血清蛋白質β-折疊水平與冠心病的關聯，為冠心病的發病機制研究提供了全新的視角。這種創新性的研究視角有助于拓展對冠心病發病機制的認識，挖掘潛在的生物標志