標(biāo)準(zhǔn)解讀

《DB32/T 4539-2023 淡水生物環(huán)境DNA監(jiān)測(cè)技術(shù)方法》是一項(xiàng)針對(duì)淡水生態(tài)系統(tǒng)中生物多樣性的監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn),主要利用環(huán)境DNA(eDNA)技術(shù)來評(píng)估和監(jiān)測(cè)特定區(qū)域內(nèi)存在的物種。該標(biāo)準(zhǔn)旨在提供一套規(guī)范化的操作流程和技術(shù)指南,以確保不同研究者或機(jī)構(gòu)在執(zhí)行eDNA監(jiān)測(cè)時(shí)能夠獲得可比性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高的數(shù)據(jù)。

標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容涵蓋了從采樣準(zhǔn)備到結(jié)果分析的整個(gè)過程。首先,在采樣方面,明確了采集水樣的最佳實(shí)踐,包括但不限于采樣點(diǎn)的選擇、采樣時(shí)間以及采樣量等關(guān)鍵因素,以保證樣本代表性;其次,對(duì)于樣品處理與保存,給出了詳細(xì)的指導(dǎo)原則,如過濾器類型選擇、過濾速度控制及保存條件設(shè)定等,這些都是為了最大限度地減少外界污染對(duì)eDNA檢測(cè)的影響;此外,還涉及到了實(shí)驗(yàn)室分析部分,包括DNA提取方法、PCR擴(kuò)增條件優(yōu)化、測(cè)序平臺(tái)推薦等內(nèi)容,這些步驟都是為了提高檢測(cè)靈敏度和特異性;最后,在數(shù)據(jù)分析階段,提出了基于高通量測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行物種鑒定的基本框架,并建議使用公開數(shù)據(jù)庫(kù)作為參考序列來源,同時(shí)強(qiáng)調(diào)了質(zhì)量控制的重要性,比如去除低質(zhì)量讀段、排除潛在污染物序列等措施,以確保最終結(jié)果的可靠性。


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  • 2023-09-22 頒布
  • 2023-10-22 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS13.020

CCSZ06

!7,



DB32/T4539—2023

淡水生物環(huán)境DNA監(jiān)測(cè)技術(shù)方法

TechnicalmethodforenvironmentalDNAmonitoringof

freshwaterorganisms

2023?09?22發(fā)布2023?10?22實(shí)施

江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版

DB32/T4539—2023

目次

前言……………………………Ⅲ

1范圍…………………………1

2規(guī)范性引用文件……………1

3術(shù)語和定義…………………1

4監(jiān)測(cè)點(diǎn)位布設(shè)………………3

5監(jiān)測(cè)頻次與時(shí)間……………4

6試劑和材料…………………4

7儀器和設(shè)備…………………5

8環(huán)境DNA宏條形碼監(jiān)測(cè)內(nèi)容和方法………………………5

9質(zhì)量控制與質(zhì)量保證………………………9

10廢棄物處理………………10

附錄A(資料性)環(huán)境DNA固定劑…………11

附錄B(資料性)常用淡水生物DNA條形碼擴(kuò)增引物信息……………12

附錄C(規(guī)范性)淡水生物DNA條形碼構(gòu)建方法…………14

附錄D(資料性)生物統(tǒng)計(jì)表………………17

附錄E(規(guī)范性)野外質(zhì)量控制與保證……………………18

附錄F(規(guī)范性)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與保證…………………19

參考文獻(xiàn)………………………21

DB32/T4539—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由江蘇省生態(tài)環(huán)境廳提出并歸口。

本文件起草單位:江蘇省環(huán)境監(jiān)測(cè)中心、南京大學(xué)。

本文件主要起草人:張?jiān)仭埿ァ钛砰罱A、蔡琨、王晨波、呂學(xué)研、李婧慧、張麗娟、鐘文軍、

侍昊、朱晨、毛成責(zé)、卜亞謙、范帆。

DB32/T4539—2023

淡水生物環(huán)境DNA監(jiān)測(cè)技術(shù)方法

1范圍

本文件規(guī)定了利用環(huán)境DNA技術(shù)監(jiān)測(cè)淡水生物的采樣、試劑和材料、儀器和設(shè)備、監(jiān)測(cè)內(nèi)容和步

驟,以及質(zhì)量控制與保證。

本文件適用于生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域湖泊、水庫(kù)、溪流、河流、河口區(qū)等水域浮游植物、浮游動(dòng)物、著生藻

類、大型底棲無脊椎動(dòng)物和魚類等淡水生物物種組成及相對(duì)豐度的監(jiān)測(cè)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文

件,僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本

文件。

GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB/T20001.4標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第4部分:試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)

GB/T29859生物信息學(xué)術(shù)語

GB/T30989高通量基因測(cè)序技術(shù)規(guī)程

GB/T34265Sanger法測(cè)序技術(shù)指南

GB/T35890高通量測(cè)序數(shù)據(jù)序列格式規(guī)范

GB/T37874核酸提取純化方法評(píng)價(jià)通則

GB/T40226環(huán)境微生物宏基因組檢測(cè)高通量測(cè)序法

HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范

HJ494水質(zhì)采樣技術(shù)指導(dǎo)

HJ710.7生物多樣性觀測(cè)技術(shù)導(dǎo)則內(nèi)陸水域魚類

HJ710.8生物多樣性觀測(cè)技術(shù)導(dǎo)則淡水底棲大型無脊椎動(dòng)物

HJ1216水質(zhì)浮游植物的測(cè)定0.1ml計(jì)數(shù)框?顯微鏡計(jì)數(shù)法

HJ1295水生態(tài)監(jiān)測(cè)技術(shù)指南河流水生生物監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)(試行)

HJ1296水生態(tài)監(jiān)測(cè)技術(shù)指南湖泊和水庫(kù)水生生物監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)(試行)

SC/T9402淡水浮游生物調(diào)查技術(shù)規(guī)范

SN/T4835實(shí)驗(yàn)室生物廢棄物管理要求

DB21/T2777海洋浮游微藻分離和篩選技術(shù)規(guī)程

DB32/T4178河流水生態(tài)監(jiān)測(cè)規(guī)范

3術(shù)語和定義

GB/T20001.4、GB/T29859和GB/T30989界定的

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