基本技術實驗教案doc生物學531實驗教學體系CAI課

電子教案

適用生物科學、動物科學專業(yè)

主講：彭友林，郭春秋，熊大勝，劉良國

湖南文理學院生物學基礎實驗教學中心

2008年4月

課程名稱基本技術實驗

授課專業(yè)生物科學、動物科學（本科）

授課教師彭友林，郭春秋，熊大勝，劉良國

要緊參考文獻：

劉凌云，鄭光美主編.普通動物學實驗指導.北京：高等教育出版社，1997.

解景田，趙靜主編.生理學實驗（第二版）.北京：高等教育出版社，2002.

楊秀平主編.動物生理學實驗.北京：高等教育出版社，2004.

楊芳炬主編.機能學實驗.成都：四川大學出版社，2002.

樊繼云，馮逵，劉燕編.生理學實驗與科研訓練.北京：中國協(xié)與醫(yī)科大學出版社，2003.

王竹立，林明棟主編.實驗生理科學.廣州：中山醫(yī)科大學實驗生理科學教研室，2900.

北京微信斯達科技進展有限責任公司編.Pclab生物醫(yī)學信號采集處理系統(tǒng)使用說明書.2004.

馬恒東主編.動物生理學實驗指導.成都：四川科學技術出版社，20（）3.

韓秋生，徐國成，鄒衛(wèi)東等主編.組織胚胎學彩色圖譜（第三版）.沈陽：遼寧科學技術出版社,

2003.

學時分配表

序號實驗名稱時數(shù)備注

光學顯微鏡及體視鏡構造與使用3

潮2生物信號采集與分析技術

魁3培養(yǎng)基制作與滅菌消毒技術

靖4細胞組織培養(yǎng)技術

實驗5生物切片技術

實驗6光譜分析技術*

實驗29稱量、離心及微量移液技術6必開

實驗30圖像采集與分析技術（CAI課件）

PCR技術（CAI課件）

實驗32電泳層析技術介紹（CAI課件）

實驗43分子生物學實驗技術介紹（CAI課件）

實驗1光學顯微鏡及體視鏡的構造與使用方法

一、實驗目的

1、熟悉光學顯微鏡及體視鏡的通常構造與性能；

2、學會正確地使用光學顯微鏡及體視鏡，熟練地掌握疝光，低高倍物鏡的使用技術，與顯微鏡

的保護；

3、學會臨時裝片的制作與徒手切片。

二、重點與難點

正確地使用光學顯微鏡及體視鏡，熟練地掌握對光，低高倍物鏡的使用技術。

三、教學方法與手段

本次課要緊采取講授法與討論法，在學生實驗過程中輔以個別指導進行教學。

四、實驗內容

1、光學顯微鏡的構造、使用方法及保護；

2、臨時裝片的制作及徒手切片的練習；

3、體視鏡的通常結構及使用方法。

五、實驗材料

洋蔥cepa）艱尖永久裝片；洋蔥（Alliumcepa）鱗片葉；油菜（Brassicacampestris）

或者水稻（Oryzasativa）花粉。

六、實驗用品

普通光學顯微鏡、體視顯微鏡；鎰子、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、紗布、吸水紙、擦鏡紙、

滴瓶、毛筆；碘液、水。

七、實驗方法

<-）普通光學顯微鏡的構造、使用方法及保護

1、顯微鏡的構造

顯微鏡的基本結構能夠分兩部分，即光學部分與機械部分。

（1）光學部分

①物鏡、②目鏡、③聚光器、④虹彩光圈、⑤反光鏡、⑥鏡筒

（2）機械部分

①鏡座、②鏡柱、③鏡臂、④載物臺、⑤物鏡轉換器、⑥調焦螺旋

2、顯微鏡的使用方法

（1）正確安置顯微鏡、（2）對光、（3）低倍物鏡的使用、（4）高倍物鏡的使用

（5）浸油物鏡的使用、（6）顯微鏡的使用練習、（7）用畢復原

3、顯微鏡的放大倍數(shù)

4、光學顯微鏡的顯微測微法

（1）顯微測微計

①鏡臺測微計、②目鏡測微計

（2）測量方法

用目鏡測微計測量細胞的大小時，先要用鏡臺測微計校正目鏡測微計中每一格相當于多少

微米，然后用目鏡測微尺測量細胞的實際大小。具體方法如下：

①將鏡臺測微計放在載物臺上，調節(jié)好顯微鏡，使其刻度清晰可見。

②再把目鏡測微計放在目鏡內的視野光闌l-.o

③調節(jié)臺尺，使鏡臺測微計上的零點與目鏡測微計上的零點相重疊，再找出這兩個測微計

的刻度第二次重疊的地方，并計算目鏡測微計上的每一刻度相當多少微米。如目鏡測微計第15

格正對鏡臺測微計上的24小格時：

鏡臺測微計的格數(shù)x1024x10皿

目鏡測微計每小格的長度;~目鏡測微計格數(shù)-m

④移去臺尺，換上玻片標本觀察，川目鏡測微計測量視野中物體的大小（標本所占目鏡的

小格數(shù)X目鏡測微計每小格的長度）。

在進行測量時如變換顯微鏡，或者改變目鏡與物鏡的倍數(shù)時，都務必進行換算校正，其次

為了測量的準確性，在換算及測量時，至少要測量三次，并求其平均值，得到精確的數(shù)值。

5、顯微鏡的保護

（1）顯微鏡是精密的光學儀器，使用時一定要嚴格地按規(guī)程進行操作。

（2）在使用過程中，如發(fā)生故障，應及時報告老師，以防損壞。

（3）要保持顯微鏡各部件的清潔，特別是光學部分，切不可讓鏡頭沾水或者化學藥劑，用后

務必用干凈柔軟的綢布或者鏡頭紙擦凈。

（4）顯微鏡的存放要做到四防：防潮、防腐、防熱、防撞擊。

（二）臨時裝片的制作及徒手切片的練習

1、臨時裝片的制作

（1）準備、（2）取材、（3）蓋上蓋玻片、（4）染色、（5）觀察

2、徒手切片的練習

（1）材料的選擇

①材料不宜太硬或者太軟，通常選擇發(fā)育正常、健康的幼莖、幼根或者植物的葉片，所取

材料應放入水中，防止徒手切片時菱孺。

②若實驗材料過于柔嫩，可用胡蘿卜、土豆或者塑料泡沫塊等作支持物，把材料夾在其中

切片；葉片可卷成筒狀切片。

③材料大小：通常直徑不超過5mm,長度以1.5-2.5cm為宜。

（2）徒手切片操作練習（以陸英（Sambucuschinensis）幼莖的橫切為例）

①切片、②選片、③制作臨時裝片、④觀察

（三）體視顯微鏡的通常結構及使用方法

1、體視鏡的通常構造

2、體視鏡的使用方法

3、體視鏡的使用練習

八、作業(yè)與思考

（一）作業(yè)

1、簡述光學顯微鏡的構成。

2、低、高倍物鏡的使用各應注意什么事項？

（二）思考題

1、在顯微鏡下用手移動標本，為什么前后、左右的方向與顯微鏡中見到的恰恰相反？

2、在制作臨時裝片時，應如何避免產(chǎn)生氣泡？

實驗2計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的認識及使用

計算機是一種現(xiàn)代化、高科技的自動信息分析、處理設備。隨著電子計算機技術在生物、

醫(yī)學領域的廣泛應用，使原先不易進行的某些生物信息的檢測，變得簡易可行。利用計算機采

集、處理生物信息，讓計算機進入機能學實驗室已成為必定趨勢。

計算機生物信號采集處理系統(tǒng)就是以計算機為核心，結合可擴展的軟件技術，集成生物放

大器與電刺激器，同時具備圖形顯示、數(shù)據(jù)存儲、數(shù)據(jù)處理與分析等功能的電生理學實驗設備。

對生物信號采集系統(tǒng)的熟悉與熟練使用，是今后對完成生理學實驗的數(shù)據(jù)與圖形采集、儲存與

處理所務必具備的基本技能之一。

圖Pclab生物醫(yī)學信號采集處理系統(tǒng)

一、實驗目的

1、熟悉計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的基本原理及構成；

2、熟悉并掌握計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的基本操作與使用方法。

二、實驗原理

現(xiàn)代生物機能實驗系統(tǒng)的基本原理是：首先將原始的生物機能信號，包含生物電信號與通

過傳感器引入的生物非電信號進行放大（有些生物電信號非常微弱，比如減壓神經(jīng)放電，其信

號為微伏級信號，假如不進行信號的前置放大，根本無法觀察）、濾波（由于在生物信號中夾雜

有眾多聲、光、電等干擾信號，這些干擾信號的幅度往往比生物電信號本身的強度還要大，假

如不將這些干擾信號濾除掉，那么可能會由于過大的干擾信號致使有用的生物機能信號本身無

法觀察）等處理，然后對處理的信號通過模數(shù)轉換進行數(shù)字化并將數(shù)字化后的生物機能信號傳

輸?shù)接嬎銠C內部，計算機則通過專用的生物機能實驗系統(tǒng)軟件接收從生物信號放大、采集硬件

傳入的數(shù)字信號，然后對這些收到的信號進行實時處理，一方面進行生物機能波形的顯示，另

一方面進行生物機能信號的實時存貯，另外，它還可根據(jù)操作者的命令對數(shù)據(jù)進行指定的處理

與分析，比如平滑濾波，微積分、頻譜分析等。關于存貯在計算機內部的實驗數(shù)據(jù)，生物機能

實驗系統(tǒng)軟件能夠隨時將其調出進行觀察與分析，還能夠將重要的實驗波形與分析數(shù)據(jù)進行打

印。

記錄

放大轉換顯示

生物電信號?存盤輸出

計克

儲

存

與、

理

對信號進行,數(shù)模（A/D）處

非電生物信號

調理放大轉換打印輸出

圖1-2Pclab系統(tǒng)工作原理模式圖

計算機生物信號采集處理系統(tǒng)由硬件與軟件兩大部分構成。硬件要緊完成對各類生物電信

號（如心電、肌電、腦電）與非生物電信號（如血壓、張力、呼吸）的采集。并對采集到的信

號進行調整、放大，繼而對信號進行模/數(shù)（A/D）轉換，使之進入計算機。軟件要緊用來對己

經(jīng)數(shù)字化了的生物信號進行顯示、記錄、存儲、處理及打印輸出，同時對系統(tǒng)各部分進行操縱,

與操作者進行對話。

計算機生物信號采集處理系統(tǒng)在功能上基本可替代原先的刺激器、放大器、記錄儀、示波

器等。此外，引進模擬實驗系統(tǒng)軟件還能夠演示簡單重復的印證性實驗，在動手前預習實驗，

甚至代替部分實驗。微機生理系統(tǒng)已成為生理實驗教學與研究的一個進展方向。

1、傳感器與放大器

生物所產(chǎn)生的信息，其形式多種多樣，除生物電信號可直接檢取外，其他形式的生物信號

務必先轉換成電信號，對微弱的電信號還需通過放大，才能作進一步的處理。生物信號采集處

理系統(tǒng)中的刺激與放大器都是由計算機程控的，其工作原理與通常的刺激器、放大器完全一樣。

要緊的區(qū)別在「通常儀器是機械觸點式切換，而生物信號采集處理系統(tǒng)是電子模擬開關，由電

壓高低的變化操縱，是程序化管理，提高了儀器的可靠性，延長了儀器的壽命。

2、生物信號的采集

計算機在采集生物信號時，通常按照一定的時間間隔對生物信號取樣，并將其轉換成數(shù)字

信號后放入內存，這個進程稱之采樣。

（l）A/D轉換器生物信號通常是一種連續(xù)的時間函數(shù)，必需轉換為離散函數(shù)，再將這個離

散的函數(shù)按照計算機的“標準尺度”數(shù)字化，以二進制表達，才能被計算機所同意。A/D轉換

設備能提供多路模/數(shù)轉化與數(shù)/模轉換。A/D轉換需要一定時間，這個時間的長短決定著系統(tǒng)

的最高采樣速度。A/D轉換的結果是以一定精度的數(shù)字量表示，精度愈高，（曲線的）幅度的連

續(xù)性愈好。對通常的生物信號采樣精度不應低于12位數(shù)字。轉換速度與轉換精度是衡量A/D轉

換器性能的重要指標。

（2）采樣與采樣有關的參數(shù)包含通道選擇、采樣間隔、觸發(fā)方式與采樣長度等方面。

①通道選擇一個實驗往往要記錄多路信號，如心電、心音、血壓等。計算機對多路信號

進行同步采樣，是通過一個“多選一”的模擬開關完成的。在一個很短暫的時間內，計算機通

過模擬開關對各路信號分別選通、采樣。這樣，盡管對各路信號的采樣有先有后，但由于“時

間差”極短暫，因此，仍能夠認為對各路信號的采樣是''同步"的。

②采樣間隔原始信號是連續(xù)的，而采樣是間斷進行的。對某一路信號而言，兩個相鄰采

樣之間的時間間隔稱之采樣間隔。間隔愈短,單位時間內的采樣次數(shù)愈多。采樣間隔的選取與

生理信號的頻率也有關，采樣速率過低，就會使信號的高頻成分丟失。但采樣速率過高會產(chǎn)生

大量不必要的數(shù)據(jù)，給處理、存儲帶來煩惱。根據(jù)采樣定律，采樣頻率應大于信號最高頻率的2

倍。實際應用時，常取信號最高頻率的3?5倍來作為采樣速率。

③采樣方式采樣通常有連續(xù)采樣與觸發(fā)采樣兩種方式。在記錄自發(fā)生理信號（如心電、

血壓）時，使用連續(xù)采樣的方式。而在記錄誘發(fā)生理信號（如皮層誘發(fā)電位）時，常使用觸發(fā)

采樣的方式。后者又根據(jù)觸發(fā)信號的來源分為外觸發(fā)與內觸發(fā)。

④采樣長度在觸發(fā)采樣方式中，啟動采樣后，采樣持續(xù)的時間稱之采樣長度。它通常應

略長于一次生理反應所持續(xù)的時間。這樣既記錄到了有用的波形，又不可能采集太多無用的數(shù)

據(jù)造成內存的浪費。

3、生物信號的處理

計算機生物信號采集處理系統(tǒng)因其強大的計算機功能，可起到濾波器的功能，而且性能遠

遠超過模擬電路，恢復被噪音所淹沒的重復性生理信號。人們能夠測量信號的大小、數(shù)鼠、變

化程度與變化規(guī)律，如波形的寬度、幅度、斜率與零交點數(shù)等參數(shù)。做進一步的分類統(tǒng)計、分

析給出各頻率分能量（如腦電、肌電及心率變異信號）在信號總能量中所占的比重，從而對信

號源進行定位。對實驗結果能夠用計數(shù)或者圖形方式輸出。對來自攝像機或者掃描儀的圖像信

息經(jīng)轉換后，也可輸入計算機進行分析。因此計算機生物信號采集處理系統(tǒng)，不僅具備了刺激

器、放大器、示波器、記錄儀與照相機等儀器的記錄功能外，而且還兼有微分儀、積分儀、觸

發(fā)積分儀、頻譜分析儀等信號分析器的信息處理功能。為節(jié)約存儲空間，計算機可對其獲得的

數(shù)據(jù)按一定的算法進行壓縮。

4、動態(tài)模擬

通過建立一定的數(shù)學模型，計算機能夠仿真模擬一些生理過程，比如激素或者弱物在體內

的分布過程、心臟的起搏過程、動作電位的產(chǎn)生過程等均可用計算機進行模擬。除過程模擬外,

利用計算機動畫技術還“.在熒光扉I：模擬心臟泉血、胃防端動、尿液生成及興奮的傳導等生理

過程。

三、實驗內容

1、學習計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的構成及原理。

2、計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的基本操作與使用。

四、實驗方法與步驟（以Pclab-UE為例介紹）

Pclab-UE是集放大器、采集卡、刺激器為一體的外置式USR接口島.性能的生物醫(yī)學信號采

集處理系統(tǒng)。

1.生物醫(yī)學信號放大器使用介紹

硬件放大器分前后兩個面板，前面板用來做常規(guī)，后面板要緊用來連接線路，其中前面板

的各部分功能如下：

PCI.AB-UE牛物醫(yī)學信號采集處理系統(tǒng)

刺激輸出

o100V

通道通道通道通道

電源開關用來打開或者關閉硬件設備，注意在采樣的過程當中不要關閉此電源。

通道1、通道2、通道3、通道4分別是四個獨立的放大器通道，其中通道3是專用的心電

通道，不能進行其他的信號采集。

刺激輸出有兩個插匚，上方的是0~5V檔輸出與()~1()V檔輸出，選擇不一致檔刺激輸出指

示燈會隨之變化。

★下方是。?100V檔輸出，紅色標記是提醒實驗人員注意高壓危險！

后面板的各部分功能如下：

監(jiān)聽輸出地線接口

USB接口電源接口

北京微信斯達科技進展有限責任公司

USB接口用來插接USB線的小方端口，USB線的另?端接入計算機的USB接口。

監(jiān)聽輸出口是與音箱的音頻線相連，它是用來監(jiān)聽神經(jīng)放電的聲音。

監(jiān)聽輸出口旁邊的匚是與串口線連接，它是用來傳輸刺激命令的。

地線接口用來接地線以減少外界環(huán)境對有效信號的干擾。

電源接口用來接入電源線，要求使用交流市電220%50Hz。

★若是前面板電源燈不亮，通常是保險管燒了。

2.PclabYE應用軟件窗口界面功能介紹

Pc1ab-UE應用軟件運行時窗口如下圖:

界面自上而下為：

（1）標題欄：用于提示實驗名稱、文件存盤路徑、文件名稱及“最小化”、“還原”、“關閉”

按鈕。

（2）菜單欄：用于按操作功能不一致而分類選擇的操作。包含如下主菜單名稱：

A、文件：包含所有文件操作，如打開、存盤、打印等；

B、編輯：包含對信號圖形的編輯功能，如復制、清除等；

C、視圖：包含對可視部分的操縱及信號反相、鎖定等；

1）、設置：對系統(tǒng)運行有關的設置功能進行選擇；

E、數(shù)據(jù)處理：對采集后的數(shù)據(jù)進行濾波處理、導入Excel、微分、積分等；

F、幫助：包含幫助主題、版權信息與公司網(wǎng)址等。

（3）工具欄：提供了最常用的快捷工具按鈕，依次為：新建、打開、記錄存盤、選擇存盤、

打印預覽、復制、取消、采樣、記錄、刺激、面板切換、測量、鎖定。

閶⑼@9”廓窗薄吊他緝令8

新建打開存盤選存預支復制取消采并遜?切換嵋靛

（4）實時計算工具欄：提供了實時計算數(shù)據(jù)的結果。

國曷期魅0.0000id?：0.0000心睪0.0000無0.0000

（5）采樣窗：四個采樣窗分別對應放大器的四個物理通道，用于采樣時的波形顯示、數(shù)據(jù)

處理、標記、測量等功能，是要緊的顯示區(qū)域。

(6)狀態(tài)欄：從左到右依次為命令提示區(qū)、狀態(tài)提示區(qū)、標記或者幀數(shù)提示區(qū)、采樣時間、

硬件狀態(tài)提示區(qū)。

IIKiz記錄儀自動標記內容00:29:16便件狀態(tài)：錯誤

(7)操縱面板：位于整個界面的最右側，是各通道的操縱中心，針對當前通道進行不一致

的操縱調節(jié)，如下圖所示。

通道功能：

[iiS3

.入范圍：

|50mv刁

日間常數(shù)：

|0.001s

產(chǎn)通濾波：

|lOKHz3

50H一波：

I關閉~3

標記：

P3

.向放一：

|10.00mv/div三

時間單位：

|0.500s/divv|

(8)計算結果顯示面板；浮于整個窗口的上方，用于對選定的波形進行計算分析并顯示結

果，如下圖所示。

I計算結果一動穌血壓0||

最大收縮壓：最小舒張壓：

0.0000.000

平均收縮壓：平均舒張壓：

[0^0000000

平均動脈壓：平均脈壓：

0.0000.000

心率：平均收縮間期：

00000

平均舒張間期：平均收縮商張

■0.0000000

+dP/dtmax:-dp/dtmax:

0.0000.000

t-dP/cftmax:心動周期數(shù)：

0.0000000

3.通常生物醫(yī)學信號采集的軟件設置操作

用Pclab-UE生物醫(yī)學信號采集處理系統(tǒng)做好電生理實驗的第一步就是在開始實驗之前要做

好信號采樣的軟件設置工作。這就相當于使用傳統(tǒng)儀器開始實驗前，要將儀器面板上的所有重

要開關打開，所有重要按鈕設定大體與傳統(tǒng)儀器的位置一樣。只是，使用Pclab-UE將會使您輕

松自如，具體操作如下:

第一步，執(zhí)行“設置”菜單中的“采樣條件”菜單項，打開采樣條件設置窗口見下圖:

該窗口中有四個卜拉列表框，分別用來設置顯示方式、觸發(fā)方式、采樣頻率、通道個數(shù)。

（1）其中采樣頻率能夠根據(jù)實驗做出選擇，通常是變化快的選擇采樣頻率高一些（如：減

壓神經(jīng)放電實驗能夠選擇lOKHz）,變化慢的選采樣擇頻率底一些（如：血壓、呼吸、張力等實

驗能夠選擇lKHz）o

（2）通道個數(shù)用來僚定實驗中使用通道的個數(shù)，選擇1個通道，則是第一通道；選擇2個

通道，則是第一與第二通道；選擇3個通道，則是第一、二與第三通道；選擇4個通道，則是

全部的通道。

（3）顯示方式：有記錄儀方式與示波器方式兩種，可根據(jù)實驗的需求來選擇顯示方式。

I、“記錄儀”方式：用來記錄變化較慢，頻率較低的生物信號。如電生理實驗中的血壓、

呼吸、張力、心電等。其掃描線的方向是從右向左，連續(xù)滾動，與傳統(tǒng)儀器的二導記錄儀相一

致。它的采樣頻率從20Hz到50KHZ,11檔可選.通常二述典型實驗IKHz左右“如今無觸發(fā)方

式選擇。

II、“示波器”方式：用來記錄變化快，頻率高的生物信號。如電生理實驗中的神經(jīng)干動作

電位、AP傳導速度、心宣肌動作電位等。其掃描方向是從左向右，一屏一屏的記錄，與傳統(tǒng)的

示波器相一致。它的采樣頻率從IKIIz到200KHz。★在200KHz采樣頻率只同意單窗口運行。

（4）觸發(fā)方式：有自動觸發(fā)與刺激器觸發(fā)，當使用記錄儀方式顯示時，此功能自動關閉（變

成灰色）；若使用示波器方式，還能夠進一步選擇是自動觸發(fā)還是刺激器觸發(fā)，假如是刺激器觸

發(fā)則劇的啟停由按鈕來操縱。

第二步，為每個通道在操縱面板的通道功能列表框中選擇對應的實驗類別，同時確定要計

算的內容。如圖:

jl道功能：

I血壓三］

通月

血壓

心室內壓

靜脈壓

張力

蜉吸

神經(jīng)放電

心室朋AP

AP傳導速度

肌電

記雷

說發(fā)電位

第三步，適當調節(jié)輸入范圍，時間常數(shù)，低通濾波，陷波，縱向放縮，時間單位等參數(shù)。

（1）“輸入范圍”（也稱“放大倍數(shù)”或者“增益”），它是對輸入進去的生物信號進行

放大。如下圖：（即50倍?50000倍）

（2）“時間常數(shù)”它有兩重功能：一是用來操縱交直流（即操縱電信號與非電信號），

非電信號（如：血壓、呼吸、張力等）時它是處于“直流”狀態(tài)；二是在做電信號實驗時它

相當于高通濾波。如下圖:

時間常數(shù)：

0.003s二

0.001s

泊003s

0.01s

0.03s

0.1s

0.3s

3s____________

★高通濾波是指高于某種頻率的波形能夠通過，時間與頻率是倒數(shù)關系

（3）“低通濾波”是指低于某種頻率的波形能夠通過，適合于濾除含有某種固定頻率

的周期性干擾信號。

（4）“50Hz陷波”，是指當采樣曲線中有干擾出現(xiàn)時，同時這種干擾有一定頻率的周

期性。

（5）“縱向放縮”是指而當前通道的波形進行縱向拉伸、壓縮。其與“時間常數(shù)”是

有區(qū)別的，它是對采樣后的波形進行人為的放大、壓縮，對生物信號本身沒有真正的放大。

(6)“時間單位”是指對當前通道的波形進行橫向拉伸、壓縮，同時也對當前走紙通

道速度進行調節(jié)。

第四步，假如使用直流狀態(tài)，即使用傳感器進行非電信號實驗時，要對通道進行謫零，執(zhí)行

“設置”菜單中的“當前通道調零”菜單項進行自動調零如圖：(若是偏離太大，則先調傳感

器的電位器)

第五步，對非電信號如血壓、張力等能夠進行定標，執(zhí)行“設置”菜單中的“當前通道定

標”菜單項進行定標。

第六步，單擊工具欄上的采樣按鈕開始采樣，在采樣的過程中能夠實時調整輸入范圍、低

通濾波、縱向放縮等各項指標以使波形達到最好的效果，再次單擊此按鈕則可停止采樣。

4.刺激器的設置與調整

為了方便電生理實驗，Pclab-UE系統(tǒng)內置設有一個由軟件程控的刺激器，該刺激器所提供

的功能與性能指標完全能夠滿足實驗的要求，且工作穩(wěn)固、可靠。恒壓源設計，刺激輸出電壓

不可能因刺激對象阻抗變化而變化，共分為0-5Y；0-10V；0T00V三檔，其中每一檔的輸出

電壓的步長都不相同。共有七種不一致的刺激方式，分別為單刺激、串刺激、周期刺激、自動

幅度、自動間隔、自動波寬、自動頻率。不一致的實驗選擇不一致刺激方式與刺激幅度會令實

驗效果十分理想。為了正確使用刺激器可進行如下設置.：

第一步：打開刺激器設置面板，能夠通過“設置”菜單下的“刺激器設置”菜單項來實現(xiàn),

靠

也能夠通過工具欄上的按鈕在操縱面板與刺激面板間進行切換，如今刺激面板就會代替放

大器操縱面板以方便您進行刺激器的參數(shù)設置。刺激面板如圖：

方式：

I周期蒯腆T]

.度范圍M：

|0-5V~~3

幅度大小(V)：

「。。U

主周期(ms):

|500三

每周期麻沖數(shù)

F-±|

時間間隔(ms):

|9。~百

周期數(shù)Q)：

F~~目

1時(ms謬寬

|io-#叫

顯示刺謝的通道

V第一通道

r第二通道

r第三通道

r第四通道

第二步：選擇適當?shù)拇碳つＪ剑{整相應的波寬、幅度、周期、延時、間隔等參數(shù)，然后

單擊工具欄上的“刺激”按鈕即可發(fā)出所要刺激。

第三步：刺激標記想要顯示在哪個通道上，就在相對應的通道上打鉤，這樣在當前通道上

就能夠顯示相應的刺激幅度、波寬與標記。

5.實驗結果的存盤及打印輸出

(1)為了保證實驗數(shù)據(jù)的完整儲存，Pclab-UE系統(tǒng)提供了強大的數(shù)據(jù)儲存機制，同時使用了

標準的文件存盤方式。根據(jù)用戶要儲存的目的不一致，本系統(tǒng)對數(shù)據(jù)的儲存分三種，一種是整

個實險過程中的仝部數(shù)據(jù)的儲存；另一種是通過記錄儲存；還有一種是對做完實臉后的選擇儲

存。下面分別予以介紹。

I、全部數(shù)據(jù)儲存是指從開始波形采樣就對整個實驗過程中所采集的全部波形數(shù)據(jù)的儲存，

其FI的是在實驗結束后可再現(xiàn)實驗過程。這個儲存機制與微軟的Word、Excel相一致。一是通

過停止采樣后“文件”菜單中的“所有實驗數(shù)據(jù)儲存”菜單項來實現(xiàn)的；二是在“新建實驗”

或者關閉Pclab-UE界面時系統(tǒng)用戶只需要輸入一個文件名即可，文件將被自動存放在本系統(tǒng)安

裝后的UserData文件夾中以便用戶集中管理。

II、記錄儲存是針對實驗過程中出現(xiàn)的穩(wěn)固而平滑的波形進行儲存的，它能夠儲存一段時

間內的較好的波形，其操作方法是當出現(xiàn)較好的或者用戶認為需要記錄的波形后按下工具欄上

的“記錄”按鈕，從此刻開始的波形將會被記錄起來，直到用戶再次單擊此按鈕停止記錄為止。

在采樣的過程當中用戶能夠多次通過此按鈕來記錄數(shù)據(jù)，當停止采樣后，用戶可通過工具欄上

的“存盤”按鈕或者“文件”菜單中的“實驗記錄儲存”菜單項來儲存所記錄下來的文件，用

戶只需要輸入文件名即可，文件將被自動存放在本系統(tǒng)安裝后的UserData文件夾中以便用戶集

中管理。

III、選擇儲存是對做完實驗后未及時通過記錄儲存，采取事后儲存的?種方式。它是對采

樣后的波形進行涂黑，然后按工具欄的“選存”按扭就會彈出一個對話框讓您輸入文件名。接

下去再涂黑按“選存”就不可能出現(xiàn)對話框，由于它是將后面涂黑的波形與前面涂黑的波形儲

存在同一個文件名下。

通過以上三種方式，能夠放心地儲存實驗所采樣的數(shù)據(jù)，若是Pclab-UE軟件下載了儲存在

UserData文件夾的數(shù)據(jù)也不可能丟失。

（2）關于采樣波形的打印輸出，能夠先通過工具欄上的“預覽”按鈕或者“文件”菜單中

的“打印預覽”菜單項來進行波形的預覽，然后通過“文件”菜單中的“打印”菜單項直接打

印輸出。（也能夠通過打印預覽中的“打印”直接進行打印輸出）。

五、作業(yè)與思考

（一）簡述計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的構成及基本原理。

（二）試述計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的基本操作流程。

實驗3培養(yǎng)基制作、滅菌與無菌操作接種技術

一、實驗目的與要求

1、學習細菌、放線菌及真菌常規(guī)培養(yǎng)基的制備方法；

2、學習微生物操作中常用的滅菌與消毒方法；

3、掌握高壓蒸汽滅菌鍋的滅菌原理及使用方法；

4、學習并掌握棉塞制作及常用器皿包扎的方法；

5、學習并掌握無菌操作接種技術要點。

二、重點與難點

1、高氏一號培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基、馬鈴薯蔗糖頊脂培養(yǎng)基分別屬于哪種類型的培養(yǎng)基？

分別適合培養(yǎng)哪種微生物？

2、使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時務必排盡鍋內的冷空氣，為什么？

3、掌握無菌操作與斜面接種技術要點。

三、教學方法與手段

本次實驗課要緊采取講授法與演示法,輔以視頻影象資料進行教學。實驗過程中「7項實驗

內容會按照學生分組情況調整各小組每個實驗進行的先后順序。

四、實驗內容

1、牛肉育蛋白陳培養(yǎng)基的制備；

2、高氏一號合成培養(yǎng)基的制備：

3、馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基的制備；

4、棉塞的制作及玻璃器皿的包扎；

5、常用滅菌與消毒方法簡介；

6、用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基與器皿進行滅菌；

7、無菌操作與斜面接種技術。

五、實驗材料

1、藥品與試劑:牛肉青、蛋白陳、NaCl、10%Na0H溶液、10%鹽酸溶液；可溶性淀粉、K2Hp0”、

MgSO,?7H20^KNO：“NaCLFeSOi?7也0、瓊脂、10%Na0H溶液、10%鹽酸。

2、材料：新鮮馬鈴薯、蔗糖或者葡蜀糖。

六、實驗用品

小燒杯、小鋁鍋、天平、牛角匙、100mL刻度搪驍杯、玻棒、山試紙、分裝漏斗、棉花、

棉皮圈、天平、100mL燒杯、標簽紙、電爐、菜板、小刀、紗布、18mmXI80mm試管。

七、實驗方法

（一）牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的制備

1、實驗原理

牛肉膏蛋白族培養(yǎng)基是細菌學研究最常用的天然培養(yǎng)基。在配方中不加瓊脂時稱之為肉湯

培養(yǎng)基。加入瓊脂配制的固體培養(yǎng)基通常用于細菌的分離、培養(yǎng)與測數(shù)等。

2、培養(yǎng)基配方

牛肉膏5.0g、蛋白陳10.0g、NaCl5.0g、瓊脂20.0g、自來水肉00mL、pH7.0。

3、操作步驟

（1）在100niL小燒杯中稱取牛肉膏5.0g、蛋白陳10.0g,加50mL自來水，置電爐攪拌加熱

至牛肉膏、蛋白陳完全溶解。

（2）向小鋁鍋中加入500mL自來水，將溶解的牛肉膏、蛋白陳倒入鋁鍋中并用自來水洗2?3

次。加入5.OgNaCl,在電爐上邊加熱邊攪拌。

⑶加入洗凈的瓊脂條，繼續(xù)攪拌，加熱至瓊脂完全熔化，補足水量至1000mLo

（4）用玻棒沾少許液體，用pH試紙測定pH值。用NaOH或者HC1調至pH7.0。

⑸分裝漏斗分裝于lOmmXl80mm試管中，塞好棉塞，裝入小鐵絲筐，然后用舊報紙將棉塞部

分包好。★是否能夠擱置幾天后進行滅菌？

（6）高壓蒸汽滅菌，121℃滅菌30min。

⑺滅菌后擺放斜面。

（二）高氏一號合成培養(yǎng)基的制備

1、實驗原理

高氏一號培養(yǎng)基是一個合成培養(yǎng)基，常用于分離與培養(yǎng)放線菌。

2、培養(yǎng)基配方

可溶性淀粉20.0g、硝酸鉀1.0g、《HP。。5g、?7%00.5g、氯化鈉0.5g、硫酸亞鐵

0.01g,瓊脂20g、蒸儲水1000mL、pI17.2-7.4.

3、操作步驟

（1）用搪瓷杯量取自來水500mL置小鋁鍋中，在電爐上加熱。

⑵根據(jù)培養(yǎng)基配方，依次稱取各類藥品加入搪瓷杯中，攪拌均勻。其中可溶性淀粉稱入100mL

燒杯中，加入50mL自來水調成糊狀，待培養(yǎng)液沸騰時及如鋁鍋中，邊加邊攪拌，以防糊底。

⑶加入20g浸洗過的瓊脂煮沸至熔化，補足1000血水量,調pH7.2?7.4。

⑷趁熱分裝于18mniXl80mm試管，斜面試管每管8mL,若倒平板則每管裝15mL,裝量根據(jù)

需要而定。

⑸塞好棉塞，裝入小鐵絲筐，并用舊報紙將棉塞部分包好，貼好標簽。

（6）高壓蒸汽滅菌，121℃滅菌30min。

⑺若有斜面試管，在滅菌后及時擺放斜面。

（三）馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基的制備

1、實驗原理

馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基是一種半合成培養(yǎng)基，常用于培養(yǎng)多種真菌。

2、培養(yǎng)基成分

去皮的馬鈴薯200g、蔗糖或者葡萄糖20g、瓊脂20g、自來水1000mL.pH自然

3、操作步驟

⑴稱取去皮新鮮馬鈴薯200g切成1cm見方小塊放于小鋁鍋中，加1000mL自來水，置電爐

上煮沸20min后，用雙層紗布過濾。濾液計品體積后倒入小鋁鍋中煮沸。

⑵加入稱好的蔗糖、瓊脂，加熱攪拌至瓊脂完全熔化，并補足水量至1000m

（3）趁熱用分裝漏斗分裝于18nlmXI80mm試管，斜面以8mL為宜，柱狀15mL為宜。分裝完

畢后做好棉塞，裝入小試管筐并捆好?，寫好標簽。

（4）高壓蒸汽滅菌，121C滅菌30min。若需擺斜面，滅菌后趁熱擺成斜面。

（四）棉塞的制作及玻璃器皿的包扎

棉塞的作用有二：一是防止雜菌污染，二是保證通氣良好。因此棉塞質量的優(yōu)劣對實

驗的結果有很大的影響。正確的棉塞要求形狀，大小，松緊與試管口或者三角瓶口完全適

合，過緊則防礙空氣流通，操作不便；過松則達不到濾菌的目的。加塞時，應使棉塞長度

的1/3在試管口外，2/3在試管口內（圖示）。做棉塞的棉花要選纖維較長的，通常不用脫

脂棉做棉塞。由于它容易吸水變濕，造成污染，而且價格也貴。做棉塞過程如圖所示。

此外，現(xiàn)配現(xiàn)用的培養(yǎng)基與無菌水，還可使用硅膠橡膠塞或者聚丙烯塑料試管帽。

在微生物實驗與科研中，往往要用到通氣塞。所謂通氣塞就是幾層紗布，通常8層，

相互重迭而成，或者是在兩層紗布間均勻鋪一層棉花而成。這種通氣塞通常加在裝有液體

培養(yǎng)基的三角燒瓶口上。經(jīng)接種后，放在搖床上進行振蕩培養(yǎng)，以獲得良好的通氣促使菌

體的生長或者發(fā)酹。

（五）常用滅菌與消毒方法

使用強烈的理化因素使任何物體內外所有的微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施稱之為

滅菌（sterilization）o消毒（disinfection）則是用較溫與的物理或者化學方法殺死物體上

絕大多數(shù)微生物要緊是病原微生物與有害微生物的營養(yǎng)細胞，實際上是部分滅菌。

在微生物實驗、生產(chǎn)與科學研究工作中，需要進行微生物純培養(yǎng)，不能有任何外來雜菌。

因此，對所用器材、培養(yǎng)基要進行嚴格滅菌，對工作場所進行消毒，以保證工作順利進行。

實驗室最常用的滅菌方法是利用高溫處理的達到殺菌效果。高溫的致死作用，要緊是是使

微生物的蛋白蛋與核酸等重要生物大分子發(fā)生變性。高溫滅菌分為干熱滅菌與濕熱滅菌兩大類。

濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好一。這是由于濕熱下熱量易于傳遞，更容易破壞保持蛋白質穩(wěn)固性

的氫鍵等結構，從而加速其變性。此外，過濾除菌、射線滅菌與消毒、化學藥物滅菌與消毒等

也是微生物學操作中不可缺少的常用方法。

1、干熱滅菌

火焰滅菌

微生物接種工具如接種環(huán)、接種針或者其它金屬用具等，可直接在酒精燈火焰上灼燒進行

滅菌。這種方法滅菌迅速完全。此外，接種過程中，試管或者三角瓶口等，也可通過火焰灼燒

滅菌。

丁熱滅菌

用干燥熱空氣殺死微生物的方法稱之干熱滅菌。通常將滅菌物品置于鼓風干燥箱內，在

160°C?17CTC加熱1?2h0滅菌時間可根據(jù)滅菌物品性質與體積作適當調整，以達到滅菌目的。

玻璃器皿（如吸管、培養(yǎng)皿等）、金屬用具等，凡不適于用其它方法滅菌而又能耐溫的物品都可

用此法滅菌。但是，培養(yǎng)基、橡膠制品、塑料制品等不能使用干熱滅菌。干熱滅菌箱的構造（圖

示）。

⑴干熱滅菌操作步驟

①裝箱：將準備滅菌的玻璃器材洗滌干凈、晾干，用錫箔紙包裹好或者放入滅菌專用的鐵

盒（或者鋁盒）內，放入干熱滅菌箱，關好箱門。

②滅菌：接通電源，打開干熱滅菌箱排氣孔，待溫度升至80'C?100C時關閉排氣孔。繼

續(xù)升溫至160t?170C時,開始計時。恒溫1?2h。

③滅菌結束后，斷開電源，自然降溫至60°C,打開干熱滅菌箱門，取出物品放置備用。

⑵注意事項

①滅菌的玻璃器皿切不可有水。有水的玻璃器皿在干熱滅菌中容易炸裂。

②滅菌物品不能堆得太滿、太緊，以免影響溫度均勻上升。

③滅菌物品不能直接放在電烘箱底板上，以防止包裝紙或者棉花被烤焦。

④滅菌溫度恒定在：60?170“C為宜。溫度超過任00C,棉花、報紙會燒焦甚至燃燒。

⑤降溫時，需待溫度自然降至60C下列才能打開箱門取出物品，以免因溫度過高而驟然降

溫導致玻璃器皿炸裂。

2、濕熱滅菌

濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效。濕熱滅菌是利用熱蒸氣滅菌。在相同溫度下，濕熱的效

力比T熱滅菌好的原因是：①熱蒸氣對細胞成分的破壞作用更強。水分了的存在有助于破壞保

護蛋白質三維結構的氫鍵與其它相互作用弱鍵，更易使蛋白質變性。蛋白質含水量與其凝固溫

度成反比（表示）：②熱蒸汽熱空氣穿透力強，能更加有效地殺滅微生物；③蒸汽存在潛熱，當

氣體轉變?yōu)橐后w時可放出大量，故可迅速提高滅菌物體溫度。

多數(shù)細菌與真菌的營養(yǎng)細胞在60C左右處理15min后即可殺后，酵母菌與真菌的抱子要耐

熱些，要用80"C以上的溫度處理才能殺死，而細菌的芽胞更耐熱，通常要在120℃下處理15min

才能殺死。濕熱滅菌常用的方法有常壓蒸汽火菌與高壓蒸汽滅菌。

常壓蒸汽滅菌：

（1）常壓蒸汽滅菌方法

常壓蒸汽火菌是濕焦滅菌的方法之?，在不能密閉的容器里產(chǎn)生蒸汽進行滅菌。在不具備

高壓蒸汽滅菌的情況下，常壓蒸汽滅菌是一種常用的滅菌方法。此外，不宜用高壓蒸煮的物質，

如糖液、牛奶、明膠等，可使用常壓蒸汽滅菌。這種滅菌方法所用的滅菌器有阿諾氏（Aruokd）

滅菌器或者特制的蒸鍋，也可用普通的蒸籠。由于常壓蒸汽的溫度不超過100”C,壓力為常壓，

大多數(shù)微物的營養(yǎng)細胞能被殺死，但芽胞細菌卻不能在短時間內死亡，因此務必采取間歇滅菌

或者持續(xù)滅菌的方法，以殺死芽胞細菌，達到完全滅菌。

蛋白質含水量與其凝固溫度的關系

蛋白質含水量/%蛋白質凝固點/℃

5056

2574?80

1880?90

6145

①巴氏消毒：是用于牛奶、啤酒、果酒與醬油等不能進行高溫滅菌的液體的?種消毒方法,

其要緊目的是殺死其中的無芽胞病原菌，如牛奶中的結核分枝桿菌或者沙門氏菌，而又不影響

其特有風味。巴氏消毒法是一種低溫消毒法，具體的處理溫度與時間各有不一致，通常在6()?

85C下處理15~30mino具體的方法可分兩類，第一類是較老式的，稱之低溫維持法，比如在

63"C卜.保持30min可進行牛奶消毒；另一類是較新式的，稱之高溫快速，用于牛奶消毒時只要

在85℃下保持5min即可。但是巴氏消毒法不能殺滅引起Q熱的病原體一一伯氏考克斯氏體(一

種立克次氏體工

②間歇滅菌法：又稱分段滅菌法。適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。方法是：將待滅菌的培養(yǎng)

基在100t下蒸煮30?60min,以殺死其中所有微生物的營養(yǎng)細胞，然后置室溫或者20?3(TC

下保溫過夜，誘導殘留的芽胞萌發(fā)，第二天再以同法蒸煮與保溫過夜，如此連續(xù)重復3天，即

可在較低溫度下達到完全滅菌的效果。比如，培養(yǎng)硫細菌含硫培養(yǎng)基就應用間歇滅菌法滅菌，

由于其中的元素硫經(jīng)常規(guī)的高壓滅菌(121℃)后會發(fā)生熔化，而在100'C的溫度下則呈結晶狀。

③蒸汽持續(xù)滅菌法：微生物制品土法生產(chǎn)或者食用菌菌種制備經(jīng)常用這種方法。在容量較

大的蒸鍋中進行。從蒸汽大量產(chǎn)生開始，繼續(xù)加大火力保持充足蒸汽，待鍋內溫度達到100C

時，持續(xù)加熱3?6h,殺死絕大部分芽胞與全部營養(yǎng)體，達到滅菌目的。

以上三種方法通過是在無高壓蒸汽滅菌條件的地方(如農(nóng)村)使用.

(2)滅菌過程中注意事項

①使用間歇法或者持續(xù)法滅菌時務必在滅菌物里外都達到100C后，開始計算滅菌時間，如

今鍋頂上應有大審蒸汽冒出。

②為利于蒸汽穿透滅菌物，鍋內或者蒸籠上堆放物品不宜過滿過擠，應留有空隙。固體曲

料大量滅菌時，每袋以1.5?2.0kg為宜，料袋在鍋內用蒐子分層隔開，不能堆壓在一起。

③火大水足才能保證汽足，蒸鍋里應先把水加足。一次持續(xù)滅菌時，如鍋內盛水量不能維

持到底，應在蒸鍋側面安裝加水口，以便在蒸煮過程中添水。添水應用開水，以防驟然降溫。

④間歇法滅菌時應在每次加熱后，迅速降溫，然后在室溫放置24h,再第二次加熱。假如降

溫慢，往往使未殺死的雜菌大量滋長，反而導致滅菌物變質，特別是固體曲料包裝過大時，靠

近中心部分更易發(fā)生這種情況。

⑤從使用效果看，分裝試管、三角瓶或者其它容器的培養(yǎng)基，因其體積小，透熱快以用間

歇法為佳。固體曲料，因其包裝較大，透熱慢，用間歇法容易滋生雜菌變質或者者水分蒸發(fā)過

多，曲料變得不新鮮，影響培養(yǎng)效果，因此使用一次持續(xù)滅菌法較好。

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌法是微生物學研究與教學中應用最廣、效果最好的濕熱滅菌方法。

⑴滅菌原理

高壓蒸汽滅菌是在密閉的高壓蒸汽滅菌器（鍋）中進行的，其原理是：將待滅菌的物體放

置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內。把鍋內的水加熱煮沸，并把其中原有的冷空氣完全驅盡

后將鍋密閉。再繼續(xù)加熱就會使鍋內的蒸汽壓逐步上升，從而溫度也隨之上升到1000C以上。為

達到良好的滅菌效果，通常要求溫度應達到121t（壓力為0.IMPa）,時間維持15?30min。也

可使用在較低的溫度（115'C,即0.075MPa）下維持35min的方法。★為什么比干熱滅菌的工藝

指標低？此法適合于一切微生物學實驗室、醫(yī)療保健機構或者發(fā)酵工廠中對培養(yǎng)基及多種器材、

物品的滅菌。蒸汽壓力與溫度的關系如表所示。

蒸汽壓力與溫度的類系

蒸汽壓力（表壓）蒸汽溫度

kg/cm'MPa℃°F

0.000.00100212

0.250.025107.0224

0.500.050112.0234

0.750.075115.0240

1.000.100121.0250

1.500.150128.0262

2.000.200134.5274

在使用高壓蒸汽滅菌器進行滅菌時，蒸汽滅菌器內冷空氣的排除是否完全極為重要，由于

空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓。因此當水蒸汽中含有空氣中，壓力表所表示的壓力是水蒸

汽壓力與部分空氣壓力與總與，不是水蒸氣的實際壓力，它所相當?shù)臏囟扰c高壓滅菌鍋內的溫

度是不?致的。這是由于在同?壓力下的實際溫度，含空氣的蒸汽低于飽與蒸汽。見表所示。

由表看出：如不將滅菌鍋中的空氣排除干凈，即達不到滅菌所需的實際溫度。區(qū)此，務必

將滅菌器內的冷空氣完全排除，才能達到完全滅菌的目的。

在空氣完全排除的情況下，通常培養(yǎng)基只需在0.IMpa下滅菌30min即可。但對某些物體較

大或者蒸汽不易穿透的滅菌物品，如固體曲料、土壤與草炭等，則應適當延長滅菌時間，或者

蒸氣壓力升到0.15Mpa保持1?2h。

⑵滅菌設備

高壓蒸汽滅菌的要緊設備是高壓蒸汽滅菌鍋，有立式、臥式及手提式（圖）等不一-致類

型。實驗室中以手提式最為常用。臥式滅菌鍋常用于大批量物品的滅菌，不一致類型的滅菌鍋,

雖大小外形各異。但其要緊結構基本相同。

高壓蒸汽滅菌器的基本構造如下:

空氣排除程度與溫度的關系

壓力表讀數(shù)滅菌器內溫度/"C

/Pa未排除空氣排除1/3空氣排除1/2空氣排除2/3空氣完全排除空氣

35729094100109

7090100105109115

10510C109112