PAGEPAGE6微生物的培育與應用1.(2024·江西贛中南五校一聯)回答下列有關微生物培育與運用的問題：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2gFeCl30.1gX1g維生素微量瓊脂15g(1)如上表是篩選異養型細菌的培育基配方。從物理性質上看該培育基屬于________培育基，其中成分X除了為目的菌供應能源外，還能供應____________。制備該培育基的一般操作依次是計算→稱量→________→滅菌→________。對培育基進行滅菌的常用方法是____________________。(2)如圖A、B是純化微生物培育的兩種接種方法，C、D是接種后培育的效果。某同學接種培育后獲得圖C所示效果，則其采納的接種方法是[]____________([]選填“A”“B”)；接種時可能的失誤操作是__________________________。(3)微生物強化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術。為篩選和純化該類微生物，應向培育基中添加________作為唯一碳源；培育一段時間后在培育基上形成降油圈，此時選取________就可獲得高效菌株。答案(1)固體碳源和氮源溶化倒平板高壓蒸汽滅菌法(2)B稀釋涂布平板法涂布不勻稱(3)石油降油圈大的菌落解析(1)題表中培育基的成分有凝固劑——瓊脂，因此該培育基為固體培育基。培育基除應含有水、無機鹽、特別養分物質(維生素等)外，還應有碳源和氮源。制備固體培育基的一般操作依次是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。(2)圖A運用接種環接種，表示的是平板劃線法，相應培育效果如圖D所示；圖B運用涂布器接種，表示的是稀釋涂布平板法，相應培育效果如圖C所示。圖C所示培育基上菌落分布不勻稱，可能是接種過程中涂布不勻稱所致。(3)篩選和純化能降解石油的微生物時，應以石油為唯一碳源。降油圈越大，說明該處微生物降解石油的實力越強。2．(2024·湖北八校二模)為了調查某學校旁邊河流的水質狀況，該學校生物愛好小組測定了河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分別等工作。回答下列問題：(1)如圖，該小組采納的是________分別水樣中的細菌。操作時，接種環通過________滅菌，在其次次及以后的操作時，總是從上一次的末端起先，這樣做的目的是____________________________。(2)該試驗組將接種好的培育皿在恒溫箱中培育時倒置，其目的是________________________________________；在培育基上產生的單個菌落在生態學中可以被稱為________。(3)依據培育皿上菌落的平均數可以計算河水中該細菌的密度，但計算的數據要比實際活菌的數目少，緣由是______________________。除了上述的活菌計數法外，________也是測定微生物數量的常用方法。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培育基中并混勻，一部分進行靜置培育，另一部分進行振蕩培育。結果發覺：振蕩培育的細菌比靜置培育的細菌生長速度快。分析其緣由是：__________________________________________________________________________________。答案(1)平板劃線法灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(2)防止形成的冷凝水滴落在培育基上產生雜菌污染種群(3)當兩個或者多個細胞連在一起時平板上視察到的是一個菌落顯微鏡干脆計數(4)振蕩培育能提高培育液的溶解氧的含量，同時可以使菌體與培育液充分接觸，提高養分物質的利用率解析(1)從圖中可明顯看到三個劃線區域，這說明該小組采納的是平板劃線法分別水樣中的細菌。接種環是金屬制品，可用灼燒滅菌。在其次次及以后的操作時，總是從上一次的末端起先，這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(2)將接種好的培育皿在恒溫箱中培育時倒置，其目的是防止形成的冷凝水滴落在培育基上產生雜菌污染。種群是生活在同一區域的同種生物全部個體的總和，因此在培育基上產生的單個菌落在生態學中可以被稱為種群。(3)計算的數據要比實際活菌的數目少，緣由是當兩個或者多個細胞連在一起時平板上視察到的是一個菌落。除了上述的活菌計數法外，顯微鏡干脆計數也是測定微生物數量的常用方法。(4)振蕩培育的細菌比靜置培育的細菌生長速度快的緣由是：振蕩培育能提高培育液的溶解氧的含量，同時可以使菌體與培育液充分接觸，提高養分物質的利用率。3．(2024·河北邯鄲一模)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。探討人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培育基，勝利篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。試驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題：(1)培育基中加入化合物A的目的是________________________，這種培育基屬于________培育基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培育基中的________。試驗須要振蕩培育，由此推想“目的菌”的代謝類型是________。(3)在上述試驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關鍵是________________________。(4)轉為固體培育基時，常采納平板劃線的方法進行接種，此過程中所用的接種工具是________，操作時采納的滅菌方法是________。(5)試驗結束后，運用過的培育基應當進行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是________________________________________。(6)某同學安排統計污水池中“目的菌”的總數，他選用104、105、106稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設置了3個培育皿，從設計試驗的角度看，還應設置的一組比照試驗是_________________，此比照試驗的目的是________________________________。答案(1)篩選目的菌選擇(2)化合物A異養需氧型(3)防止外來雜菌污染(4)接種環灼燒滅菌(5)防止造成環境污染(6)不接種的空白培育基檢驗培育基滅菌是否合格解析(1)該試驗的目的是篩選“目的菌”，故培育基中添加的化合物A起選擇作用。(2)微生物正常生長須要碳源、氮源、無機鹽等，由培育基中添加的物質種類知：化合物A應當給微生物生長供應碳源、氮源。培育過程需振蕩，說明目的菌是需氧型微生物。(6)統計污水池中的“目的菌”時應設置空白比照，以用于檢驗培育基是否滅菌嚴格。4．(2024·山西太原一模)玉米秸稈含有大量的纖維素，用纖維素酶分解秸稈后的產物可以生產酒精。探討人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制培育基，勝利地篩選到能產生纖維素酶的微生物。請分析回答：(1)纖維素酶至少包括________、________、__________三種組分，在這三種酶的作用下，纖維素最終被水解成________。(2)培育基中加入的化合物A是________，為微生物的生長供應碳源，這種培育基屬于________培育基，對培育基進行滅菌時常用的滅菌法為__________________________________________________。(3)在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用________染色法；假如培育基某部位出現________現象，則說明存在纖維素分解菌。(4)用獲得的糖液發酵生產乙醇，常用的微生物是________，在________________發酵液中，該菌可以生長繁殖，而絕大多數其他生物受到抑制。常用________________法對該菌進行計數，檢測是否產生酒精的常用試劑是________________，會變為________色。(5)試驗結束后，運用過的培育基應當進行________處理后才能倒掉，這樣做的目的是愛護環境。答案(1)C1酶CX酶葡萄糖苷酶葡萄糖(2)纖維素選擇高壓蒸汽滅菌(3)剛果紅透亮圈(4)酵母菌酸性且缺氧稀釋涂布平板(其他答案正確也可)酸性重鉻酸鉀灰綠(5)滅菌解析(1)纖維素的單體是葡萄糖，纖維素酶能夠將纖維素水解成葡萄糖。纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)依據題干信息可知，試驗目的是篩選到能產生纖維素酶的微生物，因此培育基應以纖維素作為唯一碳源，這種培育基屬于選擇培育基，對培育基進行滅菌時常用的滅菌法為高壓蒸汽滅菌。(3)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，出現以纖維素分解菌為中心的透亮圈，我們可以通過是否產生透亮圈來篩選纖維素分解菌。(4)酵母菌無氧呼吸時產生乙醇，所以用獲得的糖液發酵生產乙醇，常用的微生物是酵母菌，在酸性且缺氧發酵液中，該菌可以生長繁殖，而絕大多數其他生物受到抑制，常用稀釋涂布平板法對該菌進行計數。酒精與酸性的重鉻酸鉀發生反應，由橙色變為灰綠色。(5)試驗結束后，為了愛護環境和防止操作者被感染，對運用過的培育基應進行滅菌處理。5．(2024·山東菏澤一模)為探究大腸桿菌CV101菌株和CV103菌株的養分需求，某團隊在養分成分相同的含醋酸鹽的培育液中分別接種CV101菌株和CV103菌株，并置于相同且相宜的環境中培育，每隔一段時間統計兩種菌株的生長狀況。試驗數據如下圖所示，回答下列問題：(1)醋酸鹽培育基從物理性質上來看屬于________培育基，該培育基主要應用是________；從功能上來看屬于________培育基。(2)由圖可知：更適應醋酸鹽培育基環境的菌株是________，其依據是_________________________________________________，緣由是__________________________________________。(3)若要統計培育30小時后醋酸鹽培育基中的CV101活菌數，可采納________法；為保證能在固體培育基上獲得單個菌落，接種前，需取1mL該菌液進行________處理。答案(1)液體擴大培育選擇(2)CV101菌株在肯定時間內，CV101菌株在該培育基中數量持續增多，而CV103菌株的數量削減且維持在較低水平CV101菌株能以醋酸鹽為碳源(3)稀釋涂布平板梯度稀釋解析(1)依據題干信息分析，某團隊在養分成分相同的含醋酸鹽的培育液中分別接種CV101菌株和CV103菌株，因此該培育基屬于液體培育基，有利于菌種的擴大培育；從功能上看其屬于選擇培育基。(2)據圖分析可知，在肯定時間內，CV101菌株在該培育基中數量持續增多，而CV103菌株的數量削減且維持在較低水平，說明CV101菌株能以醋酸鹽為碳源，因此CV101菌株是更適應醋酸鹽培育基環境的菌株。(3)常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中后者可以用于菌種的計數；為保證能在固體培育基上獲得單個菌落，接種前，需取1mL該菌液進行梯度稀釋處理。6．(2024·寧夏固原一中訓練)某愛好小組欲調查學校某區域土壤中微生物的種類，并進行了微生物的分別等工作。回答下列問題：(1)該小組采納稀釋涂布平板法從土壤中分別分解纖維素的微生物，在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時間，這樣做的目的是________________________________；分別得到的純化單菌落屬于________(填“種群”或“群落”)；篩選纖維素分解菌常用________________法，依據菌落四周是否出現________來判定。(2)該小組采納平板劃線法分別土壤中的微生物，操作時，接種環通過________滅菌，在其次次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端起先劃線，這樣做的目的是____________________________。(3)鑒定土壤中微生物的種類，可以通過菌落的___________(至少兩點)等特征。在試驗中小組每隔24小時統計一次菌落數目，并選取菌落數目穩定時的記錄作為結果，這樣可以防止_______________。答案(1)檢測培育基滅菌是否合格種群剛果紅染色透亮圈(2)灼燒將聚集的菌體漸漸稀釋以便獲得單個菌落(3)形態、大小、隆起程度及顏色因培育時間不足導致遺漏菌落數目解析(1)在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時間，這樣做的目的是檢測培育基滅菌是否合格；分別得到的純化單菌落是同種生物，屬于種群；篩選纖維素分解菌常用剛果紅染色法，依據菌落四周是否出現透亮圈來判定。(2)接種環常采納灼燒滅菌法滅菌；在其次次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端起先劃線，這樣做的目的是將聚集的菌體漸漸稀釋以便獲得單個菌落。(3)鑒定土壤中微生物的種類，可以通過菌落的形態、大小、隆起程度及顏色等特征。在試驗中小組每隔24小時統計一次菌落數目，并選取菌落數目穩定時的記錄作為結果，這樣可以防止因培育時間不足導致遺漏菌落數目。7．為了分別和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用