新城疫是一種高度傳染性的急性傳染病，已在眾多養殖場中被記錄。感染大腸桿菌后，其臨床表現復雜多變，給診斷和治療帶來了挑戰。本研究計劃在先前研究的基礎上，進一步探討雞新城疫與大腸桿菌混合感染后的臨床癥狀和病理變化，確立這兩種疾病的實驗室診斷標準，并提出有效的防控措施，旨在減少混合感染的發生，確保養殖業的經濟效益，并提供科學依據。新城疫又稱亞洲雞瘟，是由禽副黏病毒科的新城疫病毒（NDV）引發的一種具有高度傳染性的疾病，對家禽健康構成嚴重威脅。該病不僅對雞群造成顯著傷害，還會削弱其對其他疾病的免疫力，導致多種病原體的復合感染。大腸桿菌作為一種長期潛伏于環境中的病原菌，極易與新城疫并發混合感染。因此，掌握新城疫的臨床特征，提升對該病的早期識別能力，對于及時實施有效防治措施，遏制其傳播和流行至關重要。一、病原1、新城疫新城疫乃一種由病毒引發的傳染性疾病，隸屬于副黏病毒科。該病毒為禽類副黏病毒I型毒株。盡管新城疫病毒僅存在單一血清型，其基因型卻極為多樣，通常依據F基因及全基因序列被劃分為I類和Ⅱ類。Ⅱ類中包括I至Ⅸ型，其中以VII型病毒株最為常見。該病毒展現出較強的存活能力，在-20～80℃環境下可存活長達12年。然而，它對消毒劑的抵抗力較弱，常規消毒劑即可有效殺滅。此外，該病毒對太陽光極為敏感，暴露于陽光下會迅速失去活性。2、大腸桿菌大腸桿菌通常呈現為兩端鈍圓的短桿菌形態，盡管它們也可能呈現為球形或桿狀。在革蘭氏染色過程中，該細菌被鑒定為革蘭氏陰性。大多數大腸桿菌具有莢膜或微莢膜結構，但通常不形成孢子。這些細菌普遍具有菌毛，其中許多是特異性表達的。大腸桿菌能夠將葡萄糖分解為酸性氣體，通常甲紅試驗結果為陽性，而吲哚生成試驗結果為陰性。該細菌對消毒劑極為敏感，然而，它們對常規使用的抗菌藥物容易產生耐藥性，尤其是對多種抗生素和磺胺類藥物。二、流行病學1、新城疫流行病學新城疫，一種高度傳染性的病毒性疾病，對家禽尤其是雞類構成嚴重威脅。該病毒具有快速傳播的特性，一旦在養雞場暴發，極易造成大規模的雞只死亡。新城疫病毒能在雞的多個器官內擴散，包括腦、肺和骨髓等，對家禽健康造成嚴重損害。此病不僅在雞群中傳播，還可能感染其他鳥類，如鵪鶉。新城疫是一種普遍的傳染病，各個年齡段的雞都易感，尤其在雞群免疫系統功能不全時，疾病更易擴散。該病不僅傳染性強，而且致死率高，給養殖業帶來巨大的經濟損失。疾病的傳播主要來源是已感染的病雞，但也有其他攜帶病毒的雞和鳥類，這使得發病率居高不下。在疾病早期，癥狀往往表現為慢性，使得養殖者難以及時發現并隔離病雞，從而導致疾病的廣泛傳播。新城疫病毒主要通過消化道和呼吸道傳播，健康雞只也可能通過接觸病雞的水源、飼料和環境而感染。此外，雞蛋中可能含有病毒，導致疾病在孵化過程中傳播，并可能引起雞胚死亡。病毒能在死亡的雞胚中長期存活，若不采取科學的治療措施，病毒的傳播風險將顯著增加，對后續養殖活動構成威脅。此外，新城疫不僅對家禽造成危害，還可能在檢疫、轉運過程中引發疾病傳播，并可能影響到加工食品的安全性。該病多發于春季和秋季，盡管其他季節也可能發生。2、大腸桿菌大腸桿菌主要通過消化道和呼吸道進行傳播，其致病病毒主要通過呼吸道分泌物、消化道分泌物以及糞便等途徑傳播至周圍環境。因此，無論是健康的還是已感染新城疫病毒的雞群，都極易受到感染。大腸桿菌能夠感染多種動物，其中雞是最易感的動物之一。該病無特定季節性，全年均可發病，但尤其在雨季，發病率顯著升高。此外，病雞若同時感染其他病原體，亦會增加該病的發生概率。三、臨床癥狀新城疫與大腸桿菌的共同感染，主要呈現兩種臨床表現。病雞通常表現出精神萎靡、食欲減退、飲水量增多、羽毛蓬松且失去光澤。感染后的雞群往往呈現直立姿態、躲藏行為、無法站立或行走，體溫可升高至43℃。隨著病情的惡化，病雞的翅膀下垂、眼睛閉合、嗜睡，伴有咳嗽、呼吸困難等癥狀。病雞會張口、伸頸、持續從口中排出黏液，同時伴有喘息和哀鳴聲，偶爾可聽到吞咽聲。其嗉囊內積聚大量液體，若倒提，可見帶酸味的液體從口中流出。病雞排泄的糞便呈黃白色，顏色淡，有時呈水樣，偶爾帶血。感染晚期，糞便可能呈現蛋清狀，嚴重時可引起神經系統癥狀，如腿部和翅膀癱瘓，以及轉圈、扭頭等異常行為。疾病末期，病雞可能突然倒下，陷入昏迷，體溫下降，最終導致死亡。亦有可能在2～5天內無明顯癥狀的情況下死亡。四、病理變化病亡雞只常表現出皮膚干燥及脫水現象。口腔及咽部可見大量黏液積聚，嗉囊內含有渾濁且帶有腥味的液體。病雞的喉頭黏膜呈現充血和出血狀況，并伴有大量黏液分泌。組織切片檢查揭示心臟冠狀動脈區域存在多處點狀出血。心臟外膜增厚且不透明，肝臟腫大并被纖維素性膜所覆蓋，腎臟亦出現腫脹，其表面可見大量淤血和充血現象。剖檢腺胃可見腺胃乳頭發生潰瘍和充血，腺胃與肌胃交界處黏膜腫脹，肌胃易與肌肉剝離，肌肉組織中可見斑點狀出血。小腸尤其是十二指腸前段出血較為嚴重，空腸和回腸處可見類似棗核的腫脹，直腸出血則呈現條紋狀。腹腔內存在多處點狀出血點。此外，眼睛腫脹和出血、腺胃腫脹等癥狀亦與大腸桿菌感染有關。五、實驗室診斷1、剖檢觀察在對養殖場的病禽進行剖檢后，觀察到其口腔內充斥著黏液和污穢物質，嗉囊內含有酸敗氣味的液體，并伴有氣體積聚；氣管內出現環狀出血現象，伴隨有淺白色黏液；心包腔內可見淡黃色液體滲出，心包膜顯著變薄且呈灰白色，心冠及其周圍區域可見大量出血點；肺部呈現充血和水腫狀態，顏色暗紅，內含淺黃色乳酪狀物質；肝臟體積增大，邊緣變得鈍圓，表面被黃白色纖維狀物質所覆蓋；胃黏膜上皮內可見少量出血點，肌層和胃黏膜亦見出血點；腸壁較為薄弱，腸系膜及漿膜存在不同程度的出血現象，腸腔內充滿淡黃色稀薄內容物，泄殖腔內可見條狀血跡。2、新城疫實驗室診斷①病毒分離鑒定對于疑似或已患病的雞只，應立即進行消毒處理，并采集其組織或血液樣本。隨后，應迅速將樣本進行冷凍或冷藏保存。在處理收集到的樣本時，需加入適量的生理鹽水并充分混合，接著進行離心處理，取其上清液。將上清液接種至雞胚中，并進行孵化。若在孵化過程中雛雞出現死亡現象，則需使用新的雞胚重復此過程3～5次。若每次接種后雛雞均發生死亡，這可能意味著已成功分離出病毒。接下來，通過病理學和組織學檢測方法，檢查死雞胚內是否存在新城疫的病變。同時，以新城疫病毒為研究對象，運用逆轉錄聚合酶鏈反應（RT～PCR）等分子生物學技術，對NDV的特異性基因進行鑒定。若在雞胚中發現典型的新城疫病變，并且分子標記檢測結果呈現新城疫病毒特有的基因序列，則可確診為新城疫病毒感染。②微量紅細胞凝集抑制試驗在診斷雞新城疫的過程中，通常采用微量紅細胞凝集抑制試驗。首先，準備試管或微平板，并采集新鮮的雞紅細胞以及待測血清。將待測血清樣品進行1∶2、1∶4、1∶8等以二倍遞增的稀釋處理。接著，取適量新城雞瘟病毒抗原與之混合，并進行30分鐘的培養。然后，取1%的雞紅細胞懸浮液，攪拌均勻后靜置30分鐘，以觀察紅細胞是否出現凝集現象。若紅細胞分散，形成均勻的紅色懸濁液，則表示未發生凝集反應，可判定為陽性，意味著樣品中含有新城疫病毒抗體。相反，若紅細胞出現聚集，并形成“傘”狀沉淀，則表明發生了凝集反應，可判定為陰性，即樣品中未發現新城疫病毒抗體。陽性稀釋程度越高，表明抗體濃度越高。③大腸桿菌病實驗室診斷首先，需準備實驗所需的培養皿、培養基、接種環、酒精燈、酒精棉球等器材。接著，從病雞體內采集肝、脾、腸道等部位的樣本，將樣本切割成小塊，并加入無菌生理鹽水，使用勻漿機進行充分混合，制成懸液。隨后，采用倍比稀釋法對懸液進行稀釋，通常達到106～108CFU/mL的濃度。將稀釋后的病原體接種至選定的培養基上，每皿接種量為1～2mL，隨后將培養皿置于37℃的培養箱中培養18～24小時。在培養過程中，需對菌落的色澤、形態、邊緣等特征進行細致觀察。若菌落呈現圓形、表面光滑、濕潤，顏色為灰白色或淡黃色，直徑介于1～2mm之間，則可依據其形態特征判斷為大腸桿菌。六、藥物治療1、抗菌治療每1L水溶解5%氟苯尼考可溶性粉4g，每日對雛雞進行喂食，持續7天。初次使用時劑量應加倍。亦可選用20%多西環素可溶性粉，劑量為每1L水中加入1.5g，每日1次，連續5天。2、抗病毒治療使用青瘟解毒粉可預防和治療雛雞疾病。每只雞用2g粉末與溫水混合，拌入飼料喂食，最好在3～4小時內喂完。每日1次，連續5天，以保持雛雞健康。3、輔助治療使用黃芪多糖0.5g，每天1次，為期5天。同時，每天添加240g電解多維添加劑至200kg飼料中，讓雞群自由采食。這2種方法結合可有效輔助治療雞病。4、腸道菌群調理將500g益生菌拌入50kg飼料中，每日1次，連續5天；將1kg葡萄糖氧化酶混合入300kg飼料中，每日1次，連續5天。經過5天的對癥治療，雞群的疾病得到了有效控制，未再出現新的病例，雞的精神狀態顯著改善，癥狀逐漸消退，飲食和飲水行為恢復正常。2個月后，對雛雞進行頸靜脈注射，劑量為每只0.5mL，并進行免疫測定。七、預防措施1、及時隔離，完善應急處置預案在養殖過程中，一旦出現疑似疾病跡象，必須迅速采取預防和控制措施，以最大限度地降低疾病對養殖活動的潛在危害。首先，在日常的飼養管理活動中，應加強對疾病監控的重視。飼養管理人員需密切關注雞群的健康狀況，一旦發現雞群出現食欲不振、精神不振、多種呼吸道癥狀或產蛋量減少等異常表現，應立即對疑似病雞實施隔離，并對養殖環境進行徹底消毒。同時，應及時向地方防疫部門報告情況，并尋求專業支持。對于同舍其他雞只的健康狀況也應持續觀察，并根據需要采取緊急免疫措施，以減少疾病對養殖工作的負面影響。2、加大衛生管理力度，切斷傳播途徑強化養雞場的消毒管理措施，定期對養雞場進行徹底的清潔和消毒工作，以營造一個潔凈、衛生、舒適且無害的養殖環境。所有進出養雞場的車輛與人員必須經過嚴格的消毒程序，方可進入，以防止病毒的侵入。必須建立一套完善且可行的消毒體系，例如，養雞場應每周執行1次全面消毒，以及每2～3天進行1次雞場消毒。帶雞消毒通常采用氣霧消毒法，選用對雞呼吸道黏膜無強烈刺激性的藥物，如戊二醛、碘制劑等，并應定期更換不同種類的藥物，以避免耐藥性問題的產生。對于病雞曾經活動過的雞舍及其使用過的器具，必須進行徹底的清潔和消毒，并在下個月左右進行復查，消毒藥物包括癸甲溴銨溶液、聚維酮碘等。3、緊抓季節管理，減少雞群應激雞天性膽小，極易因外界環境的不當管理而產生應激反應，例如通風不良、飼養密度過高、溫度波動劇烈等。因此，在養殖實踐中，相關工作人員必須嚴格遵循季節性管理原則，力求將雞只的應激反應降至最低。特別是在夏季與冬季，溫度管理尤為關鍵。應根據當地氣候特征，制定適宜的溫度調控方案，確保適時增溫或降溫，維持雞舍溫度在適宜范圍內，有效控制病原體的生成與傳播，從而顯著減少疫病的發生與擴散。夏季高溫時，若舍內溫度超過28℃，雞只飲水量會顯著增加，食欲減退，不利于生長。此時，雞場應使用制冷設備及時降低溫度，并改善自然通風條件，擴大通氣孔，并采取遮陽措施。同時，保持雞舍內部的安靜，避免突發噪聲對雞群造成驚嚇。鑒于夏季中午和午后是一天中最熱時段，為確保雞群每日攝食充足，可選擇在早上5點開始喂食，或在飼料中添加具有降溫效果的中草藥成分。冬季寒冷，重點在于保暖。若雞舍溫度過低，不僅會刺激雞群，還可能導致雞只相互依偎取暖，進而引發擁擠和踩踏事故。春季氣溫波動較大，尤其需關注天氣變化，冷熱交替易使雞只患病，因此必須密切監控雞舍溫度和雞群健康狀況，維持穩定的溫度環境，避免雞只受到劇烈溫度波動的影響。4、疫苗免疫當前，針對該疾病的防控主要依賴于疫苗接種。目前，市場上主要流通的疫苗類型包括弱毒疫苗、中等毒力疫苗以及IV系和LaSota疫苗。常見的接種方法包括滴鼻法、點眼法、飲水法和霧化法。滴鼻法和點眼法涉及將疫苗用生理鹽水或適宜的稀釋液稀釋后，分別滴入雞只的鼻腔和眼部。在滴鼻時，需封閉一側鼻孔，向另一側滴入兩滴，每滴約0.05mL；點眼法則是在一只眼睛上滴入兩滴疫苗，隨后讓雞閉眼以確保疫苗被完全吸收。飲水法是通過讓雞只飲用含有疫苗的水來進行免疫，免疫前需讓雞禁水3～4小時，然后將疫苗稀釋于水中供其飲用，建議使用涼水或深井水稀釋，避免使用自來水，并且可以將100kg的疫苗加入飲用水中。初次免疫通常在雞只10日齡時進行，第2次免疫則安排在25～30日齡，之后每隔4個月進行1次。霧化法是將疫苗稀釋后，通