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文檔簡介
資料來源于網絡整理,更多高質量文檔請聯系。微生物室管理制度1、微生物檢驗流程現場無菌取樣↓無菌室無菌操作↓樣品均質↓樣液稀釋↓樣品接種↓恒溫培養↓結果觀察↓依據標準進行判斷↓報告結果2、微檢室清洗工藝及操作規程2.1無菌操作前的準備工作:2.1.1每次無菌操作結束后,將用過的吸管、培養皿等物品拿出微檢室,并用75%酒精擦拭操作臺桌面及周圍。2.1.2每周用75%酒精或0.25%新潔爾滅擦拭微檢室(緩沖間)四周墻壁。地面及室內其它物品。2.1.3隨時清理室內物品及培養皿、吸管、三角瓶等,超過一周未使用的,須重新進行嚴格滅菌。
2.1.4定期清洗工作服、工作鞋、工作帽、口罩等。2.1.5每天做空氣捕捉培養檢驗,掌握室內無菌情況,確定空間是否需要徹底消毒殺菌。2.1.6根據空間微生物檢測結果,若每個平皿內菌落不超過4個,則可以認為無菌程度良好;若菌落數很多,則應對無菌室用甲醛熏蒸徹底消毒(配制35~40%的甲醛液,其使用量為每立方米空間2ml)。2.1.7培養基的配制:在培養基配置前,首先要了解培養基的用途、成分,各成分在培養基中的作用原理,是否能承受加熱滅菌,需要調整的PH值等,然后再著手配置。培養基的制備按下述順序進行:配料→溶解→調整PH值→過濾→加瓊脂熔化→定容→分裝→包扎→滅菌。2.1.8玻璃器皿滅菌程序:為保證實驗的準確性,微生物檢驗所需的試管、三角瓶、移液管和培養皿等,除與其他實驗室要求一樣需洗刷干凈外,還需要滅菌即通過殺滅所有微生物的營養細胞和芽孢,使其永遠失去生命力。玻璃器皿的洗滌、滅菌程序如下:(1)新玻璃儀器使用前必須用2%鹽酸浸泡。(2)用洗衣粉水或洗滌靈浸泡(熱水煮沸)→清水沖洗→烘干→包扎→滅菌(3)通常使用150℃、3小時,160℃、2小時,或170℃、1小時干熱滅菌法。
注意:(1)干熱滅菌的溫度不能超過180℃,對帶有棉花塞、紙包的器皿,溫度宜采用150℃、3小時的滅菌法,溫度不宜過高,不要緊貼烘箱器壁,以免棉花塞、紙發脆、焦化,甚至著火。(2)滅菌操作時,必須等恒溫后再離人,滅菌完畢后或溫度升溫過程中,須在60度以下才能打開箱門。(3)如果不慎烘箱冒煙,應立即切斷電源,切忌打開箱門,以免高溫下棉花等遇見空氣后即燃燒,釀成火災。2.1.9每班對微檢室(包括緩沖間)利用打開紫外燈滅菌30分鐘。2.2無菌操作要點:2.2.1用75%酒精或0.25%新潔爾滅溶液擦手;2.2.2操作過程不離開酒精燈無菌區;2.2.3換下的棉塞不得亂放;2.2.4接種工具,使用前必須經火焰灼燒滅菌;2.2.5操作要準確、迅速;2.2.6接種工具使用后,必須經火焰灼燒滅菌后,才能放到桌上;2.2.7所有使用過的器皿均須嚴格滅菌。3.微生物檢驗室衛生管理制度
3.1衛生管理區域包括(1)微生物檢驗室(2)緩沖間(3)培菌室(4)檢菌室3.2衛生管理內容1、人員:
(1)微生物檢驗人員必須持有健康證(2)必須正確穿戴好勞動保護具,保持工作服整潔。(3)不得留長指甲(指甲長度不得超過手指),不涂指甲油,不帶戒指、耳環,不穿裙子、高跟鞋,不許穿短褲、拖鞋工作,不準赤膊,不準酒后上崗,微生物檢驗室、緩沖間、培菌室、檢菌室內禁止吸煙。2、設備:(1)操作臺、紫外燈、照明燈、培養箱、冰箱、滅菌鍋、干燥箱等要保證完好,外表面無灰塵、無銹蝕、無霉菌、無污跡、無油污、無泄漏、保持干凈。(2)設備下面及周圍無積塵、無雜物、無積水、保持清潔。(3)閑置的設備、封存的設備及附件、膠管等,應劃定專放區存放(或設置專用間),要求擺放整齊定期保養、清潔,保持干凈,無霉菌,報廢設備不得留在工作現場。(4)備品、備件存放在專用備品庫,分類定置整齊擺放,并作好標識。3、用具:(1)所有用具定置擺放整齊,保持清潔,干凈,無污漬,無銹蝕,使用前后清洗干凈。(2)記錄清晰干凈,整潔,無污漬。3.3要求達到的標準及注意事項:1.應每天徹底擦拭一次地面,每周用75%酒精擦拭緩沖間、微檢室的桌面及存放物品;2.緩沖間、無菌室安裝紫外燈,每天使用前后用紫外燈照射殺菌30分鐘,且須間隔30分鐘后方可進入;3.操作人員進入無菌室前,應在緩沖間穿好專用的工作服、工作鞋、工作帽、口罩,工作服、工作鞋、工作帽、口罩應放在無菌室緩沖間,工作前經紫外燈殺菌后使用,只準在無菌室內專用,不準穿到其他地方去,并定期洗換和消毒滅菌;4.操作人員進入無菌室前應先用肥皂洗凈手,在接種前,先用75%酒精擦拭手、操作臺面、待接種樣品的外壁,點燃酒精燈,在火焰附近進行接種操作;5.進行接種所用的吸管、平皿、培養基等必須經消毒滅菌,金屬用品應高壓鍋滅菌;6.從包裝取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管平皿時,吸管尖不得觸及試管和平皿;7.接種樣品轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后都通過火焰滅菌;8.接種環或接種針每次使用前后,必須通過火焰灼燒全部金屬絲,直到金屬絲燒紅為止,要燒到環和針與桿的連接處,待冷卻后方可接種培養物,以免將待檢的細菌殺死,影響結果的準確性;9.完成無菌操作后,要及時將用過的物品帶出微檢室,并將操作臺面等物品用75%酒精擦拭后待用,已報結果的培養皿、試管等要及時清洗,必要時放入消毒容器內用水煮沸后再清洗;10.工作完畢,兩手應用肥皂和水沖洗干凈
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