第2節動物細胞工程

1動物細胞培養................................................................1

2動物細胞融合技術與單克隆抗體...............................................7

3動物體細胞核移植技術和克隆動物............................................14

1動物細胞培養

【基礎達標］

題組一動物細胞培養的條件

1.下列不屬于動物細胞培養的條件是（）

A.無毒、無菌的環境B.合成培養基通常需加血清?、血漿

C.pH=7的中性環境D.提供細胞代謝所需的d

【答案】C

【解析】動物細胞培養需要無菌、無毒的環境，A正確；動物細胞培養需要在合成培養基中

添加血清、血漿，B正確：動物細胞培養需要的適宜的pH一般為7.2?7.4,呈弱堿性，。錯誤；

動物細胞培養需要提供細胞代謝所需的（LD正確。

2.動物細胞體外培養需要滿足一定的條件，下列說法錯誤的是（）

A.細胞培養液通常會添加一定量的抗生素，以防止雜菌污染

B.0?是細胞代謝所必需的，CO?有利于維持培養液pH的穩定

C.使用合成培養基時，通常要加入血清、血漿等一些天然的成分

D.多數動物細胞生存的適宜pH為7.2?7.4,適宜溫度為25±0.5℃

【答案】D

【解析】抗生素具有殺菌作用，為防止培養液被污染，可在培養液中加入一定量的抗生素，

A正確；。2是細胞代謝（細胞呼吸）所必需的，C0?溶于水能使溶液pH降低，有利于維持培養液pH

的穩定，B正確；使用合成培養基時，通常要加入血清、丸漿等一些天然的成分，以利于動物細

胞生長，C正確；細胞體外培養的適宜溫度和動物體溫相近，哺乳動物動物多以36.5±0.5℃為

宜，多數動物細胞牛.存的適宜pH為7.2?7.4,D錯誤。

題組二動物細胞培養的過程

3.下列有關動物細胞培養的敘述，正確的是（）

A.原代培養和傳代培養前都可以使用胰蛋白酶

B.培養過程中需將細胞置于含95%（h和5%C0?的混合氣體的培養箱中

C.配制合成培養基要加入糖、促生長因子、氨基酸、瓊脂等成分

D.培養液中添加適量的抗生素可為細胞提供無菌、無毒的培養環境

【答案】A

【解析】原代培養前用胰蛋白酶可使組織分散成單個細胞，傳代培養前需要用胰蛋白酶使細

胞從瓶壁上脫離下來，A正確；將培養皿或培養瓶要置于含95%空氣加5%C02的混合氣體的培養箱

中進行培養，而非細胞，B錯誤；合成培養基是液體狀態，無需加瓊脂，C錯誤；培養液中添加

適量的抗生素以防培養過程中的污染，為細胞提供無菌、無毒的培養環境，需對培養液和所有培

養用品進行無菌處理，D錯誤。

4.小鼠的某種上皮細胞與某種淋巴細胞體外培養時，細胞周期基本相同，但上皮細胞在培

養時，呈現扁平不規則多角形，且貼附在培養瓶內壁上；該淋巴細胞則常常懸浮在培養液中。下

列有關敘述錯誤的是（）

A.使用合成培養基培養動物細胞時通常需添加一些血清等天然成分

B.培養基內加入適量的抗生素以防止培養過程中雜菌的污染

C.相同次數分瓶培養所獲得的兩者細胞數目完全相同

D.培養上皮細胞更易觀察判斷細胞是否具有接觸抑制現象

【答案】C

【解析】使用合成培養基培養動物細胞時通常需添加一弊血清等天然成分，A正確；培養基

內加入適量的抗生素以防止培養過程中雜菌的污染，B正確；相同次數分瓶培養所獲得的兩者細

胞數目不一定相同，C錯誤；上皮細胞在培養時，呈現扁平不規則多角形，且貼附在培養瓶內壁

上，而淋巴細胞則常常懸浮在培養液中，因此培養上皮細胞更易觀察判斷細胞是否具有接觸抑制

現象，D正確。

5.下列關于動物細胞培養過程的敘述，錯誤的是（）

①制作細胞懸液時，可以使用胰蛋自酶或膠原蚩自酶處理

②懸液中分散的細胞很快貼附在瓶壁上，細胞貼壁體現了細胞的適應性

③10代以內的細胞能保持細胞正常的二倍體核型

④細胞培養在含混合氣體的培養箱中，其中的可刺激細胞的呼吸

⑤動物細胞培養需要在嚴格無菌的條件下進行

⑥用胰蛋白酶處理動物組織后，可用無菌水稀釋制成細胞懸浮液

⑦根據培養時是否有接觸抑制現象判斷細胞是否癌變

A.②③④B.②③⑥

C.②④⑥D.④⑥

【答案】D

【解析】在利用動物組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以消化組織

細胞間的蛋白質，得到單個細胞，①正確；細胞貼壁是指懸浮液中分散的細胞很快就貼在瓶壁I：

的現象，體現了細胞的適應性，②正確；原代培養一般傳代1?10代，細胞的遺傳物質不會發生

改變，能夠保持二倍體核型，③正確；細胞培養應在含5%（3的恒溫培養箱中進行，C0?的作用是

維持培養液的pH,④錯誤；為了保證細胞處于無菌、無毒的環境，應對培養液和所有培養用具進

行無菌處理，通常還要在培養液中添加一定量的抗生素，以防培養過程中的污染，⑤正確；動物

細胞置于無菌水中，會吸水膨脹甚至漲破，所以稀釋細胞懸浮液應選用生理鹽水，⑥錯誤；癌變

的細胞表面糖蛋白減少，不會出現接觸抑制現象，故可通過是否有接觸抑制現象判斷細胞是否癌

變，⑦正確。

6.如圖所示為動物細胞培養過程中，動物細胞增殖情況的變化曲線（圖中反〃兩點表示經

篩選后繼續培養），據圖分析，下列說法錯誤的是（）

A.動物細胞培養需要使用液體培養基

B.如段的培養稱為原代培養

C.4?段可能發生了接觸抑制現象，可用胰蛋白的處理使細胞分散開來

I）.培養過程中，細胞可通過有絲分裂和減數分裂實現細胞增殖

【答案】D

【解析】動物細胞培養需要使用液體培養基，A正確；勿段的培養為初次培養，稱為原代培

養，B正確；當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，即會發生接觸抑

制現象，/心段細胞停止增殖，可能發生了接觸抑制現象，用胰蛋白酶等處理可使細胞分散開來，

C正確；培養過程中，細胞可通過有絲分裂實現細胞增殖，D錯誤。

題組三干細胞的培養及應用

7.下列關于胚胎干細胞的敘述，不正確的是（）

A.動物胚胎的每一個細胞都是胚胎干細胞

B.胚胎干細胞具有分化為動物各種組織的潛能

C.胚胎干細胞的遺傳物質在質和量上與受精卵相同

D.胚胎干細胞在體外可誘導分化為不同類型的組織

【答案】A

【解析】胚胎干細胞是由早期胚胎中分離出來的一類細胞，并不是動物胚胎的每一個細胞都

是胚胎干細胞，A錯誤；胚胎干細胞全能性很高，具有分化為動物各種組織的潛能，B正確；其

遺傳物質與受精卵相同，C正確；由于其具有發育的全能性，可在體外培養時誘導分化為不同的

機體組織，D正確。

8.胚胎干細胞是哺乳動物或人早期胚胎中的細胞，可以進一步分裂、分化成各種組織干細

胞，再進一步分化成各種不同的組織。下列敘述錯誤的是（）

A.各種組織十細胞分化形成不同的組織細胞是基因選擇性表達的結果

B.胚胎干細胞有細胞周期，神經干細胞分化形成的神經細胞沒有細胞周期

C.造血干細胞分化形成紅細胞、白細胞的過程是不可逆的

D.肝臟干細胞分化成肝臟細胞的過程體現了細胞的全能性

【答案】D

【解析】干細胞分化形成不同的形態、結構和功能的組織細胞是基因選擇性表達的結果，A

正確；高度分化的細胞不能再分裂，如神經細胞，B正確；一般分化了的細胞將一宜保持分化后

的狀態，分化具有不可逆性，C正確；肝臟干細胞分化成肝臟細胞，沒有發育成完整的個體，不

能體現細胞的全能性，D錯誤。

［能力提升］

9.以下有關動物細胞培養、植物組織培養的表述中正確的是（）

A.動物細胞培養中，含5%C0?的恒溫培養箱的作用是調控溫度

B.植物組織培養過程中加入誘導因素也不會出現組織分化現象

C.目前使用或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型

D.動物細胞培卷過程中，首先要用胃蛋白酶處理部分組織以使細胞分散獲得單個細胞

【答案】C

【解析】動物細胞培養過程中，需要適宜的溫度和一定的其他環境，所以含5妮。2的恒溫培

養箱用來調控pH值和溫度，A錯誤：植物組織培養過程中加入誘導因素會出現組織分化，B錯誤;

使用或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型，C正確；動物細胞

培養的適宜pH是7.2?7.4,該pH下胃蛋白酶會失活，所以動物細胞培養過程中，應用胰蛋白酶

處理部分組織使細胞分散獲得單個細胞，D錯誤。

10.動物細胞體外培養F寸，通常要在培養液中補充一定濃度的某些物質。下圖是血清對正常

細胞和癌細胞培養的影響的實驗結果，根據該圖提供的信息不可以得出的結論是（）

.癌細胞侑血清）

癌細胞（無血涌）

正常細胞（有血清）

正常細胞（無血清）

培養時間

A.正常細胞與癌細胞的增殖速率相同

B.有無血清對正常細胞培養的影響不同

C.培養基中補充血清有助于正常細胞的培養

I）.培養基中是否補充血清對癌細胞的培養影響不大

【答案】A

【解析】從圖中可以看出，隨著培養時間的延長，癌細胞的數量比正常細胞的顯著增多，因

此正常細胞與癌細胞的增殖速率不同，A錯誤；從圖中還可以看出，有無血清對正常細胞培養的

影響很大，而對癌細胞培養的影響不大，因此在培養液中補充血清對正常細胞的培養有利，而對

癌細胞來說，有無血清其結果相差不大，都是快速增殖，E、C、D正確。

11.下圖是動物細胞培養的基本過程示意圖。請據此回答下列問題。

Ic

況，它一般取自________________________

(2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是,然后用耐處理，

這是為了使細胞分散開；這樣做的目的是o

(3)培養首先在B瓶中進行，瓶中的培養基成分有等。在B瓶中的

培養稱為__________培養，將B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用處理，制成細胞懸液

再繼續培養，稱為。

(4)在B瓶中培養時，懸浮液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為。培養

貼附性細胞時，細胞進行有絲分裂，數量不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到時，

細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的o為了把B瓶中的細胞分瓶，要用

處理，目的是。然后配成,再分裝。

(5)在動物細胞培養時，通常在合成培養基中加入適量血清，其原因是

。細胞培養應在含5%的CO?的恒溫培養箱中進行，CO?的作用是

(6)為了防止細胞培養過程中細菌的污染，可向培養液中加入適量的o

【答案】(1)動物胚胎或幼年動物的器官組織

(2)剪碎胰蛋白使每個細胞都能與培養液接觸

(3)糖類、氨基酸、無機鹽和動物血清原代胰蛋白酶傳代培養

(4)細胞貼壁表面相互接觸接觸抑制胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來細胞懸液

(5)血清可以補充合成培養基中缺乏的物質維持培養液pH

(6)抗生素

12.動物器官的體外培養技術對研究器官的生理.、病理過程及其機制的意義重大。下圖是一

個新生小鼠的肝臟小塊培養裝置示意圖。請回答卜列問題。

玻璃蓋

-肝臟小塊

?淀紙

?培養液

-氣室

（1）肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞O

（2）氣室中充入5加。2的主要作用是o

（3）培養液中添加抗生素是為了抑制細菌生長，但要注意選擇抗生素的

,以保證抗生素對肝臟細胞無害。

（4）有機物X有毒性，可誘發染色體斷裂。利用如圖所示裝置和下列提供的材料用具，探究

肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用。

材料用具：肝臟小塊、外周血淋巴細胞、淋巴細胞培養液、植物凝集素（刺激淋巴細胞分裂）；

顯微鏡、載玻片、蓋玻片、玻璃皿、滴管；吉姆薩染液（使染色體著色）、有機物X溶液等。

實驗過程：

①在淋巴細胞培養液中加入植物凝集素培養淋巴細胞，取4等份，備用。

②利用甲、乙、丙、丁4組裝置（與上圖相同），按下表所示步驟操作（“J”表示已完成的

步驟）。

操作步驟甲乙丙T

步驟■:加入町臟培養液VqVV

步驟二：加入有機物X溶液V

步驟三：放置肝臟小塊V

表中還需進行的操作是o

③培養一段時間后，取1組裝置中的等量培養液，分別添加到4份備用的淋巴細胞培養液中

并繼續培養淋巴細胞.

④一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察,并

對比分析。若丙組淋巴細胞出現異常，而甲組的淋巴細胞正常，則說明

【答案】（1）吸收&和營養物質、排出代謝廢物

（2）維持培養液的pH

（3）種類和劑量

（4）②向乙（或丁）組裝置中放置肝臟小塊

④染色體的形態和數量肝臟小塊對有機物X具有解毒作用

【解析】（1）把肝臟切成小薄片，有利于肝臟細胞進行物質代謝，即吸收6和營養物質、排

出代謝廢物。（2）氣室中充入5%CO?的作用是維持培養液的ph（3）培養液中添加抗生素是為了

抑制細菌生長，但要注意選擇抗生素的種類和劑量，以保證抗生素對肝臟細胞無害。（4）由題表

可知，需向乙（或丁）組裝置中放置肝臟小塊作為對照組，有機物X有毒性，可誘發染色體斷裂，

所以要觀察淋巴細胞的染色體的形態和數顯是否變化。甲組添加肝臟小塊，淋巴細胞染色為止常，

丙組沒有添加.淋巴細胞出現染色體異常,說明肝臟小塊對有機物X具有解毒作用c

2動物細胞融合技術與單克隆抗體

［基礎達標］

題組一動物細胞融合

1.有關動物細胞融合的敘述不正確的是（）

A.使遠緣雜交成為可能

B.雜交細胞具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息

C.其基本原理是細胞膜的選擇透過性

D.為制造單克隆抗體開辟了新途徑

【答案】C

【解析】動物細胞融合的原理是細胞膜具有一定的流動性，C錯誤。

2.動物細胞融合屬于動物細胞工程的技術手段之一，下列有關動物細胞融合的敘述正確的

是（）

A.動物細胞融合產生的細胞稱為重組細胞

B.融合后形成的細胞為單核或多核細胞

C.常用的誘導融合的生物誘導劑是聚乙二醉、滅活的病毒等

1）.也稱細胞雜交，可由兩個或多個動物細胞結合成一個細胞

【答案】D

【解析】動物細胞融合產生的細胞稱為雜交細胞，核移植產生的細胞稱為重組細胞，A錯誤；

融合后形成具有兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，B錯誤；誘導動物細胞融合的生物誘導劑

是滅活的病毒，聚乙二醇屬于化學誘導劑，C錯誤；動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多

個動物細胞結合形成?個細胞的過程，D正確。

題組二單克隆抗體的制備

3.用動物細胞工程技術制備單克降抗體，下列實驗步驟中錯誤的是（）

A.將抗原注入小鼠體內，獲得能產生抗體的B淋巴細胞

B.用氯化鈣作誘導劑，促使能產生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合

C.篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產生所需抗體的細胞群，培養后提取單克隆抗體

D.該雜交瘤細胞的增殖方式和產物分別是有絲分裂和單克隆抗體

【答案】B

【解析】將抗原注入小鼠體內，小鼠發生免疫反應，可以獲得能產能抗體的B淋巴細胞，A

正確；B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醉或物理因素來誘導，氯化鈣

不能作為誘導劑，B錯誤；單克隆抗體制備過程中，有兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細胞，第

二次篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞，通過體外培養或體內培養后提取單克隆抗體，C正確;

雜交瘤細胞只有既能無限增殖，又能產生特異性抗體的特點，其增殖方式是有絲分裂，經過兩次

篩選產生的抗體是單克隆抗體，D正確。

4.生產單克隆抗體時，在培養液中加入某種試劑能夠篩選出雜交瘤細胞，因為該試劑（）

A.能抑制淋巴細胞和雜交瘤細胞的D5IA復制

B.能阻止淋巴細胞的膜癌基因被激活

C.選擇性抑制骨髓瘤細胞的DNA復制

D.能阻止雜交瘤細胞核糖體上所有蛋白質合成

【答案】C

【解析】由于骨髓瘤細胞與雜交瘤細胞都能無限增殖，而生產單克隆抗體需要只選擇出雜交

瘤細胞，因此需要用試劑抑制骨髓瘤細胞DNA的復制，因此該試劑的作用為選擇性抑制骨髓瘤細

胞的DNA復制，C正確；這里不存在原癌基因被激活的問題，B錯誤。

5.下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，有關敘述不正確的是（）

甲幽小取一牌1些乙3內卡潦絲器般

包俅____________

痛細胸

A.圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結合的抗原

B.利用PEG融合法、電融合法和滅治病毒誘導法等方法均可誘導細胞融合獲得乙

C.用特定的選擇性培養基對乙篩選，融合細胞均能生長，未融合細胞均不能生長

D.丙需進行克隆化培養和抗體檢測，經多次篩選后可獲得人最能分泌所需抗體的丁

【答案】C

【解析】圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結合的抗原，A正確；利用PEG

融合法、電融合法和滅活病毒誘導法等方法均可誘導動物細胞融合，B正確：選擇培養基只能讓

特定的符合條件的細胞存活下來，在題目給定的選擇性培養基上，只有雜交瘤細胞才能夠存活，

未融合細胞和融合的同型細胞均不能生長，C錯誤；丙為能無限增殖和分泌抗體的雜交瘤細胞，

為獲得大量專一性抗體，需進行克隆化培養和抗體檢測、多次篩選，D正確。

6.①?⑥是應用動物細胞工程技術獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，下列相關敘述不

正確的是（）

①將X抗原注入小鼠體內，獲得能產生抗X抗體的B淋巴細胞

②從患骨髓瘤的小鼠體內獲取骨髓瘤細胞

③利用促細胞融合因子使細胞發生融合

④將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔培養

⑤篩選出能產生抗X抗體的雜交瘤細胞

⑥從腹水中提取抗體

A.實驗順序應該是①?③⑤④⑥

B.④過程中產生的多個雜交瘤細胞的方式為有絲分裂

C.③過程獲得的細胞均可無限增殖

D.③?⑤的過程中通常要經過兩次篩選

【答案】C

【解析】獲得單克隆抗體的實驗過程是獲得已免疫的B淋巴細胞，已免疫的B淋巴細胞和骨

髓瘤細胞融合、篩選，克隆化培養和抗體檢測，大量增殖，A正確；④過程雜交瘤細胞在小鼠腹

腔中通過有絲分裂大量增殖，B正確：利用促細胞融合因子使細胞發生融合，若只考慮兩個細胞

的融合，則有三種情況：兩個骨髓瘤細胞融合、兩個能產生抗X抗體的B淋巴細胞融合和雜交瘤

細胞。兩個能產生抗X抗體的B淋巴細胞融合后的細胞不能無限增殖，C錯誤；③?⑤的過程中

通常要經過兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞，

D正確。

題組三單克隆抗體的應用

7.單克隆抗體技術在生物工程中占有重要的地位，下列有關單克隆抗體應用的敘述錯誤的

是（）

A.作為診斷試劑，具有準確、高效、快速、簡易的優點

B.作為診斷試劑，可定位診斷腫瘤、心血管畸形、白化病等疾病

C.從臨床試驗來看，單克隆抗體可用于癌癥治療

D.在“生物導彈”中，單克隆抗體的作用是定位而不是殺傷

【答案】B

【解析】單克隆抗體在診斷的應用上，具有準確、高效、簡易、快速的優點，A正確：白化

病的表型非常直觀，不需要單克隆抗體定位診斷，B錯誤；臨床試驗中，單克隆抗體可用于癌癥

治療，也可用于其他疾病的治療，C正確；在“生物導彈”中，單克隆抗體作為“瞄準裝置”，作

用是定位，起殺傷作用的是與其相連接的藥物，D正確。

8.利用單克隆抗體研制而成的“生物導彈”由兩部分組成，一是“瞄準裝置”，二是殺傷性

“彈頭北下列對此描述不正確的是（）

A.“瞄準裝置”是由識別腫瘤的單克隆抗體構成的

B.“彈頭”是由放射性同位素、化學藥物或細胞毒素等物質構成的

C.“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細胞的功能

D.“生物導彈”是利用細胞工程技術制備出來的

【答案】C

【解析】“生物導彈”中的“瞄準裝置”是由專一識別特定腫瘤細胞的單克隆抗體構成的，A

正確；“彈頭”是由殺死腫瘤細胞的放射性同位素、化學藥物或細胞毒素物質構成的，B止確；

，，彈頭，，中的藥物既能殺傷腫瘤細胞，也能殺傷正常細胞，不具有選擇性，C錯誤；“生物導彈”

是利用動物細胞融合、動物細胞培養等細胞工程技術制備出來的，D正確。

［能力提升］

9.無論是植物細胞，還是動物細胞，都可以利用一定的方法誘導融合，可用模型圖表示細

胞融合技術的一些過程，下列有關敘述錯誤的是（）

A.若該過程表示植物原生質體的融合，則甲、乙細胞可用酶解法獲取

B.若該過程表示動物細胞融合，只能用滅活的病毒誘導

C.若該過程表示制備單克隆抗體，則丙細胞是雜交瘤細胞

D.以上二個過程體現了細胞的流動性

【答案】B

【解析】植物細胞融合需先用酶除去細胞壁，制備原生質體，再誘導細胞融合，A正確；若

該過程表示動物細胞融合，則可用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法，B錯誤；若該過程

表示制備單克隆抗體，則丙細胞是雜交瘤細胞，C正確；以上三個過程都體現了細胞膜的流動性,

1）正確。

10.利用細胞工程方法，以H1N1病毒核衣殼蛋白為抗原，采用細胞工程制備單克隆抗體，

下列敘述正確的是（）

A.用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清中均為單克隆抗體

B.體外培養單個B淋巴細胞可以獲得大量針對H1N1病毒的單克隆抗體

C.將等量B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞

D.利用該單克隆抗體與H1N1病毒核衣殼蛋白特異性結合的方法可以診斷該病毒感染者

【答案】D

【解析】用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，血清中的抗體不是單一抗體，還含有體

內己存在的其他抗原的抗體，A錯誤；單克隆抗體是相應的雜交瘤細胞產生的，單個B淋巴細胞

的培養不能獲得單克隆抗體，B錯誤；等量B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，若只考慮細胞兩兩融

合，可以形成三種融合細胞，但只有B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成的細胞稱為雜交瘤細胞，

C錯誤；H1N1病毒感染者體內有病毒核衣殼蛋白，用相應的單克隆抗體與之發生特異性結合的方

法可加以診斷，D正確。

11.甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測甘草酸，科研人員利用細胞工程技

術制備了抗甘草酸的單克隆抗休，其基木操作過程如卜.圖。下列相關敘述正確的是（）

給小鼠注射

甘草酸一牛.

血清r蛋白②①③①④⑤抗草睥的

結合抗原

過程①注射相應抗原后應立即從小鼠脾臟中提取細胞甲

過程②誘導細胞融合，利用了細胞膜的全能性

過程③④的篩選方法相同，細胞丙、丁的遺傳物質相同

過程⑤無論在體內還是體外進行，細胞丁都可大量增殖

【答案】D

【解析】過程①注射相應抗原后，機體進行免疫反應，使B淋巴細胞增殖分化產生具有免疫

能力的B淋巴細胞，才可以從小鼠脾臟中提取細胞甲，A錯誤；過程②誘導細胞融合，利用了細

胞膜的流動性，B錯誤；過程③是用選擇性培養基獲得雜交瘤細胞，過程④是用抗體檢測和克隆

培養得到能產生特定抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；雜交瘤細胞既能無限增殖又能產生特異性.抗體，

過程⑤無論在體內還是體外進行，細胞丁都可大量增殖，C正確。

12.科學家們已陸續從病死的家禽和候鳥體內分離得到了H5N1亞型禽流感病毒，若要生產

可以用于預防和治療禽流感的抗體，請根據下面的單克隆抗體制備過程示意圖回答有關問題。

體內培養

抗體

*體外培養

（1）若A細胞是小鼠骨髓瘤細胞，則B細胞是取自______________體內的細胞，

促進d過程的常用誘導方法有、和O

（2）假設僅考慮某兩個細胞的融合，則可形成_____種類型的C細胞。因此需用________培

養基篩選出（填特點）的D細胞用于培養。D細胞的名稱是o

（3）目前注射禽流感疫苗是預防禽流感的一種措施。我們已經知道，決定禽流感病毒在人體

細胞中增殖變化的物質是，而決定其抗原特異性的物質位于___________

。據此分析制備禽流感疫苗的主要思路：

【答案】（1）感染禽流感病毒的動物或人已免疫的B淋巴聚乙二醇（PEG）融合法電融合

法滅活病毒誘導法

（2）三選擇既能無限增殖乂能產生特異性抗體雜交瘤細胞

（3）病毒的RNA病毒的衣殼蛋白上將禽流感病毒滅活或減毒（或利用基因工程技術生產禽

流感病毒的衣殼蛋白）

【解析】（1）若A細胞是小鼠骨髓瘤細胞，則B細胞是己免疫的B淋巴細胞（漿細胞;，取自

被禽流感病毒感染的動物或人。促進d過程細胞融合常用的誘導方法有聚乙二醉（PEG）融合法、

電融合法和滅活病毒誘導法。（2）假設僅考慮某兩個細胞的融合，則可形成三種類型的C細胞.

分別是B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合成的雜交瘤細胞、B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤

細胞相互融合形成的細胞,因此需用選擇培養基篩選出D雜交瘤細胞，其特點是既能無限增殖乂

能產生特異性抗體。（3）決定禽流感病毒在人體細胞中增殖變化的物質是病毒的RNA,而決定其抗

原特異性的物質位于病毒的衣殼蛋白上。因此制備禽流感疫苗的主要思路是將禽流感病毒滅活或

減毒（或利用基因工程技術生產禽流感病毒的衣殼蛋白）。

13.某研究者用抗原（A）分別免疫三只同種小鼠（X、Y和Z）,每只小鼠免疫五次，每次免疫

?周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原抗體反應的血清最人稀粹倍數），結果如下圖所

示。請據圖回答下列問題。

W32000

E2X000

a24(MX)

20(XX)

三16(XX)

花12000

自

(1)制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠和血清抗體效價需達到16000以上，則小

鼠最少需要經過次免疫后才能符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這三只免疫小鼠中，

最適合用于制備B淋巴細胞的是________小鼠，理由：

(2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有

，體系中出現多種類型細胞的原因是

(3)利用細胞融合技術生產單克隆抗體的過程中，需經過兩次篩選才能得到所需細胞，第一

次篩選的目的是選出細胞，而未融合的B淋巴細胞經多次傳代培養后，都不能存活，其

原因是:第二次篩選的目的是選出細胞。

【答案】(1)四YY小鼠的血清抗體效價最高

(2)B淋巴細胞相q融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相G融合形成的細胞細胞融合是隨機的，

且融合率達不到100筆

(3)雜交瘤不能無限增殖能分泌單一抗體的雜交瘤

【解析】(1)據圖分析可知,第四次注射后X、Y、Z小口的血清抗體效價都達到16000以上,

Y小鼠的血清抗體效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜

交瘤細胞之外，還有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和B淋巴細胞的自身融合細胞。細胞的融合是隨

機的，并且不可能所有細胞都融合，故體系中會出現多種類型的細胞。(3)正常細胞的分裂次數

是有限的，且經過免疫的B淋巴細胞高度分化，不能無限增殖，而是經多次傳代培養后逐漸衰老

死亡。

14.新型冠狀病毒和SARS病毒都會造成肺炎。如圖是SARS-CoVS蛋白特異性單克隆抗體

的制備過程。清據圖問答下列問題。

SARS-(：OVsignt■慶

I骨腑輸細胞、々前:SABS-C..VS

小團體內-已免疫的B細胞/5應應培。蛋白單克隆抗體

(1)若只考慮細胞兩兩融合，圖中甲理論上有________種。

(2)在SARS-CoVS蛋白特異性單克隆抗體的制備過程中，需要用到動物細胞培養和動物細

胞融合技術。一般來說，動物細胞培養需要的條件有(至少答出兩點)；

誘導動物細胞融合的因素有(至少答出兩種),

（3）SARS-CoVS蛋白單克隆抗體（填“能”或“不能”）對新型冠狀病毒發揮作用，

理由是o

【答案】（1）三（2）無菌、無毒環境，營養，適宜的溫度、pH,含有5%C02和95%空氣的混

合氣體環境等PEG、滅活的病毒、電激（3）不能新型冠狀病毒與SARS病毒的抗原不同，SARS

一CoVS蛋白單克隆抗體只能與SARS-CoVS蛋白發生特異性結合

【解析】（1）若只考慮細胞兩兩融合，則產生的融合細胞有骨確瘤細胞自身融合細胞、B細胞

自身融合細胞、雜交瘤細胞三種。（2）一般來說，動物細胞培養需要的條件是無菌、無毒環境，

營養，適宜的溫度、pH,含有5%C02和95與空氣的混合氣體環境等。動物細胞融合常用的誘導因

素有聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒、電激等。（3）新型冠狀病毒與SARS病毒的抗原不同，而SARS

-CoVS蛋白單克隆抗體只能與SARS-CoVS蛋白特異性結合，故該單克隆抗體不能對新型冠狀

病毒發揮作用。

15.單克隆抗體的制備過程如圖所示，請據圖回答下列問題。

能產生抗體骨髓瘤細胞

的淋巴細胞

兩種細胞融合培養

國選擇雜交痛細胞

▼iii

同目國目克隆

i選出能產生特定抗:體的細胞群

目、通過體內雜

通過體外細,”

胞培養產生早交痛細胞繁

單克隆抗體*I殖產生單克

0隆抗體

（1）淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞膜也能“融合”在一起，說明細胞

膜O此過程，常用作為誘導劑，該細胞的特點是

（2）已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基噂吟阻斷。人淋巴細胞中有

這兩種DNA的合成途徑，但?般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增

殖。將這兩種細胞在試管中根合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細胞。請設計一種方法（不考慮機

械方法），從培養液中分離出雜交瘤細胞：。

（3）雜交病細胞繁殖進行的是________分裂，其遺傳性狀o

（4）雜交瘤細胞的體外培養與植物組織培養的培養基相比主要有何不同？

（5）單克隆抗體注入體內后可以自動追蹤抗原（病原體或癌變細胞等）并與之結合，而且絕不

攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導彈”，這是利用了o

（6）在單克隆抗體制備過程中，還應用了細胞工程中的和兩大技

術。

【答案】（1）具有?定的流動性聚乙二醇（或滅活的病毒）既具有無限增殖的能力，又能

產生特異性抗體（2）培養液中加入氨基喋吟，收集增殖的細胞（3）有絲保持不變（穩定）（4）

動物細胞培養用的是液體培養基，且其中含有動物血清（5）抗原與抗體之間的高度特異性結合

（6）動物細胞融合動物細胞培養

3動物體細胞核移植技術和克隆動物

［基礎達標］

題組一體細胞核移植的概念和分類

1.下列對動物核移植技術的描述不正確的是（）

A.哺乳動物核移植包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植，動物體細胞核移植的難度明顯高

于胚胎細胞核移植

B.體細胞核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細胞中的細胞核

C.體細胞核移植過程中通常采用MH期的卵母細胞作為受體細胞

D.通過體細胞核移植生產的克隆動物是對提供體細胞核的動物進行了100%的復制

【答案】D

【解析】哺乳動物核移植技術包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植，由于體細胞分化程度較

高，所以動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，A正確；體細胞核移植的過程中可

以通過顯微操作去除卵母細胞中的細胞核，便于供體的細胞核與之融合，B正確；體細胞核移植

過程中通常采用MII期的卵母細胞作為受體細胞，C正確；通過體細胞核移植生產的克隆動物，

由于其細胞核遺傳物質來自提供細胞核的供體細胞，細胞質遺傳物質來自提供細胞質的卵母細

胞，所以其遺傳性狀并不是對提供體細胞核的動物進行了100%的復制，D錯誤。

2.下列有關核移植的說法錯誤的是（）

A.通過核移植得到的細胞稱為重組細胞

B.哺乳動物休細胞核移植的難度高于胚胎細胞核移植

C.核移植得到的克隆動物屬于無性生殖

D.克隆動物與供核動物的遺傳信息完全相同

【答案】D

【解析】將供體細胞的細胞核移植到去核的卵母細胞中，可得到重組細胞，A正確；哺乳動

物核移植包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植，胚胎細胞移植成功率要高，因為其分化程度低，

體細胞核移植成功率低，因為其分化程度高，B正確；核移植得到的克隆動物，沒有經過減數分

裂和受精作用，屬于無性生殖，C?正確；克隆動物的細胞核基因來日提供細胞核的生物，而細胞

質基因來自提供卵母細胞的生物，D錯誤。

題組二體細胞核移植技術的過程

3.在目前現有技術條件下，還不能將從動物體內分離出來的成熟的體細胞直接培養成一個

新個體，而是必須將體細胞的細胞核移植到去核的卵細胞中才能發育成新個體。你認為哪個是最

可能的原因（）

A.卵細胞大，便于操作

B.卵細含有的營養物質多

C.卵細胞的細胞質可使體細胞的細胞核全能性得到表達

D.重組細胞才具有全能性

【答案】C

【解析】在目前現有技術條件下，還不能將從動物體內分禽出來的成熟的體細胞再接培養成

一個新個體，而是必須將體細胞的細胞核移植到去核的卵細胞中才能發育成新個體，因為卵細胞

的細胞質可使體細胞的細胞核全能性得到表達。

4.下列關于動物體細胞核移植技術和克降動物的敘述中正確的是（）

A.H前在實驗中，科學家可以用類似植物組織培養的方法獲得完整的動物個體

B.體細胞的細胞核移植到受體細胞之前，要先去掉受體卵母細胞的細胞核

C.用于核移植的供體細胞一般都選用傳代50代以內的細胞

1）.用體細胞核移植方法生產的克隆動物是對體細胞供體動物進行100%的復制

【答案】B

【解析】目前在實驗中，科學家還不能直接把動物細胞培養成完整的動物個體，A錯誤；體

細胞的細胞核移植形成的里構胚的細胞核來自供體核，細胞質來自受體卵母細胞，故在移植之削，

要先去掉受體卵母細胞的細胞核，B正確；用于核移植的供體細胞?般都選用傳代10代以內的細

胞，因為10代以內的細胞能保持正常的細胞核型，C錯誤；用體細胞核移植方法生產的克隆動物,

并不是對體細胞供體動物進行100%的復制，因為還有部分遺傳物質來自受體卵母細胞的細胞質，

而且生物性狀還受環境因素的影響，D錯誤。

5.下列關于高產奶?？寺∵^程的敘述，錯誤的是（）

A.供體牛體細胞在進行體外培養時，會發生細胞貼壁和接觸抑制的現象

B.培養至UH期的卵母細胞的細胞質中含有能促進細胞核全能性表達的物質

C.通過電刺激促進供體與去核受體細胞兩兩融合，供體核進入卵母細胞

D.胚胎移植時，應將重組細胞直接移入代孕母牛的子宮

【答案】D

【解析】供體牛體細胞在進行體外培養時，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細

胞會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制，A正確；核移植用U1I期的卵母細胞做受體

細胞的原因是卵母細胞體積大，便于操作，含有促使細胞核表達全能性的物質，營養物質豐富，

B正確；去核的卵母細胞與供體細胞通過電擊后融合，供體核進入受體卵母細胞，構建成重構胚,

C正確：胚胎移植時，應待重組細胞形成重構胚，再移入代孕母牛的子宮，D錯誤。

6.2018年中國科學院神經科學研究所宣布，攻克了克隆靈長類動物這一世界難題，首次成功

以體細胞克隆出了兩只獅猴一一“中中”和“華華”，流程如圖。對于該過程的分析錯誤的是（）

A.過程①表示胚胎移植

B.克隆猴的性狀與核供體性狀不完全相同

C.克隆猴的成功說明動物體細胞的細胞核具有全能性

D.與核供體相比，克隆猴體細胞的染色體數目減半

【答案】I）

【解析】①表示胚胎移植過程，A正確：由于卵母細胞中遺傳物質的作用，克隆猴的性狀與

核供體性狀不完全相同，B正確；克隆猴的成功證明了已分化的動物細胞核具有全能性，C正確；

克隆猴體細胞的染色體數目與核供體染色體數目相同，D錯誤。

題組三克隆

7.下列關于克隆的說法，不正確的是（）

A.基因克隆是指某目的基因的復制過程

B.雜交瘤細胞在體外培養成一個細胞系屬于克隆

C.動物難以克隆的根本原因是基因組中的基因不完整

D.動物體細胞核移植技術需通過細胞核移植形成重組細胞

【答案】C

【解析】克隆指無性繁殖，基因克隆是指某目的基因的復制過程，A正確：雜交瘤細胞在體

外培養成一個細胞系屬于克隆，B正確：動物的體細胞均來自受精卵的有絲分裂，因此細胞核中

的基因組都相同，動物難以克隆的根本原因是動物體細胞的全能性受到限制，體細胞很難發育成

一個小動物，C錯誤；動物體細胞核移植技術需通過細胞核移植形成重組細胞，使這個重組細胞

發育成重構胚，將重構胚植入代孕母體中發育成的新個體稱為克隆動物，D正確。

8.下列事例中不屬于克隆的是（）

A.通過植物組織培養技術獲得脫毒苗

B.用液體培養基擴大培養大腸桿菌

C.花生種子發育成完整植株

I）.通過動物細胞培養得到相應的細胞

【答案】C

【解析】通過植物組織培養技術獲得脫毒苗屬于個體水平的克隆，A錯誤；用液體培養基擴

大培養大腸桿菌屬于細胞水平上的克隆，B錯誤；花生種子發育成完整植株屬于自然生長過程，

不屬于克隆，C正確；通過動物細胞培養得到相應的細胞屬于細胞克隆，D錯誤。

題組四體細胞核移植技術的應用及問題

9.下列敘述中，不屬于動物體細胞核移植技術的應用前景的是（）

A.加速家畜遺傳改良進程，促進優良畜群繁育

B.轉基因動物作為生物反應器，生產許多珍貴的醫用蛋白

C.可以用于檢測有毒物質，判斷某種物質的毒性

D.利用自身細胞核移植培育相應的組織器官

【答案】C

【解析】“用于檢測有毒物質，判斷某種物質的毒性”是動物細胞培養技術的應用之一，不

是動物體細胞核移植技術的應用，C符合題意。

［能力提升］

10.下列關于細胞工程的有關敘述，正確的是（）

A.動物難以克隆的根本原因是基因組中的基因不完整

B.在進行組織培養時，由根尖細胞形成愈傷組織的過程中，不可能會發生細胞脫分化和基

因突變，而可能發生細胞分化和基因重組

C.動物細胞融合與植物體細胞雜交相比，誘導融合的方法、所用的技術手段、所依據的原

理均相同，都能形成雜種細胞和雜種個體

D.從紫草的愈傷組織中提取紫草寧，利用細胞工程培育“番茄一馬鈴薯”雜種植株，都利

用了植物組織培養技術

【答案】D

【解析】動物的體細胞均來自受精卵的有絲分裂，因此細胞核中的基因組都相同，動物難以

克隆的根本原因是動物體細胞的全能性受到限制，體細胞很難發育成一個小動物，A錯誤；在進

行組織培養時，由根尖細胞使分化形成愈傷組織的過程中，細胞通過有絲分裂方式增殖，可能會

發生染色體變異或基因突變，而不可能發生細胞分化和基因重組，B錯誤；動物細胞融合與植物

體細胞雜交相比，誘導融合的方法、所用的技術手段、所依據的原理均不完全相同，都能形成雜

種細胞，植物體細胞雜交能形成雜種個體，但動物細胞融合不能形成雜種個體，C錯誤；從紫草

的愈傷組織中